Informe de Trabajo Prctico N3

Control de Microorganismos: Actividad

N3 Antisepsia de la Piel
















Integrantes: Jasmin Ibarra
Jean miranda
Tutor: Dr. Roberto Vidal
Fecha: 22 de abril, 2014

Introduccin:
Existe un conjunto de microorganismos que colonizan al hospedero en zonas especficas (como
piel y mucosas) desde su nacimiento, estableciendo relaciones de simbiosis y comensalismo. A
estos se les llama microbiota normal. Parte de la importancia de esta microbiota radica en que
participa en la defensa del hospedero por medio del mecanismo de interferencia bacteriana, y en
la activacin basal del sistema inmunolgico
(1).
Ello permite enfrentar la posible entrada de
microorganismos patgenos, los cuales al colonizar el organismo humano provocan un estado
alterado de la fisiologa humana normal. Por otra parte, la microbiota normal puede comportarse
como patgena; esto ocurre en determinados nichos anatmicos, aprovechando distintos estados
alterados del organismo para ingresar a sitios anatmicos estriles y provocar infeccin;
denominndose patgenos oportunistas
(2).
En ciertas situaciones como en intervenciones mdicas, es necesario mantener control sobre
microorganismos colonizadores de tejido, pues pueden ocurrir infecciones a causa del
procedimiento realizado. Para ello se utilizan antispticos, que son qumicos de baja toxicidad
capaces de destruir o inhibir el crecimiento de microorganismos sobre tejidos vivos, actuando de
manera inespecfica sobre ellos
(3).
En este trabajo analizaremos la accin de tres de ellos:
Alcohol, Povidona Yodada y Clorhexidina.

1.-Alcohol 70%:
- Caractersticas: es una sustancia orgnica voltil, por lo que no posee efecto residual. Tiene
accin bactericida debido a que desnatura protenas de la membrana plasmtica. Al cabo de 2
minutos elimina un 90% de las bacterias, mejoran al aumentar el largo de la cadena (hasta 5 u 8
carbonos), siendo los de mayor uso el etanol e isopropanol y al aumentar la presencia de agua, en
soluciones optimas de un 60 a 80% de alcohol. Se inhiben en presencia de materia orgnica
(4) (5).

-Microorganismos que puede controlar: poseen una rpida accin frente a bacterias vegetativas,
micobacterias, algunos hongos y algunos virus membranosos. No son activos frente a esporas.
(4)

- Aplicaciones: su uso principal es la antisepsia de la piel antes de inyecciones o pequeas
intervenciones quirrgicas, uso domstico frente a pequeas heridas. Adems se suele mezclar
con otros antispticos obteniendo un efecto sinrgico
(5).
- Efectos adversos: son lquidos estables pero inflamables y voltiles, por lo que se debe
mantener en recipientes cerrados y sin exposicin al sol o fuentes de calor. Su toxicidad aumenta
con el nmero de carbonos en la cadena alcohlica. Adems pueden causar irritacin a la piel
(3)

2.-Povidona yodada:
-Caractersticas: son soluciones de yodo y polivinilpirrolidona, que actan como reservorio de
yodo para disminuir la irritacin que pueden causar, manteniendo su eficacia en comparacin con
el yodo metlico
(5).
Tiene poder oxidante, afectando la estabilidad de las membranas
celulares, precipitando protenas y cidos nucleicos
(3).
Se inhiben en presencia de materia
orgnica
(6).

-Microorganismos que puede controlar: afecta a bacterias vegetativas, micobacterias, hongos,
virus y algunas esporas con menos efectividad.
-Aplicaciones: antisepsia de la piel y mucosas para intervenciones quirrgicas, heridas,
prevencin de gangrena, cuidados intensivos, lavado de instrumental mdico y del enfermo
(3).

-Efectos adversos: su uso aumenta la captacin en de yodo en neonatos conllevando problemas
tiroideos
(3).
No debe usarse en quemaduras de consideracin, por la posible absorcin que puede
inducir toxicidad renal
(5).
3.- Clorhexidina:
-Caractersticas: es una bisbiguanida catinica poco soluble por lo que se utiliza como sal, en
forma de gluconato. Es capaz de romper membranas biolgicas alterando el
equilibrio osmtico de la clula, generando la precipitacin de protenas y
cidos nucleicos. Su accin puede durar hasta 6 horas
(7).
No se inhiben en
presencia de materia orgnica.
(6).

-Microorganismos que puede controlar: efectivo en bacterias Gram positivas
y Gram negativas (no sobre sus esporas), algunos hongos, y se ha demostrado que in vitro acta
tambin sobre virus encapsulados como el del herpes simple, el citomegalovirus y el VIH
(7).

-Aplicaciones: se utiliza como antisptico, sobre la piel y mucosas en centros de salud para evitar
infecciones intrahospitalarias asociadas a procedimientos quirrgicos, cateterizacin, utilizacin
de ventiladores mecnicos. Adems puede ser utilizado como antisptico bucal pero no se suele
emplear pues es una sustancia muy amarga, y debe acompaarse por algn edulcorante
(7).

-Efectos Adversos: puede causar dermatitis, hipersensibilidad y anafilaxia. Adems no debe
usarse en cirugas que involucren el odo medio e interno pues es ototxica
(7).

Objetivo:
Analizar la accin de los principales antispticos utilizados en el control de microorganismos
(alcohol, Povidona yodada y Clorhexidina).

Materiales:
- Mechero
- 3 placas de agar sangre
- 3 Esponjas
-Pocillo
- Alcohol 70%
- Povidona Yodada
-Clorhexidina

Mtodo:
1.-Se dividi (marcando con rotulador) en 4 espacios, cada placa de
agar sangre.


2.- Se abri una placa bajo mechero, para evitar la contaminacin de
ella con microorganismos ambientales, y se puso en contacto con el
agar sangre 3 dedos sin tratamiento previo en el lugar destinado para la
muestra control (tiempo 0) y se tap inmediatamente la placa de cultivo.


3.- Se verti alcohol 70% en una esponja y luego se puso en contacto con ella los 3 dedos que
tuvieron contacto con el agar para evaluar el efecto del qumico sobre los microorganismos
presentes en la superficie de los dedos a analizar.

4.- Se esper 5 segundos con la mano bajo el mechero y se procedi a
colocar un dedo en contacto con la porcin del agar rotulada como 5
segundos.

5.- Se repiti el paso 4, a los 30 segundos y
a los 5 minutos, teniendo la precaucin de
que el dedo que se colocara en contacto con
el agar fuera uno distinto al utilizado
previamente, a fin de dilucidar en los
resultados, qu ocurre con la efectividad del
qumico a lo largo del tiempo.

6.- se repiti el paso 2, 3, 4 y 5 cambiando el alcohol 70% por Povidona yodada y posteriormente
por Clorhexidina.




















Placa agar sangre para pruebas con alcohol
70%. Tiempo 0, numerosas colonias
bacterianas. 5 segundos, unas pequeas
colonias. 30 segundos, colonias no
observables por el ngulo de la fotografa. 5
minutos, aumento considerable de colonias.
Placa agar sangre para pruebas con povidona
yodada. Tiempo 0, numerosas colonias
bacterianas. 5 segundos, baja cantidad de
colonias. 30 segundos, solo 2 colonias
apreciables. 5 minutos, pocas colonias con
aparicin de hongo posiblemente ambiental.
Resultados:

Imgenes:























Placa agar sangre para pruebas con
Clorhexidina. Tiempo 0, numerosas colonias
bacterianas. 5 segundos, sin crecimiento
bacteriano. 30 segundos, sin crecimiento
bacteriano. 5 minutos, sin crecimiento
bacteriano.
Tabla 1: Resultado del crecimiento bacteriano
Tiempo Alcohol 70% Povidona Yodada Clorhexidina
Tiempo 0 (inicial) +++ +++ +++
5 segundos ++ ++ -
30 segundos + + -
5 minutos ++ + -
Expresin de resultados: (-) sin crecimiento bacteriano, (+): escasa cantidad de bacterias, (++):
regular cantidad de bacterias, (+++): abundante cantidad de bacterias.



Discusin y Conclusiones
Respecto a los resultados en general: es importante destacar que las imgenes obtenidas no
reflejan fidedignamente la cantidad de colonias observadas directamente pues la condensacin de
agua sobre la tapa de las placas gener brillo el cual puede confundirse con crecimiento
microbiano, sin embargo sirven como referencia de los datos descritos de mejor manera en la
Tabla 1.

Respecto al alcohol 70%:
Los resultados muestran que en los tiempos menores (5 y 30 segundos) es un muy buen
microbicida, con muy pocas colonias y de pequeo tamao, solo visibles si se prestaba mucha
atencin a las placas y en ciertos ngulos (no apreciable en las fotografas anteriores). No as a
los 5 minutos, donde se observa un aumento en las colonias bacterianas. Esto se debe a que el
alcohol es altamente voltil y de secado rpido, por lo que su capacidad microbicida disminuye
en periodos muy largos de tiempo
(5).


Respecto a la Povidona yodada:
En esta placa se pudo observar que a un tiempo de 5 segundos ejerce parcialmente su accin
microbicida, necesito de algo ms de tiempo para poder obtener una escasa carga bacteriana la
que logro mantener con el tiempo, siendo consecuente con la informacin recopilada con
anterioridad. Sin embargo, al tiempo de 5 minutos apareci inesperadamente una colonia de
carcter mictica. Creemos que esta aparicin se pudo deber a una contaminacin ambiental,
probablemente por un leve descuido de en el radio de accin del mechero, ya que si hubiese sido
un microorganismo trasente en nuestros dedos debi aparecer tambin en el tiempo 0 pero este no
fue el caso por lo que se descart esta opcin, por lo dems su crecimiento no fue inhibido por no
entrar nunca en contacto directo con la povidona yodada, adems que esta no posee una accin
muy prolongada, por lo que a ese tiempo su efecto iba en decadencia.

Respecto a la Clorhexidina:
Los resultados muestran que es muy efectiva en la eliminacin de microorganismos y que adems
posee una accin prolongada.
Los datos recogidos con anticipacin indican que por estas propiedades es altamente
recomendada para su uso en intervenciones mdicas pues disminuye el riesgo de infeccin
intrahospitalaria.
(7)
Sin embargo como su amplio espectro de accin incluye en su uso la muerte
de la microbiota normal, no es recomendada para uso domstico frecuente pues la eliminacin de
la microbiota normal favorecera la colonizacin por microorganismos patgenos, perjudicando
la salud de quien utiliza el qumico.

En general podemos decir que los 3 antispticos cumplieron su propsito que es controlar y
disminuir la carga bacteriana. Sin embargo, cada uno de estos agentes qumicos tiene sus ventajas
y desventajas que los hacen especficos para determinados propsitos. Estos pros y contras
pueden ser su disponibilidad en el mercado y el costo econmico, el modo de empleo y
aplicaciones, los efectos adversos que pueden producir en las clulas y tejidos del organismo
humano, su espectro de accin sobre los distintos tipos de vida microbiana y como ciertas
condiciones podran potenciar o reducir su rendimiento. Por estos motivos se hace necesario que
se deban conocer al menos en aspectos generales las principales caractersticas para obtener una
eficiencia y rendimiento mximo a la hora de utilizarlos. Para este propsito anexamos el
siguiente cuadro resumen de los 3 antispticos estudiados.
(7)




Bibliografa
(1) Cabello R. Microbiologa y parasitologa humana, 2007, 3
a
edicin, Editorial mdica
panamericana, pgs. 679-683.
(2) Betancourth M, et al. Microorganismos inusuales en surcos y bolsas periodontales. Colombia
Mdica, 2006, vol. 37 n1.
(3) Arvalo JM, et al. Gua de utilizacin de antispticos, Sociedad espaola de medicina
preventiva, 2001.
(4) Murray P. Microbiologa Mdica, 2009, 6
a
edicin. Editorial Elsevier Espaa, pgs.79-83.
(5) Comit de Redaccin de The Pharmaceutical Letter. Antispticos. The Pharmaceutical
Letter. 15 de Gener de 2003. Lib. V; n2.
(6) Casamada N, Ibez N, Rueda J, Torra JE. Gua prctica de la utilizacin de antispticos en el
cuidado de heridas, Dnde?, cundo? y por qu? Barcelona: Laboratorios SALVAT, 2002.
(7) Maya J, et al. Papel de la clorhexidina en la prevencin de las infecciones asociadas a la
atencin en salud. Infectio, 2011, vol. 15, n 2.