ENZIMAS

1. INTRODUCCIN

Al igual que las disciplinas experimentales que han surgido como rama comn
que es la biologa, tiene una historia propia construida a travs de
observaciones, experiencias, pruebas y teoras.
Se inici con el estudio de los procesos de fermentacin y de putrefaccin y
Antoine-Laurent Lavoiser (1743- 1794) fue el primero en plantear sobre bases
cuantitativas el proceso de la fermentacin alcohlica al observar una relacin
entre cantidad de azcar presente y productos formados durante el proceso.
Sostuvo que la fermentacin poda ser considerada como una
reaccin qumica cualquiera.
No obstante Pasteur demostr pronto que los procesos de putrefaccin y
fermentacin eran provocados por la presencia de bacterias y levadura.
Si bien algunos qumicos consideraron esos procesos como metamorfosis de
sustancias que provocaban excitaciones en otras que estaban cerca de ellas,
esta cuestin fue, como ya se ha dicho, definitivamente resuelta por Buchner
hacia finales del siglo XIX; exprimiendo masas celulares de Saccharomyces
cerevisie obtuvo un lquido sin clulas, capaz de producir la mismas reacciones
qumicas que se obtenan utilizando la suspensin de clulas, es decir, la
transformacin del azcar en alcohol y anhdrido carbnico.
Por tanto, de la levadura se poda extraer una sustancia capaz de regular un
proceso qumico concreto.



2. OBJETIVOS


2.1 GENERAL

Comprender es estudio de las enzimas relacionada a su
universalidad y especfica.



2.2 ESPECFICOS


Determinar las propiedades de los enzimas.

Conocer el uso y aplicaciones de las enzimas


Catalizar la transformacin de apenas un substrato o una familia
de substratos relacionados estructuralmente, catalizando solo una
de las posibles reacciones que ese substrato puede
experimentar.

Actuar sobre substratos con estructuras muy similares, se dice
que la enzima muestra especificidad relativa para el substrato.





3. MARCO TEORICO

3.1 PROPIEDADES DE LA ENZIMA

Las propiedades de los enzimas derivan del hecho de ser protenas y de actuar
como catalizadores. Como protenas, poseen una conformacin natural ms
estable que las dems conformaciones posibles. As, cambios en la
conformacin suelen ir asociados en cambios en la actividad cataltica. Los
factores que influyen de manera ms directa sobre la actividad de un enzima
son:

pH
Temperatura
Cofactores

EFECTO DEL pH SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

Los enzimas poseen grupos qumicos ionizables (carboxilos -COOH; amino -
NH2; tiol -SH; imidazol, etc.) en las cadenas laterales de sus aminocidos.
Segn el pH del medio, estos grupos pueden tener carga elctrica positiva,
negativa o neutra. Como la conformacin de las protenas depende, en parte,
de sus cargas elctricas, habr un pH en el cual la conformacin ser la ms
adecuada para la actividad cataltica. Este es el llamado pH ptimo. (Para
activar la animacin de la Figura de la derecha, pulsar la opcin "Recargar" del
navegador).

La mayora de los enzimas son muy sensibles a los cambios de pH.
Desviaciones de pocas dcimas por encima o por debajo del pH ptimo pueden
afectar drsticamente su actividad. As, la pepsina gstrica tiene un pH ptimo
de 2, la ureasa lo tiene a pH 7 y la arginasa lo tiene a pH 10 (Figura de la
izquierda).

Como ligeros cambios del pH pueden provocar la desnaturalizacin de la
protena, los seres vivos han desarrollado sistemas ms o menos complejos
para mantener estable el pH intracelular:

Los amortiguadores fisiolgicos.



EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA ACTIVIDAD
ENZIMTICA
En general, los aumentos de temperatura aceleran las reacciones qumicas:
por cada 10C de incremento, la velocidad de reaccin se duplica.
Las reacciones catalizadas por enzimas siguen esta ley general. Sin embargo,
al ser protenas, a partir de cierta temperatura, se empiezan a desnaturalizar
por el calor.
La temperatura a la cual la actividad cataltica es mxima se llama
temperatura ptima (Figura de la derecha).
Por encima de esta temperatura, el aumento de velocidad de la reaccin
debido a la temperatura es contrarrestado por la prdida de actividad cataltica
debida a la desnaturalizacin trmica, y la actividad enzimtica decrece
rpidamente hasta anularse.








EFECTO DE LOS COFACTORES SOBRE LA ACTIVIDAD
ENZIMTICA
A veces, un enzima requiere para su funcin la presencia de sustancias no
proteicas que colaboran en la catlisis: los cofactores. Los cofactores pueden
ser iones inorgnicos como el Fe++, Mg++, Mn++, Zn++ etc. Casi un tercio de
los enzimas conocidos requieren cofactores.
Cuando el cofactor es una molcula orgnica se llama coenzima. Muchos de
estas coenzimas se sintetizan a partir de vitaminas.
En la figura inferior podemos observar una molcula de hemoglobina (protena
que transporta oxgeno) y su coenzima (el grupo hemo).
Cuando los cofactores y las coenzimas se encuentran unidos covalentemente
al enzima se llaman grupos prostticos. La forma catalticamente activa del
enzima, es decir, la enzima unida a su grupo prosttico, se llama holoenzima.
La parte proteica de un holoenzima (inactiva) se llama apoenzima, de forma
que:


3.2 MODELOS DE ACCION ENZIMATICA

Hay dos modelos sobre la forma en que el sustrato se une al centro activo del
enzima:
El Modelo Llave Cerradura
El Modelo del Ajuste inducido

MODELO LLAVE-CERRADURA

El modelo llave-cerradura supone que la estructura del sustrato y la del centro
activo son complementarias, de la misma forma que una llave encaja en una
cerradura.
Este modelo es vlido en muchos casos, pero no es siempre correcto.

MODELO DEL AJUSTE INDUCIDO
En algunos casos, el centro activo adopta la conformacin idnea slo en
presencia del sustrato.

La unin del sustrato al centro activo del enzima desencadena un cambio
conformacional que da lugar a la formacin del producto.

Este es el modelo del ajuste inducido (Figura animada de la derecha. Pulsar la
opcin "Recargar" del navegador para ver la animacin).

Sera algo as como un cascanueces, que se adapta al contorno de la nuez.






3.3 CLASIFICACIN DE ENZIMAS

En funcin de su accin cataltica especfica, las enzimas se clasifican en 6
grandes grupos o clases:

1. OXIDORREDUCTASAS

Catalizan reacciones de xido reduccin, es decir, transferencia de hidrgeno
(H) o electrones (e-) de un sustrato a otro, segn la reaccin general:

Ejemplos son la succinato deshidrogenasa o la citocromo c oxidasa.

2. TRANSFERASAS

Catalizan la transferencia de un grupo qumico (distinto del hidrgeno) de un
sustrato a otro, segn la reaccin:

Un ejemplo es la glucoquinasa, que cataliza la reaccin representada en la
Figura de la derecha:


3. HIDROLASAS

Catalizan las reacciones de hidrlisis:

Un ejemplo es la lactasa, que cataliza la reaccin:

4. LIASAS

Catalizan reacciones de ruptura o soldadura de sustratos:

Un ejemplo es la acetacetato descarboxilasa, que cataliza la reaccin:



5. ISOMERASAS
Catalizan la interconversin de ismeros:

Son ejemplos la fosfotriosa isomerasa y la fosfoglucosa isomerasa, que
catalizan las reacciones representadas en la tabla inferior:


6. LIGASAS

Catalizan la unin de dos sustratos con hidrlisis simultnea de un nucletido
trifosfato (ATP, GTP, etc.):

Un ejemplo es la piruvato carboxilasa, que cataliza la reaccin:




3.4 USO Y APLICACIONES DE LAS ENZIMAS
Uso:
* Utilizacin del enzima en medio acuoso, ya que la actividad ptima est
asociada a las particulares caractersticas de ste en medios acuosos. Suelen
ser en forma de gel y si hace falta, aadiendo un espesante a base de
derivados de la celulosa que aseguran una ptima transparencia y buena
conservacin.
* pH del medio acuoso lo ms estable posible, dentro de unos lmites mediante
soluciones tampn, que tienen la capacidad de mantener la invariabilidad del
pH. En el caso del enzima, es necesario utilizar soluciones tampn de origen
biolgico, que sean compatibles con las protenas y que no desnaturalicen los
enzimas. La proporcin de estas soluciones suele ser unos 100-200 mg de
enzima de alta actividad especfica hasta 1 mg de los de baja actividad
especfica por 100 ml. de agua.
* Temperatura ptima en torno a los 35-40C. Si las condiciones ambientales
superan esta temperatura, se produce un ablandamiento y calentamiento de la
superficie a tratar y de la solucin enzimtica. Nunca habra que superar los 45-
50C porque muchos enzimas se transforman en inactivos cuando superan
estas temperaturas.
Aplicaciones:
La solucin contiene el enzima a la temperatura adecuada y se aplica
tamponando sobre una pequea superficie.
El tiempo de aplicacin vendr determinado cada vez y generalmente oscila
entre 1 y 10 minutos. Es indispensable, en un tiempo prolongado de aplicacin,
evitar que el gel enzimtico se seque sobre la superficie.
Antes de su aplicacin ser necesario limpiar con agua la superficie donde se
aplicar el gel enzimtico.
Al acabar el tiempo de aplicacin, habr que limpiar tamponando con agua y
despus una ltima limpieza con un disolvente voltil (hidrocarburo, esencia de
petrleo, white spirit). Si es necesario repetir la aplicacin, habr que seguir
todos los pasos otra vez.
Tambin es posible la aplicacin de diferentes tipos de enzimas de forma
sucesiva, dejando el enzima proteoltico para el ltimo, porque su accin
hidrolgica sobre las protenas podra ralentizar la accin de los enzimas
aplicados anteriormente.
Los enzimas deben conservarse refrigerados, teniendo en cuenta que en forma
de solucin se alteran rpidamente.
Pueden ser utilizados durante aproximadamente dos semanas, pero con una
sucesiva disminucin de actividad especfica hasta ser inservibles.
La capacidad de los enzimas de disgregar macromolculas orgnicas hace
pensar en otras utilizaciones aparte de la limpieza de superficies policromadas.
Por ejemplo, se pueden utilizar para eliminar los residuos de cola orgnica
utilizada para un entelado, en el reverso de una tela.
Histricamente, se han utilizado para operaciones de limpieza, la pancreatina,
pero con malos resultados.
Es una sustancia que contiene todas las actividades enzimticas principales:
proteolticas, lipdicas y analticas. Pero no cumple la principal caracterstica de
los enzimas, la especificidad, y por lo tanto no debera utilizarse en soportes
materialmente complejos, como son la pintura, donde es muy importante
conocer la actividad enzimtica que se est utilizando.
Si se utiliza un enzima mediante una preparacin de gel, existe la ventaja de
una menor penetracin en el medio acuoso, mientras que la presencia de un
enzima reduce el tiempo de aplicacin respecto el uso de gua.


3.5 FACTORES QUE ALTERAN LA ACCIN DE LAS
ENZIMAS

Concentracin del sustrato.- A mayor concentracin del sustrato, a una
concentracin fija de la enzima se obtiene la velocidad mxima. Despus de
que se alcanza esta velocidad, un aumento en la concentracin del sustrato no
tiene efecto en la velocidad de la reaccin.
Concentracin de la enzima.- Siempre y cuando haya sustrato
disponible, un aumento en la concentracin de la enzima aumenta la velocidad
enzimtica hacia cierto lmite.
Temperatura.- Un incremento de 10C duplica la velocidad de reaccin,
hasta ciertos lmites. El calor es un factor que desnaturaliza las protenas por lo
tanto si la temperatura se eleva demasiada, la enzima pierde su actividad.
pH.- El pH ptimo de la actividad enzimtica es 7, excepto las enzimas del
estmago cuyo pH ptimo es cido.
Presencia de cofactores.- Muchas enzimas dependen de los cofactores, sean
activadores o coenzimas para funcionar adecuadamente. Para las enzimas que
tienen cofactores, la concentracin del cofactor debe ser igual o mayor que la
concentracin de la enzima para obtener una actividad cataltica mxima.






1. CONCLUSIN

Como pudimos ver, existen centenares de variedades distintas de protenas en
el cuerpo, cada una encargada de realizar ciertas tareas definidas. Sin
embargo pueden hasta utilizarse como combustible, aunque no sean, en
principio, alimentos energticos como los carbohidratos.

Cada tejido recoge constantemente de la sangre los aminocidos especiales
que necesita para su reparacin o crecimiento. Un cuerpo que se desarrolla
necesita un amplio suministro de aminocidos para ayudar al crecimiento de
sus tejidos. Por eso, los nios y los adolescentes necesitan ms protenas que
los adultos.

Las necesidades protenicas no varan segn el trabajo desarrollado, sin
embargo, si es insuficiente la dotacin de estos elementos bsicos, el cuerpo
echar mano de las protenas como combustible y no quedarn bastantes para
fabricar convenientemente el tejido corporal.
Por estas razones concluimos que las protenas son sustancias esenciales
para los seres vivientes.










2. RECOMENDACIONES


Evaluar el efecto de otros niveles de presin dinmica en la
actividad enzimtica de la polifenoloxidasa, as como tambin en
la poblacin microbiana, color y pH.

Realizar estudios del efecto de las altas presiones dinmicas
sobre la actividad enzimtica de la polifenoloxidasa en alimentos
o bien sistemas modelo con pH entre 6 y 6.5, para evaluar el
efecto en condiciones ms cercanas al ptimo.













3. ANEXOS
























4. BIBLIOGRAFA

http://www.monografias.com/trabajos5/enzimo/enzimo.shtml

http://www.monografias.com/trabajos82/las-enzimas/las-enzimas.shtml

http://www.ehu.es/biomoleculas/enzimas/tema11.htm

http://espanol.answers.yahoo.com/question/index?qid=20090207152448AAUZ
YlL

http://genesis.uag.mx/edmedia/material/quimicaII/enzimas.cfm

http://unicum.cat/es/2011/07/enzims/

http://catarina.udlap.mx/u_dl_a/tales/documentos/lia/celis_h_t/capitulo8.pdf