A base celular da

morfognese
Msc. Patrcia de Abreu Moreira
A base celular da morfognese
Um corpo no meramente uma coleo
de tipos de clulas distribudas ao acaso
Desenvolvimento diferenciao e morfognese Desenvolvimento diferenciao e morfognese
As clulas do embrio em
desenvolvimento criam rgos funcionais
A base celular da morfognese
Como se formam tecidos a partir de clulas?
Como so os rgos construdos a partir de tecidos?
Como clulas migrantes atingem seu destino e como se Como clulas migrantes atingem seu destino e como se
formam rgos em determinados locais?
Como crescem rgos e suas clulas e como esse
crescimento coordenado ao longo do desenvolvimento?
Comportamento celular
A base celular da morfognese
Existem dois grupos principais de clulas
no embrio:
Clulas epiteliais Clulas epiteliais
Clulas mesenquimatosas
A base celular da morfognese
Duas vias principais pelas quais clulas se
comunicam para que se efetue a
morfognese
Substncias difusveis
Contato
Enquanto o paradigma dominante na gentica do desenvolvimento a
expresso diferencial do gene, o paradigma dominante na morfognese
envolve afinidade celular diferencial
Afinidade celular diferencial
Papel da superfcie celular na morfognese
Townes e Holtfreter, 1955
As posies finais
das clulas das clulas
reagregadas refletiam
suas posies
embrionrias
Afinidade celular diferencial
Afinidade seletiva
Ectoderma
+ mesodrmicas + mesodrmicas
- endodrmicas
Mesoderma
+ endoderma
+ ectoderma
Afinidade celular diferencial
Boucaut, 1974
Injeo de clulas das camadas germinativas na
cavidade gastrular de anfbios cavidade gastrular de anfbios
Informao posicional s clulas embrionrias
Afinidade celular diferencial
Afinidades seletivas mudam durante o
desenvolvimento...
Trinkaus, 1963 Trinkaus, 1963
Correlao entre mudanas de adeso in vitro e o
comportamento da clula embrionria
Fink e McClay, 1985 ourio-do-mar
Afinidade celular diferencial
Agregao histotpica
Pele normal Suspenso de clulas isoladas
Afinidade celular diferencial
Agregados aps 24 hs Migrao de clulas epidrmicas para a periferia
Aps 72hs, a epiderme e derme
foram reconstitudas
A base molecular da adeso
clula-clula
Formao de tecidos e rgos
Membrana plasmtica
Molculas de adeso celular
Molculas da juno celular
Molculas de adeso a substrato
Molculas de adeso
Diferentes clulas podiam usar diferentes molculas de
adeso
Molculas de adeso
Molculas mediadoras de adeso celular:
Molculas de adeso celular (CAMs)
Caderinas ons Ca
2+
CAMs da superfamlia de imunoglobulinas
Molculas de adeso
Caderina
Papel crtico no estabelecimento e
manuteno de conexes intercelulares
Cruciais para a segregao espacial de Cruciais para a segregao espacial de
clulas e para a organizao da forma
animal
Caderina
Caderinas interagem com outras
caderinas de clulas adjacentes
So ancoradas na clula por complexos So ancoradas na clula por complexos
de protenas chamados cateninas
Caderina
Caderina
E-caderina caderina epitelial
L-CAM e uvomorulina
Expressa em todas as clulas embrionrias
precoces de mamferos
Restrita a tecidos epiteliais de embries e
adultos
Caderina
P-caderina caderina de placenta
Expressa primariamente em clulas
placentrias do embrio de mamfero placentrias do embrio de mamfero
Facilita a conexo do trofoblasto com o
tero
Caderina
N-caderina caderina neural
vista inicialmente nas clulas mesodrmicas
no embrio em gastrulao enquanto elas no embrio em gastrulao enquanto elas
perdem sua expresso de E-caderina
Intensamente expressa nas clulas do sistema
nervoso central em desenvolvimento
Caderina
E-caderina E-caderina
N-caderina
Quando se forma o tubo neural, ele
expressa N-caderina, a epiderme
expressa E-caderina e as clulas da
crista neural nenhuma das duas
Caderina
EP-caderina
C-caderina
crtica na manuteno da adeso celular entre
os blastmeros de Xenopus
Necessria para os movimentos normais de
gastrulao
Caderina
Caderinas promovem a aderncia celular
Ligao homoflica
Expresso de caderinas frequentemente
correlacionada com agregao e
disperso
Caderina
Distribuio homotpica
Hepatcitos E-caderina
Clulas retinais N-caderina Clulas retinais N-caderina
Dissociao de clulas pulmonares
embrionrias e recombinao com
fibroblastos
Caderina
Experimento in vivo
Injeo de mRNA de N-caderina em um
dos dois blastmeros da r Xenopus dos dois blastmeros da r Xenopus
Nessa condio, o tubo neural no se
separa da clulas que formaro a
epiderme
CAMs
N-CAM
Molculas de adeso de clulas neurais
Glicoprotenas
No necessitam de ons clcio
CAMs
CAMs
Papel importante no desenvolvimento do
sistema nervoso
N-CAM necessria para uma ligao N-CAM necessria para uma ligao
adequada de axnios s clula
musculares alvos
CAMs
L1 necessria para a produo de certos
axnios
Mutaes na L1 no homem causam um Mutaes na L1 no homem causam um
espectro de anomalias:
Hidrocefalia
Retardamento mental
Inabilidade em controlar movimentos dos membros
Molculas de juno celular
Protenas da juno em fenda
Molculas de juno celular
Compartimentos fisiolgicos dentro do
embrio em desenvolvimento
Molculas de juno celular
Microinjeo de anticorpos contra
protenas da fenda em blastla de
Xenopus de oito clulas
Molculas de juno celular
Os canais da juno em fenda so feitos
de protenas chamadas conexinas
Canal transmembrana formado por um Canal transmembrana formado por um
complexo de juno
Molculas de juno celular
Doze tipos de conexinas
podem ser reguladas por caderinas
Possuem papis separados, mas Possuem papis separados, mas
parcialmente sobrepostos, no
desenvolvimento normal
Molculas de juno celular
A membrana celular tem, ento, vrios
mecanismos pelos quais pode fazer ligaes
com membranas de outras clulas:
CAMs dependente de clcio CAMs dependente de clcio
CAMs da superfamlia das imunoglobulinas
Protenas de juno
A clula tambm pode se ligar a componentes
especficos da matriz extracelular
Molculas de adeso a substrato
Quando comear a migrao, quando
cessar a migrao e qual rota tomar
Os sinais para este procedimento esto Os sinais para este procedimento esto
na matriz extracelular (MEC)
Hiptese da afinidade diferencial a
substrato
Molculas de adeso a substrato
Cada tipo de clula migratria prefere
certas combinaes de molculas da
matriz a outras combinaes, e essas
molculas orientam a clula para quando molculas orientam a clula para quando
e onde migrar
Matriz extracelular
A MEC consiste de macromolculas
Essas molculas interagem de modo a
formar uma estrutura insolvel que pode formar uma estrutura insolvel que pode
ter vrias funes no desenvolvimento
Matriz extracelular
Pode separar dois grupos adjacentes de
clulas e prevenir qualquer interao
Pode servir como o substrato no qual as Pode servir como o substrato no qual as
clulas migram
Pode at induzir diferenciao em certos
tipos celulares
Matriz extracelular
Existem trs componentes principais na
maioria das MEC: colgeno,
proteoglicanos e glicoprotenas grandes
Colgeno
Famlia de glicoprotenas contendo altas
porcentagens de resduos de glicina e
prolina
Quase metade das protenas do corpo so
constitudas de colgeno
Colgeno
Colgeno Tipo I - encontrado nas MECs
da pele, tendes e ossos
Colgeno Tipo II - como secreo das Colgeno Tipo II - como secreo das
clulas cartilaginosas, na notocorda e no
corpo vtreo do olho
Colgeno
Vasos sanguneos apresentam colgeno
Tipo III
O Tipo IV encontrado na lmina basal O Tipo IV encontrado na lmina basal
produzida por clulas epiteliais
Proteoglicanos
Tipos especficos de glicoprotenas nas
quais:
O peso dos resduos de carboidratos muito O peso dos resduos de carboidratos muito
maior do que o da protena
Os carboidratos so cadeias lineares
compostas de dissacardeos repetitivos
Proteoglicanos
Um dos acares tem um grupo amino e
a unidade repetitiva chamada
glicosaminoglicano (GAG)
Proteoglicanos
cido hialurnico
Condroitina sulfato
Dermatan sulfato
Queratan sulfato
Heparan sulfato
Proteoglicanos
A consistncia da MEC depende da
relao entre colgeno e proteoglicanos:
Cartilagem - proteoglicanos Cartilagem - proteoglicanos
Tendes - fibras de colgeno
Proteoglicanos
Importantes como mediadores de
conexes entre tecidos adjacentes em um
rgo
No rgo, eles renem clulas soltas para
formar uma lmina epitelial
Glicoprotenas
MECs contm uma variedade de outras
molculas especializadas: fibronectina,
laminina e tenascina
Essas glicoprotenas grandes so
responsveis pela organizao de
colgeno, proteoglicanos e clulas em
uma estrutura ordenada
Glicoprotenas
Fibronectina serve como adesivo
molecular em geral, ligando clulas a
substratos
As rodovias pelas quais se movem
certas clulas migratrias so
pavimentadas com essa protena
Glicoprotenas
Em embries de galinha, os precursores
do corao migram na fibronectina para
se mover das laterais do embrio para a
linha mediana linha mediana
Injeo de anticorpos de fibronectina
Glicoprotenas
Laminina um componente principal da
lmina basal
Composta de trs cadeias peptdicas, e Composta de trs cadeias peptdicas, e
tambm pode se ligar ao colgeno,
glicosaminoglicanos e clulas
Glicoprotenas
Se liga ao colgeno do Tipo IV e
reconhece principalmente clulas
epiteliais e neurnios
Importante na montagem da MEC
Glicoprotenas
Tenascina encontrada transitoriamente
em vrias MECs
Citotactina
Nem sempre promove adeso celular
Glicoprotenas
Diferentes clulas reagem de maneira
diferente tenascina
Sntese e secreo de proteases das Sntese e secreo de proteases das
clulas que nela se localizam
Vias de migrao
Remodelao da MEC
Receptores celulares para
molculas da MEC
Habilidade de ligao da clula s
glicoprotenas adesivas
Receptores de membrana
Integrinas
Integrinas
No lado extracelular, integrina se liga
sequncia arginina-glicina-aspartato
(RGD) de vrias protenas adesivas em
MEC, inclundo vitronectina, fibronectina e MEC, inclundo vitronectina, fibronectina e
laminina
Integrinas
No lado citoplasmtico, se liga talina e
-actinina, duas protenas que se ligam
aos microfilamentos de actina
Essa ligao dupla permite o movimento
da clula pela contrao dos
microfilamentos de actina contra a MEC
fixa
Integrinas
Tipos diferentes de clulas podem ter
diferentes molculas de integrinas com
diferentes afinidades por molculas da
MEC MEC
Combinaes das subunidades e :
21 se liga ao colgeno e laminina
41 se liga somente fibronectina
Glicosiltransferases
Encontradas no retculo endoplasmtico e
nas vesculas de Golgi
Produo de glicoprotenas
As glicosiltransferases so especficas
para um dado acar
Galactosiltransferase
Glicosiltransferases
Galactosiltransferases so enzimas
funcionais da membrana celular
Adeso mltipla
Adeso diferencial resultante de sistemas
de adeso mltipla
Os processos morfogenticos de Os processos morfogenticos de
interao clula-clula so provavelmente
realizados por combinaes de molculas
de adeso celular
Adeso mltipla
Fixao inicial do embrio de
camundongo
Clulas trofoblsticas tm receptores Clulas trofoblsticas tm receptores
para o colgeno e os proteoglicanos do
endomtrio uterino
Adeso mltipla
Glicosiltransferases da superfcie celular
P- e E-caderinas esto presentes tanto no
tecido uterino como no trofoblstico no tecido uterino como no trofoblstico no
local da implantao
Vias de transduo de sinais
Os destinos das clulas so determinados
pelas interaes em suas superfcies
Como certas interaes na superfcie da Como certas interaes na superfcie da
clula causam a transcrio de genes
especficos dentro do ncleo?
Vias de transduo de sinais
Vias de transduo de sinais
Ligante
Fator de transcrio
Clula, MEC ou ainda molcula difusvel
Sinal endcrino ou parcrino