TECNICAS DE SIEMBRA DE MICROORGANISMOS

SIEMBRA POR DILUCIN

Se toma el tubo de ensayo con medio lquido, como el caldo simple. Se toma el
material a diluir y se siembra en el tubo con el uso del asa cargada con
el material bacteriolgico, se agita, con movimientos moderados.
Medio de cultivo: Liquido
Instrumento: Asa
Finalidad: Poner la bacteria en suspensin

SIEMBRA POR ESTRAS EN SUPERFICIE

Se siembra el material en la superficie de el agar inclinado en un tubo de
ensayo, all se extiende por toda la superficie con el asa bacteriolgica,
previamente esterilizada y cargada con el material a sembrar, haciendo estras no
muy amplias, pero tampoco muy estrechas. Se inicia por la parte ms profunda de
la superficie inclinada y se termina la estra en la parte ms cerca de la boca del
tubo.
Medio de cultivo: Agar base inclinado
Instrumento: Asa o aguja bacteriolgica

SIEMBRA POR ESTRA POR AGOTAMIENTO

Con ste procedimiento se puede conseguir una buena separacin de las
colonias y aislarlas fcilmente. Para ello se funde el medio de cultivo, se vuelca en
caja de Petri y se deja solidificar. Con el asa previamente esterilizada se toma
material de un cultivo heterogneo y se descarga sobre la superficie del medio
formando estras. Esto puede realizarse de varias formas:
a) Al comienzo se coloca el inoculo, luego se contina con las estras. Cuando se
quiere obtener colonias muy separadas se puede utilizar dos o tres placas de
Petri, para lo cual se repite la operacin sin tomar con el asa nuevo material.
b) Se puede dividir la placa de Petri en cuatro cuadrantes; una vez depositado el
material en el primero, siguiendo el sentido de las agujas del reloj, se hace una
estra luego en el segundo, tercero y cuarto cuadrante sin cargar nuevamente el
asa; en el ltimo cuadrante aparecern las colonias aisladas
c) El inculo se extiende sobre una pequea zona de la placa, prxima al borde,
se esteriliza el asa y se traza otra estra a partir del depsito y as sucesivamente.
Medio de cultivo: solido en placa de Petri
Instrumento: Asa
Finalidad. Obtener colonias aisladas




POR PICADURA O PUNCIN

Con una aguja se toma el material que se quiere sembrar y se lo introduce en el
tubo, con medio semislido. Introducir la aguja hasta el fondo, formando un canal
de puncin, trayecto por el cual la retiraremos luego. Este mtodo se utiliza para
estudiar la movilidad de las bacterias.
Medio de cultivo: Semislido.
Instrumento: Aguja bacteriolgica.
Finalidad: Estudiar la movilidad de las bacterias.

SIEMBRA EN TSI: (POR PICADURA Y ESTRAS EN SUPERFICIE)

El TSI (Triple Sugar Iron) es un medio que contiene glucosa, sacarosa y lactosa,
hierro y un indicador que es el rojo fenol.
En este medio sembraremos por picadura y estras en superficie, como ya
conocemos, para estudiar los cambios que ocurrirn en superficie y profundidad. A
lo largo del canal se desarrollan los microorganismos, y segn lo hagan en la parte
superior o inferior del tubo, estarn indicando su comportamiento frente a los
azucares.

SIEMBRA DE LOS TRES GIROS
Consiste en tomar el inculo con el asa de platino y se siembra por estra a la
mitad superior de la placa. Sin flamear el asa de platino giraremos unos 90 y
volveremos a sembrar una segunda vez. As sucesivamente hasta completar toda
la siembra (girando de nuevo 90). Esta prctica no es utilizada porque no permite
buenos aislamientos.
SIEMBRA DE LOS CUATRO CUADRANTES
Consiste que en la base de la placa se dibujen lneas perpendiculares que se
debern cruzarse en el centro de la placa de tal forma que quede dividida en
cuatro cuadrantes iguales. Se tomara el asa de siembra estril una cantidad de
inculo y se adicionara en el extremo superior de uno de los cuadrantes
extendindole por todo ese cuadrante en forma de zig-zag.
Realizaremos la misma operacin sin flamear en todos los dems cuadrantes
siguiendo un orden de tal forma que iremos arrastrando el microorganismo
problema, observndose en el ltimo cuadrante las colonias ms aisladas o
separadas.



SIEMBRA CON ASA DIGRASKY
Consiste en adicionar al medio slido un inoculo que puede oscilar entre 0.2 y 1mL
segn los casos con pipetas graduada estril, y posteriormente se extiende con el
asa digrasky tambin estril. Esta tcnica se suele utilizar para el recuento viable,
antibiogramas, etc.