http://www.uem.

br/acta
ISSN printed: 1679-9283
ISSN on-line: 1807-863X
Acta Scientiarum
Doi: 10.4025/actascibiolsci.v34i1.7257

Acta Scientiarum. Biological Sciences Maring, v. 34, n. 1, p. 105-112, Jan.-Mar., 2012
Morfometria e histologia das gnadas de machos e fmeas recm-
eclodidos de Podocnemis expansa e Podocnemis unifilis (Testudines,
Podocnemididae)
Adriana Malvasio
1*
, Josefa Moreira do Nascimento-Rocha
2
, Helcileia Dias Santos
2
, Adson
Gomes de Atades
1
e Thiago Costa Gonalves Portelinha
1
1
Laboratrio de Ecologia e Zoologia, Universidade Federal do Tocantins, Av. NS 15 ALC, 14, 109 Norte, Cx. Postal 114, 77001-090, Palmas, Tocantins,
Brasil.
2
Laboratrio de Histologia e Parasitologia, Universidade Federal do Tocantins, Araguana, Tocantins, Brasil. *Autor para correspondncia.
E-mail: malvasio@uft.edu.br
RESUMO. Considerando a importncia da tcnica histolgica na sexagem de quelnios e os poucos trabalhos
direcionados para esta tcnica, proposto neste estudo caracterizar morfometricamente e histologicamente as
gnadas de P. expansa e P. unifilis. Todos os espcimes utilizados neste trabalho foram procedentes do rio Javas,
entorno do Parque Nacional do Araguaia, Estado do Tocantins, Brasil. Aps estudo sob estereomicroscpio,
foram coletadas as gnadas para o procedimento histolgico de rotina. Foram analisadas 187 amostras de
P. expansa, das quais 81,2% foram identificadas como fmeas e 18,7% como machos; e 98 de P. unifilis, das quais
31,6% eram fmeas e 68,4% machos. No foram verificadas diferenas microscpicas relevantes na sexagem entre
estas espcies. Os critrios utilizados no diagnstico microscpico foram principalmente a morfologia das
gnadas, a presena do apndice no oviduto remanescente, a morfologia do oviduto e as caractersticas das clulas
de revestimento dos folculos e tbulos seminferos. Quando comparadas as medidas biomtricas dos ovrios e
testculos, somente foram observadas diferenas para a largura.
Palavras-chave: tartarugas, sexagem, ovrio, testculo, microscopia, Tocantins.
Morphometry and histology of the gonads of males and females hatchlings of
Podocnemis expansa and Podocnemis. unifilis (Testudines, Podocnemididae)
ABSTRACT. Considering the importance of the histological sexing technique of turtles and the few works
directed to this objective, it was proposed in this study to morphometrically and histologically characterize the
gonads of P. unifilis and P. expansa. All specimens used in this work originated in the Javas river, around the
Araguaia National Park, Tocantins State, Brazil. Following a study under a stereoscope, the gonads were collected
for the routine histological procedure. A total of 187 samples of P. expansa were analyzed, of which 81.2% were
identified as female and 18.7% as male; as well as 98 P. unifilis samples, of which 31.6% were female and 68.4%
males. No relevant microscopic differences were verified in the sexing between these species. The criteria used in
the microscopically diagnosis were primarily gonad morphology, presence of the appendix in the remaining
oviduct, oviduct morphology and the characteristics of covering cells of the follicles and somniferous tubules.
When the measurements of the ovaries and testicles were compared, only differences in width were observed.
Keywords: turtles, sexing, ovary, testicle, microscopy, Tocantins.
Introduo
A ordem Testudines ou Chelonia, que engloba os
quelnios terrestres, marinhos e de gua doce, tida
como a mais antiga de todas entre os vertebrados atuais
(FERRI, 2002). Existem aproximadamente 300
espcies de quelnios, que esto distribudas em 13
famlias e que podem ser encontradas nos mares e
continentes, com exceo da Antrtida (IVERSON,
1992; POUGH et al., 2008).
Os quelnios sempre constituram um recurso
da fauna silvestre de grande importncia para as
populaes que vivem s margens dos rios e dos
lagos amaznicos. Sua carne, excelente fonte de
protena, bem como os seus ovos, gordura e vsceras
so de grande interesse s comunidades ribeirinhas
(MARTINS; MOLINA, 2008; SMITH, 1979). A
herpetofauna de quelnios no Brasil bastante
diversificada (PRITCHARD; TREBBAU, 1984),
mas o consumo indiscriminado de algumas espcies,
somado destruio e/ou ocupao desordenadas de
seu ambiente natural, provocaram um declnio
acentuado das populaes e colocaram as espcies
Podocnemis expansa (tartaruga-da-amaznia) e
P. unifilis (tracaj), na lista de animais protegidos
106 Malvasio et al.
Acta Scientiarum. Biological Sciences Maring, v. 34, n. 1, p. 105-112, Jan.-Mar., 2012
pelo Centro de Conservao e Manejo de Rpteis e
Anfbios do Instituto Chico Mendes para
Conservao da Biodiversidade - RAN/ICMBio,
pelo Projeto Quelnios da Amaznia.
Dentre os quelnios que ocorrem na Regio
Amaznica, foram contempladas neste estudo as
espcies P. expansa e P. unifilis, em decorrncia das
aes de conservao das populaes desses animais
j implementadas pelo RAN-ICMBio; por essas
duas espcies constiturem um dos mais ricos
recursos biolgicos para o pas; por ser de grande
importncia para as populaes que vivem nas
margens dos rios e lagos amaznicos; e pelo seu uso
racional, que tem fornecido novas alternativas de
produo para essas regies (LUZ et al., 2003).
Nos projetos voltados preservao das espcies,
no basta apenas devolver os indivduos natureza.
Conhecer a proporo entre machos e fmeas que
est sendo devolvida, tambm significativo. Vogt
(1994) salienta que, em um projeto para conservao
de tartarugas marinhas na Amrica Central, foram
produzidos predominantemente machos por muitos
anos, por terem usado a mesma temperatura de
incubao nos ninhos artificiais em que os ovos
foram submetidos. Cabe ressaltar que na maioria das
espcies de quelnios a determinao sexual se faz
principlamente por fatores ambientais, no tendo
interferncia gentica.
Souza e Vogt (1994), em trabalho realizado com
P. unifilis em ambiente natural e controlado - rio
Guapor, Costa Marques, Estado de Rondnia,
Brasil, mencionam que, em condies naturais, o
sexo dos filhotes influenciado pela temperatura de
incubao dos ovos, em que em temperaturas mais
altas predominam as fmeas e nas mais baixas, os
machos. Yao e Capel (2005) concluram que vrias
espcies animais dependem de fatores extrnsecos,
como por exemplo, a temperatura ambiente, para
determinar o sexo.
Em muitas espcies de Testudines, o sexo no
pode ser identificado com preciso, utilizando-se
padres fisiolgicos ou pela morfologia externa em
recm-eclodidos e jovens. Uma das grandes
dificuldades na identificao sexual dos filhotes a
complexidade dos mtodos usados na sexagem.
Mesmo considerando a tcnica de morfometria
geomtrica (VALENZUELA et al., 2004), esta
necessita ser testada em mais populaes e espcies,
carecendo ainda, de confirmao histolgica da
sexagem, por ser um mtodo recente. possvel
apontar ainda que muitas das tcnicas de sexagem,
atualmente utilizadas, envolvem alm do sacrifcio
dos animais, um custo operacional elevado e
procedimentos laboratoriais demorados.
Souza e Vogt (1994) utilizaram em P. unifilis a
anlise da morfologia externa das gnadas, com
posterior estudo histolgico, obtendo um nvel de
correspondncia de 80%. Yntema (1981) afirma que
o exame das gnadas em estereomicroscpio, o
suficiente para identificar o sexo dos filhotes recm-
eclodidos em vrias espcies de quelnios,
contrariando porm, Yntema (1981) ao conclurem
que, para Caretta caretta, a anlise das caractersticas
morfolgicas das gnadas no suficiente para
identificar o sexo do indivduo, sendo necessria a
avaliao histolgica. Greenbaum e Carr (2001)
utilizaram a observao microscpica para avaliar a
evoluo embriolgica de gnadas de Apalone spinifera e
propuseram estudos adicionais a fim de caracterizar
melhor o dimorfismo entre os sexos. Portanto, em
Testudines, ainda h controvrsias sobre quais so os
mtodos mais eficientes para a identificao do sexo em
filhotes.
Levando em considerao a importncia da tcnica
histolgica na sexagem de quelnios e os poucos
trabalhos direcionados para esta tcnica, proposto
neste estudo caracterizar morfometricamente e
histologicamente as gnadas de P. expansa e P. unifilis,
verificar se existem diferenas entre as gnadas de
machos e fmeas em recm-eclodidos, no mbito
macroscpico e microscpico.
Material e mtodos
Todos os espcimes de P. expansa e P. unifilis
utilizados neste trabalho foram procedentes do rio
Javas, entorno do Parque Nacional do Araguaia,
Ilha do Bananal, Estado do Tocantins, onde est
localizada a Base Fsica do RAN-ICMBio, na qual
ocorre o monitoramento das desovas e ecloses
destas espcies, por meio do Projeto Quelnios da
Amaznia, coordenado pela referida instituio.
Para proceder a esta pesquisa, foram concedidas
licenas do RAN/Ibama, cujo nmero 110/2005 e
do Sistema de Autorizao e Informao em
Biodiversidade - Sisbio/Ibama, sob n 119033/2007.
Os filhotes de P. expansa coletados na estao
reprodutiva de 2005 (entre os meses de novembro e
dezembro) foram procedentes de trs ninhos das
seguintes praias: Canguu (83 filhotes), Comprida
(103 filhotes) e Bonita (86 filhotes). J, os filhotes de
P. unifilis foram obtidos entre os meses de setembro
e outubro de 2007, oriundos das praias Bonita (11
filhotes), Goiaba (13 filhotes), Coco (17 filhotes),
Comprida (21 filhotes) e Canguu (44 filhotes),
localizadas entre os paralelos 950 S e 1110 S e os
meridianos 4956 W e 5030 W.
Os animais foram coletados imediatamente aps
a ecloso e sacrificados em cmara de ter sulfrico,
Morfohistologia das gnadas de Podocnemis spp. 107
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seguindo as tcnicas utilizadas por Franco e Salomo
(2002). A disseco foi realizada sob
estereomicroscpio com o animal em decbito
dorsal, sendo retirado o plastro com bisturi e, em
seguida, o intestino, fgado estmago e corao com
tesoura de ponta fina, tornando possvel a
visualizao das gnadas, que em P. unifilis, foram
diretamente embebidas na formalina a 10% (Figura
1). Em P. expansa, os ovrios e testculos foram
medidos com paqumetro de preciso 0,1 mm,
levando em considerao o comprimento total das
mesmas e a largura, a qual foi tomada na poro
mais larga da gnada. Aps a mensurao, as peas
foram fixadas tambm em formalina a 10%, passo
inicial para a preparao histolgica.


Figura 1. Visualizao das gnadas de um espcime recm
eclodido de P. unifilis, logo aps a eviscerao (go: gnadas).
O preparo para o estudo histolgico em ambas as
espcies seguiu o procedimento padro e a colorao
utilizada foi a de Hematoxilina e Eosina para
P. expansa e o Tricrmico de Mallory para P. unifilis,
segundo Behmer et al. (1976). Foram analisadas 187
amostras de P. expansa e 98 amostras de P. unifilis,
salientando que algumas peas preparadas
apresentaram artefatos de montagem, no sendo por
isso, utilizadas no diagnstico microscpico. A
nomenclatura geral utilizada na avaliao histolgica
foi a mesma para outras espcies animais e para as
estruturas especficas de quelnios foram adotadas as
descritas por Danni e Alho (1985) e Hidelbrand e
Goslow (2006). A sexagem microscpica foi
realizada para ambas as espcies enquanto que a
morfometria macroscpica e microscpica foi
realizada apenas em P. expansa.
A sexagem microscpica foi comparada com as
mensuraes macroscpicas analisando-as
estatisticamente por anlise de varincia
(ANOVA) unifatorial (MAGNUSSON;
MOURO, 2005), com teste de Tukey aplicado a
posteriori e p 0,05, a fim de verificar alguma
relao entre os tamanhos das gnadas e o
dimorfismo sexual. As anlises estatsticas foram
realizadas com o auxlio do programa BioEstat 4.0
(AYRES et al., 2005).
Resultados e discusso
No foram encontradas diferenas histolgicas
entre as gnadas de P. expansa e P. unifilis podendo os
mesmos critrios de diferenciao ser adotados para
ambas as espcies. As gnadas de machos e fmeas
processadas histologicamente, quando observadas
microscopia de campo claro, foram visualizadas junto
ao hilo renal na forma de rgos ovides nos machos e
relativamente alongados nas fmeas. Entretanto,
vrios critrios foram considerados no processo de
avaliao do dimorfismo sexual, que por ordem de
relevncia, foram utilizados para o diagnstico
sexual das amostras em estudo, como seguem:
oviduto, estruturas que alojam as clulas
germinativas, morfologia das clulas de
revestimento das estruturas, morfologia das
clulas germinativas e morfologia da extremidade
distal de cada gnada (Tabela 1).
Tabela 1. Principais critrios por ordem de relevncia, utilizados para
avaliar o dimorfismo sexual das espcies P. expansa e P. unifilis, em
observao microscpica, nos diversos aumentos.
Critrios Fmea Macho
Oviduto
alongado com clulas
cbicas altas e a presena
de apndice remanescente;
arredondado com clulas
cbicas baixas e ausncia de
apndice;
Estruturas que
alojam as clulas
germinativas
semelhantes a folculos
mais definidos, localizados
principalmente na regio
cortical, prximo ao
epitlio germinativo;
constitudos por tbulos
seminferos de luz dilatada e
contorno tortuoso, presentes
em todo a gnada;
Clulas epiteliais
das estruturas
nos folculos, so cbicas
baixas ou planas;
nos tbulos seminferos, so
de ncleo esfrico, presena
de nuclolo e citoplasma rico
em prolongamentos apicais;
Clulas
germinativas
a grande maioria
posicionada centralmente
aos folculos, com ncleo
claro e citoplasma
disperso;
esfricas e aderidas ao epitlio
dos tbulos seminferos;
Extremidade
distal da gnada
de contorno agudo. de contorno obtuso.

Nos preparados histolgicos das fmeas foram
verificados ovrios alongados, com superfcies
uniformes e revestidos externamente por uma
camada de clulas cuboides, semelhante ao epitlio
germinativo dos mamferos (Figuras 2 e 3). No
interior dos ovrios, foram visualizadas estruturas
8 mm
108 Malvasio et al.
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semelhantes a folculos primordiais formados por
nica camada de clulas planas que envolviam uma
clula de ncleo amplo, fracamente corado
apresentando grnulos de cromatina dispersos na
cariolinfa, a qual foi identificada como ovognia.
O citoplasma da ovognia foi visto de forma
reduzida, disforme e relativamente acidfilo.
As estruturas foliculares que alojavam as ovognias
estavam sustentadas por um tecido conjuntivo frouxo
infiltrado por vasos sanguneos de pequeno calibre.
Lateralmente ao ovrio, na altura do tero caudal,
foram observadas seces de pores tubulares
formadas por epitlio simples cbico, com clulas altas,
ncleos grandes e ovides, estes tbulos estavam
envolvidos por tecido conjuntivo frouxo e vasos
sanguneos. Esta estrutura foi considerada a poro
remanescente do mesonfron descrito por Pough et al.
(2008) (Figura 2).


Figura 2. Fotomicrografia do aparelho reprodutivo da fmea de
Podocnemis expansa, destacando o ovrio com o epitlio
germinativo (a), a presena de ovognias (b) e os folculos
ovarianos (c), obtido por microscopia ptica em objetiva de 40x.
Um segmento formado por tecido conjuntivo e
contendo vasos sanguneos de mdio calibre ligou o
mesonfron ao oviduto propriamente dito (Figura
3), representado por um tbulo nico revestido
internamente por uma camada de clulas epiteliais
cilndricas baixas. Este oviduto circundado por
tecido conjuntivo frouxo, e foi observado que este
tecido projeta-se apicalmente, formando um
apndice de comprimento proporcional ao dimetro
do oviduto. Assim como a discrio de Greenbaum e
Carr (2001), no houve distino entre o crtex e a
medula nas gnadas das fmeas quando observadas
em microscopia.
Nos machos imaturos, os testculos foram
vistos revestidos por uma camada de clulas
planas, sustentadas por uma faixa fibrosa de tecido
conjuntivo (Figura 4). Constituindo o
parnquima, foram observadas vrias estruturas
tubulares, representando os tbulos seminferos,
estes possuindo na sua luz clulas esfricas, que
foram identificadas como clulas da linhagem
espermatognica e tambm raras clulas, com
citoplasma ramificado, com ncleo claro e ovoide,
apresentando um nuclolo bem visvel e citoplasma
disperso, reconhecidas como as clulas de Sertoli.
Os tbulos estavam circundados por clulas
fusiformes semelhantes s clulas mioepiteliais e
ligados uns aos outros por tecido conjuntivo.
No interstcio, entre as fibras de tecido conjuntivo,
foram visualizadas algumas clulas polidricas, com
ncleo grande, arredondado e central, identificadas
como clulas de Leydig (Figura 4).


Figura 3. Desenho do ovrio de Podocnemis expansa, observado em
microscopia ptica de campo claro, em que se verifica a presena do
apndice remanescente com comprimento proporcional largura do
oviduto (a), o oviduto com epitlio cilndrico alto (b), a poro
remanescente do mesonfron (c), o revestimento do ovrio
constitudo por clulas cuboides epitlio germinativo (d), a poro
inicial do oviduto (e), a presena de clulas livres dentro de estruturas
foliculares ovognias (f), tecido conjuntivo frouxo ricamente
vascularizado (g) e estruturas foliculares constitudas por clulas
planas (h).
50 m
50 m
Morfohistologia das gnadas de Podocnemis spp. 109
Acta Scientiarum. Biological Sciences Maring, v. 34, n. 1, p. 105-112, Jan.-Mar., 2012

Figura 4. Desenho do testculo de Podocnemis expansa, observado em
microscopia ptica de campo claro, onde se observa o epiddimo
medial (a), tecido conjuntivo vascularizado (b), epiddimo inicial (c),
revestimento de clulas planas (d), rede testis (e), clulas fusiformes
semelhante a msculo liso imerso em tecido conjuntivo (f), clulas
esfricas com ncleo densamente corado e espermatognias no
interior dos tbulos aderidos ao epitlio seminfero (g), vrias
estruturas tubulares correspondentes aos tbulos seminferos
revestidos por clulas de ncleo claro e citoplasma fragmentado
possivelmente clulas de Sertoli (h) e clulas polidricas com ncleo
arredondado central possivelmente clulas de Leydig (i).
Na poro central do corte foram observadas
estruturas tubulares retas e alongadas revestidas por
epitlio cbico baixo, representando a redi testis,
local de passagem dos espermatozides para o ducto
do epiddimo (Figura 5).
O epiddimo foi localizado mediolateralmente ao
testculo, nesta regio, as pores seccionadas
apresentaram epitlio cbico alto, formado por
clulas grandes e com projees citoplasmticas
semelhantes a estereoclios (Figura 5).
Todas as pores do epiddimo observadas
estavam circundadas por clulas fusiformes e
sustentadas por tecido conjuntivo frouxo.
Foi observado na poro caudal dos testculos
um segmento alongado de tecido conjuntivo e vasos
sanguneos de mdio calibre, ligando o epiddimo a
uma estrutura tubular nica reconhecida como
oviduto remanescente, a qual estava revestida
internamente por epitlio pseudoestratificado
cilndrico, com clulas baixas e circundado por
tecido conjuntivo frouxo (Figura 6).


Figura 5. Fotomicrografia do aparelho reprodutivo do macho de
Podocnemis expansa, destacando o oviduto remanescente (a),
clulas de Sertoli (b), testculo com epitlio pavimentoso simples
(c) e tbulos seminferos (d), obtido por microscopia ptica,
observado em objetiva de 10x.

Figura 6. Fotomicrografia do aparelho reprodutivo da fmea de
Podocnemis unifilis (1) e Podocnemis expansa (2), destacando o
apndice (a) e o oviduto (b), obtido por microscopia ptica em
objetiva de 10x.
Seguindo Danni e Alho (1985), a caracterizao
histolgica do testculo de P. expansa e P. unifilis se
deu pela presena de clulas esfricas, com ncleo
densamente corado (espermatognias) no interior de
estruturas tubulares, aderidas ao epitlio seminfero.
Enquanto os ovrios foram histologicamente
caracterizados pela presena de folculos ovarianos,
que aparecem como estruturas tubulares ovaladas
contendo centralmente clulas de aspecto
vacuolizado, com ncleo amplo (ovognias),
resultados estes semelhantes aos do presente estudo.
Porm, vale ressaltar que as estruturas e variaes
celulares detectadas nestas amostras aumentam as
caractersticas possveis de serem utilizadas para
avaliar o dimorfismo sexual destas espcies, as quais
aparecem descritas na Tabela 1.
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110 Malvasio et al.
Acta Scientiarum. Biological Sciences Maring, v. 34, n. 1, p. 105-112, Jan.-Mar., 2012
Das 187 amostras de P. expansa diagnosticadas
histologicamente, 149 foram identificadas como
fmeas (81,28%), as outras 35 (18,72%) amostras
foram identificadas como machos, o que
corresponde a uma razo sexual de 4,25 fmeas para
um macho. Danni e Alho (1985) encontraram
resultados semelhantes e constataram que os filhotes
de P. expansa oriundos de ninhos descobertos, ou
seja, localizados em reas desprovidas de vegetao
que pudesse sombre-los, assim como os
monitorados no presente estudo, eram em sua
maioria fmeas (97%). Malvasio et al. (2002a)
corroboram esses resultados e para um total de seis
ninhos, com 494 filhotes, observaram 59% de
recm-eclodidos fmeas e 41% de machos.
A razo sexual dos recm-eclodidos de P. unifilis
foi de 0,46 fmeas para um macho. Das 98 amostras
identificadas para esta espcie, 31 (31,6%) foram
fmeas e 67 (68,4%) foram machos. Nos ninhos de
P. expansa foram registrados temperatura mdia de
incubao de 31,4C e nos ninhos de P. unifilis
temperatura mdia de incubao foi de 27,5C.
Souza e Vogt (1994), estudando P. unifilis em
ambiente natural, encontraram resultados contrrios
e verificaram maior proporo de filhotes fmeas,
segundo eles, influenciada pela temperatura de
incubao dos ovos. Esses autores observaram que
ninhos com temperatura mdia e varincia mais alta,
durante o perodo de incubao crtico, produziram
proporo maior de fmeas. Para esta espcie, em
estudo realizado com seis ninhos e 67 recm-
eclodidos, Malvasio et al. (2002a) identificaram 63%
dos filhotes como machos e 37% fmeas, e
afirmaram que em tartarugas de gua doce, cuja
determinao sexual depende de fatores ambientais,
nem sempre a temperatura mdia das covas na
natureza uma boa ferramenta preditiva da razo
sexual dos filhotes.
Segundo grande parte da literatura, a
determinao do sexo nos quelnios est
diretamente relacionada com a temperatura de
incubao dos seus ovos, pois em temperaturas mais
altas haveria um predomnio de fmeas e nas mais
baixas um predomnio de machos (ALHO et al.,
1984; PIEAU et al., 1999; POUGH et al., 2001;
VALENZUELA, 2001; VOGT; BULL, 1982). No
entanto, Gutze e Paukstis (1983) tambm apontam a
influncia de fatores hdricos do ambiente como
importantes na determinao de sexo de tartarugas;
Valenzuela et al. (1997) salientam que, em ambiente
natural, muitas outras variveis como umidade,
posio dos ovos no ninho e metabolismo do
embrio, podem influenciar na determinao sexual.
Os resultados da biometria dos ovrios e
testculos dos filhotes de P. expansa esto descritos na
Tabela 2 e a comparao entre as medidas das
gnadas de fmeas e machos, para verificar a
ocorrncia de diferenas entre comprimento e
largura dos ovrios direito e esquerdo com o
comprimento e a largura dos testculos direito e
esquerdo (p < 0,05) aparecem na Tabela 3.
Tabela 2. Mdia e desvio-padro das gnadas direita e esquerda
de machos e fmeas de P. expansa (em mm).
Fmeas Machos
Mensurao das Gnadas
Mdia
Desvio-
padro
Mdia
Desvio-
padro
Comprimento Direito 0,790 0,126 0,789 0,144
Largura Direito 0,137 0,034 0,121 0,020
Comprimento Esquerdo 0,845 0,119 0,826 0,117
Largura Esquerda 0,153 0,032 0,136 0,020
Tabela 3. ANOVA unifatorial, com teste de Tukey a posteriori,
comparando a biometria das gnadas de machos e fmeas em
P. expansa com grau de liberdade = 1.
Teste Comprimento das gnadas Largura das gnadas
Esquerda Direita Esquerda Direita

Fmeas X
Machos
Fmeas X
Machos
Fmeas X
Machos
Fmeas X
Machos
ANOVA
F = 0,5360
p = 0,5279
F = 0,0023
p = 0,9605
F = 0,5360
p = 0,5279
F = 0,0023
p = 0,9605
teste de
Tukey ns ns p < 0,05 p < 0,05
ns: no-significativo.
Ao se comparar estatisticamente os resultados
obtidos pela sexagem microscpica e a mensurao
macroscpica, foi verificado que as diferenas entre o
comprimento dos ovrios e testculos, tanto direito
quanto esquerdo no foram significativas. Entretanto,
as diferenas foram significativas para a largura dos
ovrios e dos testculos tanto esquerdo (F = 66,269;
p = 0,0106) quanto direito (F = 40,602; p = 0,0431),
ressalvando-se que os ovrios apresentaram largura
maior que os testculos (diferena de 0,017 mm
quando comparados os lados esquerdos das gnadas e
0,015 mm nos direitos), nos recm-eclodidos, nos
quais, pelo pequeno tamanho das gnadas, este tipo de
estudo relativamente dificultado.
Malvasio et al. (2002b), estudando a morfologia
dos rgos reprodutores de recm-eclodidos de
P. expansa, obtiveram ndice de acerto de 80% na
identificao sexual; e sugerem que relativamente
seguro utilizar apenas tcnicas anatmicas para a
identificao sexual dos filhotes desta espcie. No
mesmo sentido, Malvasio et al. (2005) verificaram
que existem diferenas significativas entre as
medidas (comprimento e dimetro) das gnadas de
machos e fmeas recm-eclodidos de P. unifilis,
sendo as gnadas dos machos mais alongadas e com
maior dimetro do que as das fmeas.
Morfohistologia das gnadas de Podocnemis spp. 111
Acta Scientiarum. Biological Sciences Maring, v. 34, n. 1, p. 105-112, Jan.-Mar., 2012
importante considerar que a mensurao
macroscpica da largura das gnadas contradiz
com a observao microscpica, onde foram
verificadas as formas alongadas para os ovrios e
ovide para os testculos. Certamente, esta
observao se deve ao efeito do tempo de
processamento histolgico, onde a fixao em
formalina a 10% foi superior a 30 dias, tendo em
vista que as amostras foram colhidas em
Tocantins e processadas em So Paulo. Estas
alteraes se tornam considerveis, especialmente
em rgos do tipo ovrios, em que a perda de
lquido tissular resulta em reduo do volume
total do rgo. Apesar da no-mensurao
microscpica das gnadas, este aspecto
morfolgico observado foi importante para
auxiliar na identificao sexual.
O resultado obtido neste trabalho, ao que se
refere s medidas macroscpicas das gnadas de
P. expansa merece ateno, indicando que a
mensurao pode ser suficiente para diagnosticar
o sexo nesta espcie, pois apesar da anlise
histolgica ser um mtodo seguro para identificar
o sexo dos filhotes, o preparo das lminas
demanda tempo e o custo relativamente elevado,
conforme Vogt (1994).
Alguns fatores que comprometeram a
diferenciao sexual, por meio da microscopia
ptica, foram o plano de corte histolgico, por
nem sempre dispor as gnadas no sentido
longitudinal, ou deixando somente o rim em
evidncia. Outro aspecto a ser considerado que
o oviduto e o ducto deferente apresentam-se
pouco diferenciados, sendo este um fator que
dificulta o reconhecimento do sexo. Estes ductos
tm caractersticas histolgicas semelhantes, sendo
constitudos por epitlio prismtico simples, mas
podem eventualmente ser diferenciados, pois o
oviduto apresenta paredes proporcionalmente
mais espessas do que os ductos deferentes
(MALVASIO et al., 2002b).
Concluso
Perante o exposto, conclui-se que no houve
diferenas microscpicas relevantes entre as
gnadas de P. expansa e P. unifilis, o que possibilita
a utilizao dos mesmos critrios para sexagem de
recm-eclodidos de ambas as espcies; a biometria
macroscpica revelou ovrios mais largos que
testculos, resultado este indito para a espcie de
P. expansa, portanto possvel indicar, para esta
espcie, a avaliao do dimorfismo sexual pelo
critrio da biometria macroscpica das gnadas.
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Received on June 3, 2009.
Accepted on May 18, 2010.


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