UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Fisiologa
Prctica # 7: Absorcin de Glucosa en el intestino delgado de la rata.
Grupo: 08
Fecha de realizacin: 23 de Octubre del 2014

Nombres del equipo

Firma

1) Flores Gmez Luis Enrique

_______________________

2) Hernndez Valdez Andrea

_______________________

3) Rivera Ansastiguin Yessica

_______________________

4) Sandoval Snchez Hctor

_______________________

5) Vzquez Cervantes Irhec

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Objetivos.
Verificar el transporte de glucosa a travs del intestino delgado de la
rata.
Demostrar de qu manera influyen la oxigenacin, la temperatura y
algunas soluciones en la absorcin intestinal de glucosa.
Determinar el efecto del 2,4-dinitrofenol en la absorcin intestinal de
glucosa.
Reforzar el conocimiento del manejo de animales.

Material y Mtodo.
Manejo y eutanasia de la rata

Para sacrificar a la rata, primero se procedi a

inyectarla con una dosis de anestsico para
posteriormente practicar la dislocacin de la
mdula espinal.

La inyeccin que se le aplic a la

rata fue va intraperitoneal. Se
cort a la rata y se le extrajo
nicamente el intestino delgado,
que se cort en trozos para su uso
posterior.

Para poder saber cul era la dosis necesaria

para poder realizar la eutanasia de la rata
tuvimos que saber el peso de esta para poder
hacer el clculo de la dosis necesaria.

Preparacin de sacos intestinales

Justo despus de que se nos dieron los
trozos de intestino, los colocamos en una
caja petri con solucin tyrode sin glucosa.

Una vez que realizamos esto con cada saco,

los trasladamos al tubo en el que se llevara a
cabo el experimento y una vez ah se
procedi a atar el intestino al instrumental.
Posteriormente suministramos solucin
tyrode sin glucosa para verificar que no
hubiramos perforado el intestino y que las
ataduras estuvieran correctamente
colocadas.

Para voltear el intestino de la rata primero

cosemos un extremo del intestino una vez
cosido, introdujimos un varilla de cristal en el
intestino de la rata, y despus con otro
varilla de metal presionamos un extremo del
intestino y lo movimos hacia este mismo
palo de metal para que el intestino quedara
volteado.
Una vez que realizamos esto con cada
saco, los trasladamos al tubo en el que se
llevara a cabo el experimento y una vez ah
se procedi a atar el intestino al
instrumental.

A. Experimento control

Una vez que el saco estuvo lleno con

solucin tyrode sin glucosa, se llen
el tubo en el que se pondra la
muestra con solucin tyrode con
glucosa, verificando que la solucin
no sobrepasara el borde del tubo y
se conect el sistema de aire.

A partir de ese momento se

empez a contar el tiempo y cada
10 minutos tomamos una lectura
de la concentracin de glucosa
tanto dentro del saco como fuera
del saco con ayuda de las tiras de
glucosa.

B. Efecto de la oxigenacin en el paso de glucosa a travs de la mucosa

intestinal

Se llen el segundo tubo de la

misma manera, con solucin tyrode
con glucosa al y el saco intestinal
con solucin tyrode sin glucosa.
Una vez que el saco estuvo dentro
del tubo, se tap el conducto de
aeracin para evitar el sistema de
oxigenacin.

A partir de ese momento se empez

a contar el tiempo y cada 10 minutos
tomamos una lectura de la
concentracin de glucosa tanto
dentro del saco como fuera del saco
con ayuda de las tiras de glucosa.

C. Efecto de 2-4 dinitrofenol en la absorcin intestinal de glucosa

Despus de haber llenado

el saco intestinal con
solucin tyrode sin glucosa
a 37C, se meti en un
tubo con una solucin de
glucosa al y con 2-4
dinitrofenol.

A partir de ese momento se

empez a contar el tiempo y
cada 10 minutos tomamos
una lectura de la
concentracin de glucosa
tanto dentro del saco como
fuera del saco.

Determinacin de glucosa por medio de tiras reactivas.

En si la medicin de la
concentracin de glucosa
en los tres incisos
anteriores se tomara al
mismo tiempo y con la
misma temperatura de
37C

Resultados.

Para obtener una gota de la solucin problema, ya sea la del

interior del saco intestinal o de la solucin exterior, por medio
de una cnula limpia conectada a una jeringa. Colocar la gota de
la solucin problema en la zona reactiva de la tira y se deja
reaccionar durante el tiempo establecido por el fabricante de la
tira (el tiempo necesario para la reaccin est indicado en el
recipiente de las tiras y puede variar), el cambio de color se
efectuar de acuerdo con la concentracin de glucosa presente
en la muestra y ste deber ser comparado con la escala
cromtica proporcionada en el recipiente de las tiras, la lectura
debe efectuarse bajo buenas condiciones de luz.

Resultados.

TIEMPO (min)

10
20
30
40
50

FRASCO
1 (glucosa 2% y 2 (glucosa 2% sin
oxigeno)
oxigeno)
(mmol/L)
(mmol/L)
2.8
2.8
5.5
2.8
5.5
5.5
17
5.5
55
5.5

3 (DNP)
(mmol/L)
2.8
2.8
2.8
5.5
17

GRAFICO 1. Cambios en la concentracin de glucosa, frasco 1 glucosa 2% y

oxgeno.

Concentracin (mmol/L)

60
50
40
30
20
10
0
0

10

20

30

40

50

60

Tiempo (min)

GRAFICO 2. Cambios en la concentracin de glucosa, frasco 2 glucosa 2% sin

oxgeno.

Concentracin (mmol/L)

6
5
4
3
2
1
0
0

10

20

30
Tiempo (min)

40

50

60

Concentracin (mmol/L)

GRAFICO 3. Cambios en la concentracin de glucosa, frasco 3 efecto del 2-4

dinitrofenol.
18
16
14
12
10
8
6
4
2
0
0

10

20

30

40

50

60

Tiempo (min)

Anlisis de Resultados.
En la grfica 1 que muestra la variacin de la concentracin de glucosa en el saco
intestinal que estaba en la cmara oxigenada, como se observa el medio es
perfecto para una buena absorcin de glucosa ya que a medida que transcurre el
tiempo se observa un aumento en la concentracin de glucosa dentro del saco
intestinal.
En el grafico 2, se observa que en el saco intestinal el cual estaba falto de oxigeno
absorbi glucosa durante un intervalo de tiempo y posteriormente la concentracin
de glucosa dentro del saco fue constante lo cual indica que la absorcin de
glucosa fue interrumpida. Adems tambin se observa que en este saco se
absorbi muy poca glucosa en comparacin con el saco 1 que si contaba con
aireacin.
En el grafico 3, se observa el efecto del 2-4 dinitrofenol, la concentracin de
glucosa dentro del saco intestinal se mantuvo constante la mayor parte del tiempo
y se observan pequeas variaciones, lo cual nos puede indicar que esta sustancia
inhibe la absorcin de glucosa en el intestino.
Discusin de Resultados.
Un buen aporte de oxgeno, una temperatura cercana a la temperatura corporal
normal de la rata y el contacto con un medio extracelular con los electrolitos
adecuados en la concentracin requerida (solucin Tyrode) permitieron que las
clulas de la mucosa intestinal, del saco sometido a estas condiciones, llevaran a
cabo de forma correcta e ininterrumpida la absorcin de glucosa.

El transporte de glucosa constituye un ejemplo de transporte activo secundario (en

el cual el transporte activo del Na+ esta acoplado al transporte de otras
sustancias). Las membranas luminales de las clulas de la mucosa en el intestino
delgado contienen una simportadora la cual transporta la glucosa al interior de la
clula solo cuando el Na+ se enlaza a la protena y, al mismo tiempo, transporta a
esta en la direccin del gradiente electroqumico. El gradiente electroqumico para
el Na+ se conserva mediante el transporte activo de ste al exterior de la clula.
Los transportes activos de Na+ y de K+ constituyen uno de los procesos
principales de utilizacin de la energa del cuerpo. (Ganong, 2000)

El saco intestinal que fue privado de oxigeno efectu la absorcin de glucosa por
un tiempo, despus del cual se vio cesada, por lo que su concentracin dentro del
saco intestinal se mantuvo contante.
Esto ocurri debido a que un medio carente de oxgeno impidi que en las clulas
de la mucosa intestinal se efectuara uno de los procesos que representa la
sntesis de la mayor parte del ATP: la fosforilacin oxidativa.
La fosforilacin oxidativa es la culminacin del metabolismo productor de energa
en los organismos aerbicos. Es la etapa final de la respiracin celular, en los
eucariotas tiene lugar en la mitocondria y consiste en la sntesis de ATP ( a partir
de ADP y fosfato inorgnico) impulsada por la transferencia de electrones al
oxgeno desde intermediarios catablicos. (Lehninger, 1993)
Por esta razn, al no existir oxigeno que desempee el papel de aceptor de
electrones, la fosforilacin oxidativa se detiene al igual que el suministro de
energa necesario para que se mantenga el gradiente electroqumico para el Na+ ,
el cual a su vez es esencial en el transporte de glucosa al interior del saco
intestinal.
El ltimo de los sacos intestinales, se encontraba con suficiente aporte de
oxgeno, no obstante estaba sumergido en la solucin Tyrode con 2,4-dinitrofenol.
En esta ocasin tambin se vio afectado e inhibido el transporte de glucosa hacia
el interior del saco intestinal debido al aporte insuficiente de energa para su
realizacin, solo que esta vez fue resultado de la presencia de un agente que
interfiri con la fosforilacin oxidativa.
El estrecho acoplamiento del transporte de electrones y la sntesis de ATP es
impedido por sustancias que transportan protones a travs de la membrana
mitocondrial interna (desacoplantes), como el 2,4-dinitrofenol. Este compuesto
previene la formacin del gradiente de protones necesario para impulsar la

sntesis de ATP. Debido a que no dejo de suministraste oxgeno en esta ocasin,

lo que ocurri fue que los electrones fueron transportados normalmente hacia el
oxgeno, pero la energa liberada se disipo como calor en lugar de ser
aprovechada para la sntesis de ATP. (Curtis, Barnes, 2000)
Conclusiones.

Se comprob experimentalmente que la absorcin de glucosa ocurre por

medio de un trasporte activo secundario desde la luz del intestino hacia la
sangre siendo un transporte que depende del sodio en la luz intestinal,
comprobando que el oxgeno es indispensable para una buena absorcin
de glucosa en la clula ya que el oxgeno participa en la sntesis de ATP
por medio de la fosforilacin oxidativa.
Al igual que el oxgeno la temperatura a 37C son factores que favorecen
la absorcin de glucosa.
El 2,4-dinitrofenol, impide la absorcin correcta de glucosa as como su
utilizacin como fuente de energa dentro de las clulas.
La glucosa puede ser utilizada como fuente de energa, almacenarse en el
hgado en forma de glucgeno y en los msculos para cuando se requiera
rpidamente.
La solucin Tyrode fue importante debido a que permite darle ciertas
condiciones al experimento facilitando el proceso de transporte de glucosa.

Bibliografa.
Ganong William F. "Fisiologa mdica" Editorial El Manual Moderno 17 edicin
Mxico 2000 p.p. 39, 40.
Lehninger Albert L. et. al. "Principios de bioqumica" Ediciones Omega 2 edicin,
Espaa 1993, p.p. 543,556.
Curtis Elena, Barnes N. Sue, "Biologa" Editorial Mdica Panamericana 6 edicin
Espaa 2000, p. 228.