Juan Carlos Caiza Urgiles

Escuela Superior Politcnica de Chimborazo

Facultad de Ciencias
Escuela Bioqumica y Farmacia
Microbiologa
Replicacion
Viral
Los virus se multiplican solo en clulas vivas.
Es necesario la sntesis de protenas virales por la maquinaria de
sntesis proteica de la clula hospedera
El virus debe ser capaz de producir un ARNm

La replicacin viral est dividida en las siguientes fases:

Fase precoz: el virus reconoce a la clula diana, se adhiere, atraviesa la
membrana y libera el genoma en el citoplasma y si es posible lo introduce en el
ncleo
Fase tarda: inicia el ciclo de replicacin del genoma y sntesis de
macromolculas, seguido del ensamblaje y liberacin
Perodo de Eclipse: Fase del ciclo donde ocurre replicacin viral, el virin
infectante se rompe y pierde su infecciosidad, despus de este perodo existe
un intervalo de rpido acumulo de una progenie infectante de partculas virales,
tras el ensamblaje.

Etapas de la replicacin viral


Juan Carlos Caiza Urgiles
Reconocimiento y unin a la clula - Fijacin: Unin del virin a los
receptores de la clula y el la clula la que define el tropismo de tejidos.
Penetracin: la partcula viral es internalizada en la clula diana por
medio de endocitosis y viropexia.
Perdida de cobertura - Desnudamiento: separacin fsica del cido nucleico
de los otros componentes estructurales del virin. Ocurre al mismo tiempo de la
penetracin, liberando el genoma en forma de cido nucleico libre o como
nucleocapside.
Expresin del genoma viral y sntesis de componentes: Transcripcin de
ARNm especfico a partir del cido nucleico viral, para expresin y duplicacin
de la informacin gentica Los virus usan componentes de la clula para
traducir el ARNm
Ensamblaje y liberacin: Los genomas virales recin sintetizados y los
polipptidos de la cpside se unen para formar las partculas virales Las
cpsides icosaedricas pueden condensarse en ausencia de cido nucleico Las
nucleocpsides de los virus con simetra helicoidal no se firman en ausencia de
ARN viral Las clulas infectadas sufren lisis, liberando las partculas virales.


Curva de
Crecimiento
Bacteriano

En un cultivo bacteriano en medio lquido, se pueden diferenciar cuatro fases
en la evolucin de los parmetros que miden el crecimiento microbiano:
Fase lag o de adaptacin: Durante la que los microorganismos adaptan
su metabolismo a las nuevas condiciones ambientales (de abundancia de
nutrientes) para poder iniciar el crecimiento exponencial.
Fase exponencial o logartmica: en ella la velocidad de crecimiento es
mxima y el tiempo de generacin es mnimo. Durante esta fase las
bacterias consumen los nutrientes del medio a velocidad mxima. La
evolucin del nmero de clulas durante esta fase se explica con
el modelomatemtico descrito anteriormente. Esta fase corresponde a la
de infeccin y multiplicacin dentro del organismo del agente infeccioso.
Fase estacionaria: en ella no se incrementa el nmero de bacterias (ni
la masa u otros parmetros del cultivo). Las clulas en fase estacionaria
desarrollan un metabolismo diferente al de la fase de exponencial y
durante ella se produce una acumulacin y liberacin de metabolitos

Juan Carlos Caiza Urgiles
secundarios que pueden tener importancia en el curso de las
infecciones o intoxicaciones producidas por bacterias. Los
microorganismos entran en fase estacionaria bien porque se agota
algn nutriente esencial del medio, porque los productos de desecho que
han liberado durante la fase de crecimiento exponencial hacen que el
medio sea inhspito para el crecimiento microbiano o por la presencia de
competidores u otras clulas que limiten su crecimiento. La fase
estacionaria tiene gran importancia porque probablemente represente
con mayor fidelidad el estado metablico real de los microorganismos en
muchos ambientes naturales.
Fase de muerte: se produce una reduccin del nmero de bacterias
viables del cultivo.
Las fases, parmetros y cintica de crecimiento discutidas para el caso de los
medios lquidos se presentan tambin en los slidos. La cintica de
crecimiento, en este caso, slo se puede seguir utilizando unos sistemas de
deteccin especiales siendo el ms sencillo, la medida del nmero de clulas
viables por unidad de superficie o por unidad de masa.



La Temperatura
como condicin

Juan Carlos Caiza Urgiles
fsica para el
Crecimiento
Bacteriano
Cada microorganismo tiene una temperatura de crecimiento adecuada. Si
consideramos la variacin de la velocidad de crecimiento en funcin de la
temperatura de cultivo, podemos observar una temperatura mnima por debajo
de la cual no hay crecimiento; a temperaturas mayores se produce un
incremento lineal de la velocidad de crecimiento con la temperatura de cultivo
hasta que se alcanza la temperatura ptima a la que la velocidad es mxima.
Por encima de esta temperatura ptima, la velocidad de crecimiento decae
bruscamente y se produce la muerte celular.
El aumento de la velocidad de crecimiento con la temperatura se debe al
incremento generalizado de la velocidad de las reacciones enzimticas con la
temperatura. Se denomina coeficiente de temperatura a la relacin entre el
incremento de la velocidad de reaccin y el de temperatura. En trminos
generales, la velocidad de las reacciones bioqumicas suele aumentar entre 1.5
y 2.5 veces al aumentar 10C la temperatura a la que tienen lugar.
La falta de crecimiento a temperaturas bajas se debe a la reduccin de la
velocidad de las reacciones bioqumicas y al cambio de estado de los lpidos de
la membrana celular que pasan de ser fluidos a cristalinos impidiendo el
funcionamiento de la membrana celular.
La muerte celular a altas temperaturas se debe a la desnaturalizacin de
protenas y a las alteraciones producidas en las membranas lipdicas a esas
temperaturas.
Es importante tener en cuenta que a temperaturas bajas, el metabolismo
celular es lento y las clulas paran de crecer; aunque suelen morir. Sin
embargo, cuando la temperatura es superior a la ptima, se produce la muerte
celular rpidamente y las clulas no pueden recuperar su capacidad de divisin
si baja posteriormente la temperatura. Esto permite esterilizar por calor y no por
fro.
Hay varios tipos de microorganismos en funcin de sus temperaturas de
crecimiento mnima, mxima y ptima.

Juan Carlos Caiza Urgiles

Los microorganismos psicrtrofos son mesfilos que pueden crecer a
temperaturas bajas. Por tanto, se les puede considerar como psicrfilos
facultativos. Esto es importante desde el punto de vista aplicado porque cuando
se encuentran contaminando alimentos, son capaces de crecer en condiciones
de refrigeracin (4 - 8C) y de producir infecciones en los consumidores del
alimento (30 - 35 C).
Desde el punto de vista clnico, los microorganismos capaces de producir
infecciones en pacientes son los mesfilos y algunos psicrtrofos ya que sus
temperaturas ptimas de crecimiento coinciden con las corporales.

Caractersticas
Del Genoma
Procariota

Actualmente, hay una cantidad estimable de genomas de organismos
procariotas ya secuenciados. El tamao de estos genomas es pequeo (de
unos 500000 pb a 9000000 pb). Este tamao vara incluso dentro de la misma
especie. Los organismos con genomas ms pequeos suelen vivir en hbitats
muy restringidos (bacterias que habitan dentro de otro organismo), con unas
caractersticas muy estables. Los organismos con genomas ms grandes
habitan en zonas ms complejas y variables (suelo o races de plantas), por lo
que pueden llegar a necesitar genes que para otros organismos seran intiles.
Las bacterias pueden generar informacin gentica nueva mediante
duplicacin de genes, insercin de elementos genticos transponibles y
transferencia horizontal de genes, proceso gracias al cual dos especies
bacterianas pueden intercambiar informacin gentica a lo largo de la

Juan Carlos Caiza Urgiles
evolucin. El intercambio puede realizarse mediante la captacin de ADN
del ambiente por parte de la bacteria debida al intercambio de plsmidos o
a travs de vectores virales. El nmero de genes que codifican funciones
biolgicas (traduccin, transcripcin) es similar en las distintas especies de
bacterias, lo que indica que esas funciones estn codificadas por un grupo de
genes presentes en todas las especies. Por el contrario, funciones como la
biosntesis o el metabolismo energtico estn reguladas por un nmero
variable de genes, dependiendo de la especie
Organizacin compacta (poco espacio entre genes)
Informacin adicional en plsmidos
DNA no codificante en pequeos segmentos dispersos en el genoma
(<11%)
No hay intrones
Organizacin en operones (E.coli aprox 600 operones con 2 o ms
genes)
DNA genmico - Nucleoide : empaquetamiento en forma organizada
Molcula de DNA circular nica (80%) + Protenas bsicas asociadas
Super-enrollamiento (agregado de giros al DNA)
DNA girasa (topoisomerasa II)
DNA topoisomerasa I
Nucleoides
Organizacin de dominios: aprox. 400 dominios: Loops super-enrollados
(10- 40kb)
DNA genmico unido a un core proteico a partir del cual radian los loops
Protenas asociadas: DNA girasa, DNA topoisomerasa I, ms al menos 4
protenas HU la ms abundante (Tetrmeros)

Variaciones en las procariotas
Algunos genoma linear Ej: Borrelia burgdorferi
Algunos genomas de tamao mayor Ej. B.megaterium (30 x 106pb)
DNA circular o linear subgenmico - genoma multipartito (Brivio cholera,
Borrelia)
Archae - empaquetamiento con protenas similares a Histonas
Bibliografa
Castillo, S. (2009). VIROLOGA BSICA: REPLICACIN DE LOS VIRUS. The
Board of Trustees of the University of South Carolina. Recuperado el 10
de octubre de 2014, de http://pathmicro.med.sc.edu/spanish-
virology/spanish-chapter2.htm
(s.f.). Estructura Genoma Procariota. Recuperado el 10 de octubre de 2014, de
http://www.iib.unsam.edu.ar/php/docencia/licenciatura/biotecnologia/200
9/GenMol/clase3.pdf

Juan Carlos Caiza Urgiles
(2005). FACTORES FSICOS Y QUMICOS QUE INFLUYEN EN EL
CRESIMIENTO. Recuperado el 10 de octubre de 2014, de
http://www.unavarra.es/genmic/microclinica/tema%2002.pdf
REPRODUCCIN Y CRECIMIENTO MICROBIANO. (s.f.). Recuperado el 10
de octubre de 2014, de
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/
08_Tema_6_crecimiento.pdf