UNIVERSIDADE FEDERAL DE SO JOO DEL-REI

CAMPUS ALTO PARAOPEBA

DETERMINAO NA CONCENTRAO DE Fe
2+
POR ESPECTROMETRIA DE
ABSORO NO VISVEL



Professora Responsvel: Ana Maria de Oliveira
Alunos: Fausto Mrcio Ferreira Costa (104500011)
Lucas Augusto Ferreira de Oliveira (104500032)
Mateus Chaves Almeida de Oliveira (104500001)
Vithor Barcelos Rocha Liz (104500030)







Ouro Branco MG
Abril de 2012
DETERMINAO NA CONCENTRAO DE Fe
2+
POR ESPECTROMETRIA DE
ABSORO NO VISVEL

RESUMO
Um dos mtodos instrumentais de anlise mais comum a espectrofotometria de absoro
molecular no UV-VIS. Ele consiste na medida da radiao absorvida pela substncia de interesse analito.
Anlises quantitativas so realizadas atravs da confeco de uma curva analtica por um processo de
padronizao seguida de posterior determinao da concentrao do analito. A Lei de Beer pode ser usada
para determinar a absortividade molar da substncia, que a constante de proporcionalidade linear entre a
absorbncia, resposta emitida pelo espectrofotmetro, e a concentrao do analito. Vrios tipos de desvios
podem ocorrer ao se utilizar esta lei na quantificao, entre eles o desvio qumico e instrumental, portanto,
caso algum tipo de desvio esteja presente na anlise, este deve ser monitorado. Quando a substncia de
interesse no detectvel pelo mtodo, deve-se empregar o processo de derivatizao, que consiste em
convert-la, por meio de reaes qumicas que no causem interferncia no meio, em uma substncia capaz
de absorver e emitir radiao e, assim, possibilitar o desenvolvimento da anlise. Neste experimento, usou-
se a anlise espectrofotomtrica para quantificar o sulfato ferroso em uma amostra de antianmico (25 mg
mL
-1
), atravs da confeco de uma curva de padro externo, com base em cinco pontos de calibrao
realizados em triplicatas, e a anlise das diluies. A quantificao foi realizada com sucesso, obtendo
concentrao de 4,80,3 mg mL
-1
e erro relativo de 4,0%, fora dos padres aceitveis de 1-3% para o
mtodo. Portanto, o mtodo em questo no se mostrou to eficiente na determinao da concentrao de
sulfato ferroso presente na amostra.

1 INTRODUO
A espectrofotometria no visvel e no ultravioleta um dos mtodos analticos mais usados nas
determinaes analticas em diversas reas. utilizada radiao eletromagntica cujos comprimentos
variam entre 200 e 780 nm. Quando estimulada com este tipo de radiao, a molcula do composto de
anlise tende a sofrer transies eletrnicas por ocasio da absoro de energia quantizada. A resposta do
sistema a esse estmulo registrada na forma grfica do espectro eletrnico de absoro [SKOOG et al.,
2002].

O clculo relativo quantidade de luz absorvida pelo material feita atravs da Lei de Beer,

(I)
onde Po a potncia da luz que entra na substncia de anlise e P a potncia da luz que sai da substncia.
O representa a absortividade molar, o representa a absorbncia do analito, o representa o caminho
ptico e o representa a concentrao do analito na soluo [SKOOG et al., 2002].
A absoro da regio visvel e ultravioleta depende do nmero e do arranjo dos eltrons nas
molculas ou ons absorventes. Existem fatores que podem mudar o estado natural da substncia de anlise
e proporcionar desvios que interferem diretamente no clculo da Lei de Beer. Um destes tipos de desvios
o qumico, que acontece quando um analito se dissocia ou reage com um solvente para formar um produto
que tem um espectro de absoro diferente do analito. Existe tambm o caso de haver presena de
substncias indesejveis que tambm absorvem a luz no comprimento de onda almejado para o analito.
Neste caso usam-se certos artifcios para anular a presena deste interferente, como a adio de uma
substncia mascarante ou a fixao do pH do meio em um valor onde o interferente sofra alguma
transformao a ponto de no se no mais alterar na quantidade de luz absorvida pela substncia.
[HARRIS, 2005].
Tambm existem os desvios gerados por instrumentao. Um deles o de radiao policromtica.
Ele existe, pois a radiao aplicada na absoro deve ser monocromtica. Quando isso no acontece, o
comprimento de onda de outras faixas de luz somado ao comprimento que deve ser usado. Assim, o valor
obtido na equao da Lei de Beer ganha um desvio devido a esse somatrio. Outro desvio que acontece
devido ao equipamento o feito por radiaes parasitas, que so radiaes geradas por reflexo ou
disperso de feixes provenientes de pequenos contaminantes. O que tambm gera grandes desvios
numricos ao ser aplicado na Lei de Beer. A exatido aceitvel usando o mtodo de espectrofotometria
UV-VIS em torno de 1-3% [HARRIS, 2005].
Em alguns casos, o analito da amostra no absorve luz no espectro do visvel e do ultravioleta,
impedindo uma anlise direta do analito por espectrofotometria de absoro. De forma a transpor essa
barreira, aplicado o mtodo de derivatizao, que consiste na execuo de reaes com analito para que
este seja ento convertido a uma substncia que seja capaz de absorver luz no espectro UV-VIL,
habilitando assim uma anlise indireta do analito. Este mtodo seletivo, pois certos derivatizantes s
podem ser usados para certos tipos de substncias. Este mtodo muito aplicado anlise de ctions
metlicos que geralmente no absorvem no espectro UV-VIS [SKOOG et al., 2007].

2 OBJETIVOS
Determinar a concentrao de Fe(II) em antianmicos por espectrometria de absoro molecular na
regio visvel do espectro.

3 MATERIAIS E MTODOS
3.1 MATERIAIS E REAGENTES
Bales volumtricos de 50, 100, 250 e 500 mL;
Bqueres de 250 mL;
Bales volumtricos de 50, 100, 250 e 500 mL;
Pipetas volumtricas de 1,0 e 10,0 mL;
cido sulfrico concentrado P.A.;
Acetato de sdio P.A.;
Sulfato Ferroso amonical P.A.;
Cloridrato de hidroxilamina P.A.;
1,10 fenantrolina P.A.;
Espectrofotmetro Shimadzu UV-3600;

3.2 PROCEDIMENTO
Inicialmente, a soluo me de Fe
2+
que foi utilizada para fazer os padres foi preparada. Para isso, foi
pesado 0,7 g de sulfato ferroso amoniacal, padro primrio, [Fe(NH
4
)
2
(SO
4
)
2
].6H
2
O, que em seguida foi
transferido para um balo volumtrico de 500 mL, onde a soluo recebeu algumas gotas de cido sulfrico
concentrado, H
2
SO
4
, e, ento, ela foi aferida. A soluo final possua concentrao de 0,2 mg mL
-1
de Fe
2+
. Na
confeco da soluo padro diluda de Fe
2+
, pipetou-se 10mL da soluo me para um balo volumtrico de
100mL, onde foi aferida. A soluo de cloridrato de hidroxilamina 5% (m/v) foi preparada pela dissoluo de
5g de NH
2
OH.HCl em 100 mL de gua deionizada. Para a outra soluo, a de acetato de sdio 2 mol L
-1
, foi
necessrio a pesagem de 41 g de acetato de sdio anidro e, ento, aferi-lo em um balo volumtrico de 250
mL. A ltima soluo, 0,25% (m/v) de 1,10-fenantrolina, foi preparada com o uso de 0,25 g de 1,10-
fenantrolina em um balo volumtrico de 100 mL. Adicionou-se, tambm, 50 mL de gua deionizada, seguida
de 5 gotas de cido ntrico HNO
3
concentrado. Ento, o balo foi aferido e agitado. Todas as aferies foram
realizadas com gua deionizada.
Na confeco da curva analtica, foi necessrio o preparo de cinco amostras de padro, utilizando 2,0;
4,0; 6,0; 8,0 e 10,0 mL da soluo padro diluda em bales de 50mL. A seguir foi adicionado a cada um
desses bales 2mL de soluo aquose da hidroxilamina a 5% (m/v), 2mL de soluo aquosa de acetato de
sdio 2 mol L
-1
e 4mL de soluo de 1,10-fenantrolina a 0,25% (m/v) . Estes bales foram aferidos e
homogeneizados com gua deionizada e ficaram em repouso por 10 minutos. Tambm foi preparado o branco
relacionado a estes padres. Ele continha apenas as solues de cloridrato de hidroxilamina, acetato de sdio e
1,10-fenantrolina, homogeneizadas com gua deionizada. Todos os padres foram realizadas em triplicata.
Utilizando a soluo padro de nmero 2, traou-se seu o espectro de absoro, obtendo o comprimento de
onda =511nm como o de maior pico de absorbncia. Assim, a leitura da absorbncia dos padres para a
confeco da curva analtica de padro externo foi realizada neste comprimento de onda e a curva foi traada
fazendo-se uso do software Excel.
Para montar a amostra, que tambm foi realizada em triplicata, tomou-se 2mL do antianmico (25 mg
mL
-1
de FeSO
4
) e transferiu-os para um balo volumtrico de 50mL, ento, 1mL desta soluo foi retirada para
um outro balo volumtrico, de 100mL, onde ela recebeu a adio das mesmas quantidades das solues de
cliridrato de hidroxilamina, acetato de sdio e 1,10-fenantrolina, que os padres citados anteriormente. O
volume das amostras foi completado com gua destilada e, aps a homogeneizao, as amostras ficaram em
repouso por 10min. Ento, a leitura da absorbncia foi realizada com o auxlio de espectrofotmetro no
comprimento de onda previamente selecionado. A concentrao da amostra foi determinada com base na curva
analtica e nos processos de diluio descritos acima.

4 - RESULTADOS E DISCUSSO
Depois de adicionadas as solues, especificadas no procedimento, aos bales volumtricos, deu-se
inicio ao processo de padronizao externa, medindo as absorbncias de cada uma das solues padro. O
contraste com o branco foi realizada automaticamente com o auxlio do espectrofotmetro.
A soluo de Fe
3+
no possui colorao e consequentemente no absorve nenhum comprimento de
onda na faixa UV-VIS. Desta forma, foi necessrio ajust-la, por um processo de derivatizao, para que esta
absorvesse comprimentos de onda na faixa indicada. Para este ajuste foi utilizado a soluo de cloridrato de
hidroxilamina que fez com que ocorresse a reduo do Fe
3+
para Fe
2+
e a soluo de 1,10-fenantrolina para
formar um complexo com o Fe
2+
, sendo este a ferrona ([Fe(phen)3]2+), conforme as Equao (II). Antes da
adio de 1,10-fenatrolina, foi preciso utilizar a soluo tampo de acetato de sdio, para garantir que o pH
ficasse fixo em 4 e possibilitar a completa converso do Fe
3+
para Fe
2+
. As solues padro ficaram em
repouso por aproximadamente 10 minutos para permitir que a derivatizao se completasse [HARRIS, 2005].

(II)
A varredura do espectro de absoro da soluo de ferrona foi realizado para determinar o
comprimento de onda com maior pico de absoro que foi escolhido por apresentar maior estabilidade do valor
de absortividade molar. O valor encontrado foi =511nm. O experimento foi realizado em triplicata. As
leituras obtidas do espectrofotmetro bem como as mdias dos valores das replicatas so mostradas na
Tabela 1 [SKOOG et al., 2002].
Tabela 1: Leitura da absortividade em diferentes concentraes de Fe
2+
para padronizao externa
Volume de
soluo (mL)
2,0 4,0 6,0 8,0 10,0
Concentrao
(mol L
-1
)
1,43 . 10
-5
2,86 . 10
-5
4,30 . 10
-5
5,73 . 10
-5
7,16 . 10
-5

Rep-I 0,168 0,327 0,485 0,639 0,821
Rep-II 0,17 0.339 0,481 0,645 0,789
Rep-III 0,162 0,349 0,484 0,645 0,844
Mdia 0,167 0,338 0,483 0,643 0,818

De posse destes dados, foi realizada a plotagem da curva analtica de padronizao externa. A Figura 1
mostra esta curva, que foi obtida atravs do mtodo de regresso linear dos mnimos quadrados. O valor do
coeficiente de determinao, R
2
, apresentou um valor de 0,999 que aceitvel, pois difere do ideal R
2
= 1 por
um valor menor que 0,01 [HOEL, 1989]

Figura 1: Curva analtica de padronizao externa da ferrona.

Foi realizado o mesmo processo de derivatizao citado acima com a amostra de antianmico diludo. A
leitura executada pelo espectrofotmetro das amostras foi feita em triplicata e os seguintes valores de absorbncia
foram obtidos: 0,705; 0,835 e 0,760.
Utilizou-se os valores de absorbncia das amostras para determinar a concentrao atravs da curva de
regresso linear. Para a primeira replicata, fazendo y = 0,705, o valor encontrado para concentrao, x, foi de 6,21
x10
-5
mol L
-1
. Para as outras replicatas, os valores obtidos foram 7,37 x 10
-5
mol L
-1
e 6,71 x 10
-5
mol L
-1
. Assim a
mdia das concentraes 6,76 x 10
-5
3,4 x 10
-6
mol L
-1
. Pela proporo de formao do complexo entre o ferro e
a 1,10-fenantrolina ser de 1 molcula de complexo para 1 molcula de ferro, pode-se considerar que esta
concentrao a mesma de Fe
2+
. Comparando visualmente com os padres, verificou-se que a concentrao da
amostra analisada se encontrava entre os padres 4 e 5. Esta anlise visual confirma o resultado obtido.
Como foi retirado primeiramente do antianmico 2,0 mL para preparar uma soluo de 50 mL e desta foi
retirado 1,0 mL para a preparao de uma soluo diluda de 50 mL, soluo esta que passou pela anlise, se fez
necessrio o uso da regra de diluio duas vezes:

Os clculos dos desvios foi realizado separadamente e os resultados apresentados vo de acordo com
as regras estatsticas [SKOOG et al., 2007]..
Essa concentrao de sulfato ferroso encontra-se em unidades de mol L
-1
. Convertendo-a para
unidades de mg mL
-1
:

y = 11214x + 0.0081
R = 0.999
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.9
1
0 0.00001 0.00002 0.00003 0.00004 0.00005 0.00006 0.00007 0.00008
Absorbncia
mol L
-1
Assim a concentrao do analito obtida pelo mtodo foi de

[SKOOG et al.,
2007]. Conforme indicado no rtulo do antianmico, a concentrao de Fe
2+
era de 5,0 mg mL
-1
. Desta forma,
o erro relativo associado ao resultado pode ser calculado pela Equao (III):

(III)

Este erro est levemente deslocado com relao aos padres esperados e pode ser justificado pelos
erros aleatrios e sistemticos envolvidos na manipulao da anlise. Eles podem estar associados s etapas de
pesagem, aferio e referente aos instrumentos envolvidos. A provvel fonte de erros no procedimento foi a
preparao das amostras, uma vez que as leituras de absorbncia apresentaram uma baixa preciso, desvio-
padro de 0,07, enquanto a mdia foi de 0,77 [SKOOG et al., 2007].
Como a faixa de erro esperado pelo mtodo de 1 a 3%, o erro encontrado foge dos padres
esperados o que caracteriza a anlise em questo como pouco eficaz, ao mesmo tempo em que a diferena
entre o erro encontrado e o permitido de 1%. Portanto, a discrepncia entre o resultado encontrado e o
esperado no to significativa [SKOOG et al., 2002].

5 CONCLUSO
O valor encontrado para a concentrao do antianmico foi de 4,8 0,3 mg mL
-1
, com um erro
relativo de 4,0%. Estes valores no se encontram dentro da faixa de aceitao de uma anlise quantitativa por
espectrofotometria de absoro na faixa UV-VIS, pois se espera um erro entre os limites de 1-3%. Porm a
discrepncia apresentada foi baixa. Desta forma, o mtodo de quantificao empregado se mostrou apto para a
determinao da quantidade de Fe
2+
presentes na amostra de sulfato ferroso.
As reaes de derivatizao empregadas foram bem sucedidas, uma vez que a quantificao do analito
foi realizada com sucesso. Pois, o processo de determinao por espectrofotometria de absoro s foi possvel
atravs destas reaes, responsveis pela converso do analito em uma espcie qumica detectvel por esta
tcnica.
O processo de determinao usando a Lei de Beer foi satisfatrio, pois as possveis formas de desvios
desta lei foram evitadas, por exemplo, as solues que passaram por anlise do espectrofotmetro se
encontravam em alto grau de diluio e com nenhuma presena de substncias que poderiam causar
interferncias. Caso a anlise fosse realizada em uma matriz mais complexa, as possveis interferncias
deveriam ser monitoradas e o mtodo de calibrao poderia passar por reformulao, como o uso de padro
interno ou adio de padro, ao contrrio do padro externo usado, com objetivo de diminuir ou anular essas
modificaes. O mtodo de padro externo pode ser usado neste caso justamente pela simplicidade da matriz.


6 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
1. HARRIS, D. C. Anlise Qumica Quantitativa. 6.ed., Rio de Janeiro: LTC, 2005, 857 p.

2. SKOOG, D. A.; HOLLER, F. J.; NIEMAN, T. A. Princpios de Anlise Instrumental. 5.ed., Porto Alegre:
Bookman, 2002, 1051 p.

3. SKOOG, D. A.; WEST, D.M.; HOLLER, F. J.; CROUCH, S. R. Fundamentos de Qumica Analtica.
8.ed., So Paulo: Thomson, 2007, v.2, 1026 p.

4. HOEL, P.G. Estatstica Elementar. Rio de Janeiro, Editora Atlas, 1989, 436 p.