D DI IV VI IS SI I N N D DE E C CI IE EN NC CI IA AS S F FO OR RE ES ST TA AL LE ES S
EFECTO DEL ACEITE DE NIM Azadirachta indica A. JUSS., SOBRE LA TERMITA DE MADERA SECA Incisitermes marginipennis (Latreille) (ISOPTERA: KALOTERMITIDAE)
TESIS PROFESIONAL
QUE COMO REQUISITO PARCIAL PARA OBTENER EL TTULO DE INGENIERO FORESTAL CON ORIENTACIN EN ECONOMA Y ORDENACIN
P R E S E N T A
JAVIER ARCOS ROA
Chapingo, Texcoco, Edo. de Mxico
Septiembre de 1999 Introduccin J avier Arcos Roa 2 CONTENIDO Pg.
LISTA DE CUADROS........................................................................................................ .......iii LISTA DE FIGURAS..................................................................................................................v RESUMEN.................................................................................................................................vi SUMMARY...............................................................................................................................vii 1. INTRODUCCIN...................................................................................................................1 2. OBJ ETIVOS............................................................................................................................3 3. HIPTESIS..............................................................................................................................4 4. REVISIN DE LITERATURA...............................................................................................5 4.1. Descripcin de la termita de madera seca............................................................5 4.2. Maderas resistentes a termitas.............................................................................8 4.3. Extractos vegetales.............................................................................................12 4.3. Usos del nim en el control de plagas..................................................................15 5. MATERIALES Y MTODOS..............................................................................................24 5.1. Localizacin del sitio donde se desarroll el estudio.........................................24 5.2. Colecta de termitas.............................................................................................24 5.3. Mantenimiento de las termitas...........................................................................24 5.4. Obtencin de la substancia para impregnar.......................................................25 5.5. Metodologa de establecimiento de ensayos......................................................25 5.5.1. Tratamientos..........................................................................................25 5.5.2. Prueba experimental..............................................................................26 5.5.3. Diseo experimental..............................................................................27 5.6. Inhibicin de alimentacin.................................................................................27 5.7. Efecto insecticida y regulador del crecimiento..................................................28
Introduccin J avier Arcos Roa 3
6. RESULTADOS Y DISCUSION............................................................................................29 6.1. Inhibicin de alimentacin......................................................................................29 6.2. Efecto insecticida y regulador del crecimiento.......................................................35 6.2.1. Efecto en mortalidad por ingestin del nim.............................................35 6.2.2. Efecto en mortalidad por contacto del nim..............................................36 6.2.3. Efecto en el crecimiento...........................................................................37 7. CONCLUSIONES.................................................................................................................40 8. LITERATURA CITADA.......................................................................................................42 9. APNDICE............................................................................................................................50
Introduccin J avier Arcos Roa 4
LISTA DE CUADROS Pg
Cuadro 1. Caractersticas de termitas de madera seca................................................................6 Cuadro 2. Caractersticas de termitas subterrneas.....................................................................6 Cuadro 3. Clasificacin de especies de acuerdo a la resistencia al ataque de termitas.............10 Cuadro 4. Efecto del aceite de nim A. indica sobre la alimentacin de la termita de madera seca, Incisitermes marginipennis.................................................................29 Cuadro 5. Mortalidad promedio acumulada de Incisitermes marginipennis asperjados con aceite de nim, Azadirachta indica............................................................................36 Cuadro 6. Exuvias promedio acumulado de Incisitermes marginipennis tratado con aceite nim, Azadirachta indica............................................................................................38 Cuadro 7. Anlisis de varianza para la variable IDA en la prueba selectiva.............................50 Cuadro 8. Anlisis de varianza para la variable Q en la prueba selectiva.................................50 Cuadro 9. Anlisis de varianza para la variable prdida de peso en la prueba de confinamiento............................................................................................................50 Cuadro 10. Comparacin de medias Tukey para la variable prdida de peso en la prueba confinamiento.........................................................................................................50 Cuadro 11. Anlisis de varianza para la variable mortalidad en la prueba de confinamiento a los 8 das despus de aplicar el tratamiento.................................51 Cuadro 12. Anlisis de varianza para la variable mortalidad en la prueba de confinamiento a los 16 das despus de aplicar el tratamiento...............................51 Cuadro 13. Anlisis de varianza para la variable mortalidad en la prueba de confinamiento a los 24 das despus de aplicar el tratamiento...............................51 Cuadro 14. Anlisis de varianza para la variable mortalidad en la prueba de confinamiento a los 32 das despus de aplicar el tratamiento...............................51 Cuadro 15. Anlisis de varianza para la variable mortalidad en la prueba de confinamiento a los 40 das despus de aplicar el tratamiento...............................51 Cuadro 16. Anlisis de varianza para la variable mortalidad en la prueba de Introduccin J avier Arcos Roa 5 confinamiento a los 48 das despus de aplicar el tratamiento...............................52
Cuadro 17. Anlisis de varianza para la variable mortalidad en la prueba de confinamiento a los 56 das despus de aplicar el tratamiento...............................52 Cuadro 18. Anlisis de varianza para la variable mortalidad en la prueba de confinamiento a los 64 das despus de aplicar el tratamiento..............................52 Cuadro 19. Anlisis de varianza para la variable mortalidad en la prueba de contacto a los 2 das despus de aplicar el tratamiento..........................................................52 Cuadro 20. Anlisis de varianza para la variable mortalidad en la prueba de contacto a los 4 das despus de aplicar el tratamiento..........................................52 Cuadro 21. Anlisis de varianza para la variable mortalidad en la prueba de contacto a los 6 das despus de aplicar el tratamiento..........................................53 Cuadro 22. Anlisis de varianza para la variable mortalidad en la prueba de contacto a los 8 das despus de aplicar el tratamiento........................................................53 Cuadro 23. Anlisis de varianza para la variable mortalidad en la prueba de contacto a los 10 das despus de aplicar el tratamiento.......................................................53 Cuadro 24. Anlisis de varianza para la variable mortalidad en la prueba de contacto a los 12 das despus de aplicar el tratamiento.......................................................53 Cuadro 25. Anlisis de varianza para la variable mortalidad en la prueba de contacto a los 14 das despus de aplicar el tratamiento......................................................53 Cuadro 26. Anlisis de varianza para la variable mortalidad en la prueba de contacto a los 16 das despus de aplicar el tratamiento...................................................... 54 Cuadro 27. Anlisis de varianza para la variable mortalidad en la prueba de contacto a los 18 das despus de aplicar el tratamiento..........................................................54 Cuadro 28. Anlisis de varianza para la variable mortalidad en la prueba de contacto a los 20 das despus de aplicar el tratamiento...................................................... 54 Cuadro 29. Anlisis de la prueba no paramtrica de Wilcoxon para la variable exuvias en la prueba de confinamiento...................................................................54
Introduccin J avier Arcos Roa 6 LISTA DE FIGURAS Pg.
Figura 1. A: Vaso de plstico para mantener las termitas en los experimentos........................26 Figura 2. Prueba selectiva. Discos de papel filtro con las evidencias de los daos de consumo por termitas con diferentes concentraciones de aceite de nim. Mitad izquierda tratada, mitad derecha sin tratar................................................................31 Figura 3. Prueba de confinamiento. Discos de papel filtro con las evidencias de consumo por termitas bajo las diferentes concentraciones de aceite de nim en cinco repeticiones...............................................................................................................33 Figura 4. Comparacin de medias de la variable prdida de peso (mg), bajo diferentes dosis de aceite de nim..................................................................................................34 Figura 5. Efecto en mortalidad de I. marginipennis tratado con aceite de nim A. indica.........35
Introduccin J avier Arcos Roa 7 RESUMEN
En bioensayos bajo condicin selectiva, confinamiento y contacto, se evalo el efecto del aceite de nim, Azadirachta indica A. J uss., a concentraciones 0.5 %, 1.0 %, 1.5 %, 2.0 %, y 3.0 % en inhibicin de la alimentacin, mortalidad y regulacin del crecimiento durante ocho semanas sobre la termita de madera seca Incisitermes marginipennis (Latreille); a fin de probar la hiptesis de que el aceite provoca inhibicin de alimentacin y tambin si acta como insecticida y/o regulador de crecimiento. En ambos bioensayos, los resultados mostraron que el ataque de termitas fue mayor en los papeles control que en los impregnados; en cuanto a la mortalidad registrada por ingestin y contacto, es atribuido por inanicin y el manejo de las termitas; por otro lado el efecto como regulador en el crecimiento se present de manera no significativa. Por lo anterior se concluye que el aceite de nim, tiene un efecto de inhibicin en la alimentacin, sin caractersticas txicas, descartando la posibilidad de que exista un efecto retardador en el crecimiento, que se manifieste en la duracin de los instares ninfales.
Introduccin J avier Arcos Roa 8 In bioessays of selective, confinement and contact conditions, the effect of neem oil, Azadirachta indica A. J uss., on dry wood termite Incisitermes marginipennis (Latreille) was evaluated at concentrations of 0.0 %, 1.0 %, 1.5 %, 2.0 %, and 3.0 % in mortality, feeding inhibition and growth regulation through eight weeks; it was because of the objective of testing the hypothesis that states the oil causes feeding inhibition and acts as pesticide and/or growth regulator too. Both bioessays showed the termites attack was higher on control papers than on impregnated ones; the mortality registered by ingestion and contact is attributed to inanition and termites handling; on the other hand the effect of oil as regulator in the growth was found in a no significant way. In conclusion, neem oil has an inhibition effect in the feeding without toxic characteristic, discarding the possibility that exists a growth delayer effect, which can be manifesting through the duration of nymph stages.
Las palomillas de San J uan son termitas de madera seca, de la especie Incisitermes marginipennis (Latreille), que provocan severos daos a la madera en construcciones, esta especie es la principal causa de biodeterioro de las maderas en las regiones altas de Mxico (Cibrin et al., 1995).
En nuestro pas, en ciudades como Acapulco, Cancn, Manzanillo, Mexicali, Monterrey, Veracruz y Tampico, se registran infestaciones por termitas en casas, muebles y postes telefnicos; en los durmientes de la red ferroviaria en todo el pas. En Veracruz, Sinaloa, y Sonora sobre cultivos como caa de azcar, sorgo, maz, cacahuate y pia; tambin en Nayarit, Tabasco, Campeche, Chiapas y Veracruz causan daos a las especies forestales en plantaciones de eucalipto, caoba y pino, originando prdidas econmicas considerables (Cibrin et al.,1995).
La preservacin de maderas para la construccin, se basa principalmente en el uso del preservador pentaclorofenol, por su gran persistencia, pero por sus propiedades cancergenas en el humano, hay una tendencia a restringir su uso. Una alternativa para la proteccin de maderas son los compuestos secundarios del rbol de nim, Azadirachta indica A. J uss. Las semillas de este rbol contienen al limonoide azadiractina y otros extractos con propiedades insecticidas con amplio uso en el manejo de varias plagas agrcolas y forestales. Se ha experimentado su uso contra termitas subterrneas. Grace y Yates (1992), determinarn la deterrencia alimentaria de azadiractina comercial y aceite de nim en Coptotermes formosanus. Ishida et al. (1992), encontraron que el compuesto Deacetilgeduniun fue el compuesto mas activo como antialimentario con un 95% de actividad para la misma especie cuando se aplic en laboratorio a discos de papel filtro.
El uso extensivo de qumicos no solo causa problemas ambientales sino tambin desarrollo de resistencia contra estos qumicos (Zoberi, 1995). Por otro lado, Milner y Staples (1996) Introduccin J avier Arcos Roa 10 sealan que las demandas actuales de la sociedad a nivel mundial son en el sentido de no utilizar productos qumicos para el contro de termitas. Sin embargo, las termitas no son buenos candidatos para el control biolgico clsico, primero porque la mayora son nativas y segundo porque su distribucin y abundancia depende ms del tipo de suelo, clima y disponibilidad de alimento que de sus enemigos naturales. Tambin porque una misma especie de termita en una situacin puede ser benfica y en otra ser una plaga. El termino control, debe estar bien claro sobre todo en termitas, usualmente control significa matar, pero en termitas, el control qumico algunas veces acta mas como repelente que como txico, de aqu que el control de termitas es la reduccin de los daos a niveles tolerables. El control de termitas en la actualidad tiende a excluir los productos qumicos, sin embargo, en Mxico aun los seguimos utilizando, una alternativa muy prometedora a nivel mundial es el uso de productos vegetales aprovechando el conocimiento que se tiene de las maderas resistentes al ataque de plagas y extrayendo los compuestos secundarios con accin deterrente o txica a termitas.
El presente trabajo, tuvo como propsito principal el de investigar los efectos en sobrevivencia y alimentacin de I. marginipennis expuestas a discos de papel impregnados con cinco concentraciones de aceite de nim, por lo cual se plantearon los siguientes objetivos.
Objetivos J avier Arcos Roa 11 2. OBJETIVOS
Determinar la dosis mnima que inhiba el ataque de la termita de madera seca Incisitermes marginipennis sobre papel filtro, impregnado con aceite de nim, Azadirachta indica.
Determinar si el aceite de nim, A. indica tiene efecto insecticida sobre la termita de madera seca I. marginipennis
Hiptesis J avier Arcos Roa 12 3. HIPTESIS
Las aplicaciones de aceite de nim A. indica, tienden a disminuir la actividad alimenticia sobre la termita de madera seca I. marginipennis.
Las aplicaciones del aceite de nim actan tambin como insecticida y/o regulador de crecimiento sobre la termita.
Revisin de Literatura J avier Arcos Roa 13 4. REVISIN DE LITERATURA
4.1. Descripcin de la termita de madera seca
Las termitas son insectos hemimetabolos, ortopteroides del orden Isoptera, es un grupo relativamente pequeo en comparacin con los ordenes Coleptera, Lepidoptera, Diptera e Hymenoptera; comprende aproximadamente 2,750 especies. Las termitas estn filogenticamente relacionadas con las cucarachas y los mntidos porque una especie primitiva de termita, Mastotermes darwiniensis produce sus huevecillos en ootecas y presenta un lbulo anal en las alas posteriores (Cancello y Myles, 1998).
Las termitas viven en colonias altamente organizadas, formadas por obreras, soldados y reproductores. Las obreras son pteras, muy numerosas y su funcin es la de cuidar los huevecillos y alimentar a todas las termitas de la colonia mediante la trofalaxis, construyen adems las galeras y las cmaras de reproduccin. Los soldados cuidan la colonia de los depredadores. Los reproductores tienen dos pares de alas iguales (de aqu el nombre del Orden) se encargan de dispersarse y poner huevecillo (Gordon, 1996).
El ciclo de vida (Cibrin et al., 1995) se inicia con el vuelo de los reproductores lo cual sucede durante los das hmedos (despus de una lluvia), despus del vuelo que ocurre en grandes nmeros, se forman parejas (rey y reina) cada una excavar una celda en madera o tierra para formar una colonia; en el primer ao producirn unos 100 huevecillos, originando las ninfas que madurarn a obreras, soldados o reproductores alados, tambin con el tiempo algunas obreras se transforman en reinas suplementarias para incrementar la produccin de huevecillos y el nmero de la colonia; despus de cinco o seis aos una colonia puede contener varios miles o millones de individuos. El alimento a base de madera lo consiguen haciendo galeras subterrneas y muy bien protegidas desde el termitero hasta varias docenas de metros de distancia, algunas especies construyen termiteros satlites y cada uno de ellos puede generar una nueva colonia (Scott y Scott, 1996). Otras, las termitas de madera seca, se establecen en madera o en productos que contengan celulosa y aqu pasarn toda su vida y nicamente saldrn de ellos para diseminarse. Revisin de Literatura J avier Arcos Roa 14
En Mxico, se reportan 95 especies descritas con una amplia distribucin, se extiende desde el Norte en climas templados (Reticulitermes spp.); en el Altiplano predomina la termita de madera seca (Incisitermes marginipennis) y en el Sur por todas las zonas tropicales y costeras (principalmente Cryptotermes brevis, Coptotermes crassus, Heterotermes spp. y Nasutermes spp.) (Cancello y Myles, 1998). Bsicamente y con fines prcticos, las termitas se pueden reconocer por las siguientes caractersticas, como se observa en los cuadros 1 y 2.
Cuadro 1. Caractersticas de termitas de madera seca Viven dentro de la madera de construcciones y muebles o libros; frecuentes en las ramas secas de rboles vivos. La evidencia de su presencia son los orificios de salida y polilla en las estructuras atacadas. Familia: Kalotermitidae Simbiosis: Protozoarios Se alimentan de celulosa que contiene la madera, ejemplos sobresalientes: En reas templadas: Incisitermes marginipennis Incisitermes minor En reas tropicales: Cryptotermes brevis Marginitermes hubbardi Fuente: Damin (1998)
Cuadro 2. Caractersticas de termitas subterrneas Viven tanto en el suelo como en madera de construcciones y muebles en contacto con el suelo; frecuentes en rboles vivos. La evidencia de su presencia son los tneles de tierra sobre las paredes o estructuras y muebles de madera. Familia: Rinotermitidae Simbiosis: Protozoarios Se alimentan de celulosa que contiene la madera Familia: Termitidae Simbiontes: Hongos Se alimentan de hongos que se desarrollan en la madera que cosechan Ejemplos sobresalientes: En reas templadas: Reticulitermes flavipes En reas tropicales: Heterotermes aureus Coptotermes cressus Coptotermes formosanus Ejemplos sobresalientes: En reas templadas: Gnatamitermes tubiformans En reas tropicales: Nautitermes spp. Amitermes spp. Fuente: Damin (1998). Sols, (1999) menciona que I. marginipennis pertenece al grupo de termitas de madera seca; los individuos de su familia no tienen casta de obreras, por lo que los jvenes (ninfas) de las Revisin de Literatura J avier Arcos Roa 15 otras castas son los que desempean el trabajo de la colonia, recibiendo el nombre de pseudobreras.
Cibrin et al., (1995) describen a la termita de madera seca I. marginipennis, tambin llamada comejen o polilla, de la siguiente manera:
Distribucin en Mxico: Chiapas, Colima, Distrito Federal, Estado de Mxico, J alisco, Michoacn, Nayarit, Oaxaca, Puebla, Tlaxcala, Veracruz. Tambin se reporta en el Estado de Morelos (Mndez (1998).
Caractersticas de la especie: Los soldados de esta especie, pueden ser de dos tipos, unos de cabeza pequea (en promedio 2.5 mm) y otros de cabeza grande (3.3 mm de longitud promedio). Se consideran entre las termitas ms grandes de Mxico, ya que miden en promedio 19 mm de longitud. Los reproductores alados son de color caf a caf rojizo, miden de 9 a 11 mm de longitud, excluyendo las alas, tienen la cabeza caf amarillenta y ms larga que ancha, alas largas de 14 a 17 mm de longitud y de color amarillo claro traslcidas. Los jvenes o ninfas son de color blanco cremoso de 8 mm de longitud promedio.
Daos: La alimentacin continua y el acomodo dentro de la madera afectada, origina cmaras amplias que pueden medir de 2 a 3 cm de ancho y hasta 15 cm de largo. Por lo general las cmaras se disponen entre los anillos de crecimiento y se van agrandando conforme crece la colonia. El sistema de galeras que construyen afecta fuertemente las propiedades estructurales de la madera y en casos extremos pueden llegar a destruirla totalmente. Las evidencias de su ataque se reconocen por la precencia de excremento (polilla) que las ninfas expulsan continuamente hacia el exterior.
Importancia: Adems de que atacan estructuras de madera en uso, tambin afectan a rboles de las reas urbanas de las grandes ciudades, ya que estos insectos se encuentran en las partes Revisin de Literatura J avier Arcos Roa 16 muertas de ellos; sus infestaciones incrementan el riesgo de que estas partes sean derribadas por el viento y ocasionan lesiones a personas o daos a propiedades.
4.2. Maderas resistentes a termitas
Se ha venido investigando la resistencia de las maderas al ataque de termitas y extractos de maderas con propiedades termicidas y el conocimiento generado es considerablemente amplio como lo demuestran los siguientes trabajos:
Rust y Rierson (1977), usan maderas y extractos de 11 especies de rboles y determinan la preferencia alimenticia de la termita de madera seca Incisitermes minor (Hagen), encontrando que el consumo fue inversamente proporcional al peso especfico de las maderas; el papel filtro con extractos metanolicos de las maderas menos preferidas, tambin fueron los menos consumidos en las pruebas de confinamiento. En las pruebas de seleccin libre, solo en el papel tratado con extractos de madera fue donde se desarrollaron las colonias, en papel sin tratar y en papel tratado con metanol fueron las que se alimentaron significativamente. Los extractos de Pinus ponderosa aplicado a madera de abeto Douglas (Pseudotsuga menziesii) y pino dulce (Pinus lambertiana) redujeron significativamente la alimentacin. La resistencia a la alimentacin parece depender de la presencia de qumicos repelentes presentes en las maderas.
Carter, Stringer y Taras (1979), investigaron las propiedades termicidas de la madera de Pinus elliottii var. elliottii, en relacin a la posicin en el rbol, y encuentran que Riticulitermes flavipes sobrevive y come menos en los bloques de madera interna (duramen) en comparacin con la madera ms exterior (albura). Tambin, cuando los materiales termicidas del duramen son extrados sucesivamente con pentano y la mezcla acetona +hexano +agua (AHA en la proporcin 54:44:2 respectivamente), estos son removidos de la madera. El pentano extrae muchos materiales antitermitas pero la mezcla AHA es necesaria para una extraccin eficiente.
Revisin de Literatura J avier Arcos Roa 17 Carter y Huffman (1982), al estudiar la respuesta de las termitas a extractos y madera de Melaleuca quinquenervia, encuentran que los extractos termicidas se extrajeron solventes polares, excepto con pentano; muchos materiales termicidas, fueron removidos mediante la extraccin con acetona; los extractos con la mezcla de AHA (54:44:2), caus baja sobrevivencia de Coptotermes formosanus pero no de Reticulitermes favipes.
Scott y Labosky (1984), determinan las propiedades termicidas de extractos de corteza de 11 especies, encontrando que los extractos con AHA de Quercus prinus, Sassatras albidum, Pinus strobus y Carya ovata son prometedores como preservadores de madera.
Prez et al. (1985), estudian la resistencia de 18 especies de maderas mexicanas al ataque de la termitas de madera seca, Cryptotermes brevis, concluyen que la resistencia de las maderas puede estar influenciado por diversos factores relacionados con las propiedades que posee cada especie o con el ambiente que la rodea, as, mencionan a la densidad, a mayor densidad, las termitas tendrn mayor dificultad para fragmentarla mecnicamente con sus mandbulas; aunque indican que la principal caracterstica de la madera que las protege contra el ataque de las termitas es la presencia de extractivos acumulados en el duramen; estas sustancias pueden tener diferentes efectos sobre las termitas: actuar como txicos contra las propias termitas, provocar la muerte de los protozoarios simbiontes que habitan en su intestino o pueden disminuir la palatabilidad de la madera (deterrencia alimentaria). Por otro lado, dividen las maderas estudiadas en tres categoras (Cuadro 3)
Lakshmana y Sunder (1989), en un estudio realizado con el rbol Garcinia pictorius indican que el follaje es utilizado para proteger la madera aserrada contra termitas y otros insectos mediante la aplicacin de una capa de hojas entre las paredes y la madera durante la construccin.
Cuadro 3. Clasificacin de especies de acuerdo a la resistencia al ataque de termitas Especies altamente resistentes Especies moderadamente resistentes Especies susceptibles Revisin de Literatura J avier Arcos Roa 18 Manilkara zapota Cedrela odorata Alnus jorullensis Platymiscium yucatanum Guarea glabre Vochysia hondurensis Vetairea lundelli Swetenia macrophylla Schyzolobium parahybum Mirandaceltis monoica Licania platipus Pinus patula Lonchocarpus castilloi Guarea chichon Lysiloma acapulcensis Brosimum alicastrum Astronium graveolens Ampelocera hottlei Fuente: Prez et al. (1995).
Rocova y Konabe (1990), estudian la resistencia en campo de las ocho maderas ms comerciales y reportan que despus de 24 meses de exposicin, las maderas de Itsia palembanica y Pometria pinnata no fueron atacadas; las de Dracontemelon dao, Homalium foetidum y Alstonia scholaris tuvieron trazas de ataques en algunas estacas y todas las de Calophyllum spp., y Nothophagus spp., fueron totalmente destruidas, finalmente algunas estacas de Eucalyptus deglupta tambin fueron totalmente destruidas.
Scheffrahn (1991), presenta un resumen de los extractos de varias maderas con sus efectos antialimentarios y txicos para Isoptera.
Serit y colaboradores (1992), evaluaron la actividad antialimentaria de limonoides de Rutaceas y Meliaceas sobre la termita Reticulitermes speratus Kolbe, encontraron el siguiente orden de potencial antialimentario: Obacunona > Nomilina > Azadiractina > Limonino. Ninguno de los cuatro mostr toxicidad y tanto Obacunona como Nomilina tienen una absoluta actividad antialimentaria contra R. speratus.
Grace y Yamamoto (1994), estudian la resistencia natural de varias maderas al ataque de la termita subterrnea Coptotermes formosanus, concluyen en que la alimentacin de las termitas es igual en pino que en abeto Douglas (Pseudotsuga menziesii) pero significativamente menor en Chamaecyparis nootkatensis y Sequioia sempervirens. La reduccin en la alimentacin estuvo acompaada por una alta mortalidad, lo que indica que ambas especies contienen Revisin de Literatura J avier Arcos Roa 19 extractos en el duramen que son txicos a las termitas. Tambin compararon la susceptibilidad de la madera de Teka (Tectona grandis), con madera de Pseudotsuga menziesii tratada con productos comerciales y sin tratar, no hubo evidencias significativas de alimentacin en las muestras de Teka, los resultados indican que la durabilidad natural de esta madera es comparable con la resistencia de las maderas tratadas.
Sols (1999), cita algunos trabajos realizados sobre proteccin de la madera con productos naturales contra el ataque de termitas en el extranjero; en nuestro pas son pocos los trabajos, aunque se ha evaluado la resistencia natural de ciertas maderas Mexicanas.
Ramrez (1984), realiz una prueba con el fin de seleccionar de diferentes recubrimientos a aquellos que pudieran servir como medio de prevencin de daos causados por Cryptotermes brevis sobre madera de Pinus sp. En el trabajo se usaron diez recubrimientos comerciales, calificando la resistencia de los recubrimientos con base en la cantidad de perforaciones que recibieron.
Brcenas (1994), realiz una caracterizacin tecnolgica de 20 especies maderables de la selva lacandona, entre otras pruebas incluy una sobre biodeterioro con insectos y hongos; el tiempo de exposicin fue de tres aos, realizando revisiones peridicas cada tres meses los primeros dos aos, y despus cada seis. Los resultados son mostrados en una tabla, clasificando a las maderas dentro de tras categoras (durables, moderadamente durables y no durables).
Reyes et al., (1994), evaluaron la resistencia natural de la madera del duramen de trece especies forestales al ataque de Heterotermes sp. mediante micropruebas de campo; con objeto de evaluar la resistencia natural de estas maderas al ataque de esta termita subterrnea. La clasificacin que se obtuvo de las maderas estudiadas fue la siguiente: muy resistentes: Guarea chichon, Switwnia macrophylla, Quaribea funebris; resistentes: Pinus patula var. Longepedunculata, Lysiloma acapulcensis; poco resistentes: Pinus patula, P. Pseudostrobus, Quercus acatenanguensis; susceptibles: ninguna; muy susceptibles: Quercus crassifolia, Revisin de Literatura J avier Arcos Roa 20 Alnus jorullensis. Para Pinus teocote, Schizolobium parahibum y Licania platypus no se obtuvieron resultados concluyentes.
4.3. Extractos vegetales.
Diversos estudios se han enfocado al control de termitas, pero tienen el inconveniente de que resultan ser costosos por lo que se prefiere usar tratamientos sobre madera no infestada con el fin de prevenir su ataque. Son muchos los medios de prevencin disponibles, existen preservadores como la creosota, los compuestos oleosolubles y los hidrosolubles. Sin embargo, la produccin de sustancias qumicas anti-termitas tiende a daar el ambiente por lo que se ha sugerido limitar la produccin y uso de las mismas (Bultman y Southwell, 1976).
Algunas maderas presentan propiedades de resistencia al ataque de insectos y otros organismos degradadores. Esta resistencia natural principalmente es resultado de las adaptaciones que las plantas han desarrollado para disminuir o eliminar dicho ataques; como lo es la biosntesis de metabolitos secundarios que contienen uno o varios compuestos con una actividad significativa sobre el crecimiento y desarrollo de insectos, y que permite usarlos como antialimentarios (disuasivos) o insecticidas (Kreckova et al., 1988; Reyes et al., 1995).
Varios trabajos han sido realizados por diversos investigadores con el fin de conocer la resistencia natural de especies maderables y extraer sustancias que puedan servir como termicidas; encontrando que son varias las sustancias qumicas que actan como repelentes o txicos a ciertas especies de termitas estudiadas y que pueden servir como modelo para desarrollar preservadores de la madera no convencionales seguros al hombre y al ambiente (Reyes et al., 1997).
Los estudios generalmente se realizaron primero, para probar la resistencia natural de las maderas al ataque de tarmitas, posteriormente se obtienen extractos de las maderas que mostraron cierto grado de resistencia pero esto trae consigo que la madera sea destruida con el fin de obtener las sustancias antitermitas. Una alternativa para evitar la destruccin de madera Revisin de Literatura J avier Arcos Roa 21 con el fin de encontrar sustancias con actividad antitermitas, es el uso de otros tejidos en los cuales se encuentren quizs en mayor concentracin, grandes cantidades de metabolitos secundarios. La corteza de los encinos, es un tejido que contiene grandes cantidades de sustancias extraibles (Honorato y Hernndez, 1996; Sandoval, 1979; citados por Sols, 1999).
Wolcott (1953), realiz una prueba con Cryptotermes brevis Walker sobre la madera susceptible de Delonix regia (Bojer) Raf.; para esto sumergi muestras por 10 minutos en una solucin de pinosylvin al 0.01 %. Este compuesto fue inicialmente txico y cuando no lo fue, se observo una actividad repelente al ataque durante 565 das, lo cual representa un gran tiempo de proteccin, al compararse con otros qumicos previamente probados a la misma concentracin.
Conrado et al., (1958), hizo una extraccin sucesiva de la madera de Swietenia mahagoni, con disolventes selectivos; primero con ter de petrleo (punto de ebullicin de 30-60C), posteriormente, con ter etlico, acetona, alcohol al 95 5, agua, HCl al 3 %, NaOH al 2 %. Cada uno de los extractos obtenidos fue ensayado sumergiendo un bloque de Delonix regia de 0.7 x 2.0 x 3.0 cm por un periodo de 10 min, en una solucin de concentracin conocida de la sustancia bajo prueba. Despus de la impregnacin, los bloques fueron secados al sol y expuestos en cajas de petri a termites vivas de madera seca, Cryptotermes brevis , obteniendas de piezas de madera infestada. El extracto de ter de petrleo, demostr la mayor actividad repelente.
Major (1967), menciona que los compuestos presentes en la corteza de las races de Ginkgo biloba son ligeramente txicos a algunos insectos; pero lo son ms las sustancias obtenidas de las hojas del mismo rbol. La explicacin que el autor encuentra, es que las hojas tienen una alevada acidez; adems de que en otros trabajos se reportan estructuras qumicas similares an ambos tejidos.
Wilkins (1992), (citado por Mndez, 1998) presenta en una tabla las actividades antialimentaria, repelente o txica de fitoqumicos y extractos de madera de varias especies, estn arreglados por familia botnica. Presenta adems el efecto en las termitas y una breve Revisin de Literatura J avier Arcos Roa 22 historia del desarrollo de nuevos qumicos para el control de termitas. Ishida et al., (1992) trabajando con el aceite de nim A. indica, extraen con metanol, 11 compuestos limoniodes con propiedades antialimentarias contra termitas. El deacetilgedunino fue el ms activo y solo tres limonoides no mostraron actividad.
Seifert y Unger 1994, (citado por Mndez, 1998) encuentran que Triptantrino, indole-3- acetonitrilo y el cido p-coumarico aislados de las partes areas de Isatis tinctoria, muestran actividad antialimentaria y toxicidad hacia la termita Reticulitermes santonensis, y contra larvas del barrenador de las casas Hylotrupes bajulus as como actividad fungicida contra la pudricin del caf, causado por Coniophora puiteana.
Reyes et al.(1995), investigando las propiedades termicidas de los flavonoides y extractos del duramen del machiche Lonchocarpus castilloi, concluyen en que los flavonoides aislados del duramen de la madera, Castillina D y Castillina E mostraron deterrencia alimentaria proporcional a la concentracin aplicada y no mostraron un efecto txico contra la termita Cryptotermes brevis.
A su vez, McDaniel (1992) prob los extractos del duramen de Catalpa bignonioides al ataque de Reticulitermes flavipes; la extraccin la hizo con la mezcla de solventas acetona-hexano- agua (54:44:2 v/v), removiendo una solucin con caractersticas repelentes; mediante cromatografa de gases determin sus componentes; encontrando que el catalponol tuvo la mayor toxicidad sobre toallas de celulosa; mientras que sobre cubos, el catalpalacton mostr la mayor actividad repelente.
Mori et al., (1997) obtuvieron extractos con acetona de la corteza de 51 distintas especies arbreas caducifolias con el fin de determinar su actividad antifngica contra patgenos y hongos pudridores. Los hongos patgenos de plantas evaluados fueron siete especies y cuatro hongos que causan pudricin de maderas. Los resultados mostraron slo una actividad dbil, sin embargo, el gnero Magnolia, especialmente M. obovata tuvo una elevada actividad fngica. En otro trabajo, Mori (1995) menciona, que de manera general, los extractos Revisin de Literatura J avier Arcos Roa 23 probados de especies caducifolias tienen menor actividad contra estos hongos, comparados con los de conferas.
Sols, (1999) investiga a travs de bioensayos bajo alimentacin selectiva y confinamiento el efecto insecticida de los extractos de cortaza de Quercus crassifolia y Quercus obtusa sobre la termita de madera seca I. marginipennis; los cuales fueron impregnados en papel filtro, a fin de observar la actividad repelente contra los individuos. En ambas pruebas, los resultados mostraron que el ataque de termitas fue mayor en los papeles control que en los impregnados, pero la mortalidad fue mayor en los papeles impregnados que en los control. Sin embargo, los extractros empleados no mostraron un efecto txico, ya que al perecer la mortalidad fue causada por la falta de alimento y no como resultado de compuestos qumicos letales a la termita.
4.4. Usos del nim en el control de plagas
El aceite de nim se extrae de las semillas de A. indica, rbol de la familia Meliaceae, originario de la India y Birmania; fue introducido en Amrica desde hace 20 aos. Recientemente se han hecho plantaciones por parte del Colegio de Postgraduados en Ciencias Agrcolas en Crdoba y Veracruz (Rodrguez y Martnez, 1998).
Delate y Grace (1995), al estudiar la susceptibilidad del rbol de nim A. indica, al ataque de termitas subterrneas Coptotermes formosanus concluyen que ste no es completamente resistente al ataque, pero las propiedades antialimentarias de la madera y la corteza, as como la toxicidad de la corteza, hacen que este rbol pueda ser utilizado para arboricultura en reas donde las termitas son un problema en los arboles.
Las diferentes partes del rbol de nim aparecen como una promesa en el control de plagas de granos almacenados y de cultivos agrcolas en los pases en vas de desarrollo y tambin para los agricultores de recursos limitados (Ahmed y Grainge, 1986).
Revisin de Literatura J avier Arcos Roa 24 Segn Griange et al. ( citados por Ahmed y Grainge, 1986), el nim posee constituyentes biolgicamente activos en hojas, frutos, corteza y semillas, como los triterpenoides, azadirachtina, salanina y meliantrol. Estos compuestos controlan ms de 100 especies de insectos, adems de caros y nemtodos, incluyendo plagas de importancia econmica.
Los modos de accin incluyen efectos antialimentarios, repelentes, hormonales, reguladores del crecimiento, acaricidas y nematicidas, los cuales actan desde el estado de larva hasta adulto, dependiendo de la plaga que se trate (Ahmed y Grainge, 1986).
El aceite de nim se obtiene al romper el integumento de las semillas. Una simple mquina elctrica o una de traccin animal puede ser utilizada para obtener el aceite (Ahmed y Grainge, 1986).
La pasta del nim es lo que queda al extraer el aceite de las semillas (Ahmed y Grainge, 1986). La pasta ha sido reportada como un efectivo repelente contra las plagas del grano de trigo almacenado y se utiliza a concentraciones que van de 2.9 a 9.4 % (Prutchi, citado por Ketkar, 1976).
Contra las plagas de los granos almacenados se han utilizado hojas, semilla, extractos de semilla, aceite y pasta de nim (Garza, 1987).
Las hojas del nim han sido utilizadas de diferentes maneras (Garza, 1987). Los agricultores indopakistanos mezclan de 2 a 5 kg de hojas secas de nim por cada 100 kg de grano (Ahmed y Koppel, citados por Ahmed y Grainge, 1986). La comprobacin de la efectividad de este mtodo fue hecha por Atwal et al. (citado por Ketkar, 1976), quienes utilizaron hojas de nim a razn de un 2 % del total de grano de trigo tratado, incluyendo en las bolsas 30 adultos de Tribolium castaneum; el resultado demostr que las hojas del nim protegieron al grano contra el dao de esta especie por un tiempo mnimo de dos meses. En otro estudio (Teotia et al., citados por Ketkar, 1976), se utilizaron hojas de nim a razn de 4 % y 8 % de cada bolsa conteniendo trigo y se encontr que fue efectivo contra el dao de Sitotroga cerealella por Revisin de Literatura J avier Arcos Roa 25 ms de 135 das, adems sealan que este es un mtodo econmico para proteger la semilla de trigo que se va a almacenar.
Algunos agricultores indopakistanos remojan sacos vacios durante una noche en 100 litros de agua que contiene de 2 a 10 kg de hojas de nim, luego los ponen a secar y finalmente, los llenan con el grano; asimismo, mezclan barro y una pasta hecha con hojas de nim y con esto construyen recipientes para almacenar el grano (Ahmed y Grainge, 1986).
La semilla del nim se utiliza principalmente en forma de polvo mezclado con el grano que se quiere proteger contra el ataque de insectos (Garza, 1987). Para obtener las semillas del Neem, Ahmed y Grainge (1986), sealan que los agricultores colectan el fruto, lo despulpan remojndolo en agua de 2 a 5 das y luego lo pisotean y separan la semilla.
J otwani y Sircar (1967), reportaron que la semilla del nim es un excelente repelente contra Trogoderma granarium, Rhyzopertha dominica y Sitophilus oryzae. Ellos trabajaron con semilla de nim en polvo a dosis de 0.5, 1.0 y 2.0 % del total de grano tratado.
En experimentos de laboratorio en Tongo (Akow-Edi, 1983) se trat maz con polvo de semilla de nim a concentraciones de 20, 40 y 80 g/kg. Los dos ltimos tratamientos tuvieron un efecto repelente significativo contra Tribolium confusum y Sitophilus zeamais.
Tambin se han probado extractos de semillas de nim como repelentes de insectos. En un estudio (Syed, citado por Ketkar, 1976) hizo una extraccin de 1,000 g de semilla en polvo con ter bajo una temperatura de 33C; al eliminar el solvente se obtuvieron 60 g de extracto (6 %). Este producto mostr un efecto repelente sobre Sitophilus oryzae y Tribolium castaneum al alimentarse sobre granos de trigo tratados por inmersin.
Savitri et al. (citados por Ketkar, 1976), estudiaron la eficacia del aceite de nim en el control de tres importantes plagas de los granos almacenados: Rhyzopertha dominica, Sitophilus oryzae y Sitotroga cerealella. Ellos impregnaron costales de yute con aceite de nim a dosis de 10, 20, 40, 60, 80 y 100 mg/pie. Los resultados indicaron que la dosis de 100 mg/pie redujo Revisin de Literatura J avier Arcos Roa 26 significativamente la poblacin de adultos y fue un excelente repelente contra las plagas mencionadas.
J ayaraj (citado por Ketker, 1976), encontr que una concentracin del 1 % de aceite de nim como tratamiento a semillas de vegetales las preserv por diez meses libres de infestaciones de Callochobruchus maculatus (Coleoptera: Bruchidae).
Contra las plagas de los cultivos en el campo, el nim ha sido utilizado de diversas maneras, tales como: hojas, extractos, suspensiones de polvo a partir del fruto, extractos de semillas, aceite y pasta (Garza, 1987).
Existe un reporte de 1930 (Hussain, citado por Ketkar, 1976), en el cual se sealan que 17.79 ton/ha de hojas de nim redujeron el ataque de termitas en trigo a 0.7 % comparado con el testigo que tuvo un ataque de 8 %.
Desde 1937 Volkonski (citado por Ketkar, 1976) seal que las langostas no haban daado al rbol nim y que las dems plantas podan ser protegidas si se asperjaban con extractos preparados de sus hojas. Anot que el principio activo poda ser extrado con agua caliente, alcohol, cloroformo o benzeno, pero no con ter de petrleo. El extracto de 1 kg de hojas secas en 37.85 lt de agua dio proteccin efectiva contra Schistocerca gregari (Forsk), pero se necesitaba 2.5 veces ms potencia para otras especies. Los extractos no fueron venenosos para mamferos y no fueron afectados por el sol y la lluvia.
Volkonski (1937; citado por Ketkar, 1976) recomend que se hicieran extractos concentrados que luego podran ser diluidos en agua para asperjarse. Estos extractos se preparaban de manera barata y prctica en un aparato de extraccin continua usando alcohol, el cual debia evaporarse a 1/5 del peso de las hojas secas bajo una presin reducida. Tambin se recomend agregar un 20 % de glicerina para facilitar la emulsin; el agua deba agregarse justo antes de hacer el preparado.
Revisin de Literatura J avier Arcos Roa 27 Holman (citado por Ketkar, 1976) encontr que los extractos de las hojas del nim controlaron langostas y concluy que los extractos podran ser usados contra plagas de frutales, hortalizas y cereales. En el cultivo de la alfalfa se encontr que el jugo obtenido de la maceracin de hojas de nim caus un 25 % de mortalidad, al usarlo como veneno de contacto contra larvas del picudo de la alfalfa (Chopra, citado por Ketkar, 1976).
Sandhu et al. (citados por Ketkar, 1976) estudi el efecto antialimentario del polvo del fruto del nim contra Chrotogonus trachypterus (Blanchard), la cual es una plaga importante en la India. Se prepararon suspensiones en agua del polvo del fruto a concentraciones del 1 y 2 % y se asperjaron 10 plantas por cada repeticin con un atomizador manual. La suspensin al 2 % fue ms efectiva que la suspensin al 1 % y no permiti que los insectos se alimentaran sobre las plantas asperjadas.
Tambin se han usado extractos de semillas de nim. Mane (citado por Ketkar, 1976) encontr que una suspensin acuosa de semillas de nim dio una proteccin completa a las hojas de higuerilla en contra de Euproctis lunata a una concentracin de 0.5 %. Babu (citado por Ketkar, 1976) estudi la eficacia de extractos de semilla aplastada de nim en diferentes solventes (agua, alcohol, acetona y cloroformo) como un repelente de E. lunata en higuerilla. El resultado mostr repelencia absoluta a concentraciones de 0.0156 % en alcohol, 0.0312 % en agua y 0.0625 % en cloroformo y acetona.
El polvo de semilla de nim no fue efectivo para controlar gallina ciega (Raoedo, citado por Ketkar, 1976).
Mariappan y Saxena (1984) trabajaron mezclando aceite de Annona squamosa L., y aceite de Neem A. indica, en proporciones de 1:1, 1:2 y 1:4 (vol/vol) respectivamente y a concentraciones de 5, 10 y 20 % contra el saltamontes del arroz Nephotettix virescens. A cada una de las soluciones se les agreg 1 % de teepol, el cual es un lquido detergente. La mezcla de ambos aceites fue significativamente ms efectiva en la reduccin de la supervivencia de N. virescens, que cualquiera de ellos en forma individual. Por ejemplo la concentracin ms baja Revisin de Literatura J avier Arcos Roa 28 (5 %) de la mezcla de aceites con una proporcin de 1:4 fue tan efectiva como el 20 % de concentracin del aceite de A. squamosa.
Saxena y Khan (1985), encontraron que el aceite de la semilla del nim, emulsificado en agua y con 1.6 % de teepol (lquido detergente) fue altamente efectivo en la reduccin del saltamontes Nilapavarta lugens y en la eliminacin de la transmisin de virus que este insecto hace en el cultivo del arroz. Generalmente la supervivencia de los insectos y la transmisin de virus decreci al incrementar las concentraciones de aceite de nim. Despus de tres das de exposicin, los insectos no pudieron transmitir los virus a las plantas asperjadas con una solucin de aceite de nim a una concentracin del 50 %.
Saxena et al. (1984) encontraron que la pasta del nim muestra posibilidades de ser usada contra el saltamontes caf del arroz, Nilapavarta lugens (Stal) en pruebas de campo y de laboratorio. Ellos trataron plantas de arroz con una mezcla de tres partes de pasta de Neem y 10 partes de urea. La mezcla obtenida se aplic al suelo a razn de 120 kg/ha. En las pruebas efectuadas en el campo, se encontr que la aplicacin de dicha mezcla fue altamente significativa en el control de N. lugens tanto en terrenos hmedos como en secos.
Ortega et al., (1999) determinaron la efectividad biolgica de un extracto acuso de la semilla de nim A. indica, para disminuir las poblaciones de la mosquita blanca y por ende la incidencia viral, en jitomate bajo condiciones de riego. Probaron un extracto acuoso a dosis del 5 % y un aceite comercial a dosis de 250 ml/100 litros de agua. Estos tratamientos fueron comparados con un testigo (endosulfn 1.5 litros por hactrea) y un testigo absoluto. Los resultados mostraron que las plantas tratadas con el extracto acuoso de nim A. indica , el aceite y el endosulfn hubo menor nmero de adultos a los 63 das despus del transplante, comparado a lo registrado en el testigo (agua). De esta manera el tratamiento ms infestado fue aquel en el que se trat con agua, ya que se registr un promedio de 20 ninfas/foliolo; valor alto cuando se compara con el registrado con lo obtenido en los lotes donde se aplic el extracto acuso de nim (3.7 ninfas/foliolo). Respecto a la incidencia viral registrada por tratamiento, el anlisis estadstico no mostr diferencias notables.
Revisin de Literatura J avier Arcos Roa 29 Gutirrez et al.,(1999) experimentan la efectividad del aceite de nim A. indica para el control del gusano cogollero Spodoptera frugiperda; mostrando que el anlisis estadstico en el experimento de diferentes fechas de aplicacin, el tratamiento antes de la infestacin protegi mejor (aceite de nim en dosis de 288.6 ml por litro de agua) y obtuvo un dao casi igual al tratado con el insecticida qumico Pounce Granulado (Permetrina 10 %). En otro experimento de dosis el uso de 288.6 y 28.86 ml del aceite de nim por litro de agua, disminuyeron el dao de gusano cogollero.
Rodrguez, (1999) menciona que el nim A. indica se ha empleado para combatir hongos, garrapatas, nemtodos e insectos. Entre estos ltimos se han combatido los siguientes: barrenador de las guas de las cucurbitceas, chinches, diabrticas, gorgojos, gusano alfiler del tomate, gusano bellotero, gusano cogollero, gusano del cuerno, gusano falso medidor, gusano terciopelo, minador de los ctricos, moscas, moscas blancas, mosquitos, palomilla dorso de diamante, piojos, polilla del tomate, pulgones y trips, en los cultivos de algodn, auyama, arroz, berenjena, brcoli, cacahuate, caup, ctricos, coliflor, frijol, habichuela, maz, meln, pepino, repollo, sanda y tomate. Tambien se han empleado en huertos pequeos y en cultivos organopnicos, adems de la proteccin de granos almacenados. As como en parsitos del hombre y de animales domsticos.
Tambin, agrega Rodrguez, (1999) que el nim A. indica se ha utilizado como polvo o macerado (machacado o licuado) en agua, la hoja, el fruto, la semilla, adems del aceite obtenido de la semilla. La hoja se prepara al 2.0 %, el fruto desde el 4 al 13.3 5, el polvo de la semilla desde el 0.1 % al 5.0 % y el aceite obtenido de la semilla desde el 2.0 al 3.0 %, lo que denota, entre otras cosas, que los principios activos se encuentran distribuidos en todo el rbol (pero en mayor concentracin en la semilla).
Por ltimo, Rodrguez, (1999) menciona que el nim controla aproximadamente 200 especies de insectos al provocar inhibicin de la alimentacin, inhibicin del crecimiento e inhibicin de la ovoposicin en diferentes fases y diversos niveles. No funciona como veneno de contacto, por lo que no es tan agresivo ni fulminante como los insecticidas convencionales, de aqu que no se considera un insecticida sino un insectisttico. Primeramente provoca Revisin de Literatura J avier Arcos Roa 30 repelencia en la alimentacin, afectando el comportamiento del insecto a diferente nivel, de acuerdo a la dosis del preparado, observndose poco o ningn dao en la planta, con la presencia de la plaga. En caso de que la inhibicin de la alimentacin sea parcial, la ingestin del nim afectar el metabolismo del insecto. Interferir en los procesos de la muda, de tal manera que se observar una inhibicin en el crecimiento, desde una prolongacin en tiempo de la fase larval hasta la muerte de la larva por la deformacin de la cutcula. En caso de ser parcial la inhibicin del crecimiento y el insecto consiga continuar su desarrollo, puede presentarse formas intermedias entre larva y pupa, pupas deformes o pupas pequeas; como consecuencia de la inhibicin en la alimentacin y en el crecimiento durante el estado larval. Los adultos que emergen de los insectos (ninfas o larvas) tratados con nim sufrirn la toxicidad: no se despegarn de la exuvia pupal, tendrn alas, patas y antenas deformes, reas del exoesqueleto anormales, o sern adultos pequeos. Las hembras tendrn problemas en sus ovarios u otras rganos reproductivos, por lo que sern estriles o pondrn pocos huevecillos. Algunos de estos huevecillos podrn ser inviables y no darn lugar a larvas. En este sentido, con la aplicacin de preparados de nim no se ve mortalidad de insectos, se ve poco o nada de dao al cultivo y poca o nada de poblacin de la plaga, precisamente por afectar el comportamiento y la fisiologa de la plaga, lo que induce a definir que el nim no es un inseticida es un insectisttico. Los efectos subletales producidos por su aplicacin alteran el comportamiento, el metabolismo y la fisiologa del insecto provocando una toxicidad ms lenta, que manifiesta sus efectos en un tiempo ms largo, comparado con los insecticidas organosintticos.
Por otro lado, se han comercializado productos derivados del nim, como es el oil spray (concentrado de aceite de A. indica), cuyas propiedades naturales como repelente e inhibidor de la alimetacin de los insectos, as como del crecimiento de los mismos; otro producto parecido a este que ya esta a la venta, es el Neem-x., el cual afecta el crecimento y los estados de los insectos al antagonizar en la biosntesis y/o metabolismo de la hormona ecdisona, as mismo tiene propiedades repelentes e inhibidoras de la alimentacin de los insectos (Faras, 1999).
Revisin de Literatura J avier Arcos Roa 31
Materiales y Mtodos J avier Arcos Roa 32 5. MATERIALES Y MTODOS
5.1. Localizacin del sitio donde se desarrollo el estudio.
El presente trabajo de investigacin se realiz en el laboratorio de Entomologa Forestal de la Divisin de Ciencias Forestales en la Universidad Autnoma Chapingo, localizada en el Municipio de Texcoco, Estado de Mxico en el Km 38.5, carretera Mxico-Texcoco y situada a 19 30 LN y 98 59 LW.
5.2. Colecta de termitas.
La colecta de termitas de la madera seca I. marginipennis se realiz en el estado de Mxico, ya que es en la zona central de nuestro pas donde el ataque sobre madera en uso a causado importantes prdidas econmicas. Se colect una colonia con representantes de todas las castas (ninfas, soldados, reproductores); La casta de termitas empleadas en la prueba fueron las ninfas mayores al tercer instar.
5.3. Mantenimiento de las termitas.
Una vez realizado la colecta, las termitas I. marginipennis se mantuvieron en el laboratorio durante una semana anterior a la prueba con el fin de lograr una aclimatacin a las condiciones de laboratorio y poder trabajar con ellas; se limpiaron los residuos, polvo y aserrn de madera para colocarlas dentro de vasos de plstico (de 5 cm de dimetro del No.4A) acondicionadas en su interior con crculos de papel filtro Whatman (5 cm de dimetro), el cual servi de alimento a las termitas. Los vasos de plstico con las termitas se mantuvieron en estufa (Marca Felisa, Modelo 134A) a una temperatura de 26C 2C, humedad relativa ambiente y completa oscuridad.
Materiales y Mtodos J avier Arcos Roa 33 5.4. Obtencin de la substancia para impregnar.
La solucin de aceite de nim que se prepar para usarse como termicida fue proporcionado por el Dr. Cesreo Rodrguez del Instituto de Fitosanidad del Colegio de Postgraduados.
5.5. Metodologa de establecimiento de ensayos
5.5.1. Tratamientos.
Se prepararon soluciones acuosas de aceite de nim al 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, y 3.0 % colocndolas en vasos de plstico, donde se sumergieron discos de papel filtro (Whatman, de 5 cm de dimetro) durante cinco minutos y fueron secados al aire libre durante 24 hrs. Los discos de papel sin aceite (control) solo se sumergieron en agua, por ser esta el solvente utilizado para hacer las soluciones de aceite, los tratamientos probados fueron:
Se realizaron dos pruebas experimentales sobre papel filtro (Figura 1):
a) Selectiva. El mtodo selectivo consiste en que en el mismo vaso se coloca material impregnado con T0 sin tratar y Ti con el i-simo tratamiento (i=1, 2, 3, 4, 5), con la finalidad de obsevar cual es la preferencia de alimentacin (Fig 1b). Para ello, se cortaron discos de papel filtro en dos partes iguales, impregnando una seccin con una concentracin, la otra slo con agua (el control) y se agregaron 25 termitas (ninfas) y un soldado en cada vaso.
b) Confinamiento. El mtodo de confinamiento consiste en que las ninfas nicamente tienen papel impregnado con el i-simo tratamiento (0, 1, 2, 3, 4, 5) para alimentarse (Figura 1c). Para ello, se colocaron en vasos de plstico un disco de papel impregnado con una concentracin de aceite de nim o con agua para el control y se agregaron 25 termitas y un soldado.
Fig. 1. A: Vaso de plstico que funcion de contenedor para mantener las termitas en los experimentos.
5.5.3. Diseo experimental
A
5 cm de dimetro
B C
Selectiva Confinamiento To Ti
Ti Materiales y Mtodos J avier Arcos Roa 35 Se utiliz un diseo experimental completamente al azar con cinco repeticiones, cinco y seis tratamientos para el selectivo y confinamiento respectivamente; la unidad experimental estuvo constituida por cada vaso de plstico ms papel filtro y 25 ninfas. En total fueron 1,375 ninfas. Las unidades experimentales se mantuvieron a una temperatura de 26 C +2 C, humedad relativa ambiente y completa obscuridad durante 64 das que dur el experimento.
5.6. Inhibicin de alimentacin
Las propiedades antialimentarias de aceite de nim se investigaron mediante la prueba selectiva.
Se registr el peso del papel filtro al finalizar las ocho semanas para determinar el consumo y los datos obtenidos fueron analizados en una prueba apareada (Infante y Zrate, 1996). Por otro lado se calcul el porcentaje de deterrencia alimentaria mediante dos procedimientos, uno con el ndice de Deterrencia Alimentaria (IDA) =(1- T/C) X 100 donde: T y C son las reas consumidas en las secciones tratadas y control respectivamente (adaptado de Hassanali y Lawande (1989) citados por Valladares et al.,1997); y mediante el ndice de repelencia alimentaria de Nielsen (Q), Q=T / (T +C), donde T y C tienen el mismo significado que lneas el anterior.
Los valores obtenidos de los ndices se transformaron mediante la transformacin ARCO SENO (RAIZ CUADRADA (VARIABLE)) y se practicaron anlisis de varianza y pruebas de comparaciones mltiples de Tukey (con =0.05 para determinar cuales eran los tratamientos diferentes, en caso de presentarse) con el paquete de cmputo SAS varsin 6.04, mediante el procedimiento Proc Glm (Statistical Analysis System, 1988).
5.7. Efecto insecticida y regulador del crecimiento.
Materiales y Mtodos J avier Arcos Roa 36 El efecto insecticida y como regulador del crecimiento del aceite de nim se investig mediante la prueba de confinamiento y el parmetro utilizado para evaluar el efecto insecticida (txico) fue la mortalidad de individuos. Para evaluar el efecto como regulador del crecimiento se contaron las exuvias.
En la toma de datos se registr la mortalidad, as como el nmero de exuvias en intervalos de ocho das durante ocho semanas y al finalizar se pes el papel impregnado con el i-simo tratamiento para determinar el porcentaje consumido.
Posteriormente el nmero de exuvias se analiz mediante la prueba no paramtrica de Wilcoxon (SAS, 1988); y haciendo la transformacin ya indicada se practicaron anlisis de varianza para los datos de mortalidad.
Adicionalmente con el objeto de probar el efecto insecticida de contacto se asperjaron 10 termitas en cinco repeticiones con las diferentes concentraciones del aceite de nim, se colocaron en vasos con papel sin impregnar, tomando la mortalidad en intervalos de 48 hr durante 20 das, y as efectuar las transformaciones para practicar el anlisis similar a los anteriores.
Resultados y Discusin J avier Arcos Roa 37 6. RESULTADOS Y DISCUSIN
6.1. Inhibicin de alimentacin
En principio, con el fin de encontrar diferencias en el consumo del papel filtro entre el control y tratado, se procedi a realizar una prueba apareada, que se muestra en la quinta columna del Cuadro 4; de tal manera que se encontr, que el anlisis estadstico del consumo de papel filtro por parte de las termitas indica diferencia altamente significativa (p<0.01) entre el tratado y control del papel filtro (Cuadro 4) para todos los tratamientos, es decir, existe una preferencia de consumo en el papel sin aceite que con el impregnado, aun con la dosis ms baja, lo que se puede interpretar como un efecto en la inhibicin de alimentacin.
Cuadro 4. Efecto del aceite de nim Azadirachta indica sobre la alimentacin de la termita de madera seca Incisitermes marginipennis. Concentracin rea de papel filtro de n promedio consumida % Pr>F IDA % Q aceite % Tratado Control 0.5 5 6.66 51.11 0.0002 70.66 a 0.082 a (6.00)* (46.00)* 1.0 5 0.63 46.66 0.0020 98.63 a 0.013 a (0.57)* (42.00)* 1.5 5 2.10 62.22 0.0010 96.63 a 0.032 a (1.89)* (56.10)* 2.0 5 0.23 53.44 0.0010 99.56 a 0.004 a (0.21)* (48.10)* 3.0 5 0.23 51.11 0.0010 99.54 a 0.004 a (0.21)* (46.00)* Medias con la misma letra en columnas no son significativamente diferentes (=0.05), prueba de Tukey. * Los valores entre parentesis, estn expresados en miligramos.
En segundo termino, la inhibicin de la alimentacin se calcul mediante dos ndices: el ndice de deterrencia alimentaria (IDA) y el ndice de repelencia alimentaria de Nielsen (Q). Los resultados obtenidos se muestran en las dos ltimas columnas del Cuadro 4. A pesar de Resultados y Discusin J avier Arcos Roa 38 que los datos al realizar el anlisis estadstico fueron transformados, en el Cuadro 4 se presentan los valores originales.
Al analizar el ndice de deterrencia alimentaria (IDA) el anlisis de varianza (p<0.05) no muestra diferencia significativa entre los tratamientos (Cuadro 7 del apndice), nicamente mostraron diferencias numricas (Cuadro 4), de tal manera que existi una deterrencia alimentaria de 70.66 % en la concentracin ms baja (0.5 %) y por otro lado la deterrencia fue del 98.63 %, 96.63 %, 99.56 % y 99.54 para el resto de las concentraciones (1.0 %, 1.5 %, 2.0 %, 3.0 %) respectivamente. Esto quiere decir que hay una preferencia por el consumo en las secciones de papel sin tratar que en las tratadas, como puede notarse en las figuras 2a-2e (figura 2).
En el caso de Q (ndice de repelencia alimenteria de Nielsen) el anlisis de varianza (p<0.05) no muestra alguna diferencia significativa entre los tratamientos (Cuadro 8 del apndice), nicamente muestra diferencias numricas como puede observarse en la ltima columna del Cuadro 4, por tal motivo cabe sealar que existi cierto grado de repelencia del 0.082 en la concentracin al 0.5 % de aceite de nim, y en el resto de los tratamientos (1.0 %, 1.5 %, 2.0 %, y 3.0 %), obteniendo valores del 0.013, 0.032, 0.004, y 0.004 respectivamente.
La inhibicin alimentaria se puede apreciar en ambos ndices empleados. Para el caso del ndice de deterrencia (palatabilidad al alimento) alimentaria (IDA), los valores cercanos a 100 son indicadores de inhibicin de la alimentacin; todas las concentraciones presentaron una gran inhibicin, en un rango del 70.66 % al 99.56 %. El ndice de repelencia (rechazan el alimento) alimentaria de Nielsen (Q) muestra una interpretacin similar al IDA; los valores cercanos a cero indican mayor inhibicin de la alimentacin, de tal manera que se encuentran en un rango desde 0.082 hasta 0.004. El anlisis de varianza de los ndices no muestra diferencias significativas entre las concentraciones, por lo que podemos decir que la dosis mnima (0.5 %) causa el mismo efecto de repelencia o deterrencia que la mayor dosis estudiada.
Resultados y Discusin J avier Arcos Roa 39
Resultados y Discusin J avier Arcos Roa 40 Estos resultados fueron similares en el efecto deterrente y repelente a los obtenidos por Savitri et al., (citado por Ketkar, 1976), y posiblemente se debe al efecto que posee el aceite de nim con sus constituyentes, triterpenoides, azadirachtina, salanina, y meliantrol, que controlan gran cantidad de insectos, caros, nemtodos, incluyendo plagas de importancia econmica, como lo menciona Grainge et al. (citado por Ahmed y Grainge, 1986). Adems J ayaraj (citado por Ketkar, 1976), encontr que una concentracin del 1 % de aceite de nim como tratamientos a semillas de vegetales las conserv por diez meses libres de infestaciones de Callochobruchus maculatus (Coleoptera: Bruchidae).
As mismo Warthen,1976; National Academy Press, 1992 (citados por Grainge et al., 1985); sealaron que en Reticulitermes santonensis este aceite tiene un efecto repelente y adems antialimentario.
Adicionalmente en la prueba de confinamiento se encontr que el anlisis estadstico (Cuadro 9 del apndice) indica que hay al menos un tratamiento diferente (p<0.05); la comparacin de medias de Tukey (Cuadro 10 del apndice) muestra diferencias entre tratamientos despus de 64 das de la aplicacin, presentndose una diferencia de consumo entre el control y el resto de los tratamientos ( 0.5 %, 1.0 %, 1.5 %, 2.0 % y 3.0 %), como se observa en la Figura 3.
Esto se explica debido al incremento del aceite; ya que conforme aumenta la dosis, el consumo del papel filtro por parte de las termitas disminuye, de tal manera que en el control present la mayor rea consumida por la ausencia del nim, como se puede visualizar en las Figuras 4a-4f (Figura 4) y comprobar grficamente en la Figura 3.
Resultados y Discusin J avier Arcos Roa 41 Figura 3. Comparacin de medias de la variable prdida de peso (mg), bajo diferentes dosis de aceite de nim. Tratamientos con la misma letra son iguales entre si (Tukey, =0.05).
Los resultados obtenidos concuerdan con Schmutterer (1988), Schumutterer y Ascher (1987), J otwani y Srivastava (1981) y National Academy Press, 1992 (citados por Grainge et al., 1985) los cuales mencionan que en la semilla se encuentran la azadirachtina y otras sustancias que causan los siguientes efectos: a) Regulacin hormonal del crecimiento en los insectos, b) Repelencia y antialimentacin, c) Reduccin de fecundidad y huevecillos estriles, d) Reduccin del comportamiento y de la actividad general, e) Inhibicin del desarrollo de huevecillos y pupas, f) Impide la ovoposicin, g) Interrumpe la comunicacin sexual, h) Inhibe la formacin de quitina, i) Acta como veneno estomacal.
a b b b b b 0 10 20 30 40 50 60 70 0 0.5 1 1.5 2 3 Dosis (%) C o n s u m o
( m g ) Resultados y Discusin J avier Arcos Roa 42
6.2. Efecto insecticida y regulador del crecimiento.
Resultados y Discusin J avier Arcos Roa 43
6.2.1. Efecto en mortalidad por ingestin del nim.
En los anlisis de varianza (p<0.05) se nota que no existen diferencias significativas (Cuadros 11 al 18 del apndice) entre tratamientos en los primeros 64 das despus de aplicados los tratamientos, presentando nicamente diferencias numericas con una mayor mortandad en la concentracin del 2.0 % (45.6 %) y la menor en el tratamiento al 1.5 % con 19.2 % de mortalidad (figura 5).
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 8 16 24 32 40 48 56 64 Tiempo (das) M o r t a l i d a d a c u m u l a d a % 0.0 % 0.5 % 1.0 % 1.5 % 2.0 % 3.0 %
Figura 5. Efecto en mortalidad de I. marginipennis tratado con aceite de nim A.indica.
Los resultados de mortalidad presentados en la Figura 5, no es por efecto del aceite de nim, mas bien se le atribuye al manejo de las termitas y por inanicin.
Este efecto en mortalidad encontrado, no es similar al comentado por la National Academy Press, 1992 (citados por Grainge et al., 1985) en la que menciona, que algunos rdenes de Resultados y Discusin J avier Arcos Roa 44 importancia como plagas son afectados por los productos a base de nim; pero adems, agregan que el efecto antialimentario es el ms importante. Por otro lado dice que recientemente se ha descubierto un nuevo efecto, el de que cambian los hbitos gregarios a solitarias.
6.2.2. Efecto en mortalidad por contacto del nim.
Al aplicar el aceite de nim directamente a las termitas se encontr que los anlisis de varianza (Cuadros 27 al 28 del apndice) reflejan que hay diferencias significativas (p<0.05) entre tratamientos; similarmente en la comparacin de medias Tukey (Cuadro 5) se aprecia que existe diferencias entre tratamientos, presentando una mayor mortalidad en los primeros 20 das despus de aplicar el tratamiento al 0.5 % (64 % de mortalidad en promedio), registrando menor mortalidad en la concentracin al 1.5 % (18 % en promedio), por otro lado la mortalidad en 2.0 % y 3.0 % estn en termino medio (42 % y 30 % respectivamente), mas en la media fue de 56 % de mortalidad en promedio que se present en el control (0.0 % de concentracin).
Cuadro 5. Mortalidad promedio acumulado de Incisitermes marginipennis asperjados con aceite de nim Azadirachta indica. Cocentracin Das despus del tratamiento de ______________________(% de mortalidad)_________________________ aceite % 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 0.0 0 a 8 a 12 a 18 a 22 ab 24 a 32 a 38 a 50 ab 56 ab 0.5 2 a 10 a 24 a 26 a 36 a 36 a 46 a 50 a 56 a 64 a 1.0 0 a 4 a 6 a 6 a 6 b 14 a 18 a 24 a 24 ab 26 bc 1.5 0 a 4 a 12 a 12 a 12 ab 12 a 14 a 18 a 18 b 18 c 2.0 4 a 6 a 14 a 14 a 16 ab 20 a 30 a 34 a 38 ab 42 abc 3.0 2 a 6 a 16 a 20 a 22 ab 22 a 26 a 40 a 30 ab 30 abc Medias con la misma letra en columna no son significativamente diferentes (=0.05), prueba de Tukey.
Este comportamiento es debido a que el aceite de nim no presenta caractersticas insecticidas (txicas) al estar en contacto con las termitas, ya que un 64 % y 56 % de mortalidad se present en las concentraciones 0.5 % y 0.0 % de aceite respectivamente y una menor Resultados y Discusin J avier Arcos Roa 45 mortalidad (26 y 18 %) se present en 1.0 y 1.5 % respectivamente, es decir, no hay un efecto creciente en la muerte al incrementar la concentracin, mas bien la mortalidad se le atribuye al manejo de las termitas.
El efecto significativo presentado en el Cuadro 5, no es por el contacto con el aceite de nim, ya que la mxima mortalidad se presenta en las concentraciones ms bajas (0.5 % y 0.0 %), no descartando de que exista un efecto en la mortalidad; estos datos difieren de que lo que comenta National Academy Press, 1992 (citados por Grainge et al., 1985) para algunos rdenes de Coleoptera: Las larvas de los escarabajos coccinelidos fitfagos (escarabajo mexicano de la haba y escarabajo del pepino) y crisomlidos (escarabajo colorado de la papa entre otros), rehusan comer plantas tratadas con nim, crecen poco y algunos mueren por contacto. Por otro lado el rbol nim tiene una gran similitud en compuestos biolgicamente activos (azadirachtina) con el paraiso Melia azedarach (Garza ,1987); en este marco Valladares et al. (1997) resumen que los extractos de M. azedarch inhiben la alimentacin de Xanthogalleruca luteola y negativamente afectan la sobrevivencia y desarrollo.
6.2.3. Efecto en el crecimiento.
El anlisis de Wilcoxon (Cuadro 29 del apndice) muestran que no hay diferencia significativa (p<0.05) entre los tratamientos, sin embargo en la comparacin de medias (Cuadro 6) se registraron diferencias numricas entre los tratamientos (0.0, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0 y 3.0 % de concentracin de aceite de nim) en el cambio de muda en los primeros 64 das, obteniendo un mayor numero de exuvias en el control (0.0 %) de 8 respecto al menor de 3.6 en 2.0 % de concentracin.
El nmero de exuvias presentes en el Testigo (concentracin 0.0 %), es un indicador del desarrollo normal y cuando se aplica el nim, se espera que el nmero de exuvias sea menor, es decir que las mayores concentraciones (3.0 y 2.0 %) requerir ms tiempo para cambiar de instar (mudar) en comparacin con el comportamiento normal (0.0 %).
Por lo anterior, se puede decir que no existen cambios en la muda estadsticamente significativos por el consumo de alimento, impregnado con el aceite de nim.
Cabe mencionar que Schmutterer (1994), reporta que en ensayos de laboratorio ms de 400 plagas se mostraron susceptibles al nim, sus efectos principales los causa sobre el desarrollo de larvas, la reduccin de la alimentacin, reproduccin y la prdida de actividad. La alteracin del desarrollo se debe principalmente a una escasez de la hormona ecdisona que es la que promueve la muda y por lo cual el desarrollo no es posible.
Tambin agrega Taveras (1994), que en la Repblica Dominicana los efectos de los ingredientes activos presentes en las semillas de nim sobre los insectos son muy variables; encontrando que en Chelimorfa rufipennis se ha comprobado un fuerte efecto repelente y antialimentario sobre adultos, as como regulador del crecimiento en larvas; y sobre Trialeurodes vaporiarum y Bemisia tabaci se ha obsevado un leve efecto repelente, un moderado efecto antialimentario y un fuerte efecto regulador de crecimiento.
Por ltimo, el aceite nim, es uno de las productos ms valiosos que hasta ahora se han estudiado para el control de plagas, ya que puede ser altamente competitivo en calidad con los insecticidas qumicos. Su uso en el control de plagas se ha incrementado en el mundo, porque han resultado eficientes con diferentes plagas, con muy pocos efectos sobre la fauna benfica, Resultados y Discusin J avier Arcos Roa 47 animales domsticos y el hombre; sin embargo, en estudios sobre el manejo de termitas no es muy amplio (Taveras, 1994). Por otro lado, el efecto del nim A. indica dura desde tres das hasta dos semanas, por lo que generalmente tiene un periodo de frecuencia de aplicacin de 3 a 5 das en unas condiciones y de 6 a 9 y hasta 14 das en otras, de acuerdo a la parte del nim A. indica utilizada, las condiciones climticas (lluvia), la dosis aplicada y de los ingredientes usados. A pesar de sus grandes dotes, el nim A. indica no combate a todos los insectos; sin embargo, cuando se mezcla con otros ingredientes se incrementa su toxicidad, como la adicin de jabn para el combate de escamas y moscas blancas (Rodrguez, 1999).
Conclusiones J avier Arcos Roa 48 7. CONCLUSIONES
Basndose en los resultados en el presente trabajo de investigacin, se lleg a las siguientes conclusiones:
1. Las cinco concentraciones de aceite de nim, Azadirachta indica tienen un efecto deterrente y repelente sobre la termita de madera seca Incisitermes marginipennis; aunque no mostr actividad insecticida sobre las termitas, podemos concluir que es recomendable aplicarlo en la preservacin de maderas.
2. En la prueba de alimentacin selectiva, el consumo promedio de las termitas sobre los papeles filtro tratados con las cinco concentraciones de aceite de nim, no rebas el 10 % del peso; mientras que en los controles ste fue de ms del 45 %.
3. El anlisis de varianza para los ndices de inhibicin de la alimentacin indican que no hay diferencias significativas (=0.05) entre las concentraciones, por lo que puede decir que la dosis mnima causa el mismo efecto de repelencia o deterrencia que la mayor dosis estudiada.
4. En la prueba de alimentacin bajo condicin de confinamiento, el consumo fue mayor en los controles que en los tratados; por otro lado la mayor mortalidad de la termita de madera seca, por ingestin del papel filtro con las distintas concentraciones, se dio en 2.0 %. Sin embargo, no se puede afirmar que la mortalidad se deba al efecto txico del aceite de nim, ya que se observ que la muerte de los individuos fue por inanicin, lo cual indica que las sustancias proporcionan caractersticas de impalatabilidad al papel filtro y no por txicas.
5. Las diferencias significativas entre las concentraciones estudiadas, indican que el aceite de nim contiene cierto tipo de sustancias que protegen de mejor manera el papel filtro que el control, principalmente las que contienen mayor concentracin. Conclusiones J avier Arcos Roa 49
6. La mortalidad observada fue debido a la inanicin y al manejo de las termitas, descartando la posibilidad de que el aceite de nim contenga caractersticas insecticidas al estar en contacto y al consumir el alimento impregnado con aceite de nim.
7. En lo que respecta al efecto en la inhibicin del crecimiento, el anlisis estadstico muestra que no hay diferencias estadsticas significativas entre los tratamientos, que se manifieste en la duracin del crecimiento de los instares ninfales.
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Apndice J avier Arcos Roa 58 9. APNDICE
Cuadro 7. Anlisis de Varianza para la variable IDA en la prueba selectiva. Suma de Cuadrado F. V. G. L. Cuadrados Medio Valor de F Prob >F Modelo 4 0.68062546 0.17015636 2.64 0.0640 Error 20 1.28769386 0.06438469 Total 24 1.96831931
Cuadro 8. Anlisis de Varianza para la variable Q en la prueba electiva. Suma de Cuadrado F. V. G. L. Cuadrados Medio Valor de F Prob >F Modelo 4 0.13991060 0.03497765 2.60 0.0668 Error 20 0.26861355 0.01343068 Total 24 0.40852414
Cuadro 9. Anlisis de Varianza para la variable prdida de peso en la prueba de confinamiento. ____________________________________________________________________________ Suma de Cuadrado F. V. G. L. Cuadrados Medio Valor de F Prob >F Modelo 5 0.00803000 0.00160600 26.77 0.0001 Error 24 0.00144000 0.00006000 Total 29 0.00947000
Cuadro 10. Comparacin de medias de Tukey para la variable prdida de peso del papel filtro (mg); =0.05. Diferencia mnima significativa =0.0151. ____________________________________________________________________________ Concentracin (%) Repeticin Media (mg) 0.0 5 64 a 0.5 5 32 b 1.0 5 22 b 1.5 5 20 b 2.0 5 18 b 3.0 5 18 b ____________________________________________________________________________ Medias con la misma letra en columna no son significativamente diferentes. Apndice J avier Arcos Roa 59 Cuadro 11. Anlisis de Varianza para la variable mortalidad en la prueba de confinamiento a los 8 das despus de aplicar el tratamiento. F. V. G. L. Suma de Cuadrados Cuadrado Medio Valor de F Pr >F Modelo 5 0.05919606 0.01183921 0.68 0.6403 Error 24 0.41566174 0.01731924 Total 29 0.47485780
Cuadro 12. Anlisis de Varianza para la variable mortalidad en la prueba de confinamiento a los 16 das despus de aplicar el tratamiento. F. V. G. L. Suma de Cuadrados Cuadrado Medio Valor de F Pr >F Modelo 5 0.05371498 0.01074300 0.51 0.7678 Error 24 0.50812036 0.02117168 Total 29 0.56183534
Cuadro 13. Anlisis de Varianza para la variable mortalidad en la prueba de confinamiento a los 24 das despus de aplicar el tratamiento. F. V. G. L. Suma de Cuadrados Cuadrado Medio Valor de F Pr >F Modelo 5 0.10988828 0.02197766 0.84 0.5360 Error 24 0.62955240 0.02623135 Total 29 0.73944069
Cuadro 14. Anlisis de Varianza para la variable mortalidad en la prueba de confinamiento a los 32 das despus de aplicar el tratamiento. F. V. G. L. Suma de Cuadrados Cuadrado Medio Valor de F Pr >F Modelo 5 0.16797539 0.03359508 1.15 0.3643 Error 24 0.70409561 0.02933732 Total 29 0.87207100
Cuadro 15. Anlisis de Varianza para la variable mortalidad en la prueba de confinamiento a los 40 das despus de aplicar el tratamiento. F. V. G. L. Suma de Cuadrados Cuadrado Medio Valor de F Pr >F Modelo 5 0.23092182 0.04618436 1.19 0.3442 Error 24 0.93265403 0.03886058 Total 29 1.16357586
Apndice J avier Arcos Roa 60 Cuadro 16. Anlisis de Varianza para la variable mortalidad en la prueba de confinamiento a los 48 das despus de aplicar el tratamiento. F. V. G. L. Suma de Cuadrados Cuadrado Medio Valor de F Pr >F ____________________________________________________________________________ Modelo 5 0.30729871 0.06145974 1.45 0.2414 Error 24 1.01415864 0.04225661 Total 29 1.32145734
Cuadro 17. Anlisis de Varianza para la variable mortalidad en la prueba de confinamiento a los 56 das despus de aplicar el tratamiento. F. V. G. L. Suma de Cuadrados Cuadrado Medio Valor de F Pr >F Modelo 5 0.26975353 0.05395071 1.27 0.3087 Error 24 1.01891621 0.04245484 Total 29 1.28866973
Cuadro 18. Anlisis de Varianza para la variable mortalidad en la prueba de confinamiento a los 64 das despus de aplicar el tratamiento. F. V. G. L. Suma de Cuadrados Cuadrado Medio Valor de F Pr >F Modelo 5 0.24388099 0.04877620 1.41 0.2547 Error 24 0.82753199 0.03448050 Total 29 1.07141298
Cuadro 19. Anlisis de Varianza para la variable mortalidad en la prueba de contacto a los 2 das despus de aplicar el tratamiento. F. V. G. L. Suma de Cuadrados Cuadrado Medio Valor de F Pr >F Modelo 5 0.06901561 0.01380312 1.14 0.3653 Error 24 0.28986557 0.01207773 Total 29 0.35888119
Cuadro 20. Anlisis de Varianza para la variable mortalidad en la prueba de contacto a los 4 das despus de aplicar el tratamiento. F. V. G. L. Suma de Cuadrados Cuadrado Medio Valor de F Pr >F Modelo 5 0.04098643 0.00819729 0.18 0.9665 Error 24 1.07792870 0.04491370 Total 29 1.11891513 Apndice J avier Arcos Roa 61 Cuadro 21. Anlisis de Varianza para la variable mortalidad en la prueba de contacto a los 6 das despus de aplicar el tratamiento. F. V. G. L. Suma de Cuadrados Cuadrado Medio Valor de F Pr >F Modelo 5 0.26224020 0.05244804 1.22 0.3288 Error 24 1.02912346 0.04288014 Total 29 1.29136366
Cuadro 22. Anlisis de Varianza para la variable mortalidad en la prueba de contacto a los 8 das despus de aplicar el tratamiento. F. V. G. L. Suma de Cuadrados Cuadrado Medio Valor de F Pr >F Modelo 5 0.33091555 0.06618311 1.34 0.2803 Error 24 1.18259386 0.04927474 Total 29 1.51350942
Cuadro 23. Anlisis de Varianza para la variable mortalidad en la prueba de contacto a los 10 das despus de aplicar el tratamiento. F. V. G. L. Suma de Cuadrados Cuadrado Medio Valor de F Pr >F Modelo 5 0.60563096 0.12112619 2.45 0.0631 Error 24 1.18889953 0.04953748 Total 29 1.79453049
Cuadro 24. Anlisis de Varianza para la variable mortalidad en la prueba de contacto a los 12 das despus de aplicar el tratamiento. F. V. G. L. Suma de Cuadrados Cuadrado Medio Valor de F Pr >F Modelo 5 0.41724678 0.08344936 1.85 0.1418 Error 24 1.08488905 0.04520371 Total 29 1.50213583
Cuadro 25. Anlisis de Varianza para la variable mortalidad en la prueba de contacto a los 14 das despus de aplicar el tratamiento. F. V. G. L. Suma de Cuadrados Cuadrado Medio Valor de F Pr >F Modelo 5 0.63012758 0.12602552 2.03 0.1102 Error 24 1.48879127 0.06203297 Total 29 2.11891885
Apndice J avier Arcos Roa 62 Cuadro 26. Anlisis de Varianza para la variable mortalidad en la prueba de contacto a los 16 das despus de aplicar el tratamiento. F. V. G. L. Suma de Cuadrados Cuadrado Medio Valor de F Pr >F Modelo 5 0.54359108 0.10871822 2.48 0.0599 Error 24 1.05021899 0.04375912 Total 29 1.59381006
Cuadro 27. Anlisis de Varianza para la variable mortalidad en la prueba de contacto a los 18 das despus de aplicar el tratamiento. F. V. G. L. Suma de Cuadrados Cuadrado Medio Valor de F Pr >F Modelo 5 0.80915197 0.16183039 3.78 0.0115 Error 24 1.02761002 0.04281708 Total 29 1.83676199
Cuadro 28. Anlisis de Varianza para la variable mortalidad en la prueba de contacto a los 20 das despus de aplicar el tratamiento. F. V. G. L. Suma de Cuadrados Cuadrado Medio Valor de F Pr >F Modelo 5 1.11797870 0.22359574 4.84 0.0034 Error 24 1.10901160 0.04620882 Total 29 2.22699030
Cuadro 29. Anlisis de varianza de la prueba no paramtrica de Wilcoxon para la variable exuvias en la prueba de confinamiento Concentracin % Repeticin Media Valor de F Prob >F ____________________________________________________________________________ 0.0 5 8.00000000 1.817 0.1475 0.5 5 6.60000000 1.0 5 7.00000000 1.5 5 7.20000000 2.0 5 3.60000000 3.0 5 6.00000000