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CONTENIDO

1. INTRODUCCIN Y FUNDAMENTO DE LA TECNICA ANALTICA. 2


1.1. INSTRUMENTACIN. 3
1.1.1. FUENTE DE LUZ. 3
1.1.2. HORNO O ATOMIZADOR TRMICO. 4
1.1.3. SELECTOR DE LONGITUDES DE ONDA. 5
1.1.4. DETECTOR. 5
1.1.5. ORDENADOR. 6
1.2. CARACTERISTICAS DE LA GFAAS. 6
2. TRATAMIENTO DE MUESTRA. 7
3. CONCLUSIONES. 9
4. BIBLIOGRAFIA. 9




Olga Sanahuja Parejo
DETERMINACIN DE METALES PESADOS (Cd, Cu, Pb), CONJUNTA O SEPARADAMENTE, EN
MUESTRAS DE PESCADOS POR GFAAS.


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1. INTRODUCCIN Y FUNDAMENTO DE LA TECNICA ANALTICA.
La tcnica analtica cuantitativa de espectroscopia de absorcin atmica (AAS), mide la
radiacin electromagntica que los tomos absorben, en las frecuencias o longitudes de
onda caractersticas del elemento objeto de estudio.

La AAS mide dentro de la longitud de onda del UV-Vis, pero hay que tener en cuenta que las
especies a estudiar han de ser atomizadas previamente al analisis, para descomponerlas y
convertirlas en gases. Al convertirlas en gases son ms fciles de indentificar, ya que
tendremos una longitud de onda caractertica de cada elemento.

En resumen la AAS se fundamenta en la absorcin de radiacin electromagntica a una
determinada longitud de onda, por los electrones de un tomo gaseoso.
DETERMINACIN DE METALES PESADOS (Cd, Cu, Pb), CONJUNTA O SEPARADAMENTE, EN
MUESTRAS DE PESCADOS POR GFAAS.


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Para atomizar electrotrmicamente, en este trabajo corresponde el uso del horno de
grafito, por ello se denomina a la tcnica Espectroscopia de Absorcin Atmica en Horno de
Grafito (GFAAS).

En la tecnica GFAAS la introduccin de la muestra en el equipo se hace en gotas en el horno,
que se calienta electricamente hasta normalmente 3000C. El horno est en el camino
ptico del espectrometro de absorcin atmica, as la readiacin que emite la fuente pasa a
travs de las ventanas de cuarzo por el tubo de grafito.

Como es una absorcin, la absorbancia se puede relacionar con la concentracin del analito
a travs de la Ley de Lambert-Beer:
A = a b c
Donde:
A: Absorbancia
a: absortividad (L/g cm)

b: camino ptico de la celda (cm)
c: concentracin (g/L)
As, a concentraciones conocidas y midiendo la absorbancia podemos hacer un calibrado
lineal, y podemos cuantificar el analito.
1.1. INSTRUMENTACIN.

Fig.1. Partes bsicas de un instrumento de GFAAS.
1.1.1. FUENTE DE LUZ.
Para esta tcnica existen diferentes tipos de fuente, como puede ser:
Lmpara de ctodo hueco: es la ms usada. Se compone de 2 electrodos (catin
(metal puro o material que contenga el analito) y anin (alambre de W o Ni)) dentro
de un cilindro que contiene gas (Ar, Ne) a baja presin. Cuando aplicamos una
FUENTE DE
LUZ
HORNO
SELECTOR DE
LA LONGITUD
DE ONDA
DETECTOR ORDENADOR
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diferencia de potencial entre los electrodos ionizamos el gas del cilindro, y los iones
se mueven hacia el catin y cuando llegan, chocan y vaporizan los tomos del
analito. Estn disponibles para muchos elementos, se maneja con facilidad, es
estable, su intensidad es buena y suficiente y es bastante duradera.
Lmpara de descarga sin electrodos: es un gas inerte a baja presin dentro de un
bulbo de cuarzo. Este bulbo tiene en su interior el elemento objeto de estudio o una
sal del mismo. Al aplicar una radiofrecuencia sobre el bulbo, el gas de su interior se
ioniza, y la energa acoplada excita a los tomos vaporizados del analito que esta
dentro del tubo y emiten un espectro caracterstico. Da espectros ms intensos que
la anteriores, pero solo se usa para analitos que se vaporicen fcilmente (As, Pb) y
requiere un mayor tiempo de estabilizacin que la anterior.
Lmpara de arco de xenn: se trata de una cavidad de Si o zafiro dentro de la cual
tenemos 2 electrodos de W y tambin gas Xe. Hay que tener en cuenta que en
GFAAS los elementos se analizan como regla general simultneamente por ello si se
quiere hacer un anlisis multielemental deberamos usar la lmpara de arco de Xe,
ya que emiten la radiacin continua intensamente. La lmpara de arco de Xe no se
emplea mucho ya que hay muy pocas a la venta por su necesidad de monocromador.
Lser de diodos semiconductores: tiene un uso bastante limitado por su elevado
coste, gran tamao, difcil manejo y baja fiabilidad.

Con todo esto a la hora de escoger yo pondra una lmpara de ctodo hueco por todas las
propiedades expresados con anterioridad para el anlisis de Cd, Cu y Pb si los queremos
analizar separadamente. Todos los artculos revisados usan este tcnica GFAAS, ya que era
la que se indica en el enunciado.
1.1.2. HORNO O ATOMIZADOR TRMICO.
Al horno es donde atomizaremos al analito. Por sus paredes tanto dentro como fuera,
circula gas (normalmente Ar) que permite excluir el oxgeno y evita que las superficies del
tubo entren en combustin y tambin evita que no se formen especies entre analito y
oxigeno no deseadas. Al medir el flujo de gas en el interior para maximizar el tiempo en que
los tomos estn en el tubo, nos permite un aumento de la sensibilidad y los lmites de
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deteccin pueden mejorarse. La atomizacin depender del material y dimensiones del
tubo.

Hay diferentes materiales que pueden constituir el horno, pero de todos ellos el ms usado
es el grafito, ya que es qumicamente inerte, tiene elevada conductividad y pureza, se
moldea con facilidad, tiene baja porosidad y bajo coeficiente de expansin y un elevado
punto de fusin.

Por GFAAS se analizan diferentes tipos de muestras (slidos, lquidos o Slurries). Pero los
ms usado normalmente son lquidos en forma de gotas, ya que con ellas se pueden usar
ms fcilmente modificadores para minimizar interferencias y tambin porque usamos
menos cantidad de muestra. Las gotas se inyectan con micropipetas, pero lo mejor sera
introducirlas con un auto-muestreador para que podamos tener reproducibilidad.

En mi caso el horno en principio usara el que tuviera en el laboratorio, pero si pudiera
elegir, usara uno construido de grafito y introducira la muestra en estado lquido y con
gotas mediante un sistema automtico.
1.1.3. SELECTOR DE LONGITUDES DE ONDA.
El selector de longitudes de onda nos permite separar la radiacin que excita los tomos del
resto de lneas emitidas por la fuente de luz. Hay diferentes selectores (monocromadores
(aslan la lnea espectral) o filtros), actualmente en GFAAS destacan los equipos con
monocromadores. Para anlisis multielemental los equipos tambin los tienen pero ms
complejos y caros.
1.1.4. DETECTOR.
El detector es el que transforma la radiacin que pasa a travs de la celda de atomizacin en
una seal elctrica. Los tubos fotomultiplicadores, por su fiabilidad y fcil manejo son los
ms usados en GFAAS. Un fotomultiplicador consta de un ctodo que libera electrones
cuando le incide la luz y de un nodo. La luz del monocromador incide en el ctodo y este
emite electrones por cada fotn que lo alcanza. Estos electrones circulan hacia un dinodo,
cuando colisionan con este se emiten otros electrones por cada uno que choca, y as
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sucesivamente hasta que los electrones llegan al nodo. Este movimiento elctrico nos da la
seal.
1.1.5. ORDENADOR.
Por una serie de componentes elctricos, y un microprocesador, la seal dada por el
detector puede ser tratada para obtener una absorbancia, una altura de pico, la intensidad
de fondo, tambin nos recoge los datos y nos permite controlar los diferentes
componentes del instrumento, cuyos parmetros se introducen a travs del teclado, se
pueden almacenar y volver a utilizar. Tambin podemos hacer grficos con los estndares,
obtener la concentracin del analito por estadstica,
1.2. CARACTERISTICAS DE LA GFAAS.
Los LOD son muy buenos para ciertos elementos.
El tiempo de anlisis entre 2-4min por elemento.
Tiene un rango dinmico limitado
Sin interferencias espectrales, pero si presenta interferencias qumicas matriciales.
Puede analizar un nmero elevado de elementos.
Volumen de muestra requerido muy pequeo y opera en automtico.
Tiene rangos de deteccin sobre los ppb (tcnica sensible).
Tiene un precio moderado y es normalmente compacto.

Al revisar los diferentes bibliografas se puede ver que los LOD de esta tcnica para los
elementos buscados (Cd, Cu, Pb) son:
ELEMENTO LOD GFAAS (ppb) Lm. Mx. en pescados y cefalpodos (ppm)
Cd 0,02 1
Cu 0,07 20
Pb 0,04 5
Tabla 1. Lmites mximos permitidos por legislacin
1
y lmites de deteccin que da la tcnica para cada unos
de los elementos analizados
2
(Cd, Cu y Pb).



1
Ministerio de Sanidad y Consumo: BOE 15 agosto 1991 , nm.195 , [pg. 27153 y siguientes].
2
www.sol-analiticas.com
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En los artculos revisados se emplea la GFAAS y lmpara de ctodo hueco, la nica diferencia
son los tratamientos de muestra, para reducir los posibles efectos matriciales.
2. TRATAMIENTO DE MUESTRA.
En alguno de los artculos se presenta desde el principio el tratamiento: trituracin,
homogenizacin, secado, cuarteo y tratamiento. Como ya he indicado la nica diferencia
est en el tratamiento. Hay diferentes tratamiento de muestra: digestin seca, hmeda y
asistida por microondas.

Durali Mendil, mer Faruk Linal y otros en 2011 investigan diferentes mtodos de digestin
y estudian la recuperacin que se obtiene con ellos, los mtodos usados son:
Digestin seca: calcinando la muestra en un horno de mufla, donde la destruccin se
hace en un periodo de aproximadamente 12h. Disolviendo el residuo en ntrico y
analizando directamente la muestra por GFAAS. Hay que tener un control bueno de
la temperatura ya que pueden haber prdidas de analitos voltiles. Otros tambin
prueban con la introduccin directa de la muestra slida en el GFAAS. Sera la forma
ms rpida, ms barata y ms simple de digestin, no usa productos peligrosos. Da
buenas recuperaciones pero con el auto muestreador es difcil reproducir el peso. A
veces requiere aditivos como el ntrico, MgO, Mg(NO
3
)
2
para prevenir la
volatilizacin y acelerar la digestin.
Digestin cida hmeda: ntrico con perxido de hidrgeno.
Digestin cida asistida por microondas: con los mismos reactivos que la cida
hmeda.

Digestin cida hmeda consiste en el uso de cidos o mezcla de cidos y un oxidante, a
temperatura ambiente o calentando (aplicando por ejemplo el mtodo Kjeldahl). Pero al
revisar los artculos se ve que requiere mucho tiempo (se puede alargar hasta das). C.
Almeda, M J. Clemente y otros (2006), aplican la digestin cida tradicional con ntrico pero
requiere mucho tiempo y adems puede ser abierta (pueden haber prdidas y
contaminaciones) y cerrada (requiere igual mucho tiempo pero hay que aplicarle reflujo).

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En todos artculos revisados se ve que la digestin que ms destaca es cida asistida por
microondas, que reduce considerablemente el tiempo de la digestin cida convencional.
Consiste en introducir la muestra junto con un cido o mezcla de cidos y oxidantes y
aplicarle el microondas. Se ha visto que se ha usado en casi todos los artculos HNO
3
con
H
2
O
2
, pero con la modificacin de estar asistida por microondas. Pero tambin HNO
3
con
HF; H
2
SO
4
; HCl; HClO
4
. El ltimo tiene un uso bastante reducido por su elevada facilidad
para explotar. El sulfrico presenta el problema de que puede atacar adems de la materia
orgnica a los metales. Por lo que en todos se usan el HNO
3
mezclado con otro cido o
independiente. Un ejemplo de ntrico con clordrico lo aplican Jienbu Liu, Gai Zhang en 2009.

Pei Yu Liu, y otros (2011) y Mustafa Tuzen (2009) aplican esta digestin cida asistida por
microondas y las recuperaciones son bastante buenas; en 2013, R. Lamiere y otros estudian
dos mtodos diferentes de digestin (la misma que Pei Yu y otra usando una mezcla de
ntrico con fluordrico), con fluordrico las recuperaciones se presentan por encima del 100%
y el tiempo de la digestin es mayor.

Tambin se estn intentado utilizar otros reactivos en la digestin (HCCOH y TMAH) pero al
compararlos con el ntrico, se ve que con los nuevos reactivos la sensibilidad obtenida es
menor que en el ntrico. [Elizer Quadro Oreste, Richard Macedo de Oliveira, Adriana
Medeiros Nunes, 2013], incluso hay estudios en los que se vara la cantidad a aadir de
reactivos o de oxidantes pero al final las ventajas del ntrico o ntrico con otro cido hacen
que sea el ms usado.

Al estudiar estos tres casos se ve que en la digestin cida hmeda asistida por microondas,
se reduce considerablemente el tiempo de la digestin, la recuperacin es muy buena en
comparacin con las otras 2, al usarse recipientes cerrados constituidos por polmeros
trmicamente estables aguantan elevadas temperaturas y no reaccionan con los analitos. Al
ser vasos cerrados no hay contaminacin ambiental de la muestra y no hace que se pierdan
analitos (reproducible). Tambin se observa que las desviaciones estndar con la seca y la
hmeda son mayores que para la asistida con microondas.

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3. CONCLUSIONES.
A la vista de todo lo comentado anteriormente, solo resumir que la tcnica de GFAAS por
sus lmites de deteccin es adecuada para la determinacin de los metales objetos de
estudio (Cd, Cu y Pb). Se usara una lmpara de ctodo hueco por ser la ms cmoda de
obtener, la ms manejable,

En cuanto al tratamiento de muestra, es obvio que usara la digestin cida asistida por
microondas, usando como reactivo el cido ntrico y como oxidante perxido de hidrgeno,
ya que con esta digestin se reduce el tiempo de la hmeda cida tradicional, se evitan
contaminaciones, es reproducible, es sensible, las recuperaciones son muy buenas,

Se debera intentar reducir el uso de reactivos peligrosos y seguir intentando reducir el
tiempo de la digestin, que ya ha tenido una reduccin considerable pero intentar
disminuirlo ms, e incluso buscar alguna otra tcnica en la que se pueda analizar la muestra
de la forma ms directa posible.

4. BIBLIOGRAFIA.
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