ALCANCE

El estndar actual se aplica a los productos alimenticios y establece los mtodos para
la determinacin de la cantidad de aerobios mesfilos y anaerobios facultativos
(bacterias, levaduras y mohos) el mtodo de siembra en medio de cultivo de a!ar y el
mtodo de n"mero ms probable (N#$)%
El mtodo para la determinacin de la cantidad de aerobios mesfilos y anaerobios
facultativos por siembra en medio de cultivo de a!ar se utili&a para productos
alimenticios, 'ue contienen en ( ! de la sustancia slida ms de ()* o en ( cm+ de su
sustancia l,'uida ms de () formadoras de colonias unidades (C-.) de aerobios
mesfilos y anaerobios facultativos%
El mtodo de la ms probable n"mero de aerobios mesfilos y anaerobios facultativos
se utili&a para los productos alimenticios 'ue contienen en ( ! de la sustancia slida
de ms de ()* o de ( cm+ de la sustancia l,'uida a menos de () unidades formadoras
de colonias (.-C) de aerobios mesfilos y anaerobios facultativos%
PRINCIPIO DE LOS MTODOS
El mtodo para la determinacin de la cantidad de aerobios mesfilos y anaerobios
facultativos por cabe&as de serie en medio de cultivo de a!ar se basa en la inoculacin
de un producto o de dilucin de producto de muestra en el cultivo de crecimiento, la
incubacin de cabe&as de serie y el clculo de todas las colonias visibles cultivadas%
El mtodo para la determinacin del n"mero ms probable de aerobios mesfilos y
anaerobios facultativos se basa en la inoculacin del producto y (o) la dilucin de la
muestra del producto en un l,'uido medio de cultivo, la incubacin de los cabe&as de
serie, teniendo en cuenta los si!nos visibles del crecimiento microbiano, se!unda
siembra, si es necesario, del l,'uido de cultivo en el medio de a!ar para la
confirmacin del crecimiento de microor!anismos, su clculo con la ayuda de la tabla
de la #$N%
TOMA Y PREPARACIN DE MUESTRAS DE ANLISIS
Toma de muestras y preparac!" de pro#etas ser$" por %OST &'''() %OST &'''*+
Co" e, -" de rea,.ar prue#as de ,os s/ue"tes e0upos) matera,es y react1os se
ut,.a" de acuerdo co" %OST 23)444+2 co" ,as s/ue"tes adco"es5
La#oratoro %e"era, de esca,a co" caracter6stcas metro,!/cas de acuerdo co" %OST
&4234 7 co" u" ,6mte de peso de &33 /) Se/u"da c,ase de precs!" 8para e, pesa9e de
,os react1os:;
La#oratoro %e"era, de esca,a co" caracter6stcas metro,!/cas de acuerdo co" %OST
&4234 7 co" u" ,6mte de peso de 2 </) cuarta c,ase de precs!" 8para pesar u"
producto:;
,upa co" amp,ac!" =>23?;
Mcroscopo #o,!/co !ptco co" u" aume"to de *33>2333?;
asa #actero,!/ca; 1dro de re,o9 de acuerdo co" %OST *&(4; cu#erta de 1dro de
acuerdo co" %OST
termostato co" u" ra"/o de temperatura e-ect1a de &(>== @ C) ,o 0ue permte
ma"te"er ,a temperatura
esta#,ecer co" u" error adms#,e A 2 @ C+
Co" e, -" de rea,.ar prue#as de ,os s/ue"tes medos de cu,t1o se ut,.a" de
acuerdo co" %OST
23444+2;
a/ar /,ucosa>trpto"a 8ca,do:;
a/ar car"e 8pescado:>pepto"a 8ca,do:;
a/ar car"e 8pescado:>pepto"a 8ca,do: co" /,ucosa;
a/ar car"e 8pescado:>pepto"a 8ca,do: co" /,ucosa y e?tracto de ,e1adura; medo
s!,do Bott"/er co"te"e /,ucosa y e?tracto de ,e1adura; medo de a/ar "utrt1o seco;
medo de a/ar "utrt1o seco co" /,ucosa;
medo de a/ar "utrt1o seco D 8co" e?tracto de ,e1adura
PROCEDIMIENTO DE ENSAYO
'+2 U"a muestra or/"a, y u"a sere de d,uco"es decma,es se prepara" a partr de
u"a muestra de e"sayo de u" producto de acuerdo co" %OST &'''* de ,a ma"era
0ue ) podr6a ser pos#,e determ"ar u" pos#,e "Cmero de aero#os mes!-,os y
a"aero#os -acu,tat1os e" e, producto o e, "Cmero 0ue se "dca e" ,a docume"tac!"
"ormat1o> tDc"co para e, producto+
'+& Dura"te ,a determ"ac!" de ,a ca"tdad de aero#os mes!-,os y a"aero#os
-acu,tat1os por ca#e.as de sere e" ,os medos de cu,t1o de a/ar de u" producto y
8o : de cada u"o de ,os ca#e.as de sere correspo"de"tes ) 2 cmE ca#e.as de sere
se sem#ra" e" dos p,atos para,e,os de Petr+ Los ca#e.as de sere se e"16a" de
acuerdo co" %OST
&'+'F3 por u"o de ,os medos de a/ar de acuerdo co" e, G =+& + S se espera 0ue e,
crecme"to rastrero de ,os mcroor/a"smos de ,os /D"eros Hac,,us o Proteus ) ,os
ca#e.as de sere se e"16a" de acuerdo co" %OST &''F3 co" u"a se/u"da capa de
medo de cu,t1o de a/ar o "a"c!" 8 apro?madame"te 4 cm E: +
'+E Dura"te e, mDtodo para ,a determ"ac!" de, "Cmero m$s pro#a#,e de #acteras
aero#as mes!-,as y a"aero#os -acu,tat1os tres muestras suces1as de u" producto o
de sus d,uco"es se sem#ra" ) 0ue d-ere" e" ,a ca"tdad de producto de ,a sem#ra 8
23 1eces:
Cada porc!" de, producto y 8o : su d,uc!" se sem#r! e" ,as rDp,cas trp,es e"
-rascos o tu#os de e"sayo co" u" ,60udo 0ue co"te"e u" medo de "utre"tes de
acuerdo co" e, G =+& +
La re,ac!" e"tre ,a ca"tdad de producto sem#rado o su d,uc!" y ,a ca"tdad de
medo de cu,t1o es de 2 5 = a 2 ; F
'+4 Los ca#e.as de sere de acuerdo co" e, G '+& y '+E se "cu#a" a ,a temperatura de
8 E3 I2 : @ C dura"te
8 F& IE : Joras e" co"dco"es aer!#cas +
'+= DespuDs de ,a "cu#ac!" de ,os ca#e.as de sere 0ue se rea,.a e, c$,cu,o de ,as
co,o"as 0ue Ja" crecdo e" p,acas de Petr + Para e, c$,cu,o de ,as p,acas de Petr se
e,/e" ) 0ue te"e" e"tre 2= y E33 co,o"as +
Prese"ca o ause"ca de s/"os 1s#,es de crecme"to puede" ser "dcados e" ,os
medos de comu"cac!" de ,60udo 8 -ormac!" de /as ) ,a aparc!" de tur#de. )
sedme"tos : +
S e, crecme"to de mcroor/a"smos e" medos ,60udos "o se desarro,,a
correctame"te ) ,a mcroscop6a de ,os ca#e.as de sere se ,,e1a a ca#o usa"do ap,a"ar
o /ota co,/a"te co" u"a co"-rmac!" smu,t$"ea de ,a pos#,dad de crecme"to de
mcroor/a"smos por resem#ra e, ,60udo de cu,t1o de acuerdo co" %OST &''F3 e,
"teror o e" u"o de ,os medos de a/ar de co"-ormdad co" e, G =+& +
'+' A, determ"ar ,a ester,dad comerca, de ,os productos e" co"ser1a comp,eto )
dura"te ,a determ"ac!" de ,as ra.o"es de ,a aparc!" de de-ectos ) s "o Jay
"strucco"es especa,es e" ,a docume"tac!" "ormat1o> tDc"co) ,a mor-o,o/6a de ,os
mcroor/a"smos 0ue crece" es a determ"ar+
S -rots "ecesaros se prepara" a partr de ,as co,o"as ) ,as co,o"as est$" p"tadas de
acuerdo co" %ram 8 de acuerdo co" %OST E34&= : y rea,.ar u"a mcroscop6a ) ,a
determ"ac!" de ,a prese"ca de cata,asa 8 de acuerdo co" %OST E34&= : +
TRATAMIENTO DE LOS RESULTADOS
F+2 Los resu,tados se procesa" de acuerdo a cada muestra separada+

F+& Los resu,tados de, c$,cu,o de, "Cmero de co,o"as de acuerdo co" e, G '+=
se cue"ta" e" re,ac!" a 2 / 8cmE: de, producto de acuerdo co" %OST &''F3+
Dura"te e, a"$,ss de ,os productos e",atados) ,os resu,tados de ,as prue#as
adco"a,es para ,a determ"ac!" de ,a mor-o,o/6a de ,os mcroor/a"smos
cu,t1ados se "dca" s es "ecesaro+
F+4 NMP de #acteras aero#as mes!-,as y a"aero#os -acu,tat1os se de-"e de
acuerdo co" e, "Cmero de -rascos post1os 8tu#os: de acuerdo co" %OST
&''F3+
F+= Los resu,tados de ,a determ"ac!" de ,a ca"tdad de aero#os mes!-,os y
a"aero#os -acu,tat1os est$" escrtos de acuerdo co" %OST &''F3+