CURSO : Microbiologa Animal

PROFESOR : TAFUR ZEVALLOS, Lizandro

ALUMNA : BONIFACIO ESPINOZA, Jherson
CICLO : 2014 - I


TINGO MARIA 2014







































I. INTRODUCCION



La tincin simple se basa en la afinidad del colorante por los componentes
celulares. La tincin puede ser uniforme o presentar algunos grnulos en su
interior. Utiliza un solo colorante (violeta de genciana, azul de metileno, fuscina
diluida).
La tincin simple se utiliza para destacar el microorganismo completo para que
se vean las formas y las estructuras celulares bsicas. En las tinciones
simples se usa un nico reactivo, que preferentemente es de tipo bsico y
contiene un cromgeno (compuesto que da color al tinte) con carga positiva, ya
que la pared celular de las bacterias posee componentes con carga negativa
que atraen y enlazan el cromgeno. Se utilizan solamente para incrementar el
contraste; todas las clulas absorbern el colorante y quedarn teidas del
mismo color. Por tanto, la tincin simple mejora la observacin de la clula
completa. Se fija el espcimen, se aade el colorante y se deja el tiempo
adecuado para que se absorba, se retira el exceso de colorante y la
preparacin ya est lista para ser observada. Si se utiliza un mordiente
(sustancia qumica utilizada para intensificar la coloracin), hay que aadirlo
justo antes del colorante.

Objetivos:

El presente trabajo practico tiene por objetivo brindar al alumno herramientas
bsicas en la confeccin y el manejo de extendidos y la tincin de los mismos
de acuerdo a la observacin que se desee realizar.
El alumno aprender y aplicar las tcnicas bsicas de tincin ms frecuentes.








II. REVISION BIBLIOGRAFICA

2.1. TINCIN DE BACTERIAS

La clula bacteriana intacta se tie fcilmente con colorantes bsica
como el cristal, azul de metileno y fucsina bsica, pero relativamente mal
con colorantes cidos como la eosina.
Un colorante bsico es aquel constituido por un agrupamiento de tomos
orgnicos con carga positiva que ser la parte activa del colorante ya
que tendr afinidad por los cidos nucleicos. Un colorante cido es aquel
que se encuentra constituido por tomos orgnicos con carga neta
negativa por lo cual tiene afinidad por el citoplasma.
2.1.1. Tinciones



















2.2. TIPOS DE TINCIN

2.2.1. Tincin simple. Conocida con ese nombre ya que solo nos sirve
para hacer ms fcilmente visibles a las bacterias sin resaltar
ninguna caracterstica en especial. Una tincin simple se lleva a cabo
cubriendo con colorante bsico un frotis seco y fijado al calor. El frotis
se deja reaccionar con las clulas por un minuto y se lava
suavemente con agua. El frotis se puede dejar secar o usar papel
secante para que quede listo para observarse.
Se utiliza un solo tinte, afinidad por carga con componentes de la
superficie de la clula.
Ejemplo: azul de metileno
























2.2.2. Tincin Negativa. Este mtodo de tincin utiliza colorantes neutros
o cidos ya que tienen poca afinidad por la clula bacteriana por lo
tanto como no se absorben se colorea el fondo en el que estn las
bacterias pero la clula queda incolora y transparente, as pues las
bacterias aparecen como pequeas reas iluminadas en un fondo
oscuro. La tincin acdica con nigrosina, o neutral (con tinta china)
son las ms usadas.
2.2.2.1. Tincin simple-negativa
La tincin se logra mediante una
mezcla del tinte y el cultivo de
bacteria.
El tinte utilizado es India Ink (Se
puede utilizar tambin eosina o
nigrosina).
Se le conoce como efecto de cielo
estrellado.


2.2.3. Tincin Diferencial. Las bacterias se
diferencian unas de otras tanto fsica como qumicamente, por lo cual
su reaccin ante algunos colorantes tambin ser diferente dando
lugar as a grupos tintoreales caractersticos. Entre estos grupos
estn los que se originan por la tincin descubierta por Hans
Christian Gram, esta tincin divide a las bacterias en Gram positivas
o Gram negativas lo cual no solo sirve para diferenciarlas sino an
para elegir la terapia adecuada en algunos casos. Existen otras
tinciones diferenciales de utilidad en microbiologa clnica como la de
Ziehl- Neelsen.




2.2.4. Tincin estructural. Existen diferentes tipos de colorantes que de
acuerdo a su afinidad se utilizan para teir y detectar ciertas
estructuras de la clula bacteriana como son las esporas, los flagelos
y las cpsulas.

III. MATERIALES Y METODOS

3.1. Lugar y fecha

La presente prctica se desarroll en el laboratorio de SANIDAD
ANIMAL de la facultad de ZOOTECNIA de la UNAS el da Jueves de
Mayo del presente ao a horas 10 12 a.m. En la ciudad de Tingo
Mara, provincia de Leoncio Prado, departamento de Hunuco, a
coordenadas geogrficas: latitud sur: 09 17` 08, latitud oeste: 75 59
52 a 660 m.s.n.m. con una temperatura promedio de 27 C
aproximadamente.

3.2. Materiales

2 portaobjetos
Asa bacteriolgica
Aceite de inmersin
Microscopio
Mechero
Azul de metileno de Leffler
Cepa de staphylacocos
Cepa de streptococos
Agua estril
Guates

2.3. Metodologa
La metodologa que utiliz el profesor fue terico y prctico, en lo terico realizo
una amplia explicacin de los diferentes tinciones y basndonos ala tincin
simple y que bacterias debemos utilizar y como lo debemos de utilizar en el
transcurso de la prctica de los resultados explicaremos con detalle cmo se
realiza.





IV. RESULTADOS.






























FI GURA 1: Se toma un portaobjeto
FI GURA 2: Esterilizacin del asa de siembra
para tomar la muestra.
FI GURA 3: Toma de muestra con el asa de
siembra esterilizada
FI GURA 4: Realizamos un frotis sobre el
porta objeto conjuntamente con el agua
esterilizada.

FI GURA 5: Secado y fijacin de la muestra
en el mechero bunsen.

FI GURA 6: Tincin de la muestra fijada y
secada con violeta de genciana durante 2
minutos




























FI GURA 8: Secamos la muestra y ya estar en
disposicin de ser vista al microscopio.
FI GURA 7: lavado de la muestra con agua
destilada despus de Los 2 minutos de tincin
FI GURA 9: aadir una gota de aceite de
inmersin a la muestra una vez secada
FI GURA 10: poner la muestra en el microscopio,
enfocar y observar con el objetivo de 100 aumentos.
FI GURA 11: Resultados de la observacin del proceso
de tincin simple: estreptococos y estafilococos
V. DISCUSION
VI. CONCLUSION
VII. BIBLIOGRAFIA