1

INCERTIDUMBRE
Significa duda.
Cuando se aplica a una medicin es un parmetro
que caracteriza la dispersin de valores que pueden
ser atribuidos razonablemente al mesurando.
Definida de esta manera, la incertidumbre indica
un intervalo de valores que, segn el criterio
del operador, pueden ser razonablemente
atribuidos al mesurando.
2
Resultados precisos Resultados precisos
pero no justos pero no justos
NO HAY NO HAY
EXACTITUD EXACTITUD ! !
Resultados justos Resultados justos
pero no precisos pero no precisos
NO HAY EXACTITUD ! NO HAY EXACTITUD !
3
Resultados ni precisos Resultados ni precisos
ni justos ni justos
NO HAY EXACTITUD ! NO HAY EXACTITUD !
Resultados precisos Resultados precisos
y justos y justos
HAY EXACTITUD ! HAY EXACTITUD !
4
Use of uncertainty information in compliance
assessment
http://www.eurachem.org/guides/Interpretation_with_expanded%20u
ncertainty_2007_v1.pdf
DECISIN DE LA COMISIN DE LAS COMUNIDADES
EUROPEAS
(12 de agosto de 2002)
Por la que se aplica la Directiva 96/23/CE del Consejo
en cuanto al funcionamiento de los mtodos analticos
y la interpretacin de los resultados
http://www.cde.ua.es/dsi/elpdf/l_22120020817es00080036.pdf
5
Comunidad Europea
Regulacin EEC N 315/93
Directiva 2002/32/EC
http://ec.europa.eu/food/food/chemicalsafety/contaminan
ts/report-sampling_analysis_2004_en.pdf
Antes de establecer cualquier especificacin debe
tenerse en cuenta que el valor de un parmetro
especfico:
Puede depender del mtodo de anlisis usado
Siempre depende del mtodo de muestreo utilizado
para verificar el cumplimiento con las
especificaciones.
6
Nmero de cifras significativas:
Es necesario tener en cuenta el n de cifras significativas que
especifica cualquier legislacin y el n de cifras significativas usadas
cuando se expresa un resultado analtico.
Algunos analistas expresan el resultado con el mismo n de cifras
significativas que la especificacin.
Es necesario establecer un criterio uniforme. Ejemplo:
0 a 1,004 1.00
0 a 1,04 1,0
0 a 1,4 1
Rango donde debe
caer un resultado
satisfactorio
Especificacin
Incertidumbre de medicin y cumplimiento de
las especificaciones
Lmite de
control
superior
Resultado e
incertidumbre
fuera del lmite
Resultado fuera
del lmite
Incertidumbre
dentro
Resultado
dentro del
lmite pero
incertidumbre
fuera
Resultado e
incertidumbre
dentro del
lmite
http://www.ilac.org/guidanceseries.html Guia G8
7
Cuando se desarrolla una legislacin debe tenerse en cuenta
como mnimo:
Las unidades en que debe expresarse un resultado
El n de cifras significativas que debe contener el informe
La interpretacin de un resultado analtico en relacin con
el lmite de la especificacin
La exactitud esperada para el mtodo que probablemente
se use y por lo tanto evaluar si el n de cifras significativas
expresadas en la legislacin es realista
En caso de alguna accin judicial solo se
tomarn acciones si el analista est seguro (ms
all de dudas razonables), que el lmite ha sido
excedido.
8
La legislacin que contiene niveles mximos debe
siempre tener en cuenta como deben expresarse e
interpretarse los resultados analticos.
9
Dificultades en el anlisis qumico
Existen dos hechos fundamentales que dificultan, en muchos
casos, el clculo de la incertidumbre en una medicin qumica:
Los mtodos de anlisis qumico suelen involucrar un nmero
importante de etapas, pudiendo tener cada una de stas diversas
variables afectando la medicin.
La mayora de las mediciones qumicas tienen como objetivo
determinar la concentracin de una especie qumica, y el entorno
de la muestra (matriz) puede tener un efecto importante en dicha
determinacin
Por estas razones frecuentemente no se puede obtener una
expresin matemtica bien definida.

Preparacin de
las disoluciones
de calibracin
Dosaje de las
disoluciones de
calibracin
Medicin de la seal
producida por las
disoluciones
Clculo de la recta
de calibracin
Tratamiento
previo de la
muestra
Dosaje de la
muestra
Medicin de la seal
producida por la
muestra
Clculo de la
concentracin
del analito
Componentes
asociados a

pureza

mediciones
volumtrcas

pesadas

procesos de

certificacin
incertidumbre
asociada al

ajuste
(falta de linealidad )
Incertidumbre
asociada,
estimada por

recuperacin

anlisis de CRM

anlisis de muestras
enriquecidas
Incertidumbre combinada
repetibilidad
del volumen
de inyeccin
repetibilidad
del equipo
Fuentes de incertidumbre a una recta de calibracin
10
LINEALIDAD
RECTAS DE CALIBRACIN
MODELOS DE REGRESIN
LINEALIDAD
RECTAS DE CALIBRACIN
MODELOS DE REGRESIN
Linealidad Linealidad
Capacidad que tiene un sistema de
medicin de producir resultados
directamente proporcionales al
mesurando observado
11
Modelo de regresin lineal: Modelo de regresin lineal:
y = a + b . x + e y = a + b . x + e
a a
b b
Coeficiente de correlacin Coeficiente de correlacin
y x
s s
y x y x
R

=
eval eval a el grado de linealidad a el grado de linealidad
o o
el el porcentaje de la variaci porcentaje de la variaci n en y que n en y que
puede explica puede explicarse rse por variaciones en x por variaciones en x
12
Es un indicador cualitativo, adimensional,
invariante por cambios de escala en x o en y
Nos da una idea primaria sobre la bondad
del modelo lineal.
Para tener una idea cuantitativa de la
incertidumbre asociada a la faltad de
linealidad, se deben estimar la desviacin
standard residual
Es un indicador cualitativo, adimensional,
invariante por cambios de escala en x o en y
Nos da una idea primaria sobre la bondad
del modelo lineal.
Para tener una idea cuantitativa de la
incertidumbre asociada a la faltad de
linealidad, se deben estimar la desviacin
standard residual
Coeficiente de correlacin Coeficiente de correlacin
Estimaciones de cuadrados mnimos: Estimaciones de cuadrados mnimos:
n
) y
i
y (
y
S ,
n
) x
i
x (
x
S

=

=
2 2
donde
Pendiente Pendiente
x
y
S
S R
b

=
Interseccin con el eje Interseccin con el eje
x b

y a

=
13
}e
i
s
e
mide la dispersin de los residuos e
i
s
e
mide la dispersin de los residuos e
i
Residuos Residuos
Desvo, en cada punto, no explicado por la recta Desvo, en cada punto, no explicado por la recta
-0,02
-0,01
0,00
0,01
0,02
0 10 20 30 40 50
-0,02
-0,01
0,00
0,01
0,02
0 10 20 30 40 50
Algunos ejemplos de grficos de residuos Algunos ejemplos de grficos de residuos
14
-0,020
0,000
0,020
0,040
0,060
0 10 20 30 40 50
VR
sesgo
-0,020
0,000
0,020
0,040
0,060
0 10 20 30 40 50
-0,020
-0,010
0,000
0,010
0,020
0 10 20 30 40 50
sesgo
VR
-0,020
-0,010
0,000
0,010
0,020
0 10 20 30 40 50
15
-0,010
-0,005
0,000
0,005
0,010
0,015
0 10 20 30 40 50
sesgo
VR
-0,010
-0,005
0,000
0,005
0,010
0,015
0 10 20 30 40 50
-0,010
-0,005
0,000
0,005
0,010
0 10 20 30 40 50
sesgo
VR
-0,010
-0,005
0,000
0,005
0,010
0 10 20 30 40 50
16
-0,010
-0,005
0,000
0,005
0,010
0 10 20 30 40 50
sesgo
VR
-0,010
-0,005
0,000
0,005
0,010
0 10 20 30 40 50
2
2

=

n
) x b

y (
s
i i
e
Mide la calidad del modelo de ajuste lineal
A diferencia de R, es un parmetro cuantitativo.
Expresado en la misma unidad de y
s
e
/b mide la calidad del ajuste en las
unidades de x
Mide la calidad del modelo de ajuste lineal
A diferencia de R, es un parmetro cuantitativo.
Expresado en la misma unidad de y
s
e
/b mide la calidad del ajuste en las
unidades de x
Desviacin standard residual Desviacin standard residual
17
Bandas de confianza para la recta Bandas de confianza para la recta
( )
2
2
2
1
x
e n
S
x x
n
s t x b

+ +

x
La desviacin estndar residual caracteriza la
bondad del modelo lineal para ajustar a los datos, y a
su vez cuantifica (con n-2 grados de libertad) la
incertidumbre estndar asociada a tal ajuste
Si se utiliza la recta de calibracin para determinar el
valor de una muestra incgnita, se mide la misma en
forma repetida, obteniendo respuestas y
o1
,...,y
om
.
Finalmente, el mesurando incgnita es calculado como
b

y
x
0
0

=
18
Enfoque
puramente
estadstico
Clculo de la incertidumbre Clculo de la incertidumbre
Distinguimos dos fuentes de incertidumbre estadstica
en la determinacin de x :
la asociada al ajuste de la curva de
calibracin
la repetibilidad al medir la muestra
Distinguimos dos fuentes de incertidumbre estadstica
en la determinacin de x :
la asociada al ajuste de la curva de
calibracin
la repetibilidad al medir la muestra
Calculo de la incertidumbre de x
0
Calculo de la incertidumbre de x
0
19
Predicci Predicci n n
y -
x = (y-a) / b
Bandas de
prediccin
Bandas de
confianza
Recta de
calibracin
La incertidumbre asociada al ajuste de la recta
es solo una de las fuentes de incertidumbre de
una medicin.
Hay que evaluar las otras fuentes y
combinarlas
Ejemplos
20
Ejemplo 1: Determinacin de N
2
en muestra de
gas natural por cromatografa gaseosa
puntos de
calibracion
4
RECTA DE CALIBRACION
replicas por
punto(<=5)
4
ESTADISTICA RECTA ESTADISTICA MUESTRA
concentracin seal ( Modelo: y=a+bx )
del patrn (x) obtenida (y)
1,0100 168411 MUESTRA ANALIZADA n= 16 k= 4
1,0100 168339
n
o
de
seal R= 0,99994 y
prom
= 152312,2500
1,0100 166771 replica obtenida (y
m
) a= 100,5370 s
m
= 875,8533
1,0100 167672 1 152646 b= 165538,3592 x
muestra
= 0,9195
1,0070 165909 2 153054 s
e
= 1062,6113 raiz= 0,5673
1,0070 167461 3 151046 x
prom
= 1,1321 (%) (%) (%) (%)= 5%
1,0070 166608 4 152503 scx= 25,3385 t (, , , ,n-2)= 2,14
1,0070 165974 5 Sxx= 4,8330 intervalo()= 0,0078
0,4983 83103 6
0,4983 82426 7 RESULTADO
0,4983 82282 8 x
muestra
= 0,919 0,008
0,4983 82030 9
2,0130 331134 10
2,0130 332356
2,0130 334317
2,0130 335245
puntos de
calibracion
4
RECTA DE CALIBRACION
replicas por
punto(<=5)
4
ESTADISTICA RECTA ESTADISTICA MUESTRA
concentracin seal ( Modelo: y=a+bx )
del patrn (x) obtenida (y)
1,0100 168558 MUESTRA ANALIZADA n= 16 k= 4
1,0100 169239
n
o
de
seal R= 0,99998 y
prom
= 154302,7500
1,0100 169322 replica obtenida (y
m
) a= 841,8484 s
m
= 486,4411
1,0100 168986 1 153799 b= 166647,2752 x
muestra
= 0,9209
1,0070 169447 2 154902 s
e
= 643,5836 raiz= 0,5672
1,0070 169745 3 154040 x
prom
= 1,1321 (%) (%) (%) (%)= 5%
1,0070 168155 4 154470 scx= 25,3385 t (, , , ,n-2)= 2,14
1,0070 169366 5 Sxx= 4,8330 intervalo()= 0,0047
0,4983 83953 6
0,4983 83767 7 RESULTADO
0,4983 82948 8 x
muestra
= 0,921 0,005
0,4983 83815 9
2,0130 335136 10
2,0130 336442
2,0130 336101
2,0130 337005
21
puntos de
calibracion
4
RECTA DE CALIBRACION
replicas por
punto(<=5)
4
ESTADISTICA RECTA ESTADISTICA MUESTRA
concentracin seal ( Modelo: y=a+bx )
del patrn (x) obtenida (y)
1,0100 170719 MUESTRA ANALIZADA n= 16 k= 4
1,0100 169211
n
o
de
seal R= 0,99992 y
prom
= 155466,2500
1,0100 169276 replica obtenida (y
m
) a= 1660,8280 s
m
= 216,8692
1,0100 170940 1 155558 b= 167362,2967 x
muestra
= 0,9190
1,0070 171046 2 155708 s
e
= 1253,2262 raiz= 0,5674
1,0070 171028 3 155396 x
prom
= 1,1321 (%) (%) (%) (%)= 5%
1,0070 171664 4 155203 scx= 25,3385 t (, , , ,n-2)= 2,14
1,0070 172060 5 Sxx= 4,8330 intervalo()= 0,0091
0,4983 85103 6
0,4983 84665 7 RESULTADO
0,4983 83881 8 x
muestra
= 0,919 0,009
0,4983 84996 9
2,0130 337541 10
2,0130 336327
2,0130 339935
2,0130 339648
Grfico de residuos
-1500
-1000
-500
0
500
1000
1500
0 0,5 1 1,5 2 2,5
concentracin
residuos
Grfico de residuos
-2500
-2000
-1500
-1000
-500
0
500
1000
1500
2000
2500
0 0,5 1 1,5 2 2,5
concentracin
residuos
Grfico de residuos
-2500
-2000
-1500
-1000
-500
0
500
1000
1500
2000
2500
0 0,5 1 1,5 2 2,5
concentracin
residuos
22
Otras fuentes
Variaciones en el flujo de la muestra
Variaciones debidas a la integracin de
los picos
Se determinaron experimentalmente
realizando pequeas variaciones del
parmetro y viendo como se afectaba el
resultado
Fuentes de incertidumbre
Descripcin Valor
Incert estndar
(u
x
)
Incert estndar rel
(u
x
)/x
c
N2
concentracin de nitrgeno 0,920 0,007 0,008
f
flujo
influencia de flujo 1 0,0006 0,0006
f
integracin
influencia de integracin 1 0,0003 0,0003

Concentracin de N
2
(0,920 0,007) % molar
23
Conocer el comportamiento de la curva de
calibracin es parte de comprender el
sistema de medicin.
Debe formar parte de la validacin del
mtodo.
Ejemplo 2: Vigencia de la curva de calibracin
Propano
0,28
0,285
0,29
0,295
0,3
0,305
0,31
0,315
0,32
0,325
0,33
0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 400
tiempo(dias)
c
o
n
c

(
%
m
o
l
a
r
)
24
Los grficos de residuos son una excelente
herramienta.
Nos permiten, entre otras cosas
Evaluar linealidad
Detectar anomalas
Ejemplo 3: Curva N
2
puntos de
calibracion
5
RECTA DE CALIBRACION
replicas por
punto(<=5)
4
ESTADISTICA RECTA ESTADISTICA MUESTRA
concentracin seal ( Modelo: y=a+bx )
del patrn (x) obtenida (y)
1,5080 255820 MUESTRA ANALIZADA n= 20 k= 5
1,5080 255949 n
o
de seal R= 0,99732 y
prom
= 259033,2000
1,5080 254177 replica obtenida (y
m
) a= 17919,7453 s
m
= 314,7629
1,5080 255649 1 258961 b= 151326,0122 x
muestra
= 1,5933
0,4983 86315 2 258575 s
e
= 7768,8924 raiz= 0,5039
0,4983 85614 3 259000 x
prom
= 1,4081 (%) (%) (%) (%)= 5%
0,4983 85594 4 259418 scx= 48,4713 t (, , , ,n-2)= 2,10
0,4983 85428 5 259212 Sxx= 8,8187 intervalo()= 0,0543
2,504 389150 6
2,504 389825 7 RESULTADO
2,504 389356 8 x
muestra
= 1,593 0,054
2,504 386166 9
1,5150 253501 10
1,5150 255533
1,5150 254163
1,5150 255422
1,015 169853
1,015 170971
1,015 170857
1,015 170574
25
0
50000
100000
150000
200000
250000
300000
350000
400000
450000
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3
concentracin
seal
Grfico de residuos
-15000
-10000
-5000
0
5000
10000
15000
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3
concentracin
residuos
Problema con el material de referencia de c
N2
2.5 % molar
Mal asignado el valor de concentracin?
Otro problema: presencia de O
2
26
Ejemplo 4: Interlaboratorio Sorbato y benzoato por
HPLC
Se solicit a los participantes que adems de los
resultados enviaran los datos correspondientes
a las reas obtenidas al realizar las curvas de
calibracin.
Se reprodujeron las curvas y se estimaron las
incertidumbres
27
Resultados del ejercicio
Analito

Valor nominal
(mg/l)

Valor medio
interlab.
(mg/l)

Desviacin estndar
interlab. (sL)
(mg/l)
Desviacin estndar
interlab. relativa
porcentual
(sL relativa %)
M 1 252,18 250,1 5,3 2,1
Benzoato
de sodio
M 2 51,78 50,0 2,1 4,2
M 1 85,91 86,0 1,7 2,0 Sorbato
de
potasio
M 2 53,88 53,5 1,3 2,4

Datos de benzoato de sodio Muestra 1
Dato 1 223,45 261,8 245,8
Dato 2 259,53 257,53 256,89
28
Valores de incertidumbre de medicin obtenidos
a partir del ajuste por cuadrados mnimos
Valor Informado Valor curva calib. Incert. Valor Informado Valor curva calib. Incert.
250,35 250,4 2,4 48,70 48,7 2,4
252,94 253,9 2,5 50,57 51,7 2,5
241,60 241,6 2,1 47,95 47,9 1,0
250,75 250,7 9,1 47,35 47,4 9,3
259,53 259,6 3,6 52,01 52,0 3,6
252,93 252,9 4,0 49,50 49,5 4,1
237,44 237,7 4,7 47,26 47,5 4,7
250,00 251,3 0,4 50,35 50,6 0,4
251,25 251,2 2,2 50,48 50,5 2,2
223,45 223,4 23,1 50,75 50,8 24,2
254,74 127,4 2,6 51,18 51,2 2,8
242,45 242,4 4,7 52,41 52,8 4,3
247,60 247,6 2,5 48,15 48,2 2,5
258,15 258,2 3,3 51,42 51,4 2,9
246,25 73,8 0,6 51,60 51,6 0,5
255,75 255,9 3,8 54,00 53,7 3,4
Benzoato de Sodio M1 Benzoato de Sodio M2
-100
-50
0
50
100
150
0 50 100 150 200 250 300 350
residuos
-100
-50
0
50
100
150
0 50 100 150 200 250 300 350
residuos
Grfico de residuos
para el dato 1
Grfico de residuos
para el dato 2