El veneno de la tarantula Rose chilena (Grammostola spatulata) contiene una toxina
que es una protena globular que se parte en la membrana lipdica que ejerce su efecto. La secuencia de la protena es: ECGKFMWKCKNSNDCCKDLVCSSRWKWCVLASPF. Para el estudio de secuenciacin de aminocidos se trat con los siguientes compuestos: ninhidrina, EDMAN, cloruro de dabsilo, bromuro de cinaogeno, carboxipeptidasa A, tripsina y quimotripsina. Cules son los pptidos para cada tratamiento qumico y enzimtico?.
2. En el laboratorio experimental de bioqumica-biolgicas los alumnos aislaron de un extracto homogeneo de baba de caracol un decapptido al cual denominaron RTH- lire43, asimismo, evaluaron mediante un cultivo celular de HeLa que el peptido tiene actividad anticancergena y antiproliferativa. Los alumnos de tercer semestre de bioquimica para poder registrar su pptido y patentarlo desarrollaron una secueciacin de proteinas mediante tratamientos qumicos y enzimticos como a continuacin se describen, cul es la secuencia del pptido con actividad especfica que llos aislaron? a) Un ciclo de degradacin de EDMAN del RTH-lire43 produce dos moles de PTH-Asp por mol de RTH-lire43. b) El tratamiento de una solucin de RTH-lire43 con 2-mercaptoetanol, seguido por la adicin de tripsina, produce tres pptidos cuya composicin es (Ala, Cis, Fen), (Arg, Asp) y (Asp, Cis, Gli, Met, Fen). El pptido intacto (Ala, Cis, Fen) produce PTH-Cis en el primer ciclo de degradacin de EDMAN. c) El tratamiento de un mol de RTH-lire43 con carboxipeptidasa, produce 2 moles de Fen. d) El tratamiento del pentapptido intacto (Asp, Cis, Gli, Met, Fen) con BrCN produce dos pptidos cuya composicin es (homoserina lactona, Asp) y (Cis, Gli, Fen). El pptido (Cis, Gli, Fen) produce PTH-Gli en el primer ciclo de degradacin de EDMAN.
3. Un pptido de 14 aminocidos aislado de corazn de ovinos se somete a anlisis con el fn de determinar su secuencia. Se obtuvieron los siguientes datos. a) Residuo amino terminal: Val b) Residuo carboxi-terminal: Tre c) Fragmentos procedentes de la hidrlisis con tripsina: (Asp-Tre), (Val- Ser-Lis), (Fen-Gli-Tir-Arg), (Ala-His-Trp-Glu-Lis) d) Fragmentos procedentes de la hidrlisis con quimotripsina: (Gli-Tir), (Arg-Ala-His-Trp), (Val-Ser-Lis-Fen), (Glu-Lis-Asp-Tre)
4. Un experimento del laboratorio de experimentacin bioqumica-biolgica se estaba tratando de purificar la acetilcolinesterasa de cerebro de rata por medio de diversas tcnicas. Los alumnos reportaron sus datos en la siguiente tabla pero omitieron calcular algunos valores tiles.
a) Completa la tabla agregando a la columna de actividad especfica, el rendimiento obtenido y el nivel de purificacin luego de cada paso de la purificacin de los estudiantes. Desarrolla una discusin y conclusin de los resultados que se obtuvieron.
Paso de purificacin Proteina total (mol) Actividad total (gmol/min) Actividad especifica Rendimiento Nivel de purificacin Homogenizado de tejido fresco. 104879 6098017 100 1 Precipitacin con (NH 4 ) 2 SO 4 60337 602340 Concentracin y dalisis 3221 35760 Sephadex-G200 602 6980 Cellex-P(Int. catinionico) 585 5120 Cromatografa de afinidad 236 2763