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. . . . . . . . . . . . . . . . 35
Principios de anlisis del analizador LaserCyte
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36
Cdigos de mensajes del analizador LaserCyte
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 38
Materiales de referencia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 41
Clasicacin de la anemia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 42
Perles leucocitarios . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 43
Imprecisiones en el recuento leucocitario diferencial manual en perros:
Efecto del frotis, del observador y del nmero de clulas contadas . . . . . . . . . . . . . . . 44
Evaluacin del LaserCyte: Un analizador hematolgico
para su uso en la clnica de animales de compaa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 45
Comparacin de los recuentos de reticulocitos con el volumen corpuscular
medio y la concentracin media de hemoglobina corpuscular en perros anmicos . . 46
Recuento de eosinlos en gatos por mtodos manuales.
Los analizadores Hemavet
950 y LaserCyte
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 47
Recuento leucocitario total en gatos: Comparacin de los resultados obtenidos
mediante recuento manual y seis analizadores de uso en la clnica . . . . . . . . . . . . . . . 48
Evaluacin de un analizador hematolgico de diagnstico inmediato
en perros y gatos tratados con quimioterapia con antineoplsicos . . . . . . . . . . . . . . . . 49
Diagramas de puntos normales . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 50
vi
Introduccin
Durante los ltimos 10 o 20 aos se ha producido un avance tecnolgico
extraordinario en los equipos de hematologa. Este avance ha venido
acompaado paralelamente de un descenso de los costes de produccin, lo
que ha dado lugar a una serie de avanzados pero asequibles analizadores
hematolgicos para la prctica veterinaria en la clnica.
El rendimiento de los analizadores vara enormemente en funcin de la
tecnologa subyacente y la calidad de los datos generados. En 2002, IDEXX
introdujo en el mercado veterinario el primer analizador hematolgico
basado en la citometra de ujo lser para medicina veterinaria: el analizador
hematolgico LaserCyte
. El analizador LaserCyte
iguala el rendimiento de
los analizadores de los laboratorios de referencia, por lo que se reere a la
tecnologa y al alcance de los resultados.
Como cabe esperar con cualquier equipo avanzado, el veterinario dispone de
una mayor cantidad de informacin. Esta nueva informacin le permite ampliar
su formacin previa en hematologa, as como adquirir unos conocimientos de
gran valor gracias a los nuevos parmetros. Esta gua le ayudar a entender
mejor los fundamentos de esta evolucin tecnolgica y a usar la informacin
que ahora pone a su disposicin el analizador hematolgico de uso en la
clnica. Adems, le ayudar a entender cmo obtener la mxima informacin
de los datos hematolgicos recogidos y cmo validarlos de manera rpida.
Es razonable plantearse por qu es necesario disponer de un analizador
hematolgico basado en la citometra de ujo. Muchas personas han
sobrevivido durante aos sin analizadores hematolgicos propios y otros han
conado en tecnologas ms bsicas, como el analizador hematolgico IDEXX
VetAutoread o cualquiera de los analizadores de tecnologa de impedancia
que actualmente se comercializan. Sin embargo, la motivacin que impulsa
a los veterinarios a avanzar tecnolgicamente es la misma que tienen los especialistas del mbito acadmico y los
laboratorios de referencia: poder disponer de datos de laboratorio de la mxima calidad.
Mientras la tecnologa de impedancia diferencia las clulas nicamente en funcin de su tamao, los analizadores
hematolgicos basados en la citometra de ujo lser no slo evalan el tamao y la forma de las clulas, sino tambin
la densidad y complejidad intracelular, as como la lobularidad y densidad del ncleo, proporcionando una valoracin
ms completa y precisa. Esto es de especial importancia en las muestras de sangre de animales de compaa
enfermos, en las que es frecuente observar alteraciones del tamao (por ejemplo, neutrlos ms grandes e inmaduros
o linfocitos reactivos) que pueden llevar a errores en la clasicacin de las clulas si slo se tiene en cuenta su tamao.
En esta gua se explican las ventajas del analizador hematolgico LaserCyte
y los
distintos tipos de diagramas de puntos que pueden presentarse en la prctica veterinaria habitual, y hemos incluido
imgenes de ejemplos de frotis sanguneos que se corresponden con los datos generados. Esperamos que estos
casos contribuyan a rearmar el valor de los datos recogidos con avanzados analizadores hematolgicos como IDEXX
LaserCyte
.
Dennis B. DeNicola, DVM, PhD, DACVP
Dennis DeNicola, DVM, PhD,
DACVP, Educador veterinario jefe,
Patlogo clnico
El Dr. DeNicola obtuvo en 1978 su
DVM y se doctor (PhD) en 1981 en
la Universidad de Purdue. Durante
ms de 20 aos ha sido formador en
patologa clnica y quirrgica. Adems
dirigi el laboratorio de patologa clnica
y el servicio de citologa primaria y
patologa quirrgica del laboratorio de
la facultad de veterinaria, as como un
servicio de patologa privado durante
15 aos. Conferenciante en ms de
150 simposios educativos nacionales
e internacionales, el Dr. DeNicola es
adems autor y coautor de ms de 150
publicaciones sobre diversos aspectos
de la patologa clnica veterinaria.
viii
1
Citometra de ujo lser
El analizador hematolgico LaserCyte
proporciona estas
valiosas herramientas.
Los diagramas de puntos son grupos de clulas
Cada punto representa una sola clula tal como es analizada por el aparato. Tienen lugar dos ciclos diferentes que
producen diagramas de puntos de distinto aspecto. Un ciclo sirve principalmente para recoger datos relativos a
eritrocitos, reticulocitos y plaquetas, y el otro para datos relativos a leucocitos. Los diferentes elementos celulares
sanguneos aparecen como nubes distintas de puntos y la mayor o menor nitidez de una nube indica variabilidad
dentro de esa poblacin celular concreta, lo cual puede indicar una anomala. Cuanto mayor es la anomala, mayor es
la potencial divergencia respecto a la normalidad. La inspeccin de un frotis sanguneo dar informacin adicional. Por
ejemplo, si las nubes de puntos son ms densas de lo normal, en el frotis sanguneo probablemente se detectar un
recuento elevado para ese tipo celular.
Los diagramas de puntos son importantes elementos de informacin, porque de ellos proceden los datos numricos
que guran en la pgina de resultados de los pacientes. Estos diagramas de puntos, al igual que el frotis sanguneo,
permiten reconocer de manera rpida muchas anomalas, as como conrmar la distribucin de los leucocitos. Distintas
situaciones, como una reticulocitosis o incrementos o disminuciones en los recuentos de de plaquetas, destacan
mucho en la representacin visual de un diagrama de puntos y aumentarn automticamente la conanza en los datos
numricos que aparecen en el informe.
Entonces, cmo crea el analizador LaserCyte
lleva a cabo un
ciclo de aclarado y a continuacin aspira ms sangre para preparar una dilucin para el anlisis de los leucocitos (WBC). El
analizador LaserCyte
elimina de manera
correcta esta poblacin de clulas del recuento leucocitario fnal. La poblacin R7 tiene color magenta.
Eritrocitos nl La poblacin de eritrocitos no lisados (eritrocitos nl) se compone de eritrocitos que no se lisaron antes del
ciclo para los leucocitos. La poblacin de eritrocitos nl tiene color naranja.
Tecnologa qualiBeads
Cada tubo CBC5R contiene una cantidad conocida de qualiBeads. El analizador LaserCyte
cuenta las qualiBeads tanto en el ciclo de los eritrocitos como en el de los leucocitos con lo que se asegura la calidad de
cada ciclo. Si el analizador cuenta demasiadas o demasiado pocas qualiBeads, el anlisis de la muestra queda marcado
para indicar que hay un problema potencial en esa parte del anlisis. La poblacin de qualiBeads tiene color gris.
Clasicacin de los leucocitos
Granularidad
Neutrlos
Monocitos
Linfocitos
Eosinlos
Baslos
partculas
qualiBeads
R7
Eritrocitos nl
Diagrama de dispersin de luz absorbida vs. granularidad (perros)
L
u
z
a
b
s
o
r
b
i
d
a
Neutrlos
Eosinlos
Monocitos
Baslos
Linfocitos
partculas qualiBeads
Eritrocitos nl
R7
5
6
Otras especies
Ya que cada especie tiene recuentos especcos de clulas, el analizador LaserCyte
m
e
t
r
o
c
e
l
u
l
a
r
Tamao
Cmo se imprimen los diagramas de puntos:
1. Desde la pantalla de Inicio, pulse el botn Equipos.
2. Pulse la pestaa LaserCyte.
3. Pulse el botn Diagnsticos LaserCyte.
4. Cuando aparezca el mensaje: Advertencia: Estas opciones son funciones
avanzadas de diagnstico que slo deben usarse bajo la orientacin del
personal del Servicio Tcnico de IDEXX, pulse OK para continuar.
5. Pulse la pestaa Datos.
6. Pulse Imprimir.
7. Seleccione el paciente cuyos diagramas de puntos desea imprimir,
pulse Ver archivos y a continuacin pulse OK.
8. Seleccione el anlisis que desea imprimir y a continuacin pulse Imprimir.
Granularidad
Eritrocitos
Leucocitos
Eritrocitos
Leucocitos
Leucocitos-EOS equinos
Leucocitos
Eritrocitos
7
Medida objetiva
de la regeneracin
Hematologa
12/5/2007 4:32:33 PM LaserCyte
4Dx
4Dx
4Dx
Negativo
Radiografas abdominales y torcicas: Ligera hepatosplenomegalia
Citologa e histopatologa: La evaluacin citolgica e histolgica de una muestra obtenida por biopsia heptica revel
inltracin orgnica difusa con poblacin celular de leucemia linfoide. Los aspirados del bazo con aguja na revelaron
una poblacin homognea similar de pequeos linfocitos malignos.
Diagnstico: Leucemia linfoctica crnica con amplia diseminacin orgnica
Tratamiento/Plan de monitorizacin: Tras consultar con un veterinario onclogo, Dani comenz un protocolo
quimioteraputico adecuado.
Pronstico: De reservado a malo
Frotis sanguneo Eritrocitos: 2+ poiquilocitosis con acantocitos
(arriba a la derecha), 2+ policromasia (fechas), 1+ anisocitosis.
Leucocitos: 4 linfocitos de aspecto reactivo. Plaquetas: no se
observan en este campo
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0
0 4096 8192 12288 16384
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Eritrocitos Leucocitos
Reticulocitosis
Linfocitosis
Neutrlos
Monocitos
Baslos
Eosinlos
Baslos
partculas qualiBeads
Eritrocitos
Plaquetas
Reticulocitos
Dobletes de eritrocitos
Fragmentos de eritrocitos
Hematology
12/5/2007 1:46:21 PM LaserCyte
4Dx
, test SNAP
4Dx
Giardia
negativo. Radiografas de abdomen rea mal denida en la regin craneoventral del abdomen: posible masa
asociada a hgado, bazo o intestinos. Ecografa abdominal pequea masa intestinal irregular.
Diagnstico: Masa intestinal anemia regenerativa con hemorragia crnica junto con una deciencia de hierro en
evolucin (microctica, hipocrmica) secundaria a una masa intestinal hemorrgica
Tratamiento/Plan de monitorizacin: Laparotoma exploratoria con reseccin de la masa y anastomosis. Pendiente de
anlisis histopatolgico. Monitorizacin peridica postoperatoria del hemograma.
Pronstico: Reservado pendiente de los resultados histopatolgicos
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0
0 4096 8192 12288 16384
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0
Eritrocitos Leucocitos
Frotis sanguneo Eritrocitos: 2+ microcitosis,
2+ hipocromasia, 2+ policromasia.
Leucocitos: no se observan en este campo.
Plaquetas: pocas plaquetas grandes, plaquetas
de diversos tamaos
Reticulocitosis
Neutrlos
Monocitos
Baslos
Eosinlos
Baslos
partculas qualiBeads
Eritrocitos
Plaquetas
Reticulocitos
Dobletes de eritrocitos
Fragmentos de eritrocitos
Eritrocitos
Existe anemia normoctica y normocrmica
moderada, fuertemente regenerativa a
juzgar por el recuento de reticulocitos.
El MCV es bajo dentro del intervalo de
referencia incluso a pesar de la fuerte
regeneracin. LA MCHC tambin es baja y
dentro del intervalo de referencia. Ambos
resultados apoyan fuertemente el desarrollo
de una deciencia de hierro. En el frotis
sanguneo se observa microcitosis e
hipocromasia, compatibles con el desarrollo
de una deciencia de hierro.
Leucocitos
Existe una leucocitosis moderada
caracterizada por neutrolia moderada y
ligera monocitosis. Una inamacin parece
probable, aunque el efecto concomitante de
los glucocorticoides (estrs) puede ser un
factor aadido.
Plaquetas
Existe trombocitopenia moderada, que se
conrma al examinar el frotis sanguneo.
El alto valor de PDW (generalmente
inferior a 15-18%) sugiere una variabilidad
signicativa del tamao de las plaquetas,
que tambin se conrma al examinar el
frotis sanguneo. Se observan plaquetas
grandes y de tamaos diversos.
Gastroenteritis causada por anquilostomas
y anemia regenerativa secundaria
Brutus, pastor alemn de 5 meses
Caso clnico
Historia clnica y principales sntomas: Brutus presentaba una historia aguda de diarrea profusa con melena y letargo
de ligero a moderado. Brutus tiene acceso a un amplio patio y ha tenido varios episodios previos de gastroenteritis
secundaria a una supuesta transgresin diettica, que respondieron a un tratamiento conservador consistente en una
dieta blanda y metronidazol. Est al da en cuanto a vacunas y fue vermifugado a las 8, 12 y 16 semanas de vida. No se
encuentra bajo medicacin ni ningn tratamiento. El dueo no le ha dado ningn tratamiento preventivo mensual frente
a la laria.
Anomalas detectadas en el examen fsico general: El animal se observa aptico y delgado, con membranas
mucosas moderadamente plidas y rosadas, abdomen pndulo en el que se detecta gas y uido a la palpacin de las
asas intestinales; la zona del perineo est manchada de heces con signos de melena.
Diagnstico diferencial: Parasitismo gastrointestinal, insuciencia pancretica exocrina, hipoadrenocorticismo,
gastroenteritis vrica/bacteriana, gastroenteritis hemorrgica, transgresin diettica o cuerpo extrao, intosuscepcin,
intoxicacin por rodenticida u otra intoxicacin o alergia alimentaria/intolerancia, sobrecrecimiento bacteriano
secundario.
Plan diagnstico: Hemograma completo, perl bioqumico clnico general incluyendo electrolitos, anlisis completo de
orina, anlisis de heces, test SNAP
4Dx
.
Resultados hematolgicos:
Hematology
1/7/2008 5:01:11 PM LaserCyte
RBC = 4.22 M/L LOW ( 4.70 8.50 )
HCT = 25.9 % LOW ( 32.0 55.0 )
HGB = 8.0 g/dL LOW ( 10.3 18.0 )
MCV = 61.3 fL ( 60.0 77.0 )
MCH = 19.00 pg ( 18.50 30.00 )
MCHC = 31.0 g/dL ( 30.0 37.5 )
RDW = 19.1 % HIGH ( 14.7 17.9 )
%RETIC = 6.0 %
RETIC = 252.5 K/L
WBC = 33.63 K/L HIGH ( 5.50 16.90 )
%NEU = 86.0 %
%LYM = 3.8 %
%MONO = 8.7 %
%EOS = 1.2 %
%BASO = 0.3 %
NEU = 28.93 K/L HIGH ( 3.00 12.00 )
LYM = 1.28 K/L ( 0.50 4.90 )
MONO = 2.92 K/L HIGH ( 0.30 2.00 )
EOS = 0.41 K/L ( 0.10 1.49 )
BASO = 0.09 K/L ( 0.00 0.10 )
PLT = 62. K/L LOW ( 175. 500. )
MPV = 18.02 fL
PDW = 33.4 %
PCT = 0.1 %
Coagulation IDEXX Coag Dx
1/7/2008 4:58:22 PM
PT = 12 ( 11 14 )
aPTT = 75 ( 60 93 )
Patient: Brutus Doctor: Smith
Species: Puppy
Client: David Williams Client ID: Canine - Brutis
In-house Laboratory
6.16
39.5
14.8
64.1
24.03
37.5
16.3
0.9
55.4
11.50
77
7.9
11.1
3.8
0.2
8.86
0.90
1.28
0.44
0.03
250
9.23
18.9
0.2
13
74
12/01/2007
20
21
Resultados bioqumicos: Los valores de protenas totales, albmina y globulinas son ligeramente bajos, lo cual es
compatible con la presencia de hemorragia. La ALKP aparece moderadamente alta y la concentracin de fsforo
ligeramente alta; sin embargo, esto es habitual en perros jvenes con un crecimiento seo activo (isoenzima ALKP
sea).
PT/aPTT (Analizador de Coagulacin IDEXX Coag Dx): Tanto el PT citrato como el aPTT se encuentran dentro de
los lmites de los intervalos de referencia (12 y 75 segundos respectivamente), lo que permite descartar una intoxicacin
por rodenticida u otra coagulopata adquirida.
Otros resultados signifcativos: Anlisis de heces Anquilostomas (Ancylostoma). Test SNAP
Giardia Negativo.
Test SNAP
4Dx
Negativo.
Diagnstico: Gastroenteritis inducida por anquilostomas con anemia hemorrgica regenerativa secundaria y deciencia
de hierro en evolucin
Tratamiento/Plan de monitorizacin: Fenbendazol y metronidazol, dieta blanda y repeticin del hemograma completo
a intervalos adecuados hasta que se encuentren repetidamente dentro de los lmites del intervalo de referencia.
Pronstico: Bueno
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4096
0
0 4096 8192 12288 16384
Eritrocitos Leucocitos
Frotis sanguneo Eritrocitos: 2+
policromasia, 2+ hipocromasia,
2+ microcitosis, 1+, anisocitosis.
Leucocitos: 1 neutrflo, 1+ toxicidad.
Plaquetas: plaquetas grandes y de
diversos tamaos
Reticulocitosis
Neutrlos
Monocitos
Baslos
Eosinlos
Baslos
partculas qualiBeads
Eritrocitos
Plaquetas
Reticulocitos
Dobletes de eritrocitos
Fragmentos de eritrocitos
Hematology
5/5/2007 11:24:47 AM LaserCyte
4Dx
, test SNAP
de
13 mm x 75 mm para tomar la muestra de manera automtica).
Tiempo para obtener los resultados: ~ 10 12 minutos
Especies: Canina, felina, equina
Mantenimiento: No requiere mantenimiento diario
Control interno: Cada tubo CBC5R cuenta con un nmero determinado de qualiBeads
.
Las qualiBeads son partculas con caractersticas especcas que se utilizan
para vericar la exactitud de la pipeta y el rendimiento del lser.
Calibracin: Se realiza en IDEXX Laboratories.
Capacidad de
almacenamiento de datos:
Ilimitada
Dimensiones (An x Pr x Al): 34 cm x 36 cm x 33 cm
36
Detectores
Parmetros
Principios analticos del Analizador LaserCyte
El analizador LaserCyte
m
e
t
r
o
s
A
n
l
i
s
i
s
MCH = %RETIC =
PCT =
Linfocitos
%LYM
Baslos
%BASO
Anlisis
1. Citometra de ujo lser
Cuatro detectores y medida del tiempo de vuelo frente al haz de lser
Eritrocitos
Reticulocitos
Plaquetas
MPV
(a partir de la media
de los mximos
de plaquetas)
HCT =
RBC x MCV
10
HGB
RBC
x10
( (
100 x RETIC
RBC
MPV x PLT
10.000
MCHC =
HGB
MCV x RBC
1.000 x
Leucocitos
!translation!
37
Monocitos
%MONO
Neutrlos
%NEU
2. Absorcin espectral
Dos LED
LED
azul
LED
Verde
azulado
Clave: Dimetro celular (o tiempo de vuelo Time Of Flight TOF)
Complejidad (o dispersin frontal en ngulo abierto Forward Scatter High FSH)
Tamao (o dispersin frontal en ngulo cerrado Forward Scatter Low FSL)
Granularidad (o dispersin en ngulo recto Right-Angle Scatter RAS)
Luz absorbida (o extincin EXT)
Eritrocitos Leucocitos
Ciclo
de eritrocitos
Ciclo
de leucocitos
La comparacin
de las medidas
de HGB de
los LED permite
una lectura
ms precisa
de la HGB
HGB
intracelular
HGB posterior a la
lisis de eritrocitos
HGB registrada
Eosinlos
%EOS
Tamao
(dispersin frontal
en ngulo cerrado)
Complejidad
(dispersin frontal en ngulo abierto)
Dimetro celular
(tiempo de vuelo)
Granularidad
(dispersin
en ngulo recto)
Lser
Luz absorbida
(extincin)
38
Cdigos de mensajes del analizador LaserCyte
Los contadores celulares automticos cumplen dos objetivos principales. Primero deben analizar los diversos
componentes de una muestra sangunea y efectuar el recuento adecuado de eritrocitos, leucocitos, plaquetas as como
el clculo de diversos ndices celulares. En segundo lugar, deben advertir al usuario con un mensaje en caso de que
los recuentos celulares no puedan analizarse en su totalidad. Por ejemplo, si entre los leucocitos existen formas que
el analizador no puede clasicar totalmente, el aparato debe dar un mensaje que sugiera la conrmacin mediante la
observacin de un frotis sanguneo.
Los cdigos de mensaje del analizador LaserCyte
:
Un analizador hematolgico para su uso
en la clnica de animales de compaa
Bettina Wenger-Rigganbach, Mike Hssig, Regina Hofmann-Lehmann, Hans Lutz
Recibido: 3 enero 2006/Aceptado: 6 febrero 2006
Springer-Verlag London Limited 2006
Proceedings from: 12th Congress of the International Society of Animal Clinical Biochemistry; May 2226, 2006; Estambul, Turqua.
Resumen:
En el presente estudio se evalu el instrumento
LaserCyte, un citmetro de ujo completamente
automtico para su uso en la prctica veterinaria, con
muestras de perros y gatos. La precisin (coeciente
de variacin, CV) fue 3,9% para los parmetros de
los eritrocitos (RBC), entre el 14,9 y el 102% para los
reticulocitos, entre el 3 y el 9,5% para los leucocitos
(WBC), entre el 3,9 y el 6,5% para los neutrflos, entre
el 7 y el 17,9% para los linfocitos, entre el 4,9 y el 13,1%
para los monocitos, entre el 10,4 y el 32,1% para los
eosinflos, entre el 7,8 y el 32% para los basflos, entre
el 3,1 y el 13,2 para las plaquetas y entre el 0 y el 28,2%
para los ndices plaquetarios.
La linealidad del intervalo sobrepas los intervalos
de referencia. La concordancia con los mtodos de
referencia (coeciente de correlacin, r) fue 0,96
(eritrocitos), 0,94 (hematocrito), 0,96 (hemoglobina),
0,95 (volumen corpuscular medio), 0,94 (leucocitos),
0,93 (neutrflos), 0,77 (linfocitos), 0,77 (monocitos),
0,29 (eosinflos), 0,03 (baslos), 0,13 (reticulocitos)
y 0,86 (plaquetas).
El LaserCyte
permiti determinar
de manera able los parmetros eritrocitarios, los
leucocitos y los neutrlos en ambas especies y las
plaquetas en perros. A la vista de su capacidad para
determinar de manera able las plaquetas felinas y los
parmetros antes mencionados, se considera que el
analizador es til para su uso en la clnica veterinaria.
La valoracin microscpica cualitativa de los frotis
sanguneos an es necesaria para detectar morfologas
celulares anmalas, determinados precursores celulares
y parsitos en sangre.
46
Comparacin de los recuentos de reticulocitos
con el volumen corpuscular medio y la
concentracin de hemoglobina corpuscular
media en perros anmicos
Antecedentes:
La anemia, una anomala frecuente en la medicina de
pequeos animales, se clasic en primer lugar como
regenerativa o no regenerativa para ayudar a identicar su
causa. La evaluacin microscpica de frotis sanguneos
con tinciones convencionales o de muestras de sangre
teidas con nuevo azul de metileno, para la deteccin de
la policromasia y la reticulocitosis respectivamente, pueden
proporcionar informacin subjetiva que permita esta primera
clasicacin. Aunque el uso de analizadores hematolgicos
en la clnica es cada vez ms frecuente en la medicina
veterinaria, en la mayora de las clnicas veterinarias que
efectan anlisis hematolgicos no se miran los frotis
sanguneos de manera rutinaria. La reciente automatizacin
de los analizadores hematolgicos para su uso en la clnica
basados en la citometra de ujo lser puede proporcionar
recuentos objetivos de reticulocitos. Tradicionalmente, se
usan los ndices eritrocitarios, el volumen corpuscular medio
(MCV) y la concentracin de hemoglobina corpuscular media
(MCHC) para la clasicacin morfolgica de las anemias,
tanto en humanos como en animales domsticos; con el
uso extendido de los analizadores hematolgicos basados
en la impedancia, la medida de dichas variables se volvi
rpidamente accesible. Un aumento del MCV (macrocitosis)
y una disminucin de la MCHC (hipocromasia) son
compatibles con una respuesta regenerativa; sin embargo,
este perl tambin puede observarse en las respuestas no
regenerativas y, dado que representan cambios promedio
de dichos parmetros eritrocitarios, son menos sensibles
que la observacin de policromatlos en el frotis sanguneo
o el recuento de reticulocitos manual o con analizadores
automticos. La probabilidad durante la regeneracin de
tener un MCV y una MCHC dentro de los lmites del intervalo
de referencia es elevada.
Objetivo:
La identicacin de la anemia regenerativa en perros,
como se ha indicado, puede efectuarse mediante la
observacin del frotis sanguneo para detectar policromasia,
la evaluacin de los ndices eritrocitarios y la determinacin
de los recuentos de reticulocitos. El perl clsico de los
ndices eritrocitarios en la regeneracin es macrocitosis
e hipocromasia. El objetivo de este estudio era comparar
los cambios en el volumen corpuscular medio (MCV) y
en la concentracin de hemoglobina corpuscular media
(MCHC) con un recuento absoluto de reticulocitos en una
serie de perros anmicos, para determinar la frecuencia de
presentacin de un perl clsico de ndices eritrocitarios
durante una respuesta regenerativa.
Material y mtodos:
Se recopilaron todos los datos de los hemogramas
completos realizados en perros y enviados a 14 laboratorios
de referencia de IDEXX (LRI) en Estados Unidos entre el
01-01-05 y el 31-03-05. Los valores de hematocrito <35%
se emplearon para indicar anemia y los valores absolutos
de reticulocitos >60.000/l se emplearon para indicar
regeneracin. En los perros que resultaron clasicados en
el grupo con anemia regenerativa, se determin el nmero
y porcentaje de casos con valores de MCV altos, MCHC
bajos y con valores de MCV altos y de MCHC bajos a la vez,
situados fuera de los intervalos de referencia de los LRI.
Resultados:
Los datos recogidos se resumen en la tabla que se incluye
a continuacin. Durante un periodo de evaluacin de
tres meses, 203.939 grupos de datos de hemogramas,
incluyendo recuentos absolutos de reticulocitos, fueron lo
sucientemente completos como para incluirlos en este
estudio. Se observ anemia en 18.975 (9,3%) de esos casos
y 6.752 (3,3%) de los casos tenan recuentos de reticulocitos
superiores a 60.000/l. Entre los casos regenerativos, 1.055
(15,6%) tenan un MCV elevado, 1.520 (22,5%) tenan una
MCHC baja y slo 562 (8,3%) tenan a la vez un MCV elevado
y una MCHC baja.
Conclusin:
En las evaluaciones de los hemogramas de rutina en perros
anmicos, las alteraciones de los ndices eritrocitarios son
un predictor no able de regeneracin. Se requiere el anlisis
de un frotis sanguneo y un recuento de reticulocitos para
evaluar de manera ms precisa la regeneracin. El recuento
absoluto de reticulocitos es la medida de regeneracin ms
objetiva en perros.
MCV y MCHC normales
MCV aumentado
MCHC disminuida
MCV aumentado
y MCHC disminuida
Normal MC V and
MC HC
Increased MC V
D ecreased MC HC
Increased MC V and
decrea se d MC HC
53.5%
15.6%
22.5%
8.3%*
* Slo el 8,3% de los casos tena a la vez el MCV aumentado
y la MCHC disminuida, lo que hace que esta combinacin
resulte un predictor no able de anemia.
Normal MC V and
MC HC
Increased MC V
D ecreased MC HC
Increased MC V and
decrea se d MC HC
Distribucin de los ndices eritrocitarios en la anemias regenerativas caninas
8000
7000
6000
5000
4000
3000
2000
1000
0
N
m
e
r
o
d
e
c
a
s
o
s
562
1520
1055
6752
D.B. DeNicola, J.A. Matthews, P.J. Fernandes, M.B. Frye
IDEXX Laboratories, Inc., Westbrook, Maine EEUU
Proceedings from: 12th Congress of the International Society of Animal Clinical Biochemistry; May 2226, 2006; Estambul, Truqua
47
Recuento de eosinlos en gatos
mediante mtodos manuales. Los analizadores
Hemavet
950 y LaserCyte
y LaserCyte
.
El recuento de eosinflos se llev a cabo en 62 muestras
de sangre de gatos con EDTA K3 mediante recuento
manual en frotis sanguneo, recuento manual despus
de la tincin con foxina B al 1%, con el analizador
Hemavet 950 (tecnologa de impedancia, Drew Scientifc,
Reino Unido) y con el analizador LaserCyte
(tecnologa
de citometra de ujo, IDEXX Laboratories, EEUU).
Los resultados se compararon mediante el mtodo
de regresin de Passing Bablok y el grco de Bland-
Altman.
El recuento leucocitario total fue mucho mayor con el
Hemavet que con el LaserCyte
(r = 0,65) que con el analizador Hemavet (r = 0,32). No
se observaron diferencias signicativas en el recuento
de eosinlos entre Floxina y Hemavet (t para datos
apareados >0,05), mientras que fue signifcativamente
superior con LaserCyte
respectivamente. Las respectivas ecuaciones de Passing
Bablok fueron y = 0,96x + 0,25, y = 1,18x + 0,18, y =
1,40x + 0,28, y = 1,15x + 0,26, y = 1,10x + 0,31 y y =
0,99x + 0,68. Se obtuvieron resultados analticamente
diferentes en 25/58 (VetABC), 30/55 (MS9/5), 41/58
(Abacus Junior), 31/54 (Medonic), 28/52 (Hemavet 950)
y 20/57 (LaserCyte), respectivamente. Se habran hecho
interpretaciones mdicas equivocadas en 4/58 (VetABC),
10/55 (MS9/5), 16/58 (Abacus Junior), 5/54 (Medonic),
7/52 (Hemavet 950) y 2/57 (LaserCyte), respectivamente.
Las diferencias mayores se observaron cuando existan
agregados de plaquetas. No todos los analizadores de
uso en la clnica hacen recuentos leucocitarios precisos
en gatos enfermos. El gran tamao de las plaquetas
felinas, los agregados de leucocitos y los pequeos
agregados de plaquetas podran explicar todos los
recuentos leucocitarios falsos observados en este
estudio. Los analizadores de impedancia son sensibles
en mayor o menor grado a los agregados plaquetarios,
pero ese no es el caso de la citometra de ujo.
49
CD LC
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
p<0.0001
Hematocrit DOG (%)
10 20 30 40 50 60
10
20
30
40
50
60
y=0.9357x+0.09782
r=0.9577
Hematocrit DOG
CD Hematocrit (%)
LC Hematocrit (%)
CD LC
0
5
10
15
20
25
30
35
p<0.0001
Hematocrit CAT (%)
10 20 30 40
10
20
30
40
y=0.8957x+1.240
r=0.9215
Hematocrit CAT
CD Hematocrit (%)
LC Hematocrit (%)
WBC DOG
0 10 20 30 40 50
0
10
20
30
40
50
y=0.8907x+0.001557
r=0.9227
CD WBC (10^9/L)
WBC CAT
0 10 20 30 40
0
10
20
30
40
y=1.104x-1.516
r=0.9500
CD WBC (10^9/L)
CD LC
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
p<0.0001
CD LC
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
p<0.0001
Resultado Resultado Resultado
CD LC
0
100
200
300
400
p<0.0001
Platelets DOG (10^9/L)
Platelets DOG
0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000
0
100
200
300
400
500
600
700
800
900
1000
1100
1200
y=0.9640x+21.26
r=0.9305
CD Platelets (10^9/L)
LC Platelets (10^9/L)
Platelets CAT
0 100 200 300 400 500 600 700 800
0
250
500
750
1000
y=0.9457x+86067
r=0.7154
CD Platelets (10^9/L)
LC Platelets (10^9/L)
CD LC
0
50
100
150
200
250
300
350
400
450
p<0.0001
Platelets CAT (10^9/L)
Evaluacin de un analizador hematolgico de
diagnstico inmediato en perros
y gatos tratados con quimioterapia
con antineoplsicos
A. Lara
1
, A.C. OKeefe
1
, S. Corn
2
, M.C. Iazbik
1
, J. Russell
3
, C.G. Couto
1
1
Departamento de Ciencias Clnicas Veterinarias y
2
Departamento de Biociencias Veterinarias, College of Veterinary Medicine,
The Ohio State University, 601 Vernon L Tharp, 43210 Columbus, Ohio;
3
IDEXX Laboratories, Inc., Westbrook, Maine
E-mail: lara-garcia.3@osu.edu
Proceedings from: Veterinary Cancer Society Conference; October 2730, 2005; Huntington Beach, California.
Introduccin:
El nuevo analizador hematolgico de uso en la
clnica LaserCyte
se detect
trombocitopenia en el 93% (perros) y en el 26% (gatos)
de las muestras trombocitopnicas detectadas con los
mtodos habituales.
Conclusiones:
LaserCyte