1 DE JUNIO DE 2014 UNIVERSIDAD SAN MARTN DE PORRES Av. Del Corregidor La Molina AMINOCIDOS Y PROTENAS
1. RECONOCIMIENTO DE ALFA AMINOCIDOS Objetivo: Deteccin de alfa-aminocidos. Colocar en un tubo de ensayo 1 ml de las muestras en solucin, luego adicionarles 3 gotas de reactivo Ninhidrina (cuidado cancergeno!), llevar los tubos al bao mara por 3-5 minutos, retirar y observar. Resultados glicina cistena Triptfano Casena Ninhidrina + bao mara Inmediatamente se torna a color morado. A bao mara se identifica el color a morado intenso. El color cambia a un amarillo bajo. A bao mara se mantiene con el mismo color. No reacciona a temperatura ambiente. A bao mara tienen un color morado intenso. Tiene un bajo color lila.
2. RECONOCIMIENTO DE RESTO AROMTICO Objetivo: deteccin de aminocidos con resto aromtico. En tubos de pruebas, colocar las muestras indicadas, luego adicionar 0,5 ml de HNO 3 concentrado, llevar a bao mara por 7 minutos, enfriar y luego adicionar cuidadosamente 0,5 ml de NaOH al 20%. Anote sus resultados Resultados Casena cabello Glicina HNO 3 Reaccin rpida color amarillo Se consume el cabello, color naranja No hay color + NaOH Se acenta al color inicial, naranja intenso Se acenta con respecto al color inicial, naranja
3. RECONOCIMIENTO DE RESTO AZUFRADO Objetivo: deteccin de restos azufrados en aminocidos. En tubos de prueba colocar las muestras indicadas, luego adicionar 0,5 ml de NaOH al 40% + 2 gotas de solucin de acetato de Plomo al 10%, llevar al bao mara por 7 minutos, enfriar, observar. Resultados cistena casena glicina NaOH + b.m. 10 + Acetato de Pb A temperatura ambiente se mantiene transparente. A bao mara se pone color negro. A temperatura ambiente hay una reaccin rpida, turbio intenso. A bao mara cambia a color marrn y en la superficie hay un poco de negro. A temperatura ambiente hubo una reaccin rpida, comenzando por turbio y luego cambiando a transparente. A bao mara, se mantuvo transparente.
4. REACCIN DE BIURET Tomar un tubo de ensayo y poner unos 3 cc. de casena, glicina y triptfano en cada uno. Aadir 2 cc. de solucin de NaOH al 20% A continuacin 4 o 5 gotas de solucin de sulfato cprico diluida al 1%. Debe aparecer una coloracin violeta- roscea caracterstica. casena glicina triptofano violeta azul azul
5. NATURALEZA ANFTERA DE LAS PROTEINAS Objetivo: verificar el comportamiento anftero de la casena frente a cidos y bases. Preparar cuatro tubos de prueba con lo siguiente: 1tubo: 1 gota de HCL 0,1 M +1 gota de anaranjado de metilo + 2 ml de H 2 O 2tubo: 1 gota de HCL 0,1 M +1 gota de anaranjado de metilo + 2 ml de H 2 O 3tubo: 1 gota de NaOH 0,1 M +1 gota de fenolftalena + 2ml de H 2 O 4tubo: 1 gota de NaOH 0,1 M +1 gota de fenolftalena + 2ml de H 2 O Aadir al 1 y 3 tubo 3ml de casena, agitar y observar; al 2 y 4 tubos 3ml de H 2 O agitar y observar, explicar sus resultados. 1 2 3 4 rojo rojo Rojo grosella Rojo grosella casena Amarillo- Rojo grosella naranja claro claro- incoloro, turbio
CUESTIONARIO
1. Escriba el nombre y la estructura de 6 de los aminocidos esenciales. Leucina (CH 3 ) 2 CH
Lisina H 2 N(CH 2 ) 4
Metionina CH 3 SCH 2 CH 2
Valina (CH 3 ) 2 CH
Fenilalanina PhCH2
Treonina CH 3 CH(OH)
2. Escriba la reaccin entre la fenilalanina y la ninhidrina
3. Qu aminocidos se puede encontrar en la albmina de huevo? Leucina Isoleucina Lisina Fenilalanina Treonina Triptfano Valina
4. Cmo se investiga la estructura primaria de una protena? Si la estructura primaria es la secuencia de aminocidos de la protena, nos indicar qu aminocidos componen su cadena polipeptdica y el orden en que dichos aminocidos se encuentran. La funcin de una protena depende de su secuencia y de la forma que esta adopte.
5. Qu aplicacin tiene el concepto del punto isoelctrico? Determinar el pH de un aminocido que se presenta casi exclusivamente en forma de Zwitterion, es decir con las formas inicas positivas y negativas en iguales proporciones. En el punto isoelctrico las protenas precipitan, se separan de sus mezclas y se pueden purificar.
6. Qu fuerzas intermoleculares son responsables de las estructuras 2, 3 y 4 de las protenas? 2 el responsable son los puentes de hidrgeno 3 el responsable es el enlace salino, puentes de hidrgeno, interaccin hidrofbica, enlace disulfuro, interaccin de Van Der Waals. 4 el responsable son las fuerzas electrostticas dbiles no covalentes.
7. Cules son las aplicaciones de las electroforesis? La electroforesis es una tcnica para la separacin de molculas (protenas o cidos nucleicos) sobre la base de su tamao molecular y carga elctrica. Para la separacin se usa un gel de agarosa o poliacrilamida (fibras cruzadas, como una malla). Al poner la mezcla de molculas y aplicar un campo elctrico, stas se movern y debern ir pasando por la malla, por la que las pequeas se movern mejor, ms rpidamente. As, las ms pequeas avanzarn ms y las ms grandes que darn cerca del lugar de partida.
8. Describa algunas de las propiedades biolgicas de las protenas Especificidad: La especificidad se refiere a su funcin; cada una lleva a cabo una determinada funcin y lo realiza porque posee una determinada estructura primaria y una conformacin espacial propia. Adems, no todos los individuos poseen protenas especficas suyas; esto se pone de manifiesto en los procesos de rechazo de rganos trasplantados.
Desnaturalizacin: Consiste en la prdida de la estructura terciaria, por romperse los puentes que forman dicha estructura. Todas las protenas desnaturalizadas tienen la misma conformacin, muy abierta y con una interaccin mxima con el disolvente, por lo que una protena soluble en agua cuando se desnaturaliza se hace insoluble en agua y precipita. La desnaturalizacin se puede producir por cambios de temperatura, variaciones del pH, etc.
Funciones biolgica Estructural: Forman tejidos de sostn y relleno que confieren elasticidad y resistencia a rganos y tejidos. Ejemplo de ello es el colgeno del tejido conjuntivo fibroso, la queratina de la epidermis y la reticulada y elastina del tejido conjuntivo elstico. Algunas protenas forman estructuras celulares como las histonas, que forman parte de los cromosomas. Las glicoprotenas actan como receptores formando parte de las membranas celulares o facilitan el transporte de sustancias.
Enzimtica: Actan como biocatalizadores acelerando las reacciones qumicas del metabolismo. En su funcin como enzimas, las protenas hacen uso de su propiedad de poder interaccionar, en forma especfica, con muy diversas molculas. Esto facilita la reaccin e incrementa su velocidad varios rdenes de magnitud.
Hormonal: Algunas hormonas son de naturaleza proteica, como la insulina y el glucagn que regulan los niveles de glucosa en sangre. Tambin hormonas segregadas por la hipfisis como la hormona del crecimiento directamente involucrada en el crecimiento de los tejidos y msculos y en el mantenimiento y reparacin del sistema inmunolgico, o la calcitonina que regula el metabolismo del calcio.
Defensiva: Las protenas crean anticuerpos y regulan factores contra agentes extraos o infecciones. Toxinas bacterianas, como venenos de serpientes o la del botulismo son protenas generadas con funciones defensivas. Las mucinas protegen las mucosas y tienen efecto germicida. El fibringeno y la trombina contribuyen a la formacin cogulos de sangre para evitar las hemorragias. Las inmunoglobulinas actan como anticuerpos ante posibles antgenos.
Transporte: La hemoglobina y la mioglobina son las protenas transportadoras del oxgeno en la sangre en los organismos vertebrados y en los msculos respectivamente. En los invertebrados, la funcin de protenas como la hemoglobina que transporta el oxgeno la realizas la hemocianina. Otros ejemplos de protenas cuya funcin es el transporte son citocromos que transportan electrones e lipoprotenas que transportan lpidos por la sangre.
Reserva: Si fuera necesario, las protenas cumplen tambin una funcin energtica para el organismo pudiendo aportar hasta 4 Kcal. por gramo. Ejemplos de la funcin de reserva de las protenas son la lactoalbmina o la ovoalbmina. La hordeina de la cebada y la gliadina del grano de trigo constituyen la reserva de aminocidos para el desarrollo del embrin.
Contraccin muscular: La contraccin de los msculos travs de la miosina y actina es una funcin de las protenas contrctiles que facilitan el movimiento de las clulas constituyendo las miofibrillas.
Funcin homeosttica: Las protenas funcionan como amortiguadores, manteniendo en diversos medios tanto el pH interno como el equilibrio osmtico.
9. Qu aminocidos rendir la hidrlisis cida del siguiente pptido: