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OFICINA ESPANOLA
DE
PATENTES Y MARCAS

19

k
kInt. Cl. : C09B 61/00

11 N
umero de publicacion:

2 152 466

51

ESPANA

A23L 1/275
C07C 403/00

TRADUCCION DE PATENTE EUROPEA

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kNumero de solicitud europea: 96113568.8

kFecha de presentacion : 23.08.1996
kNumero de publicacion de la solicitud: 0 761 765
kFecha de publicacion de la solicitud: 12.03.1997

T3

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54 Ttulo: Procedimiento para la extracci

on de colorantes de carotenos a partir de materiales naturales.

73 Titular/es: SKW Trostberg Aktiengesellschaft

72 Inventor/es: Heidlas, J
urgen;

74 Agente: Lehmann Novo, Mara Isabel

30 Prioridad: 25.08.1995 DE 195 31 254

Dr.-Albert-Frank-Strasse 32
83308 Trostberg, DE

45 Fecha de la publicaci
on de la mencion BOPI:

01.02.2001

45 Fecha de la publicaci
on del folleto de patente:

ES 2 152 466 T3

01.02.2001

Aviso:

k
k

Huber, Georg;
Cully, Jan y
Kohlrausch, Utz

En el plazo de nueve meses a contar desde la fecha de publicacion en el Boletn europeo de patentes,
de la mencion de concesion de la patente europea, cualquier persona podra oponerse ante la Oficina
Europea de Patentes a la patente concedida. La oposicion debera formularse por escrito y estar
motivada; solo se considerara como formulada una vez que se haya realizado el pago de la tasa de
oposici
on (art 99.1 del Convenio sobre concesion de Patentes Europeas).
Venta de fasc
culos: Oficina Espa
nola de Patentes y Marcas. C/Panam
a, 1 28036 Madrid

ES 2 152 466 T3
DESCRIPCION
Procedimiento para la extraccion de colorantes de carotenos a partir de materiales naturales.
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El presente invento se refiere a un procedimiento para la extraccion de colorantes de carotenos, que

con ayuda de la tecnologa que usa disolventes, mediante la eleccion de apropiadas mezclas de disolventes as como de correspondientes temperaturas de proceso, hace posible extraer colorantes de carotenos,
especialmente -caroteno, a partir de materiales naturales s
olidos, secos o secados.
Los colorantes de carotenoides estan ampliamente propagados en la naturaleza y confieren a muchos
materiales naturales, tales como p.ej. zanahorias, pimientos, flores (de Tagetes o claveles de las Indias) o
determinados microorganismos, su coloracion caracterstica desde amarilla hasta roja intensa. Partiendo
de sus diferencias qumicas estructurales, la clase de los carotenoides se clasifica en dos subclases: los
carotenos, que son hidrocarburos puros considerados desde el punto de vista qumico, y las xantofilas,
que contienen funciones oxigenadas ( -OH, -O-, =O) en la molecula. A causa de sus diferencias en
la estructura qumica, los carotenos y las xantofilas, que se presentan en ambos casos como sustancias
acompa
nantes de grasas naturales, presentan un diferente comportamiento de disoluci
on en disolventes
org
anicos.
Los compuestos de carotenos en general, pero particularmente el -caroteno, alcanzaron en los u
ltimos
tiempos una importancia econ
omica constantemente creciente.
Por una parte, el -caroteno se emplea desde hace mucho tiempo en la tecnologa alimentaria como
material aditivo coloreador (colorante) o como agente antioxidante, no estando limitado su sector de
aplicaciones a sistemas de lpidos, sino que por empleo de diferentes tecnologas, tales como p.ej. diversas
encapsulaciones del -caroteno, tambien se ha extendido tambien a sistemas acuosos. Por otra parte, el
-caroteno tiene una importancia especial en la dietetica, puesto que fisiol
ogicamente le corresponde la
funci
on como pro-vitamina A. Especialmente mediante los mas recientes reconocimientos cientficos de
que el -caroteno puede actuar tambien sistemicamente como agente antioxidante y captador de radicales
y adem
as de ello puede proporcionar de manera comprobable contribuciones a la profilaxia del c
ancer
(Erdmann, J.W., Grummer, M.A., Does -Caroteen Consumption lower Cancer Risk? Backgrounder
volumen1, N 1, Vitamin Nutrition Service, EE.UU.,1984) se ha conducido a que este haya pasado a
tener un interes aumentado para un mayor grupo de consumidores.
La demanda, que con ello ha crecido, la intenta satisfacer la industria, por una parte, mediante la preparacion de -caroteno sintetico y, por otra parte, mediante la extracci
on y la subsiguiente cristalizacion
de -caroteno a partir de fuentes naturales. En tal contexto, los consumidores dan manifiestamente la
preferencia al -caroteno natural m
as que a los productos sinteticos, correspondiendo a su actual concienciacion crtica.
Mientras que todava hace relativamente poco tiempo estaban a disposicion para los procedimientos
de enriquecimiento rentables exclusivamente las fuentes naturales clasicas del -caroteno, tales como
p.ej. zanahorias o algas, en los u
ltimos tiempos mediante esfuerzos innovadores de la biotecnologa se ha
conseguido explotar con metodos de fermentacion una fuente natural incomparablemente mucho mejor
apropiada. Mediante la fermentaci
on de determinados hongos formadores de reto
nos, se puede conseguir
hoy en da una concentraci
on de hasta m
as de 5 % en peso de -caroteno en la biomasa de fermentacion
secada; la concentracion de -caroteno esta situada por consiguiente en valores mas altos por algunas
potencias de diez que en las fuentes naturales hasta ahora disponibles. Especialmente tambien a causa
de estos avances tecnologicos existe por parte de la industria un considerable interes en cuanto a procedimientos de extraccion, que hagan posible extraer de una manera rentable el -caroteno natural a partir
de la compleja matriz de materiales naturales.
Para la extraccion del -caroteno a partir de materiales naturales solidos ya se conocen numerosos
procedimientos. Como se describe p.ej. en el documento de patente de los Estados Unidos de America
US 2.170.872, con frecuencia para ello la matriz de materiales naturales se somete a tratamiento con una
solucion (leja) de un hidr
oxido de un metal alcalino, para conseguir de esta manera una disgregaci
on de
las celulas y la saponificacion de los gliceridos. A continuaci
on, las celulas disgregadas se extraen con eter
de petr
oleo, heptano o disolventes similares. El extracto - liberado de materiales fibrosos - se somete a
una destilaci
on con vapor de agua; a continuaci
on, el residuo acuoso se extrae con un aceite vegetal, en
el que el -caroteno posee una solubilidad relativamente alta.
De acuerdo con un procedimiento, que ha sido descrito en el documento de publicaci
on de solicitud
de patente alemana DE-OS 43 42 798, se pueden extraer carotenoides a partir de algas directamente a
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partir de un cultivo de salmuera salina muy concentrada con grandes cantidades de un aceite alimentario, favoreciendose el traspaso de sustancias mediante un molino de coloides. Por devoluci
on del aceite
cargado con extracto se puede enriquecer el material valioso, que o bien puede ser el aceite que contiene
-caroteno, o sino el -caroteno debe ser todava precipitado primeramente desde el aceite por cristalizacion. De acuerdo con la experiencia, sin embargo, la cristalizacion del -caroteno a partir de un
aceite con aprovechamiento de las diferencias de solubilidad condicionadas por la temperatura no carece
de problemas, puesto que la formaci
on de cristales se efect
ua solo con mucha lentitud y el aceite posee
tambien a bajas temperaturas una solubilidad restante todava relativamente alta para el -caroteno, por
lo que los rendimientos de cristalizacion son solamente peque
nos.

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15

La inducci
on de la cristalizacion del -caroteno mediante la adici
on de disolventes conduce por el contrario a rendimientos fundamentalmente m
as altos, pero se necesita la adici
on de elevadas cantidades de
disolvente, tal como se describe p.ej. en el documento US 1.988.031 para el n-propanol, para obtener un
correspondiente resultado en cuanto al rendimiento. Al realizar la extraccion a partir de materiales naturales con disolventes organicos, tales como p.ej. eter de petroleo (comparense los documentos US 1.967.1
21 y 1.998.031) se plantea en terminos generales el problema de que, a causa de la peque
na solubilidad
del -caroteno, y particularmente en el caso de altas concentraciones de -caroteno, se debe escoger una
cantidad extremadamente grande de disolvente, que sin embargo empeora de nuevo considerablemente el
rendimiento espacio-temporal.

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Hace poco tiempo se han descrito algunos procedimientos, en los que la extraccion del -caroteno a
partir de materiales naturales se lleva a cabo con di
oxido de carbono hipercrtico a presiones muy altas
del proceso (vease el documento US 4.400.398). A pesar de los buenos resultados de la extracci
on, la
desventaja generalmente vigente de estos procedimientos de extraccion con un gas ha de ser vista en la
costosa conversion tecnica de la alta presion que se necesita, que generalmente tiene mayores costos que
los procedimientos que trabajan a presi
on normal.
Dentro del marco de la unificaci
on de la legislacion referente al sector alimentario dentro de la Uni
on
Europea se present
o en Enero de 1995 un proyecto de una reglamentaci
on de la comision para el establecimiento de criterios de pureza especficos para colorantes, que se pueden utilizar en alimentos. Para la
extraccion de carotenoides naturales se proponen en tal caso los disolventes acetona, metil-etil-cetona, metanol, etanol, propan-2-ol, hexano, diclorometano y di
oxido de carbono. Con excepci
on del diclorometano
estos disolventes, sin embargo, a causa de su peque
na capacidad de disoluci
on frente al -caroteno, son
poco apropiados para una extracci
on rentable a partir de materiales naturales, en los cuales el -caroteno
se presenta en altas concentraciones. Por el otro lado, por causa de aspectos ecologicos y referidos a los
consumidores, se prescinde de la utilizaci
on de diclorometano en la industria alimentaria orientada hacia
el futuro.

45

La mision del presente invento fue, por consiguiente, desarrollar un procedimiento lo m

as rentable
que sea posible para la obtencion de colorantes de carotenos, especialmente de -caroteno, a partir de
materiales naturales, particularmente a partir de materiales naturales s
olidos con un agente de extracci
on
lquido, que evite las desventajas de los procedimientos conocidos. En tal caso, el procedimiento, despues
de la extraccion propiamente dicha, deber
a hacer posible un buen rendimiento de cristalizacion, sobre
todo de -caroteno. Particularmente, se deben utilizar solamente los disolventes que se clasifican como
ventajosos desde puntos de vista ecologicos y toxicologicos.

50

El problema planteado por esta mision se resolvio con un procedimiento para la extraccion de colorantes de carotenos, en el que el material de partida es extrado con una mezcla de disolventes, que
contiene esteres con acido acetico de alcoholes C1 -C4 y de 1 a 25 % en peso, referido a los esteres con
acido acetico, de un aceite de origen biol
ogico a unas temperaturas de por lo menos 30 C.

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A primera vista, los esteres con acido acetico aparecen como menos apropiados para la extraccion de
colorantes de carotenos, en comparacion con el aceite, puesto que poseen una capacidad de disoluci
on
comparativamente peque
na para tales compuestos. Sorprendentemente, se encontr
o sin embargo que
estos, por encima de una temperatura de 30C y especialmente a una temperatura comprendida entre
40C y 125C, son sobresalientemente apropiados como agentes de extraccion para colorantes de carotenos.
En una mezcla de esteres con acido acetico, por un lado, y de un aceite, por otro lado, la solubilidad del caroteno a unas temperaturas de extracci
on < 30 C se comporta primeramente tambien como
se espera, a saber de modo directamente proporcional a la proporci
on del aceite en la mezcla de disolventes; es decir, que la solubilidad de los carotenos en la mezcla se puede determinar gr
aficamente de
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manera muy sencilla por interpolaci

on de la solubilidad en acetato de etilo o acetato de butilo puro y en
el aceite. Sorprendentemente, sin embargo, con el procedimiento conforme al invento se comprob
o que
las solubilidades de colorantes de carotenos, especialmente de -caroteno, en esteres con acido acetico a
temperaturas elevadas se puede aumentar muy grandemente ya por la adici
on de peque
nas cantidades de
un aceite, lo cual no se poda esperar en absoluto.
Preferiblemente, en el procedimiento conforme al invento se emplean los esteres con acido acetico de
alcoholes C2 -C4 . Son especialmente preferidos como esteres con acido acetico los disolventes acetato de
etilo, acetato de butilo y sus mezclas, que se pueden emplear generalmente en la preparaci
on de alimentos
seg
un la ordenanza VO del 08.11.1991, anejo 1, para disolventes destinados a extraccion - que ha resultado vigente entretanto en toda Europa -.
Conforme al invento, se han manifestado como especialmente apropiados los aceites de origen biol
ogico
para el presente procedimiento. Los aceites vegetales posibles son aceite de germenes de maiz, aceite de
soja, aceite de semillas de algodon, aceite de colza o tambien aceite de cacahuete; sin embargo, son
apropiados tambien aceites microbianos procedentes de determinados/as hongos, levaduras o bacterias,
as como tambien aceites de pescado, que se pueden emplear para un producto en calidad alimentaria.
En casos excepcionales, puede ser ventajoso para el presente procedimiento que el contenido de aceite
natural en el material de partida sea ajustado antes del comienzo de la extracci
on a valores apropiados
mediante correspondientes medidas tecnicas de desaceitado o la adicion de aceite.
Mediante la adici
on de aceite de menos que 5 % en peso en la mezcla de disolventes, se puede conseguir
ya un aumento esencial de la solubilidad de los colorantes. Conforme al invento, el aceite es empleado
por lo tanto en la mezcla de disolventes preferiblemente en proporciones de por lo menos 3 % en peso
y de modo especialmente preferido entre 5 y 10 % en peso. Por encima de una proporci
on de 10, pero
sobre todo de 15 % en peso de aceite, se puede ciertamente aumentar todava m
as la solubilidad de los
carotenos en la mezcla de disolventes, pero se puede perder la decisiva ventaja del procedimiento, es decir
los altos rendimientos de colorantes de carotenos, que se pueden aislar despues de la extraccion. En el
caso de menores concentraciones de aceite en la mezcla, se aumenta ciertamente el rendimiento en la
subsiguiente cristalizaci
on del caroteno, pero para alcanzar la meta de extraccion se prefiere una m
as alta
proporci
on de aceite en el disolvente.
Para la extraccion con la mezcla de disolventes y aceite se han manifestado como especialmente apropiadas unas temperaturas de 50C, puesto que el mejoramiento de la solubilidad, que se puede conseguir
mediante la adicion de un aceite, es todava m
as fuertemente pronunciado a temperaturas elevadas; el
lmite superior de la temperatura del proceso es evidentemente el punto de ebullici
on del respectivo disolvente (del acetato de etilo: 77 C, del acetato de butilo: 123 - 126C), que no se alcanza sin embargo por
lo general seg
un la tecnica de procesos. En el procedimiento conforme al invento, el margen especialmente
apropiado de temperaturas para la extracci
on esta situado por consiguiente entre 50 y 70 C. Por cada
parte en peso del material de partida s
olido se a
naden preferiblemente de 3 a 5 partes en peso en una
mezcla de disolventes, despues de lo cual esta mezcla de extraccion es tratada por regla general durante
un periodo de tiempo de 1 a 3 horas, lo cual se realiza de la manera m
as sencilla por agitacion. Despues
de haberse efectuado la separaci
on de la mezcla de disolventes, por ejemplo por centrifugacion, el residuo
de extraccion es lavado posteriormente de modo preferente con 0,5 a 5 partes en peso de esteres con acido
acetico, p.ej. acetato de etilo y/o acetato de butilo, lo cual se puede realizar tambien m
ultiples veces, y
las cantidades de disolventes procedentes del proceso de lavado posterior se re
unen con las cantidades de
disolvente separadas con respecto del aceite. La obtencion del colorante de caroteno puro se realiza de
acuerdo con los procedimientos conocidos, retirando los disolventes organicos por ejemplo en vaco o por
aplicacion de un gradiente de temperaturas, con lo cual el caroteno resulta como un material s
olido.

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60

La ventaja esencial del nuevo procedimiento consiste en que, por una parte, se puede conseguir una
capacidad de disoluci
on para colorantes de carotenos que es comparable con la del aceite, con lo cual
se pueden mejorar manifiestamente los rendimientos espacio-temporales, puesto que en total se necesita
menos cantidad de disolvente; por otra parte es posible sin embargo, mediante la proporci
on s
olo peque
na
del aceite en la mezcla de disolventes, conseguir despues de la extraccion y de la eliminacion de la mezcla
de disolventes un rendimiento manifiestamente mas alto de colorante de caroteno cristalino, puesto que
las perdidas absolutas debidas a la solubilidad residual del caroteno en la peque
na proporci
on de aceite
son solo muy peque
nas. Conforme al invento, la decisiva novedad tecnica de procesos para la extraccion
de colorantes de carotenos, especialmente de -caroteno, a partir de materiales naturales ha de ser vista
en que el procedimiento re
une las ventajas de una extracci
on con un aceite puro, a saber los favorables
rendimientos espacio-temporales debidos a la alta solubilidad de los colorantes de carotenos, especialmente en el aceite, y las ventajas de la extraccion con disolventes puros, a saber los altos rendimientos
4

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de cristalizacion.
Los siguientes Ejemplos deben explicar las ventajas del procedimiento conforme al invento.
5

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Ejemplos
En cada caso una parte en peso de un residuo de fermentacion, previamente desgrasado y secado, de
un hongo formador de reto
nos, que produce -caroteno (contenido de -caroteno 3,0 % en peso), se agito
energicamente cada vez con 4 partes en peso de los disolventes o mezclas de disolventes que se mencionan
en la Tabla 1 a lo largo de un periodo de tiempo de 2 h a las indicadas temperaturas del proceso. A
continuacion, la biomasa fue separada a traves de una centrfuga de pa
no y lavada posteriormente con 1
parte en peso del disolvente o de la mezcla de disolventes, que se ha llevado a la temperatura de extraccion.
Despues de que el disolvente (o la mezcla de disolventes) haba sido eliminada en vaco desde las soluciones
para extraccion reunidas, que contenan carotenos, se determino la concentraci
on remanente de -caroteno
despues del secado en el residuo y se averiguo el rendimiento de extraccion. Como componente aceitoso
se empleo un aceite de germenes de maiz en una calidad de aceite alimentario.
Ejemplo
N

1 (comp.)
25

66

Acetato de etilo +
6 % en peso de aceite

70

>95

Acetato de etilo +
10 % en peso de aceite

70

>95

Acetato de etilo

50

45

Acetato de etilo +
6 % en peso de aceite

50

80

Acetato de butilo

70

71

Acetato de butilo +
3 % en peso de aceite

70

90

Acetato de butilo +
20 % en peso de aceite

70

>95

Acetato de butilo

50

75

Acetato de butilo +
10 % en peso de aceite

50

90

30 % en peso de acetato de etilo +

70 % en peso de acetato de butilo

70

68

 30 % en peso de acetato de etilo+ 

70 % en peso de acetato de butilo
+ 10 % en peso de aceite

70

90

6 (comp.)

45

9 (comp.)
50

Rendimiento de
extraccion de
-caroteno (%)

70

4 (comp.)

40

Temperatura
del proceso
( C)

Acetato de etilo

30

35

Disolvente o
mezcla de disolventes

10

11(comp.)
55

12

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REIVINDICACIONES

10

1. Procedimiento para la extraccion de colorantes de carotenos, especialmente de -caroteno, a partir

de materiales naturales, con un agente de extraccion org
anico lquido, caracterizado porque el material
de partida se extrae a temperaturas de por lo menos 30 C con una mezcla de disolventes, que contiene
esteres con acido acetico de alcoholes C1 -C4 y de 1 a 25 % en peso, referido a los esteres con acido acetico,
de un aceite de origen biol
ogico.
2. Procedimiento seg
un la reivindicaci
on 1, caracterizado porque los esteres con acido acetico se
escogen entre acetato de etilo, acetato de butilo y mezclas de ellos.
3. Procedimiento seg
un una de las reivindicaciones 1 a 2, caracterizado porque el aceite se emplea
en proporciones comprendidas entre 5 y 10 % en peso en la mezcla de disolventes.

15

4. Procedimiento seg
un una de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque la extraccion se lleva
a cabo a temperaturas comprendidas entre 50 y 70C.
5. Procedimiento seg
un una de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque por cada parte en
peso del material de partida se a
naden de 3 a 5 partes en peso de una mezcla de disolventes.

20

25

6. Procedimiento seg
un una de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque la mezcla de extraccion es sometida a tratamiento durante 1 a 3 horas.
7. Procedimiento seg
un una de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizado porque el residuo de extraccion se lava posteriormente con 0,5 a 5 partes en peso de esteres con acido acetico.

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NOTA INFORMATIVA: Conforme a la reserva del art. 167.2 del Convenio de Patentes Europeas (CPE)
y a la Disposici
on Transitoria del RD 2424/1986, de 10 de octubre, relativo a la
aplicaci
on del Convenio de Patente Europea, las patentes europeas que designen a
Espa
na y solicitadas antes del 7-10-1992, no producir
an ning
un efecto en Espa
na en
la medida en que confieran protecci
on a productos qumicos y farmaceuticos como
tales.
Esta informaci
on no prejuzga que la patente este o no includa en la mencionada
reserva.