¿Qué es la TFF?

La filtración es una presión impulsada proceso de separación que utiliza

las membranas de los componentes por separado en una solución
basada en líquido o suspensión, de su tamaño y carga las diferencias. En
el flujo normal de filtración (NFF), fluido es por convección directamente
hacia el de membrana en virtud de una presión aplicada. Las partículas
que son demasiado grandes para pasar a a través de los poros de la
membrana se acumulan en la superficie de la membrana o en la
profundidad de los medios de filtración, mientras que las moléculas más
pequeñas pasan a través de a la parte posterior. Este tipo de proceso se
denomina a menudo filtración sin salida. Figura 1.

NFF puede ser utilizados para la filtración estéril de limpieza arroyos,

prefiltración aclarar, y el virus de la separación de proteínas. En la
filtración de flujo tangencial (TFF), el fluido es bombeado
tangencialmente a lo largo de de la superficie de la membrana. Un
presión aplicada sirve para forzar un parte del fluido a través de la
membrana al lado de filtrado. Al igual que en NFF, partículas y
macromoléculas, que son demasiado grandes para pasar a través de la
los poros de la membrana quedan retenidos en la lado aguas arriba. Sin
embargo, en este caso, los componentes retenidos no construyen hasta
en la superficie de la membrana. En cambio, son arrastrados por el flujo
tangencial. Esta característica de la TFF hace que sea ideal para un
proceso más fino del tamaño de las separaciones base. TFF es también
comúnmente se llama filtración tangencial. Sin embargo, el término
"tangencial" es descriptivo de la dirección del fluido flujo en relación a la
membrana.

¿Cómo se utilizan las TFF en el procesamiento de proteínas?

La TFF pueden subdividirse en categorías basadas en el tamaño de

componentes de la separación. Para procesamiento de proteínas, estos
pueden variar desde el tamaño de las células intactas para amortiguar
sales. En la figura 2 se muestran los componentes que se mantendría
por una membrana y que pasaría a través de una membrana para cada
una de las subdivisiones. Además, muestra el rango de tamaño de los
poros de la membrana puntuaciones o nominal, los límites de peso
molecular de (NMWL) que generalmente caen en cada uno categoría.
Una membrana en su número de tamaño de poro, normalmente se
administra como un valor micrones, indica que las partículas más grande
que el Nota será retenido por el de la membrana. Un NMWL, por el otro
lado, es una indicación de que la mayoría de los macromoléculas
disuelto con un peso molecular superior a la NMWL y algunos con menor
peso molecular que la NMWL son retenidos por la membrana. Un forma
de los componentes, su capacidad para deformar, y su interacción con
otros componentes en la solución de todos afectar a su de retención.
Membrana diferentes los fabricantes utilizan diferentes criterios para
asignar las calificaciones NMWL a una familia de las membranas.
Microfiltración (MF) se utiliza generalmente río arriba en un proceso de
recuperación de separan las células intactas y algunas células
desechos / lisados del resto de la componentes de la corriente de
alimentación. Cualquiera las células retenidas o la aclaró filtrado puede
ser el producto en circulación. Membrana cortes de tamaño de poro
utilizado para este tipo de separación son típicamente en el rango de
0,05 micras a 1,0 micras. De ultrafiltración (UF) es uno de los más
ampliamente utilizado las formas de TFF y se utiliza para separar las
proteínas de búfer componentes para el intercambio de amortiguación,
la desalinización, o concentración. En función de la proteína a ser
mantenerse, NMWLs membrana en la rango de 1 a 1000 kD se utilizan.
Dos tipos de UF son virus de filtración (VF) y filtración tangencial de flujo
de alto rendimiento (HPTFF). Para VF, membrana NMWL puntuaciones
van desde 100 kD y 500 kD, o de hasta 0,05 micras Este tipo de proceso
se utiliza para separar partículas de virus a partir de proteínas o de
pequeños componentes de los medios de comunicación, ya sea como
paso de reducción de virus. HPTFF es un proceso de alta resolución en el
que la proteína-proteína separación puede llevarse a cabo en el base
tanto de tamaño y carga, lo que resulta en los rendimientos de los
productos y de purificación factores similares a la cromatografía.
Membrana NMWLs utilizados para HPTFF están en el rango de 10 kD y
300 kD. Osmosis Inversa (RO) y de nanofiltración (NF) son tipos de TFF
donde se utilizan membranas muy apretado para separar las sales y las
pequeñas moléculas con masas moleculares generalmente más bajos de
1500 Daltons de agua o de otros solventes. Membranas con NMWLs de 1
kD y menores son utilizados. Por último, hemodiafiltración (DF) es un
TFF proceso que puede llevarse a cabo en combinación con cualquiera
de los otros categorías de separación para aumentar la o bien el
rendimiento del producto o pureza. Durante DF, tampón se introduce en
el reciclar tanque mientras filtrado se elimina de la operación de la
unidad. En los procesos de en donde el producto está en el retenido,
hemodiafiltración lava componentes a cabo del grupo de productos en el
filtrado, así el intercambio y topes la reducción de la concentración de la
las especies no deseadas.

TFF Básico

En una operación de la unidad TFF, una bomba es utiliza para generar el flujo de la
alimentación secuencia a través del canal entredos superficies de la membrana. Un
esquema de un sistema de TFF simple se muestra en la Figura 3. Durante cada paso del
fluido sobre la superficie de la membrana, la presión aplicada una parte de las fuerzas de
el fluido a través de la membrana y la en el flujo de filtrado. El resultado es un de
gradiente en la concentración de materia prima de las condiciones a granel en el centro
de del canal a los más. Condiciones que concentra en el la superficie de la membrana.
También hay una gradiente de concentración a lo largo de la de longitud del canal de
alimentación de la entrada a la salida (retenido), como progresivamente pasa más fluido a
la filtrado lado. La Figura 4 muestra la los flujos y las fuerzas descritas anteriormente
con los parámetros definidos como:

QF: caudal de alimentación [L h-1]

QR: caudal retenido [L h-1]

QF: filtrado caudal [L h-1]

Cb: concentración de los componentes de la solución a granel [g L-1]

CW: la concentración de componentes en la superficie de la membrana [g L-1]

Cf: la concentración de componentes en la filtrado de corriente [g L-1]

TMP: la presión aplicada a través de la la membrana [bar]

El flujo de materia prima a lo largo de la de longitud de la membrana causa un la caída de

presión de la alimentación de la retenido final del canal. El flujo de en el lado de filtrado de
la membrana es suele ser baja y hay poca la restricción, por lo que la presión a lo largo de
la de longitud de la membrana en el filtrado de lado es aproximadamente constante. Un
perfil de presión estándar en un TFF canal se muestra en la figura 5.
Definiciones
La presión transmembrana (PTM) es la presión aplicada promedio de
la alimentación a la parte de filtrado de de la membrana.
TMP [bar] = [(PF + PR) / 2] - Pf
Descenso de presión (DP) es la diferencia de presión a lo largo del
canal de alimentación de la membrana de la entrada de a la salida.
ΔP [bar] = PF - PR
Conversión de la relación (CR) es la fracción del flujo de lado de
alimentación que pasa a través de la membrana a el filtrado.
CR [-] = Qf/QF
Aparente tamizado (SAPP) es la fracción de una proteína particular,
que pasa a través de la membrana de la flujo de filtrado basado en las
concentraciones de proteínas ensurables en los piensos y los flujos de
filtrado. Un tamizado coeficiente puede ser calculado para cada proteína
en una materia prima.
Sapp [-] = (concentración en el filtrado, Cf) / (concentración en la
alimentación, Cb)
Intrínseca tamizado (Si) es también la fracción de una proteína
particular, que pasa a través de la membrana de la de filtrado de flujo.
Sin embargo, se basa en la concentración de proteína en la superficie de
la membrana. A pesar de que no se puede medir directamente, da una
mejor comprensión de las características enseparación inherente de la
membrana.
Si [-] = (concentración en el filtrado, Cf) / (concentración en la pared de
la membrana, Cw)
Retención (R) es la fracción de una proteína particular, que es retenido
por la membrana. También puede ser calculado como la retención sea
aparente o intrínseca. La retención es a menudo también se llama
rechazo.
Rapp [-] = 1 - Sapp o Ri = 1 - Si
Filtrado de flujo (Jf) es el flujo de filtrado normalizado para el área de
la membrana [m2] a través del cual se que pasa.
JF [L m-2 h-1] = Qf/area
Flujo de masa (Jm) es el flujo de masa de proteínas a través de la
membrana normalizado para el área de la membrana [m2] a través de la
que está pasando.
Jm [g m-2 h-1] = Qf x Cf / area
Factor de concentración de volumen (VCF o X) es la cantidad que la corriente de
alimentación se ha reducido en volumen del volumen inicial. Por ejemplo, si 20 litros de
materias primas son procesadas por ultrafiltración hasta 18 L han pasado por el filtrado y
2 L se dejan en el retenido, diez veces la concentración ha sido realizado por lo que el
factor de concentración en volumen es de 10. En un proceso de concentración de la Fed-
Batch, donde la como materia prima a granel se realiza en un tanque externo y se añade
a la operación TFF continuamente como filtrado se eliminado, FCR debe ser calculado
basado sólo en el volumen que se ha añadido a la operación de TFF.
VCF o X [-] = volumen total de alimentación a partir añadido a la operación / volumen
retenido actual
Factor de concentración (FQ) es la cantidad que el producto se ha concentrado en la
corriente de alimentación. Esto depende tanto del factor de concentración de volumen y la
retención. Al igual que con el FCR, de la Fed-Batch, por el proceso de concentración,
calcular CF basa únicamente en el volumen de materia prima añadido a la operación de
TFF.
CF [-] = concentración del producto final/ la concentración inicial del producto = VCF
(Rapp)
Diavolumen (DV o N)=es una medida del grado de lavado que se ha realizado durante
una paso hemodiafiltración. Se basa en el volumen de tampón de hemodiafiltración
introducido en el funcionamiento de la unidad en comparación con el volumen retenido. Si
una constante de la hemodiafiltración volumen se está realizando, donde la el volumen
retenido se mantiene constante y el tampón hemodiafiltración entra a la misma velocidad
que deja filtrado, una diavolume se calcula como:
DV o N [-] = volumen total del buffer presentó a la operación durante la hemodiafiltración /
volumen retenido
Módulos
Las membranas son fabricadas en módulos en varios formatos. La mayoría de los
formatos comunes utilizados para tangencial de filtración de flujo son:
• Placa plana
• Espiral de la herida
• Fibra hueca
Los patrones de flujo básicos para cada uno de estos módulos se muestra en la figura 7.
Pantallas se han insertado en el alimento y / o filtrado de canales en espiral y los módulos
de placa plana para aumento de la turbulencia en los canales de y reducir la oncentración
de la polarización. Esto no es una opción con módulos de fibra hueca. El promotor de
tubulencia de los canales tienen mayor masacoeficientes de transferencia a un menor
flujo cruzado de las tasas, lo que significa que el aumento de los flujos son logrado con un
menor de bombeo requisitos. Promovida por la turbulencia canales de alimentación son,
por lo tanto, más eficientes que los canales abiertos. Utilizando un pantalla suspendida en
una placa plana módulo ofrece algunos de los beneficios de la abierto y promovido por la
turbulencia canales. La figura 8 ilustra el diferentes tipos de canales de configuraciones.

Modulo de placa plana

En un módulo de membrana placa plana, capas de la membrana, ya sea
con o sin alternando capas de separación la pantalla se apilan juntos y
luego sellado en un paquete. El alimento líquido es bombeada a los
canales alternos a un extremo de la pila y el filtrado pasa a través de la
membrana en la filtrado de canales. Módulos de placa plana
en general, tienen un embalaje de alta densidad (área de la membrana
por área del espacio de piso), permiten escalado lineal, y algunos
ofrecen la opción de abrir o canales de la turbulencia.

Espiral
En un módulo en espiral, alternando capas de la membrana y el separador de pantalla se
enrolla alrededor de un hueco núcleo central. La corriente de alimentación es bombeado
en un extremo y fluye hacia abajo el eje del cartucho. Filtrado pasa a través de la
membrana y la espirales al núcleo, donde se eliminado. Las pantallas de separación
aumento de la turbulencia en la línea de flujo, que conduce a un módulo de mayor
eficiencia de fibras huecas. Una desventaja de espiral módulos es que son no lineal
escalable, ya sea porque la longitud de patrones de flujo de alimentación (cartucho de
de longitud) o el filtrado de patrones de flujo de longitud (ancho de cartucho) se debe
cambiar dentro de las escalas. Sin embargo, en espiral los módulos son una buena opción
de bajo costo por muy amplia zona de operaciones de la unidad, como necesarios para la
alimentación y bebidas aplicaciones.

Fibra hueca

Módulos de fibra hueca se componen de un haz de tubos de membrana

con diámetros estrechos, típicamente en la rango de 0,1 a 2,0 mm. En
un hueco módulo de fibra, la corriente de alimentación es bombeada
hacia la luz (interior) del tubo y filtrado pasa a través de la membrana al
lado de la carcasa, donde es eliminado. Debido a una abierto
patron de flujo de alimentación, corte bajo se genera incluso con tasas
de flujo cruzado moderado. Aunque esto puede ser muy útil para
Productos sensibles al cizallamiento, en general, reduce la eficiencia del
módulo exigiendo muy elevados de bombeo capacidad para alcanzar los
flujos de la competencia.
Casetes Pellicon tienen tamaños de forma lineal con módulos
escalables a los volúmenes de proceso de de 20 ml a 10.000 L. Estos
módulos se incorporan a todos los
materiales de la membrana discutido anteriormente.
Espiral módulos son Helicon útiles para el procesamiento por su bajo
costo y grandes volúmenes. Módulos de la norma polietersulfona se
usan para el procesamiento de pequeños volúmenes cuando un espiral
de cuerda formato es preferible.