DEMANDA BIOLTICA DE OXGENO (DBO)

REACTIVOS Y DISOLUCIONES
Agua destilada.
Hidrxido de sodio (NaOH) en perlas.
Disolucin de allitiourea Inhibidor de la nitrificacin (5g/l C
4
H
8
N
2
S).
Cloruro sdico (NaCl).
Cloruro potsico (KCl).
Cloruro de calcio dihidrato (CaCl
2
.2H
2
O).

MATERIALES Y EQUIPOS
Marcadores
Probetas de 50 y 100 mL
Viales de polipropileno de 50 y 100 mL
Pipeta Pasteur
Papel indicador de pH
Bimetro: botella de vidrio mbar, cpsula de goma y tapn-registrador.
Cmara incubadora
Bases de agitacin magntica
Barillas agitadoras (imanes)

PROCEDIMIENTO
1. Preparar diluciones para las muestras que as lo requieran
2. Se introduce una varilla agitadora (imn) en el interior del bimetro.
3. Se aade el inhibidor de la nitrificacin en una proporcin equivalente a 20 gotas de la disolucin de alliltiourea por litro
de muestra.
4. Se ponen dos perlitas de NaOH en la cpsula diseada a tal efecto.
5. Se aade un volumen de muestra determinado en el bimetro. El volumen a utilizar depende del rango de DBO esperado, y
est especificado en las instrucciones de uso del bimetro.
6. Se coloca la cpsula conteniendo NaOH sobre la parte superior del bimetro, una vez que la muestra est estable y no se
observen burbujas de aire.
7. Se cierra el bimetro con el correspondiente tapn-registrador, y se pone la lectura a cero.
8. Se introduce el bimetro en la cmara incubadora a 25C y se enciende la base de agitacin magntica. Se mantiene
agitacin suave constante durante todo el ensayo.
9. Se realiza la lectura a los cinco das, siguiendo el procedimiento de lectura de la casa fabricante del bimetro.

CLCULOS

La DBO5 final del agua analizada, expresada en mg de O
2
por litro de muestra, ser la lectura obtenida en el bimetro (Display)
multiplicada por el factor de conversin (Fc) y el factor de dilucin (Fd). La correspondencia factor de conversin a volumen de
muestra introducido en el bimetro se indica en las instrucciones de uso del bimetro.

DBO
5
(mg O
2
/l) = Display (0-50) x Fc x Fd

A continuacin se adjunta la tabla con los factores de conversin y volmenes de medida en funcin del rango esperado de DBO5.
Volumen de muestra (mL) Factor Rango esperado (mg O2 L-1)
22,7 100 0-4000
43,5 50 0-2000
97 20 0-800
164 10 0-400
250 5 0-200
365 2 0-80
432 1 0-40

OBSERVACIONES

Hay que tener en cuenta que las muestras que tengan un pH inadecuado y/o una concentracin excesiva de materia orgnica,
debern ser diluidas con Suero Ringer (agua de siembra). El Suero Ringer (SR) es una solucin electroltica, isotnica con respecto a
la flora bacteriana, lo cual permite diluir las muestras sin afectar al metabolismo de los microorganismos contenidos en la misma. Si
para diluir las muestras se utilizase un solvente demasiado concentrado inicamente (hipertnico), agua del grifo por ejemplo, parte
de los microorganismos podran ver afectada su actividad, sufriendo un desecamiento (crenacin-plasmlisis). Por otro lado, si
diluyramos con agua destilada (hipotnica) los microorganismos sufriran un proceso de hinchamiento (cistlisis-turgencia).

Preparacin del SR: 8,5 g de NaCl + 0,4 g de KCl + 0,34 g de CaCl
2
.2H
2
O en 1 l de agua destilada.

SUPUESTOS DE DILUCIN.

pH inadecuado: el pH de las muestras debe estar entre 5 y 10, lo cual puede comprobarse rpidamente con papel
indicador.
Concentracin excesiva de materia orgnica: existen aguas residuales con una carga orgnica extraordinaria, lo que se
traduce en un elevado consumo de oxgeno necesario para las oxidaciones metablicas, por lo que an utilizando el
volumen mnimo (22,7 mL) se consume todo el oxgeno contenido en los bimetros. Si esto ocurre, no podremos saber
cuanto oxgeno se consume exactamente en 5 das. Ocurre por ejemplo con aguas residuales de ganadera (purn).

INTERPRETACIN DE RESULTADOS.

A continuacin, para comprender mejor los resultados, se incluyen valores representativos (mg O
2
l
-1
):
Agua residual domstica: 250-350 VLV al cauce pblico CHS: <15 Purn: 3000-8000
Ro no cont / contaminado: 3 / 10 VLV en terrenos susceptibles: <60 Purn depurado*: 300-500