NORMAS GENERALES DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE
MICROBIOLOGA CLNICA : La peligrosidad de un agente est directamente relacionada con el tipo de microorganismo y la manipulacin a la que es sometido. Por ello es bsico: 1.Conocer los agentes, sustancias y productos peligrosos que existen en el laboratorio. 2. Conocer la metodologa de trabajo del laboratorio. 3. Conocer el equipamiento del laboratorio. 4. Conocer las medidas a tomar en caso de emergencia. 5. Conocer las leyes relacionadas con la seguridad biolgica. 6. Respetar y hacer cumplir todo lo anterior. Para que se produzca un accidente por agente biolgico deben concurrir bsicamente cuatro elementos: a. Un husped susceptible b. Un agente infeccioso c. Una concentracin suficiente de ste d. Una ruta de transmisin apropiada. De todos ellos, el que mejor se puede controlar en el laboratorio es la ruta de transmisin. Las rutas de transmisin ms comunes en el laboratorio son la area y la inoculacin directa, muy por encima de todas las dems, aunque la oral, la percutanea y el contacto directo con la piel o las mucosas tambin son posibles. Siendo imposible determinar a ciencia cierta si cualquier material biolgico est contaminado con microorganismos del grupo 2 3, ciertas muestras (respiratorias, etc.) en las que sea posible que exista un microorganismo del grupo 3 deben manipularse rutinariamente en las Cabinas de Seguridad Biolgica (CSB). 1. MEDIDAS GENERALES Las siguientes medidas son de obligado cumplimiento en cualquier rea del laboratorio: El acceso al laboratorio estar limitado al personal autorizado. No deben entrar en el mismo familiares ni amigos. El personal del laboratorio debe implicarse en el cumplimiento de las normas de seguridad. Todas las reas estarn debidamente marcadas con la seal de riesgo biolgico y su nivel de contencin. Las puertas y ventanas deben permanecer cerradas para mantener la adecuada contencin biolgica. Todas las superficies de trabajo se limpiarn y desinfectarn diariamente y siempre que se produzca un derrame. Los residuos y muestras peligrosas que van a ser incinerados fuera del laboratorio deben ser transportados en contenedores cerrados, resistentes e impermeables siguiendo las normas especficas para cada tipo de residuo. El laboratorio debe permanecer limpio y ordenado y no es aconsejable utilizar los pasillos como almacn. Siempre debe quedar un espacio libre no inferior a 120 cm para poder evacuar el laboratorio en caso de emergencia. El transporte de las muestras dentro o entre laboratorios se realizar de tal manera que, en caso de cada, no se produzcan salpicaduras. Lo recomendable es hacerlo en cajas hermticas o neveras transportables. Estas cajas o neveras debern ser rgidas y resistentes a los golpes, contar con materiales absorbentes en su interior y de fcil desinfeccin. Se etiquetarn o identificarn de forma oportuna y no podrn ser utilizadas para otros fines. Bajo ningn concepto se deben transportar las muestras a mano. La ropa protectora, fcilmente ajustable y confortable, as como guantes, gafas, etc. debe estar disponible en todo momento. La ropa protectora de las reas con nivel de contencin 3 (batas) nunca debe ser usada fuera del rea de trabajo y si se quita debe de ser desechada automticamente en una bolsa de material contaminado. Jams debe volver a ser usada. Todo el personal debe poner especial cuidado en evitar el contacto de la piel con materiales potencialmente infecciosos. Con este fin deben usarse guantes cuando se manipulen muestras o cultivos que contengan posibles patgenos. Los guantes siempre sern desechados antes de salir del rea de trabajo. Jams se saldr de la misma con los guantes puestos, ni con ellos se coger el telfono, se tocarn las hojas de examen, maniguetas de las puertas, etc. Tras quitarse los guantes, se realizar un lavado de manos. Se usarn gafas protectoras y mascarillas faciales si existe riesgo de salpicaduras y/o aerosoles. Se pondr extremo cuidado en minimizar el riesgo de autoinoculacin y de generacin de aerosoles. Los derrames y accidentes deben ser informados inmediatamente al Supervisor y al Jefe del Laboratorio y hacerse constar por escrito. Nadie podr trabajar en el rea de tuberculosis con una prueba de Tuberculina negativa. Est rigurosamente prohibido pipetear con la boca. Se realizar pipeteo automtico con material adecuado y cada trabajador ser instruido para manejarlo debidamente. En la zona de trabajo no debe colocarse material de escritorio ni libros ya que el papel contaminado es de muy difcil esterilizacin. No debern usarse lentes de contacto. El personal con el cabello largo debe llevarlo recogido. Comer, beber, fumar y aplicarse cosmticos esta formalmente prohibido en el rea de trabajo del laboratorio, as como el almacenamiento de comida o bebida. El personal debe lavarse las manos frecuentemente durante las actividades rutinarias, tras acabar la jornada laboral y siempre antes de abandonar el laboratorio (almorzar). Se usar un jabn antisptico y el secado se realizar con papel. Las heridas y cortes en las manos, si se han producido en el Laboratorio, sern comunicados al responsable de la Seccin correspondiente, as como al Supervisor de Bioseguridad que lo registrar haciendo constar todas las circunstancias. Las heridas y cortes deben ser convenientemente vendados y despus es imprescindible ponerse guantes.
H- NORMAS DE SEGURIDAD EN LA UTILIZACIN DE EQUIPOS 1. NORMAS GENERALES Los equipos y aparatos nunca deben colocarse en zonas de paso, en particular en los pasillos del laboratorio. Todos los aparatos con toma elctrica debern cumplir las normativas de seguridad correspondientes. Nunca deben utilizarse en zonas mal aisladas y expuestas a la humedad. Las fuentes de calor (calentadores, termobloques, etc.), sobre todo si se alcanzan temperaturas elevadas, debern estar debidamente sealizadas para evitar quemaduras accidentales. Todos los procedimientos de utilizacin de aparatos deberan contar obligatoriamente con apartados relativos a su utilizacin segura. 2. NEVERAS Un adecuado mantenimiento, limpieza y desinfeccin sistemticos de los aparatos reduce considerablemente los riesgos asociados a su utilizacin. Sin embargo, aun en estas condiciones, hay que tener en cuenta lo siguiente: No deben almacenarse cultivos de microorganismos patgenos por inhalacin en recipientes que no estn convenientemente cerrados, especialmente si la cmara tiene un sistema de circulacin de aire. No deben almacenarse reactivos que contengan compuestos voltiles inflamables (ter etlico, por ejemplo) en neveras que no posean un sistema de proteccin antideflagracin. En los aparatos de tipo domstico que se utilizan en el laboratorio debe anularse la lmpara de la luz. 3. CONGELADORES La congelacin es un proceso que mantiene la viabilidad de muchos agentes infecciosos, de ah un potencial riesgo y las siguientes recomendaciones: Tratar de identificar en ficheros, listas, etc. el contenido de lo almacenado y sus riesgos potenciales. El material potencialmente infeccioso debe colocarse en tubos, recipientes, etc. bien cerrados. No se llenarn completamente, para evitar que rebosen por efecto del aumento de volumen tras la congelacin. Descongelar peridicamente, limpiar y desinfectar si fuese procedente. Utilizar guantes para manipular el contenido. Si la temperatura es baja (por ejemplo -70C o inferior), los guantes representan una proteccin adicional. 4. INCUBADORAS La limpieza y la desinfeccin, peridicas y sistemticas, son el mtodo recomendable para reducir los riesgos derivados de la contaminacin accidental del personal del laboratorio. 5. MICROONDAS Los microondas cada vez son ms populares en el Laboratorio de Microbiologa y constituyen una nueva fuente de accidentes, entre los ms frecuentes las explosiones cuando se usan para calentar medios con agar, ya que la diferencia de velocidad de calentamiento produce burbujas que pueden estallar. Las botellas o matraces deben tener el tapn aflojado, ya que si est cerrado estallan fcilmente. Estar siempre presente, con la ropa y pantalla facial adecuadas, y controlar la intensidad del aparato, que slo puede ser la mxima con agua y la mnima si se usa con agar. Deber existir una tabla bien visible de los tiempos en cada posicin del potencimetro y de las cantidades a emplear. Los microondas interfieren con los marcapasos. No deben ser colocados a una distancia inferior a 2 m de las personas que sean portadoras de uno de estos dispositivos. 6. AUTOCLAVES Los autoclaves deben poseer manmetro y termostato, as como vlvula de seguridad, sistema de desconexin rpido y la purga del vapor ha de realizarse a un recipiente estanco y con agua, jams directamente al exterior. No deben usarse si no se conocen perfectamente todos los mandos y su fundamento. Usar guantes especiales para protegerse del calor. No abrir jams si el manmetro no est a "0" y la purga no ha sido abierta. Controlar una vez al mes su capacidad de desinfeccin mediante esporas, no siendo suficiente el mtodo qumico. El uso de registros de presin y temperatura de cada proceso y la instauracin de un programa de mantenimiento tambin puede ser una alternativa vlida al control mediante esporas. El agua debe ser cambiada regularmente. 7. CENTRFUGAS Los mayores riesgos derivan, sobre todo, de la contaminacin por los aerosoles generados durante la centrifugacin de materiales biolgicos y, en menor medida, de los traumatismos accidentales. Se recomienda: Cuando se centrifugue material biolgico potencialmente infeccioso deben utilizarse tubos cerrados; la centrfuga debe disponer de rotores o cestillos de seguridad que protejan al operador de los posibles aerosoles. La rotura accidental de un tubo y su vertido en la cubeta representa una incidencia importante que debe ser comunicada inmediatamente al Supervisor o responsable, de forma que se proceda a la desinfeccin segura del aparato No se deben utilizar centrfugas antiguas que no posean sistema de cierre de seguridad, del que disponen todos los aparatos actuales, ni manipular stas de forma que permitan su apertura mientras estn en funcionamiento. Si el laboratorio dispone de ultracentrfugas, el equilibrado cuidadoso del rotor es fundamental.
2. TRANSPORTE Y ENVO No existen regulaciones o recomendaciones especficas para el transporte seguro de microorganismos patgenos, genticamente modificados o no. Sin embargo, si ampliamos la definicin de estos organismos y los consideramos como "mercancas peligrosas" o "sustancias infecciosas", hay varios documentos internacionales relacionados con el tema, como los de la Unin Postal Universal (UPU), la OrganizacinInternacional de Aviacin (OIAC) y la Asociacin Internacional de Transporte Areo (IATA). A nivel europeo se han publicado, o van a ser publicadas prximamente, varias Directivas sobre la normativa para el transporte de mercancas peligrosas en/entre los Estados Miembros. Estas Directivas, y en general todos los documentos internacionales relacionados, estn basadas en un texto nico comn, las Recomendaciones del Comit de Expertos de las Naciones Unidas para el Transporte de Artculos Peligrosos (UN). Estas recomendaciones clasifican las mercancas peligrosas en varias clases, dos de las cuales estn relacionadas con los microorganismos patgenos, genticamente modificados o no: clase 6.2 (substancias infecciosas) y clase 9 (substancias peligrosas miscelneas y artculos). En la clase 6.2 estn incluidas las substancias que contienen, o razonablemente se espera que contengan, microorganismos viables, incluyendo bacterias, virus, rickettsias, parsitos, hongos, recombinantes hbridos o mutantes, de los que se conoce o razonablemente se cree que pueden producir enfermedad en humanos o animales expuestos a ellos. En la clase 9 se incluyen microorganismos modificados, no peligrosos para humanos o animales, pero que podran dar lugar a cambios en animales, plantas, substancias microbiolgicas, as como en el ecosistema. Tambin se incluyen microorganismos peligrosos para el ambiente, los cuales deben de ser transportados en condiciones especificadas por las autoridades competentes del pas de origen. Sistema bsico de embalaje. De una manera general, para el embalaje y transporte de material biolgico y teniendo en cuenta las peculiaridades en funcin de los microorganismos, un sistema bsico de embalaje se compone de: Recipiente primario estanco, a prueba de filtraciones, etiquetado, que contiene la muestra. El recipiente debe envolverse en material absorbente. Recipiente secundario estanco, a prueba de filtraciones, que encierra y protege el recipiente primario. Se pueden colocar varios recipientes primarios envueltos en un recipiente secundario. Se debe usar suficiente material absorbente para proteger a todos los recipientes primarios y evitar choques entre ellos. Recipiente externo de envo. El recipiente secundario se coloca en un paquete de envo que protege al recipiente secundario y su contenido de los elementos externos, tales como dao fsico y agua. Los formularios con datos, cartas y otras informaciones de identificacin de la muestra deben colocarse pegados con cinta adhesiva en el exterior del recipiente secundario. La Gua para el transporte de substancias infecciosas y especimenes diagnsticos, publicada por la OMS en 1997, permite un conocimiento detallado de los requerimientos especficos para las diferentes situaciones que se pueden plantear ante el envo de cualquier tipo de material biolgico, algunos de los cuales se exponen a continuacin: 1. Cantidad de substancias infecciosas que pueden enviarse en un paquete. 2. Tipos de etiquetas de riesgo para substancias infecciosas y para microorganismos genticamente modificados. 3. Tipos de etiquetas de riesgo para microorganismos no infecciosos. 4. Etiquetas para envo con dixido de carbono (hielo seco). 5. Informacin que debe figurar en la etiqueta. 6. Normas para envo con refrigerantes (dixido de carbono y nitrgeno lquido). 7. Ejemplos de formato de los documentos de envo (los originales pueden obtenerse de la compaa transportadora). En los vuelos internacionales est estrictamente prohibido que los pasajeros transporten substancias infecciosas con ellos o en su equipaje de mano. Igualmente est prohibida la utilizacin del correo diplomtico para el transporte de este tipo de material. Otras posibilidades de transporte de material biolgico incluyen el traslado de muestras dentro de un hospital o centro, de un laboratorio a otro, de un hospital a otro de la misma ciudad o a otra ciudad. Los principios en los que se basa un transporte seguro son los mismos en todos los casos y su finalidad es que la muestra no tenga ninguna posibilidad de salirse del embalaje en las circunstancias normales de transporte. El transporte de material biolgico requiere una buena colaboracin entre el remitente, la compaa de transporte y el destinatario, y cada uno debe asumir sus responsabilidades para garantizar que el producto llega a su destino oportunamente y en buenas condiciones.
A- INTRODUCCIN Durante el trabajo diario de la seccin de microbiologa, se dan situaciones de potenciales riesgos que varan segn el agente infeccioso y los procedimientos utilizados. Las Normas de Bioseguridad pretenden reducir a un nivel aceptable el riesgo inherente a la manipulacin de material peligroso . El trabajo en el laboratorio de microbiologa es, como en la mayora de las otras secciones del Laboratorio Clnico, un trabajo de grupo. La actitud ante las practicas seguras de cada uno de los integrantes del equipo, determinan su propia seguridad, as como la de sus compaeros y la de la colectividad del Laboratorio. El Comit de Bioseguridad de los Laboratorios Clnicos de la Caja de Seguro Social, ha elaborado un Manual de Bioseguridad que marca las pautas a seguir en la materia. Por otra parte, el equipamiento y el diseo del Laboratorio de Microbiologa es parte fundamental en el esfuerzo de proteccin de los empleados en el ejercicio de sus labores. Tambin en ste contexto un grupo de profesionales ha elaborado un protocolo de normas bsicas en la construccin de laboratorios biolgicos. Sin embargo, las caractersticas especiales del trabajo en la seccin de Microbiologa, hacen imperante un Manual que sirva de gua a los microbilogos en su trabajo diario. La formacin es pues clave en la eficacia de los programas de seguridad y sta debe ser facilitada a todas las personas que estn expuestas a los riesgos del laboratorio. Un programa de seguridad gestionado por profesionales bien entrenados, con un alto grado de participacin por parte de los trabajadores, puede llevar no slo a una disminucin del nmero de lesiones y enfermedades, sino tambin a un incremento de la satisfaccin del trabajador y de su productividad. El propsito de este Manual es describir la metodologa a seguir en un programa de Bioseguridad en microbiologa, tal que sea una gua para el trabajo seguro en el laboratorio que envuelve microorganismos potencialmente peligrosos.