Extraccin del almidn de tejidos vegetales y determinacin del contenido de amilosa

Lucero Cabrera; Dalila Santracruz

Bioqumica 2

Introduccin:

El almidn es el carbohidrato de reserva de los vegetales y est constituido por dos
polisacridos, la amilosa y la amilopeptina, la amilosa es un polisacrido lineal, perfecto,
formado por unidades de -D-glucosa con enlaces -1.4, lo cual favorece la formacin de
estructuras helicoidales. La amilopectina posee una estructura compleja, de cadenas
ramificadas. En las cadenas principales, los monmeros de D- glucosa estn unidos por enlaces
-1.4 y las ramificaciones se realizan mediante enlaces -1.6, con un punto de ramificacin
cada 15-30 unidades de glucosa.


Procedimiento:
Extraccin y cuantificacin del contenido de almidn de un tejido vegetal
1- eliminar la cascara del material vegetal (maz) y cortar en trozos pequeos
2- pesar 100g de tejido vegetal libre de cascara y homogenizar con 100mL de agua
3- filtrar sobre tela, lavar continuamente con el fin de extraer el almidn presente
4- dejar en reposos la mezcla filtrada, decantar y lavar con agua el sedimento de almidn,
se puede sustituir la decantacin con centrifugacin
5- lavar dos veces sucesivas con etanol al 95% un lavado con acetona y dos ms con ter
etlico
6- resuspender el almidn en la misma cantidad de ter etlico y transferir a una caja Petri
pesada y seca
Determinacin del contenido de amilosa
1- Preparar la curva de calibracin de la siguiente forma:
a. Pesar muestras de 0.001; 0.002; 0.003; 0.004; 0.005 g de amilosa y transvasar,
cuantitativamente en balones aforados de 100mL
b. Dispersar la amilosa en 2mL de agua destilada. Adicionar gota a gota 0.5mL de una
solucin de NaOH 1M. calentar en bao mara hasta lograr disolucin
c. Enfriar. Neutralizar con una disolucin de HCl 1M. agregar a cada baln 0.2g de
tartrato acido de potasio
d. Diluir con agua destilada aproximadamente a 95mL. Adicionar 1mL de solucin
yodo-yoduro de potasio preparada con 2 g de KI y 0.2g de I
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en 100mL. Aforar a
100mL con agua destilada
e. Dejar en reposos 20 minutos
f. Preparar el blanco, en igual forma pero sin amilosa
g. Medir la absorbancia de cada disolucin a 680nm. Construir una curva de
calibracin
2- Preparar muestras 0.002; 0.005 g del almidn en balones aforados de 100mL y realizar
el mismo procedimiento anteriormente
3- Medir la absorbancia de la disolucin de almidn y encontrar la concentracin de
amilosa interpolando en la curva de calibracin
4- Calcular el contenido de amilosa (%m/m)
Bibliografa:
1. Tomado de internet: Qumica de Alimentos: Manual de laboratorio. Escrito por Nuria
Bolaos V.,Giselle Lutz C.,Carlos H. Herrera R.
Disponible en:
http://books.google.com.co/books?id=8VpJ8foyDiIC&pg=PA13&lpg=PA13&dq=determinacion
+de+la+pureza+y+grado+de+ramificacion+del+almidon&source=bl&ots=q0zMkVcgVj&sig=Vc0t
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