LAS INFECCIONES DEL TRACTO URINARIO (ITU) constituyen una de las entidades clnicas ms prevalentes, estimndose que de un 20 a un 35% de las mujeres presentan al menos un episodio de ITU a lo largo de su vida . Puede afectar a individuos de cualquier edad y condicin, con una especial incidencia en mujeres de cualquier edad, hombres en edades extremas de la vida, receptores de trasplante renal y en pacientes con cualquier anomala estructural o funcional del tracto urinario. Por lo expuesto es fcil entender que las ITU llevan implcita una morbilidad importante, una mortalidad no despreciable y un coste econmico elevado. En la ltima dcada la bsqueda de regmenes teraputicos que permitan un mejor cumplimiento, un menor coste y una menor incidencia de efectos adversos ha supuesto una importante innovacin en el manejo del paciente con ITU. Para descartar o corroborar a un diagnstico es esencial pruebas de laboratorio en las que tenemos: UROCULTIVO ANTIBIOGRAMA EXAMEN DE ORINA COMPLETO UROCULTIVO : EL UROCULTIVO ES EL CULTIVO DE ORINA PARA DIAGNOSTICAR INFECCIN SINTOMTICA DEL TRACTO URINARIO O INFECCIN ASINTOMTICA (BACTERIURIA ASINTOMTICA) EN PACIENTES CON RIESGO DE INFECCIN ANTIBIOGRAMA: SE ENTIENDE POR ANTIBIOGRAMA AL ESTUDIO DE LA SENSIBILIDAD IN VINTRO DE LAS BACTERIAS. EXAMEN COMPLETO DE ORINA : EL ANALISIS DE LA ORINA PROPORCIONA INFORMACION PARA DETECCION , DIAGNOSTICO DIFERENCIA Y ALTERACION NEFRO UROLOGICAS
2) OBJETIVOS :
ANTIBIOGRAMA :
- MEDIR LA SENSIBILIDAD DE UNA CEPA BACTERIANA QUE SE SOSPECHA QUE ES LA RESPONSABLE DE UNA INFECCIN A UNO O VARIOS ANTIBITICOS. - SEGUIR LA EVOLUCIN DE LAS RESISTENCIAS BACTERIANAS. - REALIZAR UN ENSAYO DE SENSIBILIDAD DE UN CULTIVO BACTERIANO A LOS ANTIBITICOS, USANDO EL MTODO DE KIRBY BAUER
UROCULTIVO : - DESARROLLAR DICHA PRACTICA ADECUADAMENTE - COMPARAR LAS CARACTERISTICAS NORMALES Y LAS CARACTERISTICAS QUE PRESENTA ESA MUESTRA DE HECHES Y DAR UN FUNDAMENTO O EXPLICACION.
EXMEN GENERAL DE ORINA : - REALIZAR LA PRUEBA CORRECTAMENTE TOMANDO LAS MEDICAS CORRESPONDIENTES - ANALIZAR LAS CARACTERISTICAS DE LA ORINA Y ESTABLECER UN FUMDAMENTO A DICHAS CARACTERISTICAS QUE PRESENTA LA ORINA.
3) METODOLOGA :
PROCEDIMIENTO DE ANTIBIOGRAMA : 1) Funda el medio de cultivo y djelo enfriar a 45-50C. 2) Vierta aspticamente suficiente cantidad de medio de cultivo en una placa de Petri, para obtener una capa de 4 mm de espesor. Para una placa de 10 cm. de dimetro se requieren 30 mL de medio y para una de 15 cm se requieren 70 mL. 3) Deje solidificar el medio de cultivo y luego seque las placas durante 30 minutos antes de usarlas para la inoculacin 4) Inocule la placa mediante un hisopo estril utilizando una suspensin del germen de 18 a 24 horas de incubacin con una turbidez equivalente a 1,5 x 106 bacterias (Equivale al tubo No. 5 de la escala de Mc Farland).Para la inoculacin sumerja un hisopo estril en el cultivo elimine el exceso rotndolo firmemente contra la pared interna del tubo. Frote el hisopo sobre la superficie del medio de cultivo. 5) Repita esta operacin por tres veces sucesivas, rotando la placa para obtener una dispersin uniforme del inculo en toda la superficie. 6) Coloque la tapa a la placa y deje secar el inculo por 3 a 5 minutos. 7) Coloque los discos con los antibiticos sobre el agar mediante pinzas estriles o usando un aplicador de
discos. Oprima los discos suavemente con una pinza para asegurar un buen contacto con el medio de cultivo. 8) Los discos deben estar espaciados de manera que su distancia a la pared de la placa sea de 15 mm y entre ellos de 30 mm. 9) Incube a 35 37C hasta el siguiente da (aproximadamente 18-19 horas). Si se requieren los resultados con rapidez se pueden leer las zonas de inhibicin despus de 6-8 horas de incubacin, pero estos resultados deben ser confirmados mediante una nueva lectura despus de la incubacin por las 18 -19 horas.
PROCEDIMIENTO DEL EXMEN COMPLETO DE ORINA : ORINA CENTRIFUGADA 1) La orina debera ser recolectada con un mnimo de contaminacin. 2) Idealmente con una muestra de segundo chorro. 3) La orina debe ser depositada en un frasco limpio y seco, y analizada lo ms rpidamente posible (dentro de una hora), a menos que se le agreguen preservantes y sea mantenida en refrigerador. 4) Para el anlisis microscpico, se ha estandarizado la preparacin de la muestra para poder hacer comparaciones vlidas entre dos o ms muestras: la muestra, de 10 a 12 ml, se debe centrifugar a 3500 r.p.m. por 5 minutos. 5) Luego se bota el sobrenadante, dejando 0.5 a 1 ml para resuspensin del sedimento. 6) Finalmente, una gota del resuspendido se coloca sobre un portaobjeto y se cubre con un cubreobjeto para luego ser observado al microscopio primeramente a un aumento de 10 x y luego a un aumento de 40x.
ORINA SIN CENTRIFUGAR
1) Colocarse los guantes y mandil como medida de bioseguridad. 2) Recoger la primera muestra matinal. Evitar contaminacin (Ej.: menstruacin, flujo vaginal). 3) Colocar la muestra de orina en un depsito. 4) Empapar con orina completamente la tira reactiva 5) Esperar 2 minutos mximo y procedemos observar las reacciones , va cambiando de color dependiendo la patologa que tenga la persona
PROCEDIMIENTO DE UROCULTIVO :
1) Lavarse las manos. 2) Preparar el equipo y llevarlo a la unidad del paciente. 3) Identificar al paciente. 4) Darle preparacin psicolgica. 5) Darle preparacin fsica. 6) Abrir el paquete de la pinza y gasas. 7) Calzarse los guantes. 8) Proceder a realizar asepsia de la regin genital. 9) Recolectar la muestra de orina. 10) Tomar una gota de orina con el asa (antes de tomar la gota calentar el asa en el mechero). 11) En una placa de agar con medio de cultivo, sembrar por estra masiva. 12) Rotular la placa de agar y dejar incubar entre 24 y 48 horas. 13) Esterilizar el asa calibrada de 10 L en el mechero y luego enfriarla introducindola en la orina. 14) Agitar con la misma asa la muestra de orina y tomar una cantidad para el sembrado. 15) Sembrar la muestra de orina en las placas de Agar sangre Agar MC-Conkey 16) Para esto, realizar una estra con el asa sobre el dimetro de la placa y luego pasar el asa perpendicularmente a esta lnea, cubriendo el resto del campo. 17) Una vez sembrados ambas placas, se incuban a 37 C durante 18 horas. 18) A partir de la cantidad de colonia que crecieron se establece el nmero de unidades formadoras de colonias que en este caso por utilizar un asa calibrada de 10 L cada colonia equivale a 100 UFC/mL.
4) RESULTADOS E INTERPRETACION :
RESULTADO ANTIBIOGRAMA
- SEGN LA AMPLITUD DE ESTE HALO DE GERMENES SE CLASIFICAN EN: RESISTENTES - SENSIBLES - SE MIDE EL DIAMETRO DE CADA DISCO Y SE TIENE EN CUENTA LO SIGUIENTE:
- En el mtodo de Kirby Bauer, el microorganismo es inoculado en la superficie de una placa de agar, sobre el cual se colocan discos impregnados con una concentracin conocida del antibitico. Las placas se incuban por 16-18 horas a 35-37C. Durante la incubacin, el antibitico difunde radialmente desde el disco a travs del agar, por lo que su concentracin va disminuyendo a medida que se aleja del disco . En un punto determinado, la concentracin del antibitico en el medio es incapaz de inhibir al germen en estudio. El dimetro del rea de inhibicin alrededor del disco puede ser convertido a las categoras de sensible, intermedio o resistente (S, I, o R) . HALO > 17 = SENSIBLE HALO < 17 = RESISTENTE
RESULTADO DE EXMEN GENERAL DE ORINA CENTRIFUGADA EN EL EXAMEN DE ORINA CENTRIFUGADA SE PUEDE ENCONTRAR: LEUCOCITOS CILINDROS CRISTALES EN LA PRESENCIA DE LEUCOCITOS TAMBIEN LLAMADOS PIOCITOS, SON GLOBULOS BLANCOS. LA PRESENCIA DE ESTOS LEUCOCITOS EN LA ORINA SUELEN INDICAR QUE HAY UNA INFLAMACION EN LA VIAS URINARIAS, EN GENERAL SUGIEREN INFECCION URINARIA PERO PUEDE ESTAR PRESENTE EN CUALQUIER OTRA SITUACION , COMO TRAUMAS O CUALQUIER OTRA INFLAMACION NO CAUSADA POR UN AGENTE INFECCIOSO .
LA PRESENCIA DE CILINDOS CONOCIDOS COMO ESTRUCTURAS CILNDRICAS QUE REPRESENTAN MOLDES DEL LUMEN TUBULAR RENAL, Y SON LOS NICOS ELEMENTOS DEL SEDIMENTO URINARIO QUE PROVIENEN EXCLUSIVAMENTE DEL RIN. SE FORMAN PRIMARIAMENTE DENTRO DEL LUMEN DEL TBULO CONTORNEADO DISTAL Y DUCTO COLECTOR A PARTIR DE UNA MATRIZ DE MUCOPROTENA DE TAMM-HORSFALL. SU ANCHO EST DETERMINADO POR EL LUGAR DE FORMACIN, SIENDO MS GRUESOS LOS DEL DUCTO COLECTOR, LO QUE SUGIERE MAYOR ESTASIS AL FLUJO URINARIO. LA APARIENCIA DE LOS CILINDROS EST INFLUENCIADA POR LOS MATERIALES PRESENTES EN EL FILTRADO AL MOMENTO DE SU FORMACIN, Y DEL TIEMPO QUE STE HA PERMANECIDO EN EL TBULO.
LA PRESENCIA DE CRISTALES EN LA ORINA, A CONSECUENCIA DE CAMBIOS DE PH, TEMPERATURA Y CONCENTRACIN QUE AFECTAN SU SOLUBILIDAD. PUEDEN ADOPTAR LA FORMA DE CRISTALES VERDADEROS O PRESENTARSE COMO MATERIAL AMORFO. SU PRESENCIA RARA VEZ TIENE SIGNIFICADO CLNICO DE IMPORTANCIA, PERO SU CORRECTA IDENTIFICACIN ES TIL PARA DETECTAR LOS POCOS TIPOS DE CRISTALES QUE CONFIEREN PER SE UNA SITUACIN PATOLGICA COMO: ENFERMEDADES HEPTICAS, ERRORES CONGNITOS DEL METABOLISMO O DAO RENAL CAUSADO POR CRISTALIZACIN TUBULAR DE DROGAS O SUS METABOLITOS. LOS CRISTALES SON MUY FRECUENTES EN ORINA REFRIGERADA. PARA SU IDENTIFICACIN ES TIL RECONOCER SU FORMA, EN MUCHOS CASOS CARACTERSTICA, Y EL PH URINARIO, YA QUE ALGUNAS SALES PRECIPITARAN SLO DENTRO DE CIERTOS RANGOS DE PH. INTERESANTEMENTE, LOS CRISTALES PATOLGICOS O ANORMALES SON ENCONTRADOS SLO EN ORINAS CON PH NEUTRO O CIDO
RESULTADO DE EXMEN GENERAL DE ORINA SIN CENTRIFUGAR :
ANLISIS FSICO Esta parte del anlisis de orina sigue siendo una de las maneras ms frecuentes de sospechar alteraciones metablicas o patologa renal oculta. Apariencia: se refiere a la claridad o grado de turbidez de la orina. Si bien normalmente es clara, la orina tambin puede verse turbia debido a precipitacin de cristales (uratos y fosfatos amorfos, oxalato de calcio o cido rico), la presencia de clulas (bacterias, eritrocitos, leucocitos, cls. epiteliales, etc.), o la existencia de proteinuria masiva o lipiduria. La presencia de espuma residual orienta hacia proteinuria importante. Color: el espectro normal va desde el cristalino al amarillo oscuro, dependiendo especialmente de su concentracin. Esta coloracin es dada principalmente por el pigmento urocromo. Olor: el olor caracterstico es sui generis o aromtico (debido a cidos orgnicos voltiles), dependiendo en algunas ocasiones, al igual que con el color, de alimentos o drogas consumidas. Este olor se transforma en amoniacal cuando la orina permanece por tiempo prolongado expuesto al medio ambiente Existen algunos olores de orina que sugieren patologas especficas. Gravedad especfica: se define como la densidad de una solucin (orina) comparada con la densidad de un volumen similar de agua destilada a igual temperatura, y refleja la capacidad del rin de concentrar o diluir la orina medible a travs de un urinmetro, un refractmetro o una cinta reactiva. Si bien hay una buena correlacin directa con la osmolalidad urinaria, esta ltima mide concentracin de solutos en una solucin, por lo que es menos influenciada que la primera ante la presencia de partculas de alto peso molecular, como glucosa, protenas y medios de contraste. La gravedad especfica de la orina isostenrica (igual al plasma) es de 1.010, dividiendo la orina entre concentrada y diluida. Si bien el espectro puede ir de 1.001 a 1.035, la gravedad especfica de muestras aisladas suele ir entre 1.010 a 1.025.
ANLISIS QUMICO Con el desarrollo de las cintas reactivas, el anlisis qumico de la orina dej de ser un procedimiento laborioso y caro, y por lo tanto impracticable en la prctica rutinaria. Las cintas reactivas son tiras plsticas con cojinetes absorbentes impregnados con diferentes productos qumicos que, al tomar contacto con orina, producen reacciones qumicas que generan cambios de color del cojinete. De esta manera, se obtienen resultados cualitativos y semi-cuantitativos dentro de segundos a minutos mediante simple pero cuidadosa observacin. Esta tcnica puede presentar falsos positivos y negativos frente a cada reactivo, lo que se esquematiza en la PH El pH urinario de individuos normales tiene un rango de 4.5 a 8.0, pero en muestras matinales es levemente cido, con pH de 5.0 a 6.0. Estos valores deben ser interpretados en relacin a la informacin clnica obtenida del paciente, pues el pH puede variar segn su estado cido- bsico sanguneo, la funcin renal, la presencia de infeccin urinaria, el tipo de dieta o drogas consumidas, y el tiempo de obtenida la muestra. Las dietas altamente proteicas acidifican la orina, en cambio aqullas ricas en vegetales la alcalinizan. El conocimiento de esta variable tiene gran importancia al momento de identificar los cristales vistos en examen microscpico del sedimento de orina. La determinacin de pH urinario por reaccin colorimtrica no es lo suficientemente exacta para ser usada en el diagnstico de acidosis tubular renal, en que deben utilizarse pH- metros calibrados. NITRITOS Los nitratos presentes en la orina son convertidos a nitritos por la reduccin enzimtica de bacterias, especialmente Gram (-). Los nitritos, que normalmente no se encuentran en la orina, son detectados por la cinta reactiva, sugiriendo as una probable infeccin urinaria. La reaccin positiva a nitritos debe ser siempre confirmada con urocultivo, pues tiene falsos (+) y (-). GLUCOSA
Menos de 0.1% de la glucosa normalmente filtrada por el glomrulo aparece en la orina. Cuando la glicemia supera el umbral renal de reabsorcin tubular de glucosa, lo cual ocurre entre los 160 a 180 mg/dl, aparece en elevadas cantidades en la orina, y es detectada en la cinta reactiva mediante la reaccin de glucosa oxidasa. Esta reaccin es especfica para glucosa, no detectando la presencia de otros azcares reductores, como galactosa y fructosa. Si bien es utilizada especialmente para diagnosticar o controlar pacientes con diabetes mellitus, la presencia de glucosuria importante puede no asociarse a cuadros hiperglicmicos, como lo son: tubulopatas, alteraciones tiroideas y dao del S.N.C. CETONAS Su presencia en orina refleja una alteracin en el uso de hidratos de carbono como principal fuente energtica, requirindose para ello de la utilizacin de grasas corporales. Las principales causas de cetonuria se relacionan a cuadros con incapacidad para metabolizar (diabetes mellitus), prdidas aumentadas (vmitos), o inadecuado consumo de carbohidratos (desnutricin, reduccin de peso). La causa ms frecuente del hallazgo de escasa cantidad de cuerpos cetnicos en la orina, es el ayuno. De los tres compuestos cetnicos presentes en la orina (hidroxibutirato 78%, cido acetoactico 20% y acetona 2%), slo el cido acetoactico es adecuadamente detectado por la cinta reactiva. PROTENAS Normalmente existen en la orina pequeas cantidades de protenas, ya sea filtradas o secretadas por el nefrn, no excediendo los 10 mg/ml o 4 mg/m2/hr. La presencia de proteinuria significativa fuertemente sugiere enfermedad renal, aunque puede no serlo, como ocurre en la proteinuria ortosttica, la asociada a fiebre, deshidratacin o ejercicios extenuantes, o la secundaria a hiperproteinemias (proteinuria de Bence Jones). Esta parte de la cinta es altamente sensible para albmina, pero no para globulinas, hemoglobina o cadenas livianas; cuando se sospecha este tipo de proteinurias debe realizarse el test de precipitacin con cido sulfasaliclico. Las equivalencias segn color estn expresadas en el envase comercial, y generalmente corresponden como sigue: trazas, 5 a 20 mg/dl; 1+: 30 mg/dl; 2+: 100 mg/dl; 3+: 300 mg/dl; 4+: >2 g/dl. BILIRRUBINA
La bilirrubina que se detecta en la orina es la conjugada, y puede ser el primer indicador de una enfermedad heptica no detectada. La exposicin a la luz puede degradar esta substancia y hacerla indetectable.
LEUCOCITOS Utiliza la accin de esterasas de los granulocitos presentes en orina, ya sea ntegros o lisados. Otras clulas presentes en la orina no contienen esterasas. Su positividad no es diagnstica de infeccin urinaria pero s la sugiere. El umbral de deteccin es entre 5 a 15 leucocitos por campo de mayor aumento (CMA). SANGRE Detecta hemoglobina a travs de su actividad pseudoperoxidsica. El test no distingue entre hemoglobinuria, hematuria y mioglobinuria, por lo que antecedentes clnicos, anlisis microscpico de orina y test especficos ayudan a clarificar el diagnstico. ANLISIS MICROSCPICO : La ltima parte del anlisis rutinario de orina es el examen microscpico de sta, segn tcnica descrita previamente. El propsito es identificar elementos formados o insolubles en la orina, y que pueden provenir de la sangre, el rin, las vas urinarias ms bajas y de la contaminacin externa. Debido a que algunos de los componentes son de ninguna importancia clnica, en cambio otros son considerados normales a menos que se encuentren en cantidades aumentadas, el examen del sedimento urinario debe incluir la identificacin y la cuantificacin de los elementos presentes. ERITROCITOS Aparecen como discos bicncavos incoloros de alrededor de 7 micrones de dimetro, y estn normalmente presentes en la orina en cantidades bajas (aprox. 5 por CMA). El origen de los glbulos rojos puede estar en cualquier lugar del rin o del rbol urinario, e incluso fuera de ste
(pseudohematuria). Su forma puede variar con cambios de pH y concentracin de la orina, si bien la dismorfia de mayor importancia clnica se relaciona con la fragmentacin y protrusiones de membrana celular de los hemates (acantocitos), pues sugieren origen glomerular LEUCOCITOS Son ms grandes que los eritrocitos (aprox. 12 micrones) y presentan ncleos lobulados y grnulos citoplasmticos. La degeneracin propia de estas clulas las transforma en piocitos. Pueden originarse en cualquier lugar del sistema genitourinario y traducen inflamacin aguda de ste. Normalmente se encuentran en recuentos menores a 5 por CMA, aunque pueden estar en nmero levemente mas alto en mujeres. Las principales causa de leucocituria (o piuria) son itu (incluyendo prostatitis y uretritis), glomrulonefritis, nefritis intersticiales, tumores y por inflamaciones en vecindad (apendicitis, anexitis, etc.). CLULAS EPITELIALES Usualmente presentes en bajas cantidades en orina, pueden clasificarse en tres tipos de acuerdo al origen dentro del sistema genitourinario: CLULAS ESCAMOSAS Son clulas grandes, con citoplasma abundante e irregular y ncleo central y pequeo. Pueden provenir del epitelio vaginal o de la porcin distal de la uretra. Un nmero elevado de ellas puede sugerir contaminacin vaginal o uretritis. CLULAS TRANSICIONALES Son clulas ms pequeas que las escamosas, de contorno redondeado y con ncleo central. Provienen del epitelio que cubre la pelvis renal, vejiga y uretra proximal. Pueden verse en elevado nmero en pacientes con litiasis renal. CLULAS TUBULARES RENALES Son redondas y algo ms grandes que los leucocitos, con un ncleo redondo central. Su presencia en nmero aumentado se asocia a condiciones que causan dao tubular, incluyendo necrosis tubular aguda, pielonefritis, reacciones txicas, rechazo de injertos, y pielonefritis.
No estn normalmente presentes en la orina, siendo frecuente su presencia en muestras contaminadas (especialmente s fueron tomadas con recolector), y en infecciones urinarias. La presencia de bacterias en muestras de orina sin piuria asociada puede sugerir bacteriuria asintomtica. De los hongos, el ms frecuente es la Candida albicans, que puede ser confundida con eritrocitos. MUCUS Es un material proteico producido por glndulas y clulas epiteliales del tracto genitourinario. Su presencia no tendra importancia clnica, encontrndose en algunas ocasiones de contaminacin vaginal
RESULTADO UROCULTIVO :
PRIMER CUADRANTE: 50 BACTERIAS SEGUNDO CUADRANTE: 60 BACTERIAS TERCER CUADRANTE: 30 BACTERIAS CUARTO CUADRANTE: 21 BACTERIAS
DETERMINAR EL PROMEDIO DE COLONIAS POR CM 1) SUMA LA CANTIDAD DE CADA CUADRANTE : 60 + 50 + 30+ 21 = 161 UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS
2) EL PROMEDIO DE COLONIAS POR CM ES IGUAL : 161 UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS / 4 CUADRANTES = 40.2 PROMEDIO DE COLONIAS POR CM.
3) SE MULTIPLICA LA CANTIDAD DE BACTERIAS EN PERSONAS CON INFECCIN POR EL PROMEDIO DE CADA COLONIA POR CM : 64 X 40.2 = 25 728 4) LA ORINA DILUIDA CON SOLUCION SALINA PUEDE HACERSE AL : 1/10 , 1/100 , 1/1000 EN ESTE CASO LA ORINA DILUIDA ESTA CON SOLUCION SALINA DE 1 / 100 LO QUE INDICA QUE 25 728 SE LE AGREGA 00 POR EL 1/100 . 5) LO QUE SE EXPRESA ASI :2.57 X 10 A LA SEXTA UFC
INTERPRETACION : EN ESTE CASO INDICA QUE ES UN PACIENTE CON TIENE ENFERMEDAD DE INFECCION , ESTO SE INDICA PORQUE SU RECUENTO DE COLONIAS ES MAYOR A 10 A LA 5 UFC , SI LA PACIENTE HUBIERA TENIDO UN RECUENTO DE BACTERIAS FORMADORAS DE COLONIAS MENOR A 10 A LA 5 SE HUBIERA CONSIDERADO UNA BACTIRIURIA .