Facultad de Ciencias Biolgicas rea de Biotecnologa Sonia H. Palomino Felices BI- 542 BIOTECNOLOGA AGROINDUSTRIAL Molculas complejas que se encuentran en el ncleo y citoplasma celular.
Polmero de nucletidos
cidos Nucleicos Funciones:
Transmitir las caractersticas hereditarias de una generacin a la siguiente.
Dirigir la sntesis de protenas especficas (estructurales y funcionales) 1.- Pentosa
Nucletido = Pentosa + B N + Fosfato COMPONENTES DE LOS ACIDOS NUCLEICOS 2.- BN = Bases Nitrogenadas Purinas: A y G Pirimidinas: T, C y U
3.- Fosfato:
(Grupo Fosfato)
H 3 PO 4
Los grupos fosfato pueden unirse a una Base Nitrogenada: Si es uno ser monofosfato Si son dos ser difosfato Si son tres ser un trifosfato Nuclesido = Pentosa + Base nitrogenada
Nucletido = Pentosa + Base nitrogenada + cido fosfrico
Los nucletidos se unen entre si para formar largas cadenas de polinucletidos, esta unin entre monmeros nucletidos se realiza mediante enlaces fosfodister entre los carbonos de las posiciones 3 de un nucletido con la 5 del siguiente Contiene la informacin gentica de la clula. Esta organizado en cromosomas lineales en clulas eucariotas y circulares en procariotas Para cada especie el nmero de cromosomas es fijo. (El hombre 23 pares, la mosca de la fruta 4 pares) ADN cido Desoxiribonucleco Localizacin del ADN El orden en el que aparecen las cuatro bases a lo largo de la cadena en el ADN, es el orden de las instrucciones del programa gentico de los organismos Esquema tridimencional de la Doble Hlice Esquema de la doble hlice . El apareamiento es especfico: A = T C G Ejemplo:
G T = T = C A = . El apareamiento es especfico: A = T C G Ejemplo:
G C T = T = C A = . El apareamiento es especfico: A = T C G Ejemplo:
G C T = A T = C A = . El apareamiento es especfico: A = T C G Ejemplo:
G C T = A T = A C A = . El apareamiento es especfico: A = T C G Ejemplo:
G C T = A T = A C G A = . El apareamiento es especfico: A = T C G Ejemplo:
G C T = A T = A C G A = T Muchos cientficos se interesaron en descifrar la estructura del ADN, entre ellos, Francis Crick, James Watson, Rosalind Franklin y Maurice Wilkins EL MODELO DE WATSON Y CRICK Rosalind Franklin; Describi que la estructura del ADN tena dos cadena. Y que los grupos fosfato se encontraban en el exterior Watson y Crick, eran investigadores que integraban todos los datos disponibles en su intento por desarrollar un modelo de la estructura del ADN. Los datos que se conocan: Que el ADN era una molcula larga y delgada. Los datos de las bases proporcionados por Chargaff (A=T y C=G) Las Purinas y las pirimidinas eran constante para cada especie. Datos de la difraccin de los rayos X de Franklin y Wilkins. Los trabajos de Linus Pauling sobre proteinas (forma de hlice mantenida por puentes de hidrgeno), quien sugiri para el ADN una estructura semejante.
WATSON Y CRICK (1953) Estructura: El conocimiento de la estructura de los cidos nucleicos permiti la elucidacin del CODIGO GENETICO La determinacin del mecanismo y control de la sntesis de las protenas y el mecanismo de transmisin de la informacin gentica de la clula madre a las clulas hijas. Las BN son las que contienen la informacin gentica y los azcares y los fosfatos tienen la funcin estructural formando el esqueleto del polinucletido. En el caso del ADN las bases son dos purinas y dos pirimidinas. A,G,T y C. En el caso del ARN son 4 BN: A y G (purinas) y C y U (pirimidinas). purina pirimidina pirimidina purina FORMACIN DE LA DOBLE HLICE ADN PROCARITICO El ADN Eucaritico
Se presenta en dos formas: CROMATINA: Que es la forma no empaquetada ("uncoiled") y tiene un 50% de protenas. CROMOSOMAS : Que son ADN y protenas empaquetados (coiled") y se forman durante los primeros estados de la divisin celular.
El ADN de cada cromosoma es una larga cadena de ADN bicatenario. En las clulas humanas, el ADN tiene 2 metros de largo y se encuentra empaquetado en 46 cromosomas y en total contiene unos 30,000 genes. Las protenas asociadas al ADN se conocen colectivamente con el nombre de histonas. ARN Acido Ribonucleco Acta como molcula intermediaria A su vez existen:
ARNm: Lleva la informacin gentica al ribosoma ARNt: Adapta el lenguaje de los nucletidos al de los aminocidos ARNr: Componentes estructurales y catalticos del ribosoma La ribosa es el azcar que interviene en la composicin de los nucletidos (tambin llamados ribonucletidos) que forman el cido ribonucleico (ARN); Las bases nitrogenadas son la adenina, la guanina, la citosina y el uracilo. El ARN mensajero (ARNm) es una molcula en forma de cinta, producto de la transcripcin del ADN y portadora del cdigo necesario para sintetizar las protenas mediante una reaccin llamada traduccin. Cada hebra de ARNm tiene dos extremos, llamados 5' y 3', que determinan el sentido de lectura. Los ARN de transferencia (ARNt) son pequeas estructuras en forma de hoja de trbol que llevan cada una un aminocido para integrarlo en una protena en fase de sntesis. Para ello se fija a un codn del ARNm (sucesin de tres elementos especficos del aminocido de que se trate) por medio de un anticodn (que es el 'negativo' del codn). La fijacin se produce por medio de los ribosomas, que 'leen' el ARN y se encargan de dirigir la sntesis de protenas. Los ARN ribosmicos (ARNr) son los componentes principales de los ribosomas. En la estructura de un ribosoma intervienen cuatro molculas de ADN de distinto tamao. La subunidad mayor (o subunidad 60 s) lleva los ARN 5 s, 28 s y 5,8 s, mientras que la pequea (o subunidad 40 s) slo lleva un ARN 18 s. (Las denominaciones, por ejemplo, 5 s y 18 s, proceden de los experimentos de centrifugacin en tubo de ensayo de las subunidades ribosmicas y las molculas de ARN; durante la centrifugacin, los elementos ms pesados se acumulan en el fondo del tubo y forman el sedimento; el nmero corresponde al coeficiente de sedimentacin de cada componente.) Dogma central de la biologa molecular TRANSCRIPCION Es la sntesis de una molcula de ARNm complementaria a una de las dos hebras del ADN molde, catalizada por la ARN polimerasa que tiene alta afinidad por un promotor. Transcripcin Promotores:
Son secuencias precisas ubicadas en el ADN, donde la ARN polimerasa se une para iniciar la transcripcin.
Se encuentran frecuentemente muy cerca y hacia arriba (upstream) del punto en que se inicia la transcripcin, en el extremo 5.
Son ms de 100 los promotores identificados y secuenciados en E. coli. Un promotor procariota estndar tiene tres partes:
a) El punto de inicio (starpoint) de la transcripcin de la secuencia de ADN, que se representa como +1 y casi siempre es una guanina o adenina. b) Una secuencia consenso cercana al punto de inicio. c) Otra secuencia consenso ms alejada del punto de inicio. El enlazamiento de la ARN polimerasa provoca una fusin de la doble hlice del ADN, lo que a su vez induce la ruptura de los enlaces de hidrgeno entre los pares de bases formndose la llamada burbuja de transcripcin que tiene una longitud de 17 pares de bases.
Los sustratos para la ARN polimerasa son los 5-trifosfatos de ribonucletido ATP, GTP, CTP y UTP. Se requiere la presencia de un in metlico, ya sea Mg 2+ o Mn 2+ , como cofactor. La reaccin est impulsada por la hidrlisis del pirofosfato que se libera.
La cadena de ARNm crece en direccin 53.
Cuando la longitud del tramo hbrido ADN-ARN se aproxima a 12 pares de bases, el extremo 5 de la cadena de ARN creciente se disocia de su hebra de ADN complementario y vuelve a formarse el ADN doble, liberndose el factor sigma.
La ARN polimerasa contina a lo largo del molde de ADN hasta que encuentra una seal de terminacin, lo que hace que el ARN se disocie del ADN molde.
Topologa tpica de una molcula de ARNm eucariota
El ARNm consta de las siguientes partes:
1) Regin no traducida 5 (extremo protegido con una 7-metil guanosina). 2) Codn de iniciacin (AUG). 3) Regin codificadora (codones para los Aas). 4) Codn de terminacin (UAA, UGA o UAG). 5) Regin no traducida 3 (con una cola de 20-250 nucletidos de adenina, poliadenilacin). Maduracin: El ARNm precursor contiene tanto exones como intrones. Se trata, por tanto, de un ARNm no apto para que la informacin que contiene sea traducida y se sintetice la correspondiente molcula proteica. En el proceso de maduracin un sistema enzimtico reconoce, corta y retira los intrones y las ARN ligasas unen los exones, formndose un ARNm maduro TRADUCCION
Es el proceso que tiene lugar en los ribosomas, mediante el cual los codones o tripletes del ARNm, que son palabras en un lenguaje (secuencia de nucletidos) se convierten o traducen por medio del ARNt, que tiene funcin de un intrprete, a otro lenguaje (secuencia de aminocidos), conservando el mismo significado. El cdigo gentico acta como un diccionario y los codones de inicio y terminacin son los signos de puntuacin. NUCLEOTIDOS AMINOACIDOS (ribosomas) (ARNt) Dogma central de la biologa molecular El Cdigo Gentico:
Es una tabla que establece todas las combinaciones de tres bases nitrogenadas del ARNm (tripetes o codones) que codifican para los aminocidos comunes presentes en la estructura primaria de una protena, despus de la traduccin.
Comprende 64 codones. De ellos, 61 tripletes corresponden a los aminocidos comunes, mientras que 03 tripletes codifican para la terminacin de la cadena.
Puesto que hay 20 aminocidos y 61 tripletes que los codifican, es evidente que el cdigo es muy degenerado.
Solamente el triptfano y la metionina estn codificados por un solo triplete.
Los otros 18 aminocidos vienen codificados por dos o ms tripletes. La leucina, arginina y serina son especificados por 06 codones cada uno.
El nmero de codones para un aminocido determinado est correlacionado con su frecuencia de aparicin en las protenas. ARN de Transferencia
* Cada ARNt es especfico para un slo aminocido, aunque puede descodificar ms de un codn. * Un aminocido se une a su ARNt correspondiente por medio de la enzima aminoacil-ARNt sintetasa. * Esta enzima cataliza la reaccin de aminoacilacin, que es importante porque: (a) Forma el enlace aminoacil-ster entre el aminocido y el ARNt; y (b) Al hidrolizarse este enlace, proporciona la energa que se requiere para formar el enlace peptdico.
Etapas de la Traduccin (Ciclo del Ribosoma)
* Las etapas fundamentales son tres: 1) Iniciacin 2) Alargamiento; y 3) Terminacin. * Todas las etapas requieren energa metablica que proviene de la hidrlisis del ATP o GTP. * Todos los componentes pueden reciclarse.
1) Iniciacin
Hay mecanismos para diferenciar un codn AUG iniciador de otro AUG interno: en bacterias, el ARNt iniciador transporta una metionina formilada; en eucariotas slo transporta una metionina. Otro detalle es que en bacterias el codn AUG iniciador est precedido por la Secuencia de Shine-Dalgarmo extremo 5 del ARNm, rico en purinas; y complementario al extremo 3 del ARNr 16S); mientras que en eucariotas, el codn AUG iniciador est casi siempre dentro de una secuencia contexto (5CCA/GCCAUGG3). Los factores de iniciacin (IF, de 03 tipos) de procariotas son diferentes a los de eucariotas (IF, de 10 tipos). 2) Alargamiento
- El ribosoma se mueve a lo largo del ARNm en direccin 53, descodificando cada triplete y ensamblando la cadena del polipptido en la secuencia correcta. - Es un proceso cclico: se descodifica un codn o triplete y se adiciona un aminocido al polipptido creciente. - Se requieren factores de alargamiento (EF), protenas especficas bastante similares entre procariotas y eucariotas.
3) Terminacin
Cuando el ribosoma encuentra un codn de terminacin en el extremo 3 del ARNm, se suspende el alargamiento. La cadena completa del polipptido se desprende junto con el ltimo ARNt y las subunidades ribosmicas. Participan factores de terminacin (RF), que son diferentes en procariotas y eucariotas.
Esquema del proceso de traduccin en procariotas Control Gentico de formacin de proteinas en Procariotas
El sistema de control gentico mejor conocido es el modelo del opern de la expresin gentica propuesto originalmente por Jacob y Monod en 1961.
Un opern viene a ser un grupo de genes contigos en el genoma bacteriano, que se transcriben regulados por un solo promotor dando origen a un ARNm policistrnico.
Regulador Promotor Operador Gen 1 Gen 2 Gen 3
a) El gen regulador, que codifica al represor (una protena interna) y tiene su propio promotor. b) Una secuencia de nucletidos denominada promotor la cual es el punto de unin de la ARN polimerasa, con los siguientes elementos: Los elementos de un opern son: 3 ADN 5 Secuencia 35 Secuencia 10 +1 ______ TTGACA _______TATAAT ______ Inicio
Una secuencia de nucletidos denominada operador, la cual es el punto de unin de la protena represora.
Los genes estructurales, que codifican para enzimas especficas, las cuales normalmente se transcriben una a continuacin de la otra dentro de la misma unidad de transcripcin.
Aparentemente hay una sola ARN polimerasa.
La Secuencia de Shine-Dalgarmo, ubicada en el ARNm es propia de procariotas y ayuda en la unin a los ribosomas.
La transcripcin es un proceso que est acoplado a la traduccin. Control Gentico de formacin de proteinas en Eucariotas
No ha sido hallado un equivalente directo al modelo del opern; tampoco parece existir una regin equivalente al operador.
La unin de la ARN polimerasa est influida por la presencia de elementos intensificadores o activadores (enhancers), que aumentan la tasa de transcripcin.
Cada gen estructural es transcrito de manera independiente, lo cual da lugar normalmente a un ARNm monocistrnico.
Los potenciadores aumentan la tasa transcripcional en eucariotas Hay tres tipos de ARN polimerasa, siendo la de Tipo II la equivalente a la ARN polimerasa de procariotas. Promotores de mayor tamao:
Secuencia -80 Secuencia -25 +1 __ CAAT __ GGGCCGGG __GGGCCGGG __TATA __ Inicio El gen estructural comprendido en la unidad Transcripcional es discontinuo; por ello debe ser entrecortado (splicing) a partir del trnscrito primario.