Equipe: jhony Moura : Fernanda Rafaelle : Daiana Suely: Lidia Sampaio: Taynara Nogueira: Gabriella Araujo: Kamila Galdino. 1. Comparar as teorias da gerao espontnea e da biognese; Teoria da Gerao Espontnea ou Abiognese. Ela defendia que os seres vivos se formaram a partir de material orgnico em decomposio. Era como se a vida brotasse de materiais no vivos, da o nome. A teoria da biognese, portanto, Louis Pasteur defendia a origem dos seres vivos atravs de outro preexistente. Esta teoria comprovada inmeras vezes, logo, a defendida pelos cientistas nos dias de hoje. 2. Definir bacteriologia, micologia e virologia; A Bacteriologia a cincia que estuda a morfologia, ecologia, gentica e bioqumica das bactrias bem como outros muitos aspectos relacionados com elas. uma parte ou ramo da Biologia e de grande importncia para o homem por seus envolvimentos mdicos. Micologia (tambm denominada micetologia) um ramo da biologia dedicado ao estudo dos fungos, que so organismos heterotrficos de variadas dimenses. Possuem tamanhos considerveis como os cogumelos e tambm tamanhos microscpicos como as leveduras e bolores. Virologia o estudo dos virus, complexos de cidos nuclicos e protenas que tm a capacidade de replicao em animais, plantas e clulas bacterianas 3. Listar pelo menos 4 atividades benficas dos microrganismos
As bactrias so usadas para produzir vacinas, antibiticos e outras drogas que combatem in feces. so usadas tambm para fazer produtos como po, cerveja e queijo As bactrias ajudam a sintetizar vitaminas, como biotina, vitamina K e cido flico, assim como em funes corporais, como digesto, imunidade e a impedir que bactrias potencialmente perigosas, como E. coli, nos deixem doentes.
4. Descrever e identificar a maneira correta de escrever o nome de bactrias;
5. Descrever quais as caractersticas bacterianas usadas na identificao de bactrias.
Diferentes espcies podem apresentar morfologia e metabolismo idnticos. Assim, a identificao requer a observao de um conjunto complexo de caractersticas: Morfologia celular: dimenses, forma, arranjos, comportamento tintorial, estruturas e mobilidade. Caractersticas culturais: formas de crescimento das colnias em diferentes meios (meio em placas, meio inclinado, meio lquido, gelatina), odor. Ecologia: hbitat, provenincia, condies ambientais, patogenicidade, hospedeiros, resistncia. Gentica: sequncia de genes especficos. Fisiologia: exigncias nutritivas, fontes de carbono e nitrognio, fatores de crescimento .
2. BIOSSEGURANA, CITOLOGIA E MORFOLOGIA BACTERIANA.
1. Comparar e diferenciar a estrutura geral dos procariotos e eucariotos Nas clulas procariontes a sua principal caracterstica a ausncia de carioteca, deixando o DNA disperso no citoplasma, e tambm pela ausncia de alguns organelas. As clulas eucariontes so mais complexas que as procariontes, possuem membrana nuclear individualizada e vrios tipos de organelas, a maioria dos animais e plantas a que estamos habituados so dotados deste tipo de clulas.
2. Identificar as estruturas essenciais e acessrias das bactrias. As bactrias tem uma estrutura celular bem caracterstica de clulas procariticas no possuem ncleo revestido de membrana e possuem estruturas essenciais para a sua sobrevivncia tais como: cromossomos, plasmdeo, hialoplasma, ribossomos, grnulos de reserva, membrana celular, parede celular, cpsulas, flagelo, fmbrias.
3. Definir DNA cromossomal e plasmdeos. As bactrias apresentam um cromossomo circular, que constitudo por uma nica molcula de DNA bicatenrio, tendo sido tambm chamado de corpo cromatnico. possvel s vezes, evidenciar mais de um cromossomo numa bactria em fase de crescimento uma vez que a sua diviso precede a diviso celular. O cromossomo bacteriano contm todas as informaes necessrias sobrevivncia da clula e capazes de auto-replicao. Existe ainda no citoplasma de muitas bactrias, molculas menores de DNA, tambm circulares, cujo os genes no codificam caractersticas essenciais, porm muitas vezes conferem vantagens seletivas bactria que as possui. Estes elementos extra cromossmicos, denominados plasmdeos so autnomos, isto , so capazes de autoduplicao independente da replicao do cromossomo e podem existir em nmero varivel no citoplasma bacteriano.
4. Definir a funo dos ribossomos, mesossomos, flagelos, membrana plasmtica, cpsula, glicoclice e incluses. Ribossomos: Acham-se espalhados no interior da clula e conferem uma aparncia granular ao citoplasma. Os ribossomos so constitudos por duas subunidades, 30S e 50S, que ao iniciar a sntese protica reunem-se formando a partcula ribossmica completa de 70S. Embora o mecanismo geral da sntese protica das clulas procariticas e eucariticas seja o mesmo, existem diferenas considerveis em relao a biossntese e estrutura dos ribossomos. Flagelos: Apresenta-se ancorado a membrana plasmtica e a parede celular por uma estrutura denominado corpo basal, composta por dois anis, nas bactria gram-positivas e por quatro nas gram-negativas, de onde saem uma pea intermediria em forma de gancho que se continua com o filamento. As bactrias que apresentam um nico flagelo so denominadas monotrquias e bactrias com inmeros flagelos so denominadas peritrquias. Mesossomos: Este termo se refere a invaginaes da membrana celular, que tanto podem ser simples dobras como estruturas tubulares ou vesiculares. Diversas funes tm sido atribudas aos mesossomos, tais como: papelna diviso celular e na respirao. Membrana Plasmatica: Esta membrana na verdade uma camada dupla de fosfolipdios, mas tambm contem protenas essenciais auxiliadoras na permeabilidade de nutrientes, na defesa e na produo de energia. Capsula Glicocalice: uma camada que recobre a parede celular, polissacardica geralmente, mas podem ser protenadas tambm. Esta estrutura mantm a clula bacteriana resistente fagocitose. Fimbrias: Tambm conhecidas como pili, estas estruturas so microfibrilas (curtas e finas) proticas, caractersticas das bactrias gram-negativas e diferentemente dos flagelos, no servem para locomoo, mas para adeso. Existe ainda um tipo especfico de fmbria, a sexual. Esta serve para auxiliar no processo de conjugao, ligando as bactrias para que troquem material gentico. Hiaoplasma: Isto um lquido gelatinoso, composto por saia, glicose e outras molculas de acar e orgnicas, protenas. Podemos encontrar tambm RNA e muitos ribossomos.
5. Comparar e diferenciar as paredes celulares de bactrias gram-positivas, gram-negativas e micobactrias. De acordo com a constituio da parede, as bactrias podem ser divididas em dois grandes grupos: - Gram-negativas: se apresentam de cor avermelhada quando coradas pelo mtodo de Gram. - Gram-positivas: se apresentam de cor roxa quando coradas pelo mtodo de Gram. A parede das gram-positivas praticamente formada de uma s camada, enquanto a das gram- negativas formada de duas camadas. Entretanto, Os dois tipos de parede apresentam uma camada em comum que chamada de peptdeoglicano. A segunda camada, presente somente na clulas das gram-negativas denominada membrana externa. Entre a membrana externa e a membrana citoplasmtica encontra-se o espao periplasmtico no qual est o peptdeoglicano.
6. Descrever as funes dos endsporos e o processo esporulao e da germinao dos esporos. O endosporo uma clula, formada no interior da clula vegetativa, altamente resistente ao calor, dessecao e outros agentes fsicos e qumicos, capaz de permanecer em estado latente por longos perodos e degerminar dando incio a nova clula vegetativa. A esporulao tem incio quando os nutrientes bacterianos se tornam escassos, geralmente pela falta de fontes de carbono e nitrognio.
7. Listar as etapas na preparao de uma colorao de gram, descrevendo o aspecto das clulas gram-positivas e gram-negativas aps cada etapa. Procedimento: Fazer o esfregao; Corar com cristal de violeta por um minuto; Lavar com gua destilada; Cobrir com Lugol por um minuto; Lavar com gua destilada; Descorar com lcool 70% por 30 segundos; Lavar com gua destilada; Corar com safranina por 30 segundos; Lavar com gua destilada, secar e observar ao microscpio. Resultados: Gram (+) coram de roxo, gram (-) cor de rosa.
3. METABOLISMO E CRESCIMENTO BACTERIANO 1. Definir metabolismo e descrever as diferenas fundamentais entre anabolismo e catabolismo.
Considera-se metabolismo, as reaes qumicas que ocorrem dentro do organismo e tem a funo de mudar ou produzir molculas. Ele pode estar presente de duas formas: no estado anablico ou catablico. Catabolismo aquela envolvida na produo e liberao de energia, j o anabolismo a envolvida na utilizao de energia a biossintese.
2. Identificar o papel do ATP como um intermedirio entre o metabolismo e anabolismo.
3. Explicar o que se quer dizer por oxidao-reduo. Oxidao-reduo so reaes que transferem eltrons entre substncias fazendo com que o nmero de oxidao (nox) de uma substncia aumente enquanto o nox de outra substncia diminui. Podemos dizer ento que em uma reao a substncia que perde eltrons e sofre oxidao designado agente redutor enquanto a substncia que ganha eltrons e sofre reduo designada agente oxidante
4. Listar e dar exemplos de trs tipos de reaes de fosforilao que geram ATP. Fosforizao em nvel de substrato: onde o ATP gerado pela transferncia de um grupamento fosfato de alta energia a partir de um composto fosforilado ao ADP. Esta ligao rica em energia geralmente foi adquirida na reao onde o substrato foi oxidado. Fosforilao oxidativa: o processo metablico de sntese de ATP a partir da energia liberada pelo transporte de eltrons na cadeia respiratria. Fotofosforilao: um processo de sntese de ATP a partir de ADP + fosfato levado a cabo pelas ATP sintases da membrana do tilacoide, nos cloroplastos das clulas vegetais. Existem dois tipos: Fotofosforilao acclica: Esto implicados os fotossistemas I e II; o fluxo de eltrons que produz no cclico. sintetizado ATP e NADPH. Fotofosforilao cclica: Est implicado s o fotossistema I. Realiza-se um bombeamento de hidrognios do estroma para o espao tilacoidal, que contribui para criar um gradiente eletroqumico de hidrognios e como tal a sntese de ATP, sem que se produza NADPH.
5. Descrever o produto final da gliclise e a quantidade de ATP produzida neste processo.
A gliclise consiste na transformao de uma molcula de glicose, ao longo de vrias etapas, em duas molculas de acido pirvico, Nesse processo so liberados quatro hidrognios, que se combinam dois a dois, com molculas de uma substncia celular capaz de receb-los: o NAD (nicotinamida-adenina-dinucleotdio). Ao receber os hidrognios, cada molcula de NAD se transforma em NADH 2 . Durante o processo, liberada energia suficiente para a sntese de 2 ATPs.
6. Descrever a importncia do ciclo de Krebs na respirao A influncia do ciclo de Krebs no processo da respirao celular comea com a gliclise, que formar as duas molculas de cido pirvico. a partir desse ponto que comea a participao do ciclo de Krebs na respirao propriamente dita. O ciclo de Krebs ocorre dentro da mitocndria, logo as molculas de cido pirvico tm que entrar nela. Esse processo s ocorre quando h molculas de oxignio suficientes para cada molcula de glicose; se h, na entrada do cido pirvico na mitocndria faz com que o oxignio reaja com o cido formando gs carbnico e libera os eltrons dos tomos de hidrognio presentes na frmula da glicose.Esses eltrons so transportados pelo NADH e o FADH, duas molculas transportadoras. Os eltrons ento se responsabilizam pela unio de mais um tomo de fsforo, com uma molcula de adenosina difosfato(ADP) formando a adenosina trifosfato o famoso ATP. Esta molcula de ATP ento que fornecer a energia para a vida da clula e o transporte ativo de substncias pelo corpo.
7. Descrever o modelo quimiosttico na cadeia transportadora de eltrons para gerao de ATP. Os eltrons de alta energia, proveniente da quebra oxidativa de acares, so transferidos ao longo de uma srie de transportadores de eltrons na membrana. Essa transferncia de eltrons libera energia, que utilizada para bombear prtons (H+ derivados da gua), atravs da membrana e, assim, gerar um gradiente eletroqumico de prtons, uma fora produtora que provoca o deslocamento de ons atravs da membrana por meio da diferena de concentrao de um meio para o outro (do hipotnico para o hipertnico) e de carga eltrica, passando a ser uma forma de energia estocada que pode ser oferecida para realizar trabalho til quando h a permisso para o refluxo atravs da membrana em favor do seu gradiente eletroqumico.
8.Diferenciar a respirao e a fermentao, descrevendo as vantagens e desvantagens de cada uma para a bactria. - A respirao, o processo de inspirar o ar, permite ao corpo absorver o oxignio que ele precisa para produzir energia e eliminar o gs carbnico resultante das reaes qumicas.
Fermentao - um processo utilizado para obter energia atravs da oxidao incompleta da glicose, sem usar oxignio livre. O produto de ATP da respirao rende mais do que na fermentao. A fermentao ocorre em situaes de anaerobiose (quando no h O2). A gliclise resulta em menos energia. Na respirao h a formao de 38 ATPs e h um aumento rpido da populao. Enquanto que na fermentao so h formao de 2ATPs
9. Listar alguns produtos da fermentao. Etanol + CO2 formada a partir da levedura Acido Actico formado a partir do etanol Acido Ltico formado a partir de carboidratos
10. Classificar os microrganismos de acordo com a utilizao da fonte de carbono e os mecanismos da produo de energia. Organismos quimio-heterotrficos: obtm Carbono a partir de materiais orgnicos - protenas, carboidratos e lipdeos. Organismos quimio-autotrficos: energia a partir de reaes qumicas. Organismos fotoautotrficos: que capta a energia da luz para a sntese da glicose.
11. Classificar os microrganismos em cinco grupos com base na faixa de temperatura tima para seu crescimento. A temperatura de crescimento de um organismo pode variar para cada espcie. Essas variaes podem ser maiores para alguns microrganismos que outros. Nas faixas de temperatura que so mais favorveis ao crescimento chamado de taxa de crescimento, cujo nmero de divises celulares por hora dobra para cada aumento de temperatura de 10C. Com relao ao crescimento timo, os microrganismos so classificados em trs grupos, conforme a faixa de temperatura: - Psicrfilos so microrganismos que crescem em baixas temperaturas. - Mesfilos so microrganismos que crescem em temperatura ambiente. - Termfilos so microrganismos que crescem em altas temperaturas.
12. Identificar a faixa de pH em que as bactrias e fungos patognicos conseguem se desenvolver melhor. Ainda que o pH mais favorvel ao desenvolvimento dos fungos esteja entre 5, 6 e 7, a maioria dos fungos tolera amplas variaes de pH. Os fungos filamentosos podem crescer na faixa entre 1,5 e 11, mas as leveduras no toleram pH alcalino. Muitas vezes, a pigmentao dos fungos est relacionada com o pH do substrato. Os meios com pH entre 5 e 6, com elevadas concentraes de acar, alta presso osmtica, taiss como gelias, favorecem o desenvolvimento dos fungos nas pores em contato com o ar. As bactrias precisam de um pH entre 6.8 e 7.8, ou seja, prximo da neutralidade. Mas de lembrar que outras bactrias podem ter outros pH ptimos, diferentes da neutralidade
13. Explicar a importncia da presso osmtica para o crescimento microbiano. Fator extremamente importante, principalmente a partir do maior conhecimento sobre as Archaea, visto que vrios membros deste domnio requerem altas concentraes de sais para seu desenvolvimento. Os microrganismos retiram da gua a maioria dos nutrientes solveis (contedo celular 80 90 % de gua) Presso osmtica: retira a H2O dentro da clula Reao Hipertnica: perda de H2O do meio intracelular para o extracelular, atravs da membrana plasmtica (meio com concentrao de sais). Plasmlise: diminuio da membrana plasmtica da clula devido a perda de H2O por osmose.
14. Explicar como ocorre a classificao dos microrganismos usando como referncia as necessidades de oxignio. Organismos classificados em: AERBIOS - Estritos (obrigados): necessitam de O 2 - Facultativos: no necessitam de O 2 mas crescem melhor com O 2 - Microaerfilo: necessitam de O 2 mas em nveis menores ANAERBIOS - Aerotolerantes: no necessitam de O 2 mas crescem melhor sem O 2
- Estritos (obrigados): no toleram O 2 (letal)
15. Definir tempo de gerao e descrever e diferenciar as fases de crescimento bacteriano. Fase Lag um perodo em que ocorre pouca ou ausncia de diviso celular, que pode estender por uma hora ou at vrios dias. Fase Log ou Fase de crescimento exponencial um perodo em que a reproduo celular encontra-se extremamente ativa onde o tempo de gerao constante. Fase Estacionria um perodo em que o N de morte celular equivalente ao N de clulas novas e a populao se torna estavl. Fase de Morte Celular ou Fase de Declnio um perodo em que o N de clulas mortas excede o de clulas novas
4. MEIO DE CULTURA 1. Estabelecer as diferenas entre o meio quimicamente definido e o meio complexo.
Meio quimicamente definido, tem as caracteristicas necessrias para o crescimento das bactrias, so compostos basicamente, por Carbono, Nitrogenio, hidrogenio, enxofre. J os complexos, precisam de mais substncias para o crescimento de determinados microrganimos, precisam ser enriquecidos com sais biliares, soro, aucares por exemplo.
2. Estabelecer as diferenas entre os meios slidos, lquidos e semi-slidos.
O meio slido tem por objetivo isolar fungos e bactrias para identificao e preservao de culturas; outra grande vantagem o uso da superfcie para separar colnias e assim conseguir uma colnia pura. O meio lquido utilizado principalmente para aumentar inculos de bactrias e fungos e os microorgnismos so cultivados sob agitao ou no. Alm disso, meios lquidos so tambm usados para analisar taxas de crescimento e propriedades fisiolgicas dos microorganismos e, dependendo do procedimento que for realizado, as clulas podem ser centrifugadas e recuperadas e ento utilizadas, por exemplo para extrao de protenas totais ou extrao de DNA. Esses meios contm pequena concentrao de agente solidificante, sendo portanto classificados como semi-slidos.So acondicionados em tubos de ensaio e tambm so empregados para realizao de provas bioqumicas para observar a motilidade bacteriana ou para conservao de culturas.
3. Definir o que meio seletivo e diferencial e de transporte. Meios seletivos:
Meio seletivo: A finalidade desses meios selecionar as espcies que se deseja isolar, e impedir no desenvolvimento de outros germes. Isto conseguido geralmente pela adio de um componente qumico especfico, como corantes, antibiticos ou outras substncias com capacidade inibitria para algumas bactrias.
Meio Diferencial:Possibilita a distino entre vrios gneros e espcies de microrganismos por possuir, em sua composio, substncias que permitem uma diferenciao presuntiva, evidenciada por mudanas de colorao ou na morfologia ou na morfologia das colnias. A maioria dos meios diferenciais tambm seletiva, possuindo desse modo, vrios tipos de agentes inibidores de crescimento. Meio Transporte: usado para transporte e preservao de espcie microbiolgica.
4. Definir meio seletivo e diferencial.
Meio seletivo: A finalidade desses meios selecionar as espcies que se deseja isolar, e impedir no desenvolvimento de outros germes. Isto conseguido geralmente pela adio de um componente qumico especfico, como corantes, antibiticos ou outras substncias com capacidade inibitria para algumas bactrias.
Meio Diferencial:Possibilita a distino entre vrios gneros e espcies de microrganismos por possuir, em sua composio, substncias que permitem uma diferenciao presuntiva, evidenciada por mudanas de colorao ou na morfologia ou na morfologia das colnias. A maioria dos meios diferenciais tambm seletiva, possuindo desse modo, vrios tipos de agentes inibidores de crescimento.
5. Explicar porque as bactrias crescem melhor em meios lquidos.
De grande influncia no cresciemnto dos microrganismos - todos os processo de crescimento so dependentes de reaes qumicas, as quais so afetadas pela temperatura. A temperatura na qual uma espcie de microrganismo cresce mais rapidamente a temperatura tima de crescimento - em temperaturas mais favorveis para o crescimento, o nmero de divises celulares por hora, chamada de taxa de crescimento, dobra para cada aumento de temperatura de 10 o C. A maioria das bactrias cresce em meios de cultura liquida devido gua ser um melhor condutor de calor do que o ar.
gar sangue: A base deste meio altamente nutritiva e promove um otimo crecimento de todos os microrganismos relevantes. O sangue utilizado pode ser de carneiro ou de cavalo, para visualizao de hemolise. gar chocolate: Meio enrequecido. Cultivo de organismos fastidiosos, como Neisseria sp, Haemophilus sp e outros germes exigentes.
7. Explicar que bactrias o meio MacConkey seleciona e quais diferenciam.
O gar MacConkey um meio seletivo (pela presena de sais biliares, cristal violeta e NaCl) para o isolamento de bacilos Gram negativos, principalmente as enterobactrias (Salmonellas, Shigellas e bactrias coliformes). Diferencia as bactrias fermentadoras de lactose (colnias vermelho tijolo a rosa, opacas se o crescimento for denso, podem estar rodeadas por zonas de precipitado de bile; possibilidades: E.coli, Klebsiella spp, Grupo Enterobacter spp) das no fermentadoras de lactose (colnias transparentes a incolores, observadas melhor a luz transmitida; possibilidades: Salmonella spp, Shigella spp, Proteus spp e Edwardsiella) pela presena de lactose e vermelho neutro na composio do produto.
8. Explicar a vantagem do uso do meio CLED.
A gelose CLED (Cystine Lactose Electrolyte Deficient) especialmente til no isolamento de microrganismos do trato urinrio. Tambm permite diferenciar as bactrias que fermentam a lactose das que no fermentam. As bactrias lactose (+) produzem colnias amarelas plidas ou amarelas, por acidificao do meio. As bactrias que no fermentam a lactose produzem colnias verdes, azuis ou incolores. A composio do meio (fraco contedo em electrlitos) previne a invaso de Proteus. A frmula de CLED fornece vantagens: maior tamanho das colnias, melhoria da leitura de caracteres Lactose, e melhor diferenciao de colnias.
9. Explicar a utilidade do meio Mueller-Hinton e Mueller-Hinton sangue.
Mueller- Hinton > Utilidade: Meio utilizado para a realizao do teste de avaliao da resistncia aos antimicrobianos pelos mtodos de difuso em disco e E-test para enterobactrias, no fermentadores, Staphylococcus, Enterococcus sp. Mueller - Hinton sangue > Utilidade: Meio utilizado para a realizao do teste de avaliao da resistncia aos antimicrobianos pelos mtodos de difuso em disco e E-test de cepas de Streptococcus pneumoniae e estreptococos beta-hemolticos dos grupos A,B,C e G conforme instrues do NCCLS.
10. Explicar o princpio dos meios cromognicos.
Meio de cultura cromognico no seletivo, utilizado para isolamento e enumerao dos microorganismos do trato urinrio; direta identificao de espcies de E. coli, Proteus, e Enterococcos e presuntiva identificao de Klebsiella, Enterobacter e Serratia. A identificao da E.coli realizada pela determinao da atividade de 2 enzimas: a galactosidase e a triptofanase; a clivagem pela galactosidase do primeiro substrato cromognico resulta numa colorao rosa das colnias. O Proteus caracterizado pela atividade de TDA positiva; O Proteus mirabilis identificado pela reao indol negativa. Os enterococos so revelados pela presena de uma glucosidase (esculinase);a clivagem por esta enzima do segundo substrato cromognico faz com que as colnias adquiram colorao azul-turqueza.
11. Exemplificar duas bactrias que no so capazes de crescer nos meios de cultura.
Bactrias haloflicas extremas no crescem com menos de 15% de sal.
12. Explicar o objetivo dos semeios bacterianos por esgotamento e o semi-quantitativo.
Semeio por esgotamento = Obteno de colonias isoladas. Semi - qunatitativa: Ala calibrada de 0,001.
5. CONTROLE DO CRESCIMENTO MICROBIANO 1. Definir os seguintes processos de controle microbiano: esterilizao, desinfeco, anti- sepsia, degerminao, sanitizao, bactericida e bacteriosttico.
Esterilizao o processo que remove ou destri todas as formas de microorganismos presentes, como vrus, bactrias, fungos, protozorios e inclusive esporos, que so altamente resistentes Desinfeco o mtodo capaz de eliminar muitos ou todos os microorganismos patognicos, porm no so capazes de eliminar esporos. Anti-sepsia o mtodo no qual se previne a proliferao de microrganismos em tecidos vivos com o uso de substncia qumicas, os anti-spticos. Degerminao Remoo mecnica dos microrganismos,em vez da morte ,em uma rea limitada ,no mata os endsporos. Sanitizao Processo que leva a reduo dos microrganismo,a nveis seguros de acordo com os nveis de sade pblica .ex:lavagens de copos,talheres e louas aplicando desinfetantes qumicos . Bactericida Quando um produto exerce determinada funo especifica sobre determinada grupo de microrganismos. Bacteriosttico Devem ser usados apenas quando eles inibem a atividade daquele determinado microrganismo,sem mat-lo. 1. Descrever os efeitos dos agentes do controle microbiano sobre as estruturas celulares A reviso de certas caractersticas da clula microbiana pode apontar os possveis locais de ao de um agente antimicrobiano. Eles podem agir causando leses na parede celular, alteraes na permeabilidade celular, alteraes das molculas de protenas e de cidos nuclicos, inibio da ao enzimtica, inibio da sntese de cidos nuclicos, entre outras coisas.
2. Explicar os fatores que influenciam a efetividade dos antimicronianos
1. O nmero de microrganismos; 2. Caractersticas dos microrganismos; 3. Presena de matria orgnica; 4. Concentrao do agente antimicrobiano; 5. Temperatura; 6. Tempo de exposio ao agente antimicrobiano.
3. Comparar a efetividade do calor mido (fervura, autoclavao e pasteurizao) e calor seco. FERVURA mata as formas vegetativas dos patgenos quase todos os vrus,fungos e seus esporos. AUTOCLAVE- esterilizao mais confivel ,temperatura acima da gua fervente. PASTEURIZAO- Principalmente utilizado na indstrias de laticnios,alta temperatura. 4.Descrever como a filtrao, as baixas temperaturas e presso osmtica suprimem o crescimento microbiano. A filtrao a passagem de um liquido ou gs atravs de um material semelhante a uma tela ,com esporos pequenos para reter os microrganismos 5. Explicar a diferena da ao das radiaes ionizantes e no-ionizantes nas clulas microbianas. Radiao ionizante radiao de pequeno comprimento de onda ,portanto de alta energia e penetrao ,raios gama,raios x,ou feixes de eltrons de alta energia. Radiao no ionizante possui um comprimento de onda maior que a radiao ionizante ,luz ultra violeta ,apresenta baixa penetrabilidade . 6. Identificar as principais classes de agentes qumicos utilizados como desinfetantes lcoois O lcool atua na desnaturao das protenas e solubilizao de lipdios. Pode haver efeitos secundrios na interferncia do metabolismo e eventual lise das clulas Aldedos e derivados Por ser bem solvel em gua, o aldedo frmico o mais utilizado. A metenamina pode ser misturada ao cido mandlico em algumas preparaes, aumentando o poder bactericida. Halognios e derivados Um dos anti-spticos mais utilizados na prtica cirrgica o iodo sob a forma de tintura. O mecanismo de ao combinao irreversvel com protenas, provavelmente atravs da interao com os aminocidos aromticos, fenilalanina e tirosina.
Agentes de superfcie Os compostos mais utilizados so cloreto de benzalcnio, cloreto de benzetnio, cloreto de cetilpiridneo e o cetremida. Os sabes no se encaixam nesta categoria , mas so compostos aninicos que possuem limitada ao quando comparada com a de substncias catinicas. Os detergentes derivados de amnia so bastante utilizados em desinfeces e anti-sepsias. Esterilizantes gasosos O xido de etileno empregado com sucesso na esterilizao de materiais cirrgicos, embora tenha uma ao lenta. A betapropiolactona cerca de 4000 vezes mais eficaz que o xido de etileno, mas txica e tem baixo poder de penetrao. 7.Diferenciar os halognios usados como anti-spticos e como desinfetantes. Os halognios e as substncia liberadas de halognios constituem alguns dos mais eficazes agentes microbianos utilizados para a desinfeco e anti-sepsia. Seu principal modo de ao parece depender da reao covalente do halognio com sistemas enzimticos-chaves. O anti-sptico se diferencia do desinfetante pelo meio em que atua. Chama-se desinfetante toda substncia qumica que destrua ou iniba o crescimento de microrganismos patognicos localizados em meios inanimados (empregam-se, consequentemente, como produtos de limpeza e para manter o instrumental clnico livre de micrbios).Os anti-spticos atacam os mesmos agentes, mas quando estes se encontram sobre tecidos vivos (usam-se, portanto, para a higiene corporal e como antimicrobianos em alimentos e remdios).
8. Explicar a melhor eficincia do lcool menos concentrado como anti-sptico e desinfetante.
As bactrias possuem umaa membrana que as revestem com uma concentrao de acares, o lcool com maior graduao (96 GL) no consegue solubilizar esta membrana, e por conseguinte, no consegue atingir o ncleo da bactria, para mat-la. Como o lcool 70% tem mais gua presente, ele tem essa capacidade, pois os acares so solveis em gua.
9. Listar as vantagens do glutaraldedo em relao a outros desinfetantes qumicos.
O glutaraldedo um dialdedo saturado - 1,5 pentanedial. Em soluo aquosa apresenta pH cido e no esporicida. As formulaes que so utilizadas possuem outros componentes para que a soluo passe a ter esta ao. As formulaes encontradas so: soluo ativada: adicionada uma substncia ativadora, o bicarbonato de sdio, que torna a soluo alcalina (pH 7,5 a 8,5), tendo ento atividade esporicida. soluo potencializada: utiliza uma mistura isomrica de lcoois lineares, possui um pH de 3,4 a 3,5. Essa mistura temperatura ambiente possui funo esporicida baixa e se aquecida a 60 o C torna-se esporicida em exposio por 6 horas. Mecanismo de ao O glutaraldedo tem potente ao biocida, bactericida, virucida, fungicida e esporicida. Sua atividade devida a alquilao de grupos sulfidrila, hidroxila, carboxila e amino dos microrganismos alterando seu DNA, RNA e sntese de protenas. A atividade esporicida se deve ao fato do glutaraldedo reagir com a superfcie do esporo, provocando o endurecimento das camadas externas e morte do esporo. Indicaes Pode ser utilizado para a esterilizao de artigos termo-sensveis que no possam sofrer esterilizao pelos processos fsicos como: enxertos de acrlico, cateteres, drenos e tubos de poliestireno. O glutaraldedo tem sido muito utilizado para desinfeco de alguns equipamentos como endoscpios, conexes de respiradores, equipamentos de terapia respiratria, dialisadores, tubos de espirometria e outros; para este fim o tempo de exposio de 30 minutos. Ele no utilizado como desinfetante de superfcie por seu custo ser elevado e por ser muito txico.
pode ser utilizado na descontaminao de artigos infectados antes da esterilizao, pois age na presena de matria orgnica; , nem dissolve o cimento de lentes de instrumentos pticos e no interfere na condutividade eltrica de equipamentos de anestesia gasosa, pois possui em sua formulao antioxidantes;
temperatura ambiente mantm sua estabilidade;
no irritante para pele e mucosas, mas pode provocar dermatite de contato.
10. Identificar os desinfetantes qumicos de acordo com suas classes.
Agente Atividade Desvantagens Dixido de cloro Rpida atividade de desinfeco; pode ser utilizado para esterilizao com exposio de sias horas Corrosivo; reduo acentuada de sua atividade na presena de restos proticos e orgnicos; requer boa ventilao fenois Atividade antimicrobiana de amplo espectro; eficazes na presena de detergentes Podem degradar plsticos; irritantes para a pele e os olhos; inativados pela gua dura e detritos orgnicos Glutaraldedo Como preparao de imerso a 2% a 3,2%, possui ativiadade antimicrobiana de alto espectro;esporicida depois de 10 horas de contato; vida til prolongada; soluo a 0,25% empregada como desinfetante de superfcie Muito irritante para a pele e mucosas; alergnico com exposio repetida Hipoclorito Ao rpida, bactericida de amplo espectro, esporicida, desinfetante virucida Irritante para a pele; corrosivo; pode degradar alguns plsticos Iodforos Ao rpida. desinfentante bactericida de amplo esprectro; permanece uma atividade antimicrobiana residual sobre a superfcie aps secagem corrosivo para alguns metais; podem colorir algumas superfcies; inativadas pela gua dura
11. Explicar a preferncia do uso da clorexidina como antisptico.
GLUCONATO DE CLOREXIDINA (0,5% c/lcool; 2%; 4%)
A clorexidina foi aprovada para o uso em escovas cirrgicas em meados de 70, e como colutrio a 0,12%, no final da dcada de 80. Para lavagem cirrgica, as solues de clorexidina a 4% so de ao rpida como os iodforos e possuem a substantividade do hexaclorefeno. A clorexidina altamente eficaz contra os microrganismos Gram-positivos, enquanto exibe menor eficcia contra os microrganismos Gram-negativos e mostra-se ineficaz contra os bacilos da tuberculose, esporos e numerosos vrus.
Na Europa, foram utilizados solues de clorexidina a 0,2% como colutrios orais desde a dcada de 80. A efeccia da clorexidina nos colutrios resulta principalmente de sua subtantividade. A natureza catinica da clorexidina permite a sua ligao a tecidos duros e moles na cavidade bucal; a seguir, liberada com o decorrer do tempo, porduzindo um efeito bacteriosttico contnuo. Causa ruptura da membrana provocando precipitao do contedo celular. Ao eficaz contra Gram positivos, menos eficaz contra gram negativos, e ineficaz contra bacilo da tuberculose, fungos, vrus (HBV,HIV,CMV,INFLUENZA). Possui ao residual de 6 horas. Possui toxicidade por contato direto com ouvidos e olhos de recm nascidos. Raramente so relatados sintomas respiratrios. pouco irritante da pele, sendo que esporadicamente algumas pessoas podem apresentar suscetibilidade. Tempo de ao de 15 segundos, com boa reduo de microorganismos mais frequentemente encontrados nas mos. Aumenta o espectro com o aumento da exposio. No entanto 30seg = 5min Conhecida como clorexidina degermante quando associada a tensoativo. A apresentao de de lcool 70% + 0,5% Clorexidina pode ser utilizada como complementao da degermao com clorexidina.
12. Reconhecer os produtos qumicos esterilizantes, pontuando suas vantagens e desvantagens.
GLUTARALDEDO um dialdedo, que pode se apresentar pronto para o uso. Em pH cido, necessita ativao pelobicarbonato de sdio, para exibir atividade esterilizante. O glutaraldedo ativado sofre polimerizao em pH alcalino, inativando-se aps 14 dias, quando seu pH for 8,5, ou aps 28 dias, em pH 7,5. Vantagens Penetra no sangue, pus e restos orgnicos. No ataca material de borracha ou plstico. Pode ser corrosivo. Desvantagens Apresenta toxicidade cutnea, celular e inalatria. Libera vapores txicos, razo para se evitar o processamento de materiais em salas mal ventiladas, em recipientes sem tampa ou com vazamentos. Aconselha-se o uso de mscaras com camada de carvo ativado para diminuir o efeito txico, quando em manipulao freqente. alergnico. No pode ser utilizado em superfcies. Sua atividade corrosiva aumenta com a diluio. Seu tempo de reutilizao varia com a biocarga. Pode ser retido por materiais porosos, da exigir enxage rigoroso, para evitar seus resduos txicos. HIPOCLORITO DE SDIO A 1% ESTABILIZADO COM CLORETO DE SDIO Indicaes Desinfeco de instrumentos semi-crticos, superfcies, moldes, roupas e gua. Vantagens Rpida ao antimicrobiana. Amplo espectro. Econmico. Efetivo em solues diludas. Desvantagens Esporicida, apenas em altas concentraes (5,25%). No pode ser reutilizado. Deve ser preparado diariamente. Atividade diminuda pela presena de matria orgnica. A perda de cloro devido a matria orgnica pode ser significante, quando so empregadas mnimas quantidades de cloro. Maiores nveis de cloro, porm, tendem a produzir reserva de segurana para exercer a ao bactericida desejada. Odor desagradvel persistente. Irritante para a pele e olhos. Corri metais e estraga tecidos. FENIS SINTTICOS Indicaes Descontaminao. Desinfeco de instrumentos semi-crticos e superfcies. Limpeza e desinfeco de paredes, pisos, superfcies fixas, em locais de alto risco. Vantagens Desinfetantes em imerso e em superfcies. teis em metais, vidros, borrachas e plsticos (ver: Cuidados). Menos txicos e corrosivos que o glutaraldeido. Desvantagens: Preparo dirio. Podem atacar vidros e plstico com a exposio prolongada. Irritantes para a pele e para os olhos. LCOOL 77% V/V OU 70% P/V Indicaes Desinfecosuperfcies.
O lcool evapora rapidamente, assim sendo, os materiais devem ser friccionados na superfcie, operao que deve ser repetida at completar o tempo de ao. Friccionar, deixar secar sozinho e repetir trs vezes a aplicao, at completar o tempo de exposio de 10 minutos (MS/1994). No aconselhvel imergir os materiais no lcool, devido sua evaporao. Vantagens Rapidamente bactericida. Tuberculocida e viruscida para vrus lipoflico. Econmico. Ligeiramente irritante. Desvantagens No esporicida. Atividade diminuda em presena de biocarga. Atividade diminuda quando em concentrao inferior a 60%. Ataca plsticos e borrachas. Evapora rapidamente das superfcies. altamente inflamvel.