ESPECTRO DE ABSORCIN

Anlisis
Instrumental

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RESUMEN
La espectrofotometra visible comprende la determinacin de la capacidad de
absorcin de un sistema qumico en estado de solucin el cual posee color. La luz
es el resultado de la energa radiante de la cual una persona normal es consciente
a travs de los sentidos, como resultado de la estimulacin de la retina de los ojos.
El sistema qumico que muestra un color y una capacidad de absorcin, es
nombrado coloreado, y por eso el trmino de anlisis colorimtrico es
frecuentemente aplicado a la medida de sistemas semejantes.
La espectrofotometra VIS puede ser aplicada a determinar un constituyente en
muchos tipos de muestras, y muchos mtodos son aplicables a valores de pocas
ppm.

















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MATERIALES Y MTODOS
El mtodo Espectrometra ultravioleta-visible utilizado en esta prctica de
laboratorio implica la espectroscopia de fotones en la regin de radiacin
ultravioleta-visible. Utiliza la luz en los rangos visible y adyacentes (el ultravioleta
UV cercano y el infrarrojo IR cercano. Un espectro ultravioleta-visible es
esencialmente un grfico de absorbancia de luz frente a una longitud de onda en
el rango de ultravioleta o la luz visible. Las muestras para espectrofotometra UV-
Vis suelen ser lquidas, aunque la absorbancia de los gases e incluso de los
slidos tambin puede medirse. El instrumento utilizado en la espectrometra
ultravioleta-visible se llama espectrofotmetro UV-Vis, mide la intensidad de luz
que pasa a travs de la muestra (I), y la compara con la intensidad de luz antes de
pasar a travs de la muestra (Io). Para la elaboracin del espectro de absorcin
de la sustancia y conocer la longitud de onda a la cual posee su mxima absorcin
de energa y construir la curva de calibracin se hizo uso del equipo Spectronic 20
y el equipo UV 1800 descritos acontinuacin:
Un espectrofotmetro puede ser nico o de doble haz. En un instrumento de un
solo haz (como el Spectronic 20), toda la luz pasa a travs de la clula muestra.
En un instrumento de doble haz, la luz se divide en dos haces antes de llegar a la
muestra. Un haz se utiliza como referencia, y el otro haz de luz pasa a travs de la
muestra. Algunos instrumentos de doble haz tienen dos detectores (fotodiodos), y
el haz de referencia y el de la muestra se miden al mismo tiempo. En otros
instrumentos, los dos haces pasan a travs de un bloqueador que impide el paso
de un haz. El detector alterna entre la medida del haz de muestra y la del haz de
referencia.
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El Spectronic-20 de Bausch y Lomb se trata de un espectrofotmetro en el que luz
es dispersada mediante una red de difraccin. Es un instrumento de precio
relativamente bajo, que se fabrica en serie y que se ha popularizado en los
laboratorios de todo el mundo. Para que este instrumento pueda resultar a un
precio limitado, su diseo es realmente simple. As, la rendija es de una anchura
fija, dando paso a una banda de longitudes de onda de 20 nanmetros de anchura
(de ah el nombre de Spectronic-20). El aparato opera en la regin de la ptica de
vidrio, de 340 a 900 nanmetros. Por encima de los 600 nanmetros hay que
sustituir el fototubo normal, sensible al azul, por un fototubo especial sensible al
rojo, y al propio tiempo hay que introducir un filtro rojo de vidrio, para excluir los
espectros de segundo orden. El fototubo es accesible abriendo una portezuela en
la cara inferior del aparato.

Figura 1. Spectronic 20

Partes del Spectronic 20
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1- Compartimiento de la muestra
2- Lectura digital
3- Indicadores de modo
4- Seleccin de modo
5- Disminuir
6- Aumentar
7- Impresin
8- Control de longitud de onda
9- Control de Transmitancia/Absorbancia (100% T/0A)
10- Interruptor de alimentacin/ Control de cero
11- Palanca de filtro
Para la medicin de la longitud de onda se calent por 25 minutos luego de
encendido el aparato y se seleccion la longitud de onda. Se coloc la escala a
0% T, con el compartimiento de muestra vaco y la cubierta del adaptador cerrado,
luego se coloc la solucin blanco de referencia en el compartimiento de la
muestra y se fij el 100% de T, se coloc la muestra problema y se realiz la
lectura, que puede realizarse en transmitancia o absorbancia.
-Equipo UV 1800
La muestra fue analizada igualmente por el equipo UV 1800 que es utilizado para
la determinacin de anlisis qumico por absorcin UV y VIS.
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Figura 2. UV 1800

Nombre del equipo:
UV 1800
Sistema de medida:
Modo Fotomtrico: Mide la absorbancia o la trasmitancia tanto en una
longitud de onda constante como en mltiples longitudes de onda.
Modo Espectro: Obtiene los espectros de la muestra escaneando la
longitud de onda.
Nivel de precisin: 190,0 ~ 1100,0 nm de intervalo espectral y 1nm (190
a1100nm) en banda espectral. Fijacin de longitud de onda en incrementos
de 0.1-nm.

Para la determinacin de datos a partir del UV 1800 se prepar la muestra de
curcumina y se procedi a medir la absorbancia (o puede medirse transmitancia)
de esta solucin en un rango de longitud de onda que se especific de acuerdo a
la indicacin comenzando de la mayor a la menor longitud de onda, lo cual es muy
importante. Se us como blanco agua destilada y se cheque la calibracin para
cada cambio de , se usaron dos cubetas o celdas idnticas para que ambas
leyeran igual 100% T o igual absorbancia. Se hicieron las lecturas en %T y se
convirtieron a absorbancia y se tabularon los datos obtenidos para elaborar el
espectro de absorcin y determinar la al que corresponde el mximo de
absorcin de la curcumina.
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CLCULO Y ANLISIS DE RESULTADOS
Realizando la lectura de datos en el espectrofotmetro spectronic 20, a un
determinado valor fijo de longitud de onda (430 nm) se obtuvieron los siguientes
resultados de tramitancia frente a diferentes concentraciones de la curcumina:
Concentracin ppm Tramitancia Absorbancia
0 100 -2.0
25 54 -1.7324
50 9 -0.9442
75 2 -0.3010
100 5 -0.6989
200 3 -0.4771
300 1 0
400 1 0
Muestra 2.5 -0.3979

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Como en el equipo utilizado se leyeron tramitancias por la mayor facilidad de
lectura, entonces estos valores se transforman a absorbancia haciendo uso de la
ecuacin:

, y se obtiene el siguiente grafico:

Notando que en este grfico presentado hay mucha variabilidad entre los valores,
es decir presentan mucha discontinuidad entre ellos se prosigue a la eliminacin
de ciertos datos, para as lograr una mejor curva ajustada a la ley de Beer,
eliminando as los datos de concentracin: 0, 25, 75, 300 con sus respectivos
valores de absorbancia. Quedando asi finalmente el siguiente grfico:
-2.5
-2
-1.5
-1
-0.5
0
0.5
0 100 200 300 400 500
A
B
S
O
R
B
A
N
C
I
A


C O N C E N T R A C I O N
CURVA DE CALIBRACIN PARA LA CURCUMINA
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La ecuacin de regresin que presenta es grafico es: A=0.002593*C 1.01886
con un

.
A partir de esta ecuacin podemos determinar la concentracin de curcumina en la
muestra problema de la siguiente forma:
Muestra problema: A=-0.3979 y luego: -0.3979=0.002593*C - 1.01886. Finalmente
obtenemos que la concentracin de curcumina en la muestra problema es de:
C=239.476 ppm.
Ahora se prosigue a la obtencin de la absortividad molar por medio de la
ecuacin:

A=
dnde: = absortividad molar en L/mol*cm
b= paso de la celdad en cm
C= concentracin en mol/L
-1
-0.8
-0.6
-0.4
-0.2
0
0.2
0 100 200 300 400 500
A
B
S
O
R
B
A
N
C
I
A


C O N C E N T R A C I N
CURVA DE CALIBRACIN PARA LA
CURCUMINA (AJUSTADA)
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Como la concentracin obtenida se encuentra en ppm se desarrolla la conversin
a mol/L a partir de su peso molecular (curcumina) que es de 368.38 g/mol.

6.5x

mol/L
Finalmente se obtiene la absortividad molar en la muestra problema de la
siguiente manera:

Anlisis de resultados obtenidos.
Muestra
Concentracin de curcumina
ppm
Absortividad molar
L/mol*cm
Muestra problema 239.476











CONCLUSIONES

La muestra analizada, es decir, la curcumina cumple correctamente con la
Ley de Beer a bajas concentraciones como se trabaj en el laboratorio.
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Luego de ajustar la curva para obtener solo valores aceptables se
determin que la absortividad molar de la curcumina es de 612.14
L/mol*cm.

La concentracin obtenida de curcumina en la muestra fue de 239.476 ppm.

Los datos obtenidos que no se ajustaban a la curva se debieron a que la
preparacin de las muestras se hizo por distintos grupos de los que algunos
de ellos no obtuvieron la dilucin a la concentracin requerida.

El mejor aparato para la realizacin de esta prctica es el UV1800 debido a
que elimina cualquier tipo de error por parte del operario al momento de la
lectura, aun puede existir errores como una mala manipulacin de la
muestra.

El anlisis de curcumina en alimentos es importante ya que es un
componente principal como por ejemplo del curry y la mostaza, y por las
diversas propiedades que tiene por su sabor, textura e incluso por sus
beneficios a la salud.
















BIBLIOGRAFA


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Skoog, D.A y Wost, D.M Analisis Instrumental. 2 Edicin 1987, Nueva
Edicin Interamericana, S.A.

www.complejob.net/2011/08/curcuma-curcumina-informaciondetallada.html,
visitado el lunes 2 de junio de 2014, a las 8:30 pm.

http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/119ssa14.html, visitado el lunes
2 de junio de 2014, a las 9:05 pm.

Manual de Laboratorio de Ingeniera Qumica. 2014.