Departamento de Biotecnologa FACEN La microbiologa de los alimentos es la parte de la microbiologa que trata de todos los procesos en los que los microorganismos influyen en las caractersticas de los productos de consumo alimenticio humano o animal. Por tanto la microbiologa de alimentos, estudia tanto los aspectos de ecologa microbiana, como los industriales y de biotecnologa para la produccin de nuevos alimentos. Se pueden distinguir cuatro aspectos diferentes en la microbiologa de alimentos: - Los microorganismos como productores de alimentos. - Los microorganismos como agentes de deterioro de los alimentos. - Los microorganismos como agentes patgenos transmitidos por los alimentos. - Factores que afectan al crecimiento bacteriano en los alimentos. Los microorganismos como productores de alimentos. Desde los tiempos histricos ms remotos se han utilizado microorganismos para producir alimentos usndolos incluso sin sospechar su existencia. En algunos casos los procesos microbianos dan lugar a alteraciones en los alimentos que les confieren ms resistencia al deterioro o, caractersticas organolpticas (sabor, textura, etc.) ms deseables. La mayora de los procesos de fabricacin de alimentos en los que intervienen microorganismos se basan en procesos fermentativos, de los que debemos destacar la fermentacin lctica. Microorganismos del Yogurt: Lactococcus thermophilus, y Lactobacillus bulgaricus Los microorganismos como agentes de deterioro de alimentos Se considera alimento deteriorado aquel daado por agentes microbianos, qumicos o fsicos de forma que es inaceptable para el consumo humano. El deterioro de alimentos es una causa de prdidas econmicas muy importante: aproximadamente el 20% de las frutas y verduras recolectadas se pierden por deterioro microbiano producido por alguna de las 250 enfermedades de mercado. Los agentes causantes de deterioro pueden ser bacterias, hongos y levaduras; siendo bacterias y hogos los ms importantes. Los microorganismos como agentes patgenos transmitidos por alimentos. Ciertos microorganismos patgenos son potencialmente transmisibles a travs de los alimentos. En estos casos, las patologas que se producen suelen ser de carcter gastrointestinal, aunque pueden dar lugar a cuadros ms extendidos en el organismo e, incluso, a septicemias. Factores que afectan al crecimiento bacteriano en los alimentos. Tratamientos que manipulan la temperatura. Refrigeracin: Conservacin de alimentos a temperaturas inferiores a 10C y superiores al punto de congelacin del agua. Choque de fro: Cuando se enfra rpidamente un alimento muchas de las bacterias mesfilas que normalmente resistiran la temperatura de refrigeracin, mueren como consecuencia del choque de fro. Congelacin: Conservacin de alimentos a temperaturas inferiores al punto de congelacin del agua (en torno a -2 a -10C) y las conseguidas en sistemas de congelacin ms potentes que pueden llegar a -30 a -80C. Altas temperaturas: Las temperaturas superiores a las de crecimiento ptimo producen inevitablemente la muerte del microorganismo o le producen lesiones subletales. Las clulas lesionadas pueden permanecer viables; pero son incapaces de multiplicarse hasta que la lesin haya sido reparada. Radiacin ultravioleta: Produce una disminucin exponencial en el nmero de clulas vegetativas o de esporas con el tiempo de irradiacin. Sales de curado y substancias anlogas: Las sales de curado son el cloruro sdico y los nitratos o nitritos de sodio y potasio; estos productos modifican el alimento en el color, aromas, textura y sensibilidad al crecimiento microbiano. Actividad de agua reducida: Los microorganismos requieren la presencia de agua, en una forma disponibles, para que puedan crecer y llevar a cabo sus funciones metablicas. La mejor forma de medir la disponibilidad de agua es mediante la actividad de agua (aw). La aw de un alimento puede reducirse aumentando la concentracin de solutos en la fase acuosa de los alimentos mediante la extraccin del agua o mediante la adicin de solutos. pH y acidez: En general, la presencia de cidos en el alimento produce una drstica reduccin de la supervivencia de los microorganismos. Los cidos orgnicos dbiles son ms efectivos que los inorgnicos en la acidificacin del medio intracelular. Sales de curado y substancias anlogas: Las sales de curado son el cloruro sdico y los nitratos o nitritos de sodio y potasio; estos productos modifican el alimento en el color, aromas, textura y sensibilidad al crecimiento microbiano. Acetobacter Gluconobacter Son las denominadas Bacterias del Vinagre, que oxidan el etanol a cido actico Acetobacter: Flagelacin peritrica Gluconobacter: Flagelacin polar Rhizobium y Agrobacterium Tumoraciones causadas por Agrobacterium tumefaciens Formacin del ndulo por Rhizobium Brucella Sntomas: El diagnostico es complicado, porque los suele comenzar con sntomas leves parecidos a la gripe, con fiebre, escalofros, sudoracin, dolores musculares y malestar general, sin embargo en algn momento hay fiebre, que suele aumentar durante las horas de la tarde hasta 40C, que se llama fiebre ondulante. Tratamiento: El microorganismo es resistente a las penicilinas y se trata con estreptomicina y tetraciclina. El ganado se vacuna. Brucella abortus: afecta a las vacas y causa el aborto contagioso. Brucella melitensis: afecta a ovejas y cabras. Brucella suis: afecta al cerdo y causa el aborto infeccioso en las cerdas. Brucella canis: afecta al perro. Todas pueden afectar al hombre. Pseudomonas aeruginosa Bacilo piocinico o productor del pus azul - Ocasiona infecciones nosocomiales graves - Importancia en la Fibrosis qustica - Forma biopelculas - Aplicaciones biotecnolgicas, sobre todo en el rea ambiental - Resistente a los antibiticos de uso comn, sensible a cido nalidixico y polimixina Azotobacter y Azomonas Azotobacter vinelandi - Forma bacilar pero son pleomrficos - Fijan el nitrgeno atmosfrico en forma libre - Forman unos quistes de resistencia llamados cistos Vibrio cholerae Sntomas: aparecen de manera repentina con intensos dolores abdominales, vmitos y diarreas continuas. Las heces aparecen con pedacitos de mucosa intestinal erosionada lo que las da el aspecto caracterstico de "agua de arroz". La perdida de electrolitos y lquidos hace que se sufra deshidratacin muy intensa lo que ocasiona hemoconcentracin y taquicardia y produce la muerte. Tratamiento: los frmacos efectivos son tetraciclina, eritromicina. El tratamiento precoz con un antimicrobiano oral erradica los vibriones, reduce en un 50% el volumen de heces y detiene la diarrea antes de 48 h. Vibriocholerae O1 Clsico Vibriocholerae O139 Bengala 1992 8 Vibriocholerae O1 El Tor Vibrio parahaemolyticus Vibrio vulnificus Sntomas: Gastroenteritis tpica, diarrea,espasmos abdominales, nauseas, dolor de cabeza, escalofros y fiebre, en los casos mas graves puede aparecer una diarrea en grano de arroz semejante al clera Sntomas: vmitos, diarrea y dolor de estmago; en personas propensas inmunolgicamente y con enfermedades crnicas puede pasar al la sangre causando, fiebre, en nios principalmente, y una baja de presin sangunea, y puede ser fatal en la mitad de los casos. En las infecciones en heridas abiertas expuestas al agua marina se forman ulceras, pasa a la va sangunea y causa severas complicaciones. -galactosidasa Indol + RM + VP - Citrato - Oxidasa - Fam. Enterobacteriaceae Mc Conkey Levine Glucosa Acido y gas Reacciones en KIA Pruebas del INViC Fermentacin cido mixta, produce una mezcla de cidos orgnicos: lctico, actico, frmico y etanol, CO 2 y H 2 . Prueba del Rojo de Metilo +. Fermentacin butanodioica: acetil metil carbinol o acetona precursor intermediario del butanodiol. prueba de Voges Proskauer + Escherichia coli Indol + RM + VP - Citrato - Pruebas del INViC Cepas enterotoxignicas (ECET). Toxina termolbil (LT) que se inactiva a 60C durante 30 minutos y/o una toxina termoestable (ST) que resiste a ms de 100C durante 30 minutos. Diarrea infantil y diarrea del turista. Sntomas : diarrea acuosa, a veces con mucosidad, dolor abdominal, nauseas, vmitos y si se origina fiebre, no muy alta. Cepas enteroinvasivas (ECEI). Caracteristicas atpicas que las hacen semejantes a Shigella, inmviles, no producen gas de la glucosa y fermenta lactosa lentamente. Invaden las clulas epiteliales del colon donde se multiplican y destruyen ocasionando ulceraciones. Sntomas: escalofros, malestar, dolor de cabeza, dolor abdominal, diarrea sanguinolenta y fiebre. Cepas enteropatgenas (ECEP). Cepas enteropatgenas clsicas mas frecuentes en nuestro pas. Se localizan en el epitelio intestinal pero no destruyen los tejidos. Sntomas: dolor abdominal, vmitos, fiebre , diarrea acuosa con abundante moco pero sin sangre. Cepas enterohemorrgicas (ECEH). E.coli serovar O157:H7 pueden causar la muerte. Producen verotoxina. Lesiona la mucosa intestinal produciendo sangrado, sin reaccin inflamatoria local. Colitis hemorrgica: dolor abdominal, con vmitos, diarrea acuosa y sanguinolenta y poca o ninguna fiebre. Sndrome hemoltico urmico: diarrea sanguinolenta y sobre todo en nios fallo renal agudo que puede terminar en muerte. No hay fiebre. Prpura trombtica trombocitopnica: No hay fiebre y hay diarrea hemorrgica, pero se afecta el sistema nervioso central. Se producen cogulos en el cerebro y puede ocasionar la muerte. Fermenta Lactcosa con produccun de cido y gas Daniel Elmer Salmn (1850-1914) Salmonella LDS + Hektoen IMViC (-+-+) RM + Indol - Citrato + S. typhi: Fiebres tifoideas S. paratyphi: Fiebres paratifoideas mas benignas. Sntomas: malestar, fiebre, que aumenta gradualmente, dolor de cabeza, estupefaccin, perdida de apetito y una roseola en trax y abdomen que puede pasar desapercibida. Estas manchas rojizas en la piel son semejantes a las del tifus lo que explica la confusin que existi durante muchos aos entre el tifus y las fiebres tifoideas. Tratamiento: penicilinas y cefalosporinas Resto de Salmonella: Salmonelosis: Sntomas: nauseas, vmitos, dolores abdominales, diarrea y fiebre que en los casos graves puede ser alta, tambin puede aparecer sangre en heces. VP - KIA Shigella Kiyoshi Shiga (1871-1957) IMViC (-+--). Movilidad- KIA Indol - RM + VP - Citrato - S. flexneri y S. sonnei son las ms frecuentes y es la especie ms virulenta. Disentera bacilar: causante del 5 al 10% de las enfermedades diarreicas en muchas zonas. Sntomas: fiebre, dolor abdominal, vmitos, nauseas y diarrea acuosa muy abundante con sangre y mucosidad. Tratamiento: mantener la hidratacin y no se suelen emplear antibiticos, pero si es muy grave se puede emplear ampicilina y tetraciclina. Mc Conkey Hektoen Proteus Serratia Enterobacter Citrobacter Citrato + Se encuentra normalmente en las heces de animales y hombre pero tambin se ha aislado como oportunista en muestras clnicas causando infecciones urinarias, respiratorias o meningitis. Sensible a tetraciclina y cloranfenicol y resistente a ampicilina Producen una colonias caractersticas de color rojo debido a presencia de un pigmento insoluble llamado prodigiosina. S. marcenscens tiene importancia como oportunista en el ambiente hospitalario donde las cepas han perdido la pigmentacin y se han hecho resistentes a la mayora de los antibiticos de uso clnico Muy mvil, lo que ocasiona al crecer en los medios de cultivo la formacin de ondas concntricas Produce ureasa lo que potencia su accin patgena, en el tracto urinario, descompone la urea y alcaliniza la orina, lo que altera las clulas del parnquima, facilitando la infeccin y precipita sales de Ca y Mg que favorecen la produccin de clculos. Sensible a penicilinas. Puede causar diversas infecciones oportunistas, destacando las urinarias. C. fetuscausa bacteriemia en personas adultas con diabetes o cirrosis y es causante de aborto espontneo en el ganado. C. jejuni produce meningitis en lactantes C. jejuni y C. coli causan diarrea en pacientes de cualquier edad. Campylobacter Sntomas: gastrointestinales, con diarrea que a veces puede ser sanguinolenta, dolor abdominal y en ocasiones fiebre. La mucosa epitelial del tracto intestinal suele daarse de manera significativa por la invasin de las clulas y la produccin de una citotoxina. No es demasiado grave y dura menos de una semana. Tratamiento: el empleo de eritromicina y gentamicina ayuda a erradicar la infeccin. Helicobacter pylori Tratamiento: se realiza con una combinacin triple de bismuto con dos antibiticos: omeprazol y amoxicilina y recientemente con el nuevo macrolido claritromicina. Robin Warren y Barry Marshall celebran el Nobel de medicina 2005 Clostridium botulinum La toxina acta sobre las terminaciones nerviosas colinrgicas del sistema nervioso, inhibiendo la liberacin de acetil colina, originando parlisis del msculo esqueltico. Produce una parlisis flcida, pues impide la contraccin del msculo. Alimentario: Los sntomas aparecen entre las 12-36 horas despus de la ingestin del alimento y generalmente es mortal por insuficiencia respiratoria o paro cardaco. Evoluciona muy rpidamente, no aparece fiebre. Heridas: Es bastante raro, se produce por la infeccin de una herida con esporas del microorganismo, los sntomas son semejantes pero aparecen mas tarde despus de 4-14 das y en este caso suele haber fiebre. Del lactante: Se produce en nios de 3 a 20 semanas, se descubri en 1976 y su transmisin parece estar relacionada con el consumo de miel. El primer sntoma es de estreimiento, apareciendo despus sntomas neurolgicos con disminucin de la capacidad de succin. La muerte se produce por paro respiratorio. Tratamiento: Si la intoxicacin se ha producido recientemente, lavado de estmago, administracin de antitoxina y respiracin asistida. Lo mejor es prevencin, no consumir conservas caseras, desechar los botes de conservas abombados o calentar los alimentos. Clostridium perfringens Tipos antignicos A, B, C, D y E. El tipo A produce intoxicacin alimentaria, el tipo C produce enteritis necrotizante y el tipo B es el causante de la gangrena gaseosa Toxiinfeccin alimentaria: Se produce por ingestin de alimentos, casi siempre crnicos, que han sido conservados o recalentados incorrectamente. El microorganismo se multiplica y produce una enterotoxina. Despus del periodo de incubacin que varia de 8- 24 horas aparece dolor abdominal y diarrea acuosa, no hay fiebre ni vmitos. No es grave y se recupera totalmente a las 12-18 horas. Enteritis necrotizante: Se produce por la ingestin de carne de cerdo insuficientemente cocida en grandes cantidades. En menos de 24 horas aparece dolor abdominal, diarrea sanguinolenta vmitos y shock. La mortalidad es elevada pues se produce obstruccin intestinal, peritonitis y colapso circulatorio. Gangrena gaseosa: Era una enfermedad tpica de las guerras, en la actualidad el 60% de los casos se debe a traumatismos y el 40% restante a infecciones posquirrgicas. El perodo de incubacin oscila entre 8 horas y 20 das tras el cual empieza un intenso dolor en la zona de la herida con hinchazn, edema y un exudado sanguinolento con olor dulzn, desagradable, hay cambios en el color de la piel que se pone negra y finalmente se produce la muerte por shock y fallo renal. Sin tratamiento es mortal en 48 horas. Tratamiento: Extirpacin de los tejidos necrticos con amputacin del miembro. Se puede administrar oxgeno hiperbrico puro al 100% y presin de 3 atmsferas para inhibir el crecimiento del microorganismo y produccin de toxina. Antibiticos: penicilina a dosis elevada y suero. Listeria monocytogenes Phylum Firmicutes Clase Bacilli Order Bacillales Familia Listerariaceae Adultos sanos: Es generalmente asintomtica, o sntomas como de gripe o tambin como un proceso diarreico. Inmunodeprimidos: Es un proceso grave, lo mas frecuente es que ocasione meningitis o bacteriemia que suelen ser mortales. Embarazadas: Son particularmente propensas a la infeccin aunque normalmente es asintomtica o con un cuadro gripal. Sin embargo el microorganismo puede atravesar la placenta e infectar al feto causando aborto, parto prematuro o listeriosis neonatal. Infecciones neonatales: Temprana, se produce por infeccin intrauterina del feto y aparece a los dos das despus del parto. Los nios son prematuros, con bajo peso y con sntomas de septicemia, con abscesos y granulomas diseminados, lesiones en placenta, piel e hgado. La tasa de mortalidad es muy elevada, 80%. Tatamiento: penicilina , ampicilina y gentamicina. Formas localizadas: Se han observado lesiones en piel y ojos ocasionado por contacto con animales infectados o sus productos, o manipulaciones en laboratorio. Tambin pueden aparecer lesiones en ganglios linfticos. Staphylococcus aureus Procesos supurativos: Los microorganismos de a piel y mucosas pueden colonizar glndulas epidrmico, sobre todo en las palmas de las manos y las plantas de los pies. sebceas o folculos pilosos, originando foliculitis , o fornculos cuando se sita en el tejido subcutneo, en la base de la pestaa ocasiona el orzuelo comn. Tambin ocasiona infecciones en heridas superficiales que pueden ser graves en los hospitales y complicaciones en el acne. Procesos txicos: Toxiinfeccin alimentaria: consumo de alimentos contaminados con enterotoxina estafilococica, el perodo de incubacin es de 1-6 horas, sntomas fiebre no muy elevada, vmitos y diarreas. Imptigo: infeccin de la piel, que ocasiona ampollas, ocasionada por una toxina exfoliativa. Sndrome de la piel escaldada: afecta a recien nacidos esta ocasionada por una toxina exfoliativa que produce ampollas y descamacin de laminas epidrmicas. Sndrome de shock txico: causado por una exotoxina, se caracteriza por, fiebre alta, vmitos, diarrea, confusin y exantema cutneo, que recuerda a las quemaduras solares, entre 3 y 7 das despus del comienzo, se observa descamacin de la piel que conduce a desprendimiento Imptigo Foliculitis Fornculos Sind. shock txico Sind piel escaldada Acne Enterococcus faecalis Agrupa los antiguos estreptococos de origen fecal, correspondientes al grupo D de Lancefield. Son -hemolticos Forma parte de la flora intestinal del hombre y se elimina por las heces. Se emplea como ndice de contaminacin fecal, pues es muy resistente a la desecacin. A pesar de no ser considerado patgeno, en los ltimos 20 aos est adquiriendo gran importancia hospitalaria como causante de infecciones del tracto urinario (ITU) y bacteriemia nosocomial, pues es muy resistente a penicilina y otros antibiticos. Se relaciona con infecciones urinarias y endocarditis aguda. Lactococcus lactis Lactococcus thermophilus Son los antiguos estreptococos del llamado grupo lctico incluidos en el grupo N de Lancefield. Tienen una gran importancia en la industria lechera, ya que se utilizan, junto con los lactobacillus en la fabricacin de yogurt, queso y mantequilla. A partir de la lactosa de la leche producen cido lctico y compuestos aromticos, como el diacetilo que da las caractersticas organolepticas de estos alimentos. La especie tipo es Lactococcus lactis. Probiticos: aquellos microorganismos vivos, principalmente bacterias y levaduras, que son agregados como suplemento en la dieta y que afectan en forma beneficiosa al desarrollo de la flora microbiana en el intestino. Deben tolerar el paso por el tracto gastrointestinal y ser capaces de colonizar la mucosa intestinal. Los utilizados industrialmente son: Lactococcus (Streptococcus) thermophilus, Lactobacillus bulgaricus, Bifidobacterumbifidum, Lactobacillusacidophilusy Lactobacilluscasei Microorganismos del Yogurt: Lactococcus (Strept) thermophilus, Lactobacillus bulgaricus Lactobacillus Tienen una gran importancia en la industria lechera ya que se utilizan, junto con los lactococos en la fabricacin de yogurt, queso y en la produccin de derivados vegetales como encurtidos. A partir de la lactosa de la leche realizan fermentacin homolctica por la va de Embden-Mayerhof produciendo cido lctico o heterolctica por la va de las Pentosas Fosfato en que adems de lctico se forma actico, etanol, frmico, succnico, CO 2 . L. helveticus se emplea en la elaboracin de quesos suizos y L. bulgaricus y L. delbrueckii se utilizan en la fabricacin de yogurt junto con Streptococcus thermophilus. L. acidophilus se utiliza industrialmente en la preparacin de leches cidas y en productos farmacuticos para restablecer la flora normal intestinal tambin forma parte de la flora vaginal (es el bacilo de Dderlain). L. salivaricusforma parte de la flora bucal y se le relaciona con la caries. L. acidophilus (bacilo de Dderlain) Corpsculos metacromticos Leoconostoc Son anaerobios facultativos que utilizan la glucosa, va fermentativa, formando cido lctico y etanol. Se encuentran en la materia orgnica en descomposicin, en ensilados de pienso y en leche. La especie tipo es Leuconostoc mesenteroides, se utiliza en la industria farmacutica en la produccin de dextrano. En la industria lechera tambin se utilizan en la fabricacin de queso y mantequilla. En la industria azucarera tiene importancia porque su crecimiento origina obturacin de filtros ya que es un microorganismo que vive en la caa de azcar o remolacha. Mycobacterium tuberculosis Mantoux:Tuberculina La infeccin se adquiere por inhalacin de los bacilos, que son expelidos al hablar, toser o estornudar, se localizan en el alveolo pulmonar donde inician la infeccin que tiene tres fases: inflamacin, formacin del tubrculo (se forma un granuloma en cuyo interior estn los bacilos) y caseinificacion (se desintegran las clulas formando una masa coagulada que dura varios aos y que tiene aspecto de queso, de lo que viene el nombre). Tratamiento: Asociacion isicianina estreptomicina durante 3-4 meses y despus isocianina etambutol (la estreptomicina ataca al 8 par craneal), hasta un total de 18 meses. Asociacion isocianina rifampicina durante 3-4 meses y despus isocianina etambutol debido a la toxicidad heptica de la rifampicina, durante 18-24 meses. Asociacion isocianina etambutol 24 meses en pacientes con insuficiencia heptica. Prevencin: Vacuna BCG (Bacilo de Calmette y Guerin realizada con una cepa avirulenta de M. bovis ) que se administra en la edad escolar. Propionibacterium Fermenta lactato y azucares para producir grandes cantidades de cido actico y propionico y CO 2. Es importante en la industria, en la produccin de quesos de tipo suizo Propionibacteriumacnes Participa en la produccin del olor corporal y en el acne vulgar. El acne suele producirse durante la adolescencia, cuando el sistema endocrino es muy activo, la actividad hormonal estimula la produccin de sebo de las glndulas sebceas creando un ambiente favorable al desarrollo de P. acnes que es lipfilo, puede ocasionar una respuesta inflamatoria con enrojecimiento e hinchazn del conducto glandular que puede ocasionar lesiones inflamatorias llamadas puntos negros o espinillas. Es sensible a tetraciclina. Bifidobacterium bifidum Bifidobacterium breve Bifidobacterium infantis Bifidobacterium lactis Bifidobacterium longum Lactobacillus acidophilus Lactobacillus brevis Lactobacillus bulgaricus Lactobacillus casei Lactobacillus gasseri Lactococcus lactis Lactobacillus paracasei Lactobacillus plantarum Lactobacillus rhamnosus Lactobacillus salivarius Streptococcus thermophilus Probiticos: aquellos microorganismos vivos, principalmente bacterias y levaduras, que son agregados como suplemento en la dieta y que afectan en forma beneficiosa al desarrollo de la flora microbiana en el intestino. Deben tolerar el paso por el tracto gastrointestinal y ser capaces de colonizar la mucosa intestinal. Gracias por su atencin!!!!! yadypg@gmail.com yparra@facen.una.py