USOS CLNICOS DE LA INMUNOCROMATOGRAFA

Es una tcnica muy comn en los sistemas de anlisis a la cabecera del

paciente porque combina la especificidad y la sensibilidad de la
tcnica de sndwich con elevada rapidez en mostrar el resultado. Estas
tcnicas se emplean para el diagnstico rpido en muestras de sangre,
orina, saliva, etc., para detectar numerosos analitos, como hormonas
(gonadotropina corinica y lutropina), drogas de abuso, marcadores
cardiacos (cTnT y cTnl, CK MB [creatina cinasa MB] y mioglobina),
marcadores tumorales (antgeno prosttico especifico [PSA, del ingls
prostate specific antigen]), o antgenos virales (VIH).

Consiste en un soporte de plstico sobre el cual se dispone una
membrana de nitrocelulosa en que existen tres zonas sucesivas; una
primera con un anticuerpo conjugado con una molcula de deteccin,
como una partcula de oro, que reconoce el antgeno que se desee
detectar, a continuacin, una segunda con un anticuerpo de captura
frente a otro eptopo del antgeno y una tercera zona con un
anticuerpo frente al anticuerpo conjgado.
Al aadir la muestra, esta migra por la membrana de nitrocelulosa e
inicialmente entra en contacto con un anticuerpo conjugado. Si existe
el antgeno, este se unir al conjugado. Posteriormente contina
migrando y arrastra el conjugado hasta una zona en que hay un
anticuerpo de captura. En caso de que se encuentre el antgeno unido
al anticuerpo conjugado, estos quedaran retenidos en esa zona. La
muestra y el resto del anticuerpo conjugado continuaran migrando por
la membrana hasta llegar a una tercera zona, donde queda retenido el
anticuerpo conjugado por un anticuerpo frente a ste.






Algunos sistemas emplean varios anticuerpos para detectar varios
analitos, tal y como ocurre con los equipos para detectar drogas de
abuso en orina.

PRUEBA DE INMUNOCROMATOGRAFA

Recientemente se han introducido tcnicas sencillas de
inmunocromatografa para la deteccin de antgenos. La prueba se
realiza en una pequea tira de nitrocelulosa con tres zonas claves; una,
abajo en la que hay anticuerpo de conejo (Ac, IgG) contra el antgeno
buscado, marcados con una partcula de oro coloidal (Ac*); en ese
lugar se deposita el producto liquido (LCR, orina, etc.).

En la mitad de la tira hay una banda de anticuerpos de conejo (Ac)
fijados a la nitrocelulosa dirigidos contra el mismo antgeno y ms arriba
otra banda con anticuerpos dirigidos contra las IgG de conejo. Al
aadir la muestra en la parte inferior, la reaccin tiene lugar segn el
siguiente proceso; si el antgeno buscado est en la muestra
reaccionar con los anticuerpos marcados y los complejos Ag Ac*,
formados en un contexto fluido, migran hacia arriba por capilaridad y
son captados en la segunda zona, en la que se hallan fijados a la
nitrocelulosa anticuerpos contra el antgeno (Ac Ag Ac*); all al
quedar captados y muy concentrados los complejos inciales, se
observa la banda de los anticuerpos marcados con el oro coloidal.

En la tercera zona (superior) hay anticuerpos fijados a la nitrocelulosa,
dirigidos contra los anticuerpos de conejo; esta banda es un control
para confirmar la correcta migracin de los anticuerpos y debe ser
siempre positiva, ya que capta la migracin de los anticuerpos
marcados (Ac*), que por su gran exceso siempre estn presentes hayan
o no reaccionado previamente con su antgeno.













Prueba de inmunocromatografa para la deteccin de antgeno


Bibliografa

HERNNDEZ, . G. (2010). PRINCIPIO DE BIOQUMICA CLNICA Y
PATOLOGA MOLECULAR. BARCELONA (ESPAA): ELSERVIER
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PRATS, G. (2005). MICROBIOLOGA CLNICA. BUENOS AIRES
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