Trejo Mondragn Mariana F17 Reporte de prctica 3: Obtencin de Emulsina
Objetivos: Obtener una enzima, la emulsina, a partir de almendras dulces.
Resultados:
EXTRACCION DE LA EMULSINA.
La mezcla de las almendras y el cido actico al 1% se somete a agitacin sin calentamiento.
La solucion filtrada que se obtuvo a partir de la mezcla anterior se deja enfriar en un bao de agua con hielos por 10 min. Y se le agrega acetona. Se empieza a formar un precipitado, el cual es la emulsina
La emulsina se recupera filtrando por gravedad.
La emulsina obtenida, tena un aspecto viscoso y gelatinoso de color blanco-amarillento. Laboratorio de Qumica Orgnica III Barreto Esquivel Nicols F3 Trejo Mondragn Mariana F17 Reporte de prctica 3: Obtencin de Emulsina
COMPROBACION DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA
Discusin de resultados La tcnica que se realiz fue cualitativa ya que no se contaba con el p-nitro fenil - -D- glucsido, por lo cual no se pudo comparar la actividad de la emulsina obtenida, bajo diferentes temperaturas por la accin del reactivo. Cuando se baja la temperatura a la mezcla de almendras dulces desengrasadas y cido actico y se agrega la acetona, se observa al fondo del matraz que se va formando un precipitado blanco-amarillento; al filtrar en el papel se obtuvo una sustancia blanco-cremosa de consistencia viscosa que corresponda a la emulsina. No se filtr con la bomba de vaco debido a que esta ejerce mucha fuerza y se podra absorber la protena hacia las aguas madres, por lo tanto se perdera una parte de la enzima; tampoco se dejo secar el papel al calor ya que esta se hubiera desnaturalizado, por lo tanto tambin se perdera y no se podra pesar correctamente, luego entonces no se puedo calcular el rendimiento, por lo cul la tcnica fue meramente cualitativa.
Cuestionario. 1. Con qu otros nombres se conoce a la emulsina? A la emulsina tambien se le conoce como: - Glucosidasa, Glusidasa o Carbohidrasa 2. Por su modo de accin, cmo se clasifica esta enzima? En 1837 Liebig extrajo de las almendras un fermento soluble que catalizaba la descomposicin de la amigdalina en glucosa y cido hidrocinico y lo llam emulsina. 3. Escriba la reaccin que se produce entre la enzima y el glucsido. O CH 2 OH HO HO HO OH CH 2 OH O O HO O CN EMULSINA O CH 2 OH HO HO HO OH CH 2 OH O O HO HO CN + HCN + H O
Laboratorio de Qumica Orgnica III Barreto Esquivel Nicols F3 Trejo Mondragn Mariana F17 Reporte de prctica 3: Obtencin de Emulsina
4. La comparacin de la actividad enzimtica de la emulsina extrada de las dos muestras de almendras dulces tratadas, a que conclusiones le lleva. No se realiz el experimento, sin embargo, Las medidas de actividad enzimtica, deben hacerse en condiciones Standard de todos los parmetros que influyen en la velocidad, tales como las concentracin de enzima, de sustrato, de cofactores, de producto y de inhibidores, el pH y la temperatura.
5. Qu otro glucsido natural podra emplear para comprobar la actividad de la enzima? La (+)-celobiosa, y metil--D-glucsido
6. Qu usos podra darle al residuo de las almendras? Se podran lavar y usarlas de abono para las plantas.
7.- Proponga un mtodo para hacer la determinacin cuantitativa del p-nitro fenol formado durante la reaccin con emulsina: El P- nitro fenol es un compuesto amarillo-coloreado brillante que tiene absorbencia mxima en 405 NM. El incremento en absorbancia a 405 nm es proporcional a la cantidad de emulsina en la muestra.
CONCLUSIONES:
Se extrajo emulsina a partir de almendras desengrasadas, aunque no se le hicieron las pruebas para ver la capacidad de la emulsina a falta de reactivos observamos su consistencia y la caracterstica de las enzimas, ya que la emulsina es una enzima. Las enzimas, son protenas, que se encargan de catalizar reacciones qumicas, para poder funcionar, deben tener sus estructuras intactas, cuando por medio de ciertas reacciones, o por medio del calor, inactivas a las enzimas, se dice que las desnaturalizas, y al hacerlo, impides la funcin de las enzimas. As que en realidad, la desnaturalizacin inactiva a las enzimas.
Las almendras a grandes cantidades son toxicas ya que la emulsina, que sirve para digestin, al combinarse con el agua o con el jugo gstrico forma cido cianhdrico el cual es altamente toxico.
BIBLIOGRAFA:
Ville, C. A.: Protenas. En: Biologa. 6 ED. Interamericana, Mxico, 1974. 31-33. Berezov T.T, Korovkin B.F: Qumica de las protenas. En Bioqumica, 1 ED. Mir Publishers Moscow Mosc, Rusia, 1992. pp. 19 64.