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Tinciones:

Tincin de May Grnwald-Giemsa (MGG)


La tincin de May Grnwald-Giemsa (MGG) es una tcnica de tincin derivada del mtodo de
Romanowsky que se utiliza principalmente para el coloreo de muestras de frotis sanguneos o
extendidos de mdula sea. Como el resto de las coloraciones basadas en la tcnica de
Romanowsky, la tcnica MGG permite diferenciar cualitativa y cuantitativamente los principales
elementos formes de la sangre.
En los laboratorios clnicos de hematologa resulta especialmente til para la demostracin de
alteraciones en el nmero, proporcin y morfologa de las clulas sanguneas. Tambin puede ser
adaptada para su utilizacin como una tcnica de tincin clsica para cortes histolgicos.
Como su nombre lo indica, la tcnica combina las tcnicas de coloracin desarrolladas por May-
Grnwald y Giemsa. Estas tcnicas a su vez se basan en el empleo de dos soluciones colorantes:
La solucin de May-Grnwald, que contiene el colorante ninico eosina y el colorante catinico
azul de metileno ambos disueltos en metanol
La solucin de Giemsa, que contiene eosina, azul de metileno y una serie de productos de la
oxidacin de este ltimo tales como el azur A, el azur B, el violeta de metilo y el azul de metilo.
Todos estos colorantes se encuentran en estado no ionizado mientras se mantienen en solucin
de alcohol metlico, pero al aadir agua se ionizan y se unen selectivamente a los constituyentes
celulares precipitando como sales insolubles.

Tincin de Gram
La tincin de Gram o coloracin de Gram es un tipo de tincin diferencial empleado en
Bacteriologa para la visualizacin de bacterias, sobre todo en muestras clnicas. Debe su nombre
al bacterilogo dans Christian Gram, que desarroll la tcnica en 1884. Se utiliza tanto para poder
referirse a la morfologa celular bacteriana, como para poder realizar una primera aproximacin a
la diferenciacin bacteriana, considerndose Bacteria Gram positiva a las bacterias que se
visualizan de color morado, y Bacteria Gram negativa a las que se visualizan de color rosa o rojo o
grosella
El cristal violeta (colorante catinico) penetra en todas las clulas bacterianas (tanto Gram positivas como
Gram negativas) a travs de la pared bacteriana. El lugol es un compuesto formado por I2 (yodo) en equilibrio
con KI (yoduro de potasio) y Sl (Siulterio), los cuales estn presente para solubilizar el yodo, y actan de
mordiente, haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de la clula bacteriana. El I2
entra en las clulas y forma un complejo insoluble en solucin acuosa con el cristal violeta..
La mezcla de alcohol-acetona que se agrega, sirve para realizar la decoloracin, ya que en la misma es
soluble el complejo I2/cristal violeta. Los organismos Gram positivos no se decoloran, mientras que los Gram
negativos s lo hacen.
Para poner de manifiesto las clulas Gram negativas se utiliza una coloracin de contraste. Habitualmente es
un colorante de color rojo, como la safranina o la fucsina. Despus de la coloracin de contraste las clulas
Gram negativas son rojas, mientras que las Gram positivas permanecen violetas.
La safranina puede o no utilizarse, no es crucial para la tcnica. Sirve para hacer una tincin de contraste que
pone de manifiesto las bacterias Gram negativas. Al trmino del protocolo, las Gram positivas se vern azul-
violceas y las Gram negativas, se vern rosas (si no se hizo la tincin de contraste) o rojas (si se us, por
ejemplo, safranina).
Esta importante coloracin diferencial fue descubierta por Hans Christian Gram en 1884. En este mtodo de
tincin, la extensin bacteriana se cubre con solucin de uno de los colorantes de violeta de metilo, que se
deja actuar durante un lapso determinado. Se escurre luego el exceso de violeta de metilo y se aade luego
una solucin de yodo, que se deja durante el mismo tiempo que la anterior; despus se lava el portaobjetos
con alcohol hasta que ste no arrastre ms colorante. Sigue a tal tratamiento una coloracin de contraste,
como safranina, fucsina fenicada diluida, pardo Bismarck, pironin B o hasta inclusive verde de malaquita.

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