Christian

Santander B.
Tecnologa de Madera y Papel

Cultivos in vitro plantas forestales:

El trmino cultivo in vitro de tejidos significa cultivar algunas partes de las plantas tambin llamados
explantes, como segmentos de hoja, tallo y races, adems de otros tejidos u rganos vegetales, dentro de un
frasco de vidrio en un ambiente artificial, en los que deben de controlarse la asepsia, el crecimiento y el
desarrollo de estos diferentes tejidos. No deben de crecer microorganismos como bacterias y hongos, y los
tejidos o plantas deben de mostrar un ptimo desarrollo.

Para lograr un cultivo in vitro de plantas, los tejidos y rganos (incluyendo semillas) deben ser esterilizados de
manera superficial y se cultivan en soluciones nutritivas especiales, con frecuencia en medios solidificados con
agar. A estos medios de cultivo se le incorporan combinaciones adecuadas de auxinas y citocininas, dos de las
principales fitohormonas del crecimiento vegetal. Con la aplicacin de stas y el cultivo controlado como el pH,
la luz y la temperatura, es posible reproducir todos los factores que puedan incidir en el crecimiento y
desarrollo de los tejidos o de las plantas in vitro.

Los cultivos in vitro se mantienen en cuartos o cmaras de crecimiento con luz artificial, en una temperatura
promedio de 25C, una intensidad de 25 a 35 mol/m2 seg con un fotoperiodo de 12 a 16 horas de luz. Aunque
de manera comercial existen diversos medios de cultivo, stos generalmente se componen de una mezcla de
sales minerales (macro- y micro- elementos), vitaminas y sacarosa. La composicin del medio depende de la
especie vegetal y del tipo de cultivo que se requiere.

La eleccin del explante para iniciar un cultivo in vitro adecuado, constituye el primer paso para el
establecimiento de los cultivos. Se ha demostrado que la edad fisiolgica del explante es un factor importante
en la formacin de rganos, entre ms joven, ms fcil ser su adaptacin y respuesta al cultivo in vitro. El
explante ms usado para los procesos de propagacin in vitro son las yemas apicales y axilares de las plantas.

Las Tcnicas de Cultivos de Tejidos Vegetales in Vitro (CTV) son una alternativa para la propagacin asexual de
rboles selectos. Ellas consisten en incubar en condiciones aspticas: rganos, tejidos, clulas y protoplastos
con el empleo de medios nutritivos artificiales en condiciones controladas de temperatura, luz y humedad, con
la finalidad de que regenere una planta completa. Una de sus aplicaciones ms exitosas es la propagacin
masiva o micropropagacin, cuyas ventajas son: altas tasas de multiplicacin, plantas genticamente
uniformes, sanas, que se obtienen en tiempo y espacio reducidos. Las vas mediante las cuales se regeneran las
plantas son la organognesis y la embriognesis somtica, cada una de las cuales tiene sus ventajas y
desventajas.

En lo referente al material vegetal: el explante (parte separada del vegetal) y su procedencia, son importantes
y se debe asegurar la disponibilidad, homogeneidad y facilitar la manipulacin del mismo en el momento de su
incubacin en el medio de cultivo. Por ello, es necesario utilizar material vegetal previamente establecido en
invernadero y vivero para reducir la incidencia de patgenos y lograr una respuesta rpida del explante. Por
otra parte, dicho explante se debe extraer de plantas jvenes, perfectamente identificadas en su procedencia
y se las conoce como plantas donantes. Cuando se establecen protocolos de micropropagacin se debe
conocer la especie, el explante debe provenir de una fuente segura de germoplasma y se debe realizar una

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eleccin apropiada de la composicin qumica del medio de cultivo en funcin de la especie. Esta composicin
se debe definir para cada etapa de la micropropagacin. El empleo de la multiplicacin masiva a travs de
explantos extrados de rboles selectos tiene como objetivo evitar la variabilidad producida a partir de semillas.