Absorciometria S

Absorciometria no UV-VIS Prof.
Evelton Casartelli DEQUIM ICE UFRRJ 1/2003

1
ABSORCIOMETRIA NO UV-VIS

1) INTRODUO
Histricamente, o termo espectroscopia refere-se ao ramo da cincia no qual estuda-se a luz e
a sua separaose em vrios componentes chamados comprimentos de onda, que constituem o que
denominamos espectro. O conhecimento da composio da luz foi a base para o desenvolvimento da
teoria atomica moderna, alm de permitir que a espectroscopia se tornasse uma ferramenta valiosa
para a anlise quali e quantitativa.
Assim, a espectroscopia desenvolveu-se de tal forma que criaram-se ramos de estudo
envolvendo faixas definidas do espectro tais como raios-X, ultravioleta, infravermelho, microondas e
rdio-frequncia.
Este item de nosso estudo ser voltado para o uso da radiao UV e visvel com fins
analticos.

2) PROPRIEDADES DA RADIAO ELETROMAGNTICA
Em uma definio bastante simples, a radiao eletromagntica um tipo de energia que
transmitida pelo espao a grandes velocidades. Muitas das propriedades da radiao eletromagntica
so convenientemente descritas por meio do modelo ondulatrio clssico que emprega parmetros
como comprimento de onda, frequncia, velocidade e amplitude. Em contraste a outros fenmenos
ondulatrios, como p. ex., o som, a radiao eletromagntica no requer nenhum meio de suporte
para sua transmisso, passando facilmente pelo vcuo.
O modelo ondulatrio falha ao explicar o fenmeno associado com a absoro ou emisso de
energia. Para tratar estas propriedades adequadamente, a radiao eletromagntica deve ser vista
como composta por pacotes discretos de energia que se comportam como partculas denominadas
ftons, com a energia do fton sendo proporcional frequncia da radiao. Estes dois pontos de
vista so complementares.

3) PROPRIEDADES DAS ONDAS
Para muitos propsitos, a radiao eletromagntica convenientemente descrita como um
campo eltrico formado por oscilaes senoidais que se move atravs do espao. A Figura 1 uma
representao bidimensional de um feixe de radiao monocromtica (composto de apenas um
comprimento de onda) e plano polarizado. O termo plano polarizado implica que a oscilao do
campo eltrico encontra-se em um plano simples. O campo eltrico representado como um vetor
cujo tamanho proporcional intensidade do campo. Esta variao na intensidade do campo eltrico
similar ao campo eltrico variante com o tempo prodzido por uma tenso AC senoidal conectada a
dois eletrodos no vcuo. A abscissa neste grfico tambm o tempo em que a radiao passa um
ponto fixado no espao ou a distncia em um tempo fixo. Observe que a direo na qual o campo
oscila perpendicular direo na qual a radiao se propaga.

3.1) Parmetros de Onda
Na Figura 1, a amplitude, A, da onda definida como o comprimento do vetor eltrico no
mximo da onda. O tempo requerido para a passagem entre dois mximos, ou mnimos, chamado
perodo da radiao, p. A frequncia, , o nmero de oscilaes do campo por segundo e igual a
1/p.
Absorciometria no UV-VIS Prof. Evelton Casartelli DEQUIM ICE UFRRJ 1/2003
2

Figura 1 Representao de um feixe de radiao monocromtica de
comprimento e amplitude A. As setas representam o vetor campo eltrico
da radiao.

preciso entender que a frequncia determinada pela fonte e permanece invariante a
despeito do meio de passagem pela radiao. Em contraste, a velocidade de propagao
i
, a taxa
pela qual a frente da onda se move atravs de um meio dependente do meio e da frequncia; o
subscrito i usado para indicar esta dependncia.
Outro parmetro importante o comprimento de onda,
i
, o qual a distncia linear entre
dois mximos sucessivos, ou mnimos, de uma onda. A multiplicao da frequncia em ondas por
segundo pelo comprimento de onda em centmetros, d a velocidade de propagao em centmetros
por segundo:

i
=
i
Equao 1
No vcuo, a velocidade de propagao da radiao torna-se independente do comprimento de
onda e mxima. Esta velocidade, a qual dado o smbolo c, foi determinada como sendo
2,99792x10
10
cm/s. A velocidade da radiao no ar difere muito pouco de c (cerca de 0,03% menos).
Assim, para as trs figuras significativas, a Equao 2 igualmente aplicvel no ar ou vcuo.
c = = 3,00x10
10
cm/s Equao 2

A taxa de propagao da radiao menor que c em um meio contendo matria porque o
campo eletromagntico da radiao interage com os eltrons nos tomos ou molculas do meio
sendo, consequentemente, retardado. Desde que a frequncia radiante seja invariante e fixada pela
fonte, o comprimento de onda da radiao deer diminuir quando passar do vcuo para um meio
material (Equao 1). Este efeito ilustrado na Figura 2 para um feixe de radiao visvel. Observar
que o comprimento de onda se encurta prximo a 200 nm, ou mais do que 30%, assim que a
radiao passa do ar para o vidro; uma troca reversa ocorre quando esta novamente penetra o ar.
O nmero de onda,
_
, definido como o recproco do comprimento de onda em centmetros
(1/), uma outra forma de descrever a radiao eletromagntica. Ordinriamente, a unidade para
_

cm
-1
, o qual o nmero de ondas de uma frequncia particular na distncia de 1 cm.

3

Figura 2 Mudana no comprimento de onda assim que a radiao passa do
ar para um vidro denso e retorna para o ar.

3.2) Potncia Radiante e Intensidade
A potncia, P, da radiao a energia do feixe que atinge a uma dada rea por segundo; a
intensidade I, a potncia por unidade de ngulo slido. Estas quantidades so relacionadas ao
quadrado da amplitude A (Figura 1) Embora no seja estritamente correto de se fazer, potncia e
intensidade so frequentemente usadas sinonimamente.

4) PROPRIEDADES CORPUSCULARES DA RADIAO
Para compreender muitas das interaes entre a radiao e a matria, necessrio se postular
que a radiao eletromagntica feita de ftons (ou quanta). A energia de um fton depende da
frequncia da radiao e dada por E = h
onde h a constante de Planck (6,63x10
-34
J.s). Em termos de comprimento de onda e nmero de
onda,

_
hc
hc
E =
=
Observar que o comprimento de onda, como a frequncia, diretamente proporcional energia.

5) O ESPECTRO ELETROMAGNTICO
O espectro eletromagntico engloba uma enorme faixa de comprimentos de onda e energias.
Por exemplo, um fton de raio-X (10
-10
m) aproximadamente 10000 vzes mais energtico do
que um fton emitido por um fio de tungstnio incandescente (10
-6
m) e 10
11
vzes mais
energtico do que um fton na faixa de rdio-frequncia.
A Figura 3 apresenta o espectro eletromagntico com faixas caractersticas. Uma pequena
frao do espectro constitui o que chamamos de espectro visvel. A Figura 3 apresenta a regio
visvel do espectro. Tais radiaes diversas como os raios gama ou as ondas de rdio, diferem da luz
visvel apenas em matria de frequncia e, consequentemente, de energia.
A Figura 3 indica as regies do espectro que so usadas para propsitos analticos e as
respectivas transies, moleculares ou atmicas responsveis pela absoro ou emisso de radiao
em cada regio.
4

Figura 3 As regies do espectro eletromagntico, relacionadas com o tipo de mudana quntica e a
espectroscopia associada a ela.

Figura 4 (a) Espectro de absoro para o vapor de sdio. (b) Diagrama
parcial de nveis de energia para o sdio, mostrando as transies resultantes da
absoro a 590, 330, e 285 nm.

6) ABSORO DE RADIAO
5
Quando um feixe de luz policromtica (uv ou visvel) passa atravs de um meio contendo
tomos no estado de vapor, apenas poucas frequncias so atenuadas por absoro, e o espectro
consiste de um nmero de vrias linhas de absoro, muito estreitas ( 0,005 nm). A Figura 4a
apesenta um exemplo de espectro de absoro no visvel para tomos de sdio. A ordenada a
absorvncia a qual o parmetro de medida da atenuao do feixe. A Figura 4b um diagrama
parcial para o sdio que mostra as transies responsveis pelas trs linhas de absoro em 4a. As
transies envolvem a excitao do nico eltron da camada externa do tomo de sdio de seu
estado fundamental no orbin\tal 3s para orbitais superiores 3p, 4p e 5p. Estas excitaes ocorrem
pela absoro de ftons cuja energias so exatamente iguais quelas das transies entre os estados
excitados e o fundamental 3s.
O espectro atmico dos metais alcalinos so muito mais simples do que aqueles dos
elementos com eltrons adicionais na camada externa. O espectro atmico dos metais de transio
so particularmente ricos em linhas, com alguns elementos exibindo milhares delas.

7) ABSORO MOLECULAR
As molculas sofrem trs tipos de transies qando excitadas por radiao uv, visvel e
infravermelha. Para radiao uv e visvel, a excitao envolve a promoo de eltron residente em
um orbital atmico ou molecular de baixa energia, para um orbital de alta energia. A energia do
fton dever ser exatamente aquela da transio entre os dois orbitais. A transio de um eltron
entre dois orbitais chamada de transio eletrnica e o processo de absoro chamado de
absoro eletrnica.
Adicionalmente s transies eletrnicas, as molculas exibem dois outros tipos de transies
induzidas por radiao: transies vibracionais e transies rotacionais. Estas transies relacionam-
se com os vrios nveis de energia quantizada associados s ligaes da molcula. A energia total E,
associada com uma molcula dada pelo somatrio das energias de transio eletrnica, vibracional,
rotacional e translacional: E = E
eletronica
+E
vibracional
+E
rotacional
+E
translacional
.
A Figura 5a representa alguns dos processos que ocorrem quando espcies poliatmicas
absorvem radiao infrevermelha, visvel e ultravioleta. As energias E
1
e E
2
dois dos muitos estados
eletronicamente excitados em uma molcula, so mostrados relativamente energia de seu estado
fundamental E
0
. Adicionalmente, as energias relativas de alguns dos muitos estados vibracionais
associados com cada esado eletrnico so indicados pelas linhas horizontais mais claras.
Como as transies vibracionais e rotacionais esto mais ligadas absoro de radiao
infravermelha, no seria interessante investirmos mais tempo neste tema. O que mais nos interessa
agora a absoro de radiao uv e visvel.

7.1) ABSORO DE RADIAO UV E VISVEL
As setas centrais na Figura 5a, sugerem que as molclulas sob considerao absorvem
radiao visvel de cinco comprimentos de onda, promovendo assim, seus eltrons aos cinco nveis
vibracionais do nvel eletrnico excitado E
1
. Os ftons ultravioleta que so mais energticos so
requeridos para produzir a absoro indicada pelas cinco setas direita.
Como a Figura 5a sugere, a absoro molecular nas regies do uv e visvel consiste de
bandas de absoro constitudas de linhas muito prximas. Como uma molcula real possui muito
mais nveis do que o apresentado na figura, de se imaginar que uma banda de absoro tpica
consiste de uma multitude de linhas muito prximas umas das outras. Em uma soluo, as espcies
absorvedoras esto circundadas pelas molculas do solvente, e a natureza da banda da absoro
6
molecular frequentemente torna-se distorcida devido ao espalhamento das energias dos estados
qunticos por colises, produzindo assim, picos de absoro contnuos e suaves.

- Processos de relaxao
O tempo de vida de uma espcie excitada breve devido aos muitos mecanismos pelos quais
uma molcula ou tomo excitado podem doar sua energia excedente e relaxar ao estado
fundamental. Os dois mecanismos mais importantes so a relaxao no-radiativa e a relaxao
fluorescente, apresentadas nas Figuras 5b e 5c. Os tempos de vida destes estados variam de 10
-15
s a
10
-6
s.

Figura 5 Diagrama de nveis de energia mostrando algumas mudanas de energia que
ocorrem durante a absoro, relaxao no radiativa e fluorescncia por espcies
moleculares.

8) TERMOS EMPREGADOS EM ESPECTROSCOPIA DE ABSORO
A Tabela 2 apresenta alguns dos termos mais comuns e os smbolos utilizados em
absorciometria. Esta nomenclatura recomendade pela American Society for Testing Materials
(ASTM) assim como pela American Chemical Society. A terceira coluna da tabela apresenta
smbolos alternativos encontrados na literatura antiga. Como a nomenclatura padro altamente
indicada, de forma a se evitar ambiguidades, recomenda-se utilizar os smbolos padro e se evitar os
mais antigos.

7
8.1) TRANSMITNCIA
A Figura 6 apresenta um feixe de radiao paralelo antes e aps passar atravs de uma
camada de soluo com uma espessura de b cm e uma concentrao c de uma espcie absorvedora.
Como consequncia das interaes entre os ftons e as partculas absorvedoras, a potncia do feixe
atenuado de P
0
a P. A transmitncia T da soluo definida como a frao da radiao incidente
transmitida pela soluo
0
P
P
T = Equao 3
A transmitncia normalmente expressa em percentagem.

Tabela 2 Termos utilizados na absorciometria
Termo e Smbolo Definio
Nome e Smbolo
alternativos
Potncia Radiante P, P
0
Energia da radiao (em ergs)
incidindo em uma rea de 1 cm
2

de um detector por segundo.
Intensidade de radiao
I, I
0

Absorvncia, A
P
P
log
0

Densidade ptica D; extino,
E
Transmitncia, T
0
P
P

Transmisso, T
Caminho ptico da
radiao* , b
---- l, d
Absortividade* , a
bc
A
Coeficiente de extino k
Absortividade Molar** ,
bc
A
Coeficiente de extino molar
*c pode ser expressa em g/L ou em outras unidades de concentrao especificadas; b pode ser expresso
em cm ou em outras unidades de comprimento.
** c expressa em mol/L; b expreso em cm.

Figura 6 Atenuao de um feixe de radiao por uma soluo
absorvente.

8
8.2) ABSORVNCIA
A absdorvncia A de uma soluo definida pela equao
P
P
log T log A
0
= = Equao 4
Observar que, em contraste com a transmitncia, a absorvncia de uma soluo aumenta com
o aumento da atenuao do feixe de radiao. Se um espectrofotmetro calibrado em transmitncia
e absorvncia, a Equao requerer que a escala de absorvncia seja logartmica.

9) A RELAO ENTRE ABSORVNCIA E CONCENTRAO A LEI DE BEER
A relao funcional entre a quantidade medida no mtodo de absoro (A) e a quantidade
procurada (a concentrao do analito), conhecida como a Lei de Beer e pode ser escrita como
abc
P
P
log A
0
= = Equao 5
onde a uma constante de proporcionalidade chamada absortividade e b o caminho ptico da
radiao atravs do meio absorvente. Como a absorvncia no possui unidade, a absortividade
possui unidades que cancelam as unidades de b e c.
Quando a concentrao na Equao 3 expressa em moles por litro e b em centmeros, a
constante de proporcionalidade chamada absortividade molar e dada por um smbolo especial,
(epson). Assim,
A = bc Equao 6
onde possui unidades de Lcm
-1
mol
-1
.

9.1) A MEDIDA EXPERIMENTAL DA TRANSMITNCIA E DA ABSORVNCIA
Transmitncia e absorvncia, como definidas nas equaes 3 e 6, no podem ser medidas no
laboratrio porque a soluo estudada dever ser suportada em algum tipo de recipiente. A interao
entre a radiao entre as paredes do recipiente e a radiao inevitvel, com perdas na potncia
ocorrendo em cada interface como o resultado da reflexo e possivelmente absoro (Figura 7)

Figura 7 Perdas por reflexo e espalhamento.

9
As perdas por reflexo so sustanciais. Por exemplo, pode ser mostrado que cerca de 8,5% de
um feixe de luz amarela perdido por reflexo quando passa verticalmente atravs de um becher de
vidro cheio com gua. Em adio s perdas refletivas, o espalhamento por molculas grandes ou
inomogeneidades no solvente pode causar uma diminuio na potncia do feixe assim que ele passa
pela soluo.
De forma a compensar estes efeitos, a potncia do feixe transmitido atravs da cela contendo
a soluo absorvedora geralmente comparado com aquela do feixe que passa atravs de uma cela
idntica contendo apenas o solvente. Uma absorvncia experimental ento definida pela equao

P
P
log
P
P
log A
0
soluo
solvente
= = Equao 7

Tais absorvncias experimentais obedecem a lei de Beer e so presumivelmente boas aproximaes
das absorvncias verdadeiras. Daqui por diante, o termo absorvncia ir se referir razo definida
pela equao 7, sendo P
0
a potencia da radiao aps a passagem pela cela contendo apenas o
solvente e P sendo a potncia aps a passagem atravs de idntica cela contendo a soluo do
analito.

9.2) APLICAO DA LEI DE BEER A MISTURAS ADITIVIDADE DE ABSORVNCIAS
A lei de Beer aplica-se a solues contendo mais do que uma espcie absorvedora. Supondo
que no ocorra interao entre as vrias espcies, a absorvncia total do sistema multicomponente
ser dada por:
A
total
= A
1
+ A
2
+ ....... + A
n
=
1
bc
1
+
2
bc
2
+ +
n
bc
n
Equao 8

9.3) LIMITAES DA LEI DE BEER
A relao linear que existe entre absorvncia e o caminho ptico a uma dada concentrao do
analito uma generalizao para a qual no se conhecem excees. Contudo, podem ocorrer desvio
da proporcionalidade direta entre absorvncia e concentrao a uma constante b. Alguns destes
desvios so fundamentais e represental limitaes reais para a lei. Outros ocorrem como uma
consequncia da maneira pela qual a absorvncia medida (desvios instrumentais) ou como
resultado de mudanas qumicas associadas a alteraes na concentrao do analito (desvios
qumicos).

9.3.1) LIMITAES REAIS
A lei de Beer bem sucedida na descrio do comportamento absortivo somente de solues
diludas e neste sentido uma lei limitante. A altas concentraes (usualmente >0,01M), as
distncias mdias entre as partculas das espcies absorvedoras so diminudas ao ponto onde cada
partcula afeta a distribuio de cargas de suas vizinhas. Esta interao pode alterar a habilidade das
partculas de absorver um dado comprimento de onda de radiao. Como a extenso da interao
depende da concentrao, a ocorrncia deste fenmeno causa desvios da relao linear entre
absorvncia e concentrao. Um efeito similar algumas vzes encontrado em solues diludas de
abservedores que contm altas concentraes de outras espcies, particularmente eletrlitos. A
proximidade dos ons ao absorvedor altera a absortividade molar deste ltimo por interaes
eletrostticas, as quais levam a partida da lei de Beer.
10
Enquanto o efeito de interaes moleculares no muito significante a concentraes abaixo
de 0,01M, algumas excees so encontradas entre certos ons ou molculas orgnicas grandes. Por
exemplo, a absortividade molar a 436 nm para o ction do azul de metileno aumenta por 88% assim
que a concentrao do corante aumenta de 1x10
-5
para 1x10
-2
M; mesmo abaixo de 1x10
-6
M, a
aderncia estrita lei de Beer, no observada.
Desvios tambm ocorrem devido dependncia da absortividade molar em relao ao ndice
de refrao da soluo. Assim, se a mudana de concentrao causa alteraes significativas no
ndice de refrao de uma soluo, desvios da lei de Beer so observados. Em geral, este efeito
pequeno e raramente significante a concentraes abaixo de 0,01M.

9.3.2) DESVIOS QUMICOS
Desvios aparentes da lei de Beer aparecem quando o analito sofre associaes, dissociaes,
ou reaes com o solvente para dar produtos com caractersticas absorventes que diferem daquelas
do analito original. Como mostrado no exemplo abaixo, a extenso de tais desvios pode ser prevista
das absortividades molares das espcies absorvedoras e das constantes de equilbrio para as reaes
envolvidas.

Exemplo:
Uma srie de solues contendo vrias concentraes de um indicador cido Hin (K
a
=1,42x10
-5
) foi
preparada em HCl 0,1M e NaOH 0,1M. Em ambos os meios, uma relao linear entre a absorvncia
e a concentrao foi observada a 430 e 570 nm. Da magniture da constante de dissociao cida,
aparente que , para todos os propsitos prticos, o indicador est inteiramente na forma no
dissociada (HIn) na soluo de HCl e compleamente dissociado como In
-
em NaOH. As
absortividades molares nos dois comprimentos de onda so:

430
570
HIn (em HCl) 6,30x10
2
7,12x10
3
In
-
(em NaOH) 2,06x10
4
9,60x10
2

Derive dados de absorvncia (cela de 1,00 cm) nos dois comprimentos de onda para solues no
tamponadas com as concentraes do indicador na faixa de 2x10
-5
a 16x10
-5
M. Grafique os dados.
RESOLUO:
Vamos calcular a concentrao de HIn e In
-
na soluo no tamponada de 2x10
-5
do indicador. Da
equao para a reao de dissociao, aparente que:
[H
+
]=[In
-
]
Assim,
[In
-
] + [HIn] = 2,00x10
-5
M

A substituio destas relaes na expresso para o Ka do indicador produz:
5
5
2
10 x 42 , 1
] In [ 10 x 00 , 2
] In [

Rearranjando temos a expresso quadrtica:
[In
-
]
2
+ (1,42x10
-5
)[In
-
] - 2,84x10
-10
= 0
A qual resolvida d os resultados seguintes:
11
[In
-
] = 1,12x10
-5

[HIn] = 2,00x10
-5
- 1,12x10
-5
= 0,88x10
-5

A absorvncia nos dois comprimentos de onda so encontradas substituindo as concentraes encontradas
na Equao 8:
A430 = (6,30x10
2
x 1,00 x 0,88x10
-5
) + (2,06x10
4
x 1,00 x 1,12x10
-5
) A430 = 0,236
A570 = (7,12x10
3
x 1,00 x 0,88 x10
-5
) + (9,6x10
2
x 1,00 x 1,12x10
-5
) A570 = 0,073

Os dados da tabela abaixo foram derivados da mesma forma e encontram-se graficados na Figura 8.

CHin x10
-5
M [HIn] x10
-5
[In
-
] x10
-5
A430 A570
2,00 0,88 1,12 0,236 0,073
4,00

2,22 1,78 0,381 0,175
8,00 5,27 2,73 0,596 0,401
12,00 8,52 3,48 0,771 0,640
16,00 11,9 4,11 0,922 0,887

Figura 8 Desvios da lei de Beer para
solues no tamponadas do indicador Hin.
Para dados, ver o exemplo dado no texto.

9.3.3) DESVIOS INSTRUMENTAIS COM RADIAO POLICROMTICA
A lei de Beer tambm uma lei limitante no senso que ela aplicada apenas quando a
absorvncia medida com radiao monocromtica. Fontes monocromticas verdadeiras, tais como
lasers, no so prticas para instrumentos de rotina analtica. Ao contrrio, uma fonte policromtica
contnua empregada em conjunto com uma rede de difrao ou filtros que isolam uma banda mais
ou menos simtrica de comprimentos de onda em torno do desejado.A seguinte derivao ilustra
como tal fonte pode levar a desvios da lei de Beer.
Considere um feixe feito de apenas dois comprimentos de onda,
1
e
2
, e assuma que a lei de
Beer se aplica estritamente a eles. Com esta assuno, podemos escrever para a radiao
1
:
bc
P
P
log A
1
1
0
1
1
= =

bc
1
0
1
1
10
P
P
=
bc 0
1 1
1
10 P P

=

12
Similarmente para o segundo comprimento de onda teremos:

bc
2
0
2
2
10
P
P
=
bc 0
2 2
2
10 P P

=

Quando a medida de absorvncia feita com radiao composta de ambos os comprimentos
de onda, a potncia do feixe emergente da soluo dada pela soma de P
1
+ P
2
, e aquele emergente
do solvente dado por P
1
0
+ P
2
0
. Assim, a medida da absorvncia
2 1
0
2
0
1
m
P P
P P
log A
+
+
=
o qual pode ser reescrito como:

bc 0
2
bc 0
1
0
2
0
1
m
2 1
10 P 10 P
P P
log A

+
+
=
) 10 P 10 P log( ) P P log( A
bc 0
2
bc 0
1
0
2
0
1 m
2 1

+ + =

Agora, quando
1
=
2
, esa equao simplifica-se a: A
m
=
1
bc
e a lei de Beer seguida. Como mostrado na Figura 9, a relao entre A
m
e concentrao no mais
linear quando as molaridades absortivas diferem. Ainda mais, desvios da linearidade tornam-se
maiores quando a diferena entre
1
e
2
aumenta. Quando este tratamento expandido para incluir
comprimentos de onda adicionais, o efeito permanece o mesmo.
um fato experimental que desvios da lei de Beer resultantes do uso de feixes
policromticos no so apreciveis, desde que a radiao usada no esteja em uma regio espectral
na qual o absorvedor exiba grandes mudanas na absorvncia como uma funo do comprimento de
onda. Esta observao ilustrada na Figura 10.

Figura 9 Desvios da lei de Beer com luz policromtica. O
absorvedor tem a absortividade molar indicada nos dois
comprimentos de onda
1
e
2
.

13

Figura 10 O efeito da radiao
policromtica sobre a lei de Beer. A banda A
mostra pequeno desvio porque no muda
muito at o fim da banda. A banda B mostra
um desvio marcante porque sofre mudanas
significantes nesta regio.

9.3.4) DESVIOS INSTRUMENTAIS NA PESENA DE RADIAO ESPRIA
A radiao empregada para medidas de absorvncia usualmente contaminada com
pequenas quantidades da radiao espria devido a imperfeies instrumentais. A radiao espria
o esultado de fenmenos de espalhamento pelas superfcies de prismas, lentes, filtros e janelas. Ela
frequentemente difere muito no comprimento de onda da radiao principal e, adicionalmente, pode
no ter passado atravs da amostra ou solvente.
Quando medidas so feitas na presena de radiao espria, a absorvncia observada dada
por
S
S
0
P P
P P
log ' A
+
+
=
onde P
S
a potncia da radiao espria. A Figura 11 mostra um grfico de A versus concentrao
para vrios nveis de P
S
relativo a P
0
.
Observe que os desvios instrumentais ilustrados nas Figuras 10 e 11, resultam em
absorvncias que so menores do que as tericas. Pode ser mostrado que os desvios instrumentias
sempre levam a erros negativos de absorvncia (ver E.J. Meeham, em Treatise in Analytical
Chemistry, wnd ed., P.J. Elving, E.J.Meeham, and I.M. Kolthoff, Eds., Part I, Vol. 7, pp 71-79. New
York: Interscience, 1981).

Figura 11 Desvios aparentes da lei de Beer causados por
vrias quantidades de radiao espria.

14

10) ERRO FOTOMTRICO
Mesmo para um sistema que no mostre desvios quanto lei de Beer, o intervalo de concentrao
onde as anlises fotomtricas so teis limita-se tanto a valores altos como a baixos. Em
concentraes elevadas do material absorvente, a quantidade de luz que a atravessa to pouca que a
sensibilidade do fotmetro torna-se inadequada. Em concentraes baixas, por outro lado, o erro
inerente leitura do galvanmetro ou a outro dispositivo indicativo torna-se grande em comparao
com a quantidade que est sendo medida. Em vrios instrumentos fotoeltricos a deflexo do
galvanmetro ou a posio de equilbrio de um potencimetro diretamente proporcional potncia
da radiao que incide na fotocela. Isso significa que a menor variao detectvel na potncia, P,
ser constante, independentemente do valor absoluto da potncia. Para maior preciso na medida da
absorvncia A, contudo, o incremento A, que corresponde variao de potncia P, deve ser uma
frao to pequena quanto possvel da absorvncia real A; em outras palavras, a quantidade A/ A
deve ser um mnimo. Para determinar a transmitncia para a qual A/A ser um mnimo, necessrio
diferenciar a lei de Beer duas vezes e igualar a segunda diferencial a zero. conveniente reescrever
a lei na forma :
A = log P
0
log P
Ento
dP
P
1
) e (log 0 dA =
donde
dP
10 P
1
A
4343 , 0
dP
P
1
A
4343 , 0
dA
A
1
A
0

= =
substituindo as diferenciais por incrementos infinitos,
A
0 10 A
1
P
P 4343 , 0
A
A

Diferenciando novamente (lembrar que P uma constante),

( )
2
A A
0 A
10
A
10 ln 10
P
P 4343 , 0
dA
A / A d
Equao

A condio para o valor mnimo de A/ A que o membro da direita da Equao seja zero. Isso
significa que o fator dentro do parnteses deve ser zero, ou

2
A A
A
10
A
10 ln 10
= , donde 4343 , 0
10 ln
1
A = =
15

Isso significa que o melhor valor para a absorvncia 0,4343, o que corresponde a uma
transmitncia T = 36,8%. O erro relativo em uma anlise com um erro de 1% na medida fotomtrica,
por variao da transmitncia ou absorvncia, mostrado graficamente na Figura 12. A situao
poderia talvez ser visualizada mais facilmente, especialmente para aqueles que seguem o clculo
com dificuldade, com o auxlio da Figura 13 , onde a lei de Beer colocada em um grfico na forma
P/P
o
= 10
-abc
. Um valor arbitrrio de T = 1% colocado em um grfico em trs posies, a 10%,
37% e 90% de T. A incerteza correspondente, em porcentagem de concentrao, maior em valor
absoluto no ponto 10% de T, o que resulta em uma baixa preciso. No outro extremo, 90% de T, a
incerteza muito menor, mas representa uma grande frao da concentrao total, o que novamente
fornece baixa preciso. evidente que deve existir um ponto intermedirio em que as duas
tendncias se igualam e o erro mnimo. Esse ponto corresponde aos 37%.

Figura 12 Erro relativo com funo da Figura 13 Lei de Beer, colocada como
Transmitncia transmitncia em funo da concentrao.

aparente na Figura 12 que, apesar do erro ser mnimo a 37% de T, isso no ser muito
importante num intervalo de transmitncia entre 15 e 65% (absorvncia 0,8 a 0,2).
O grfico de calibrao de uma anlise fotomtrica pode ser representado tanto pela curva
exponencial da Figura 13 como pela linha reta de um grfico de calibrao. Esta tem a vantagem de
mostrar a regio onde se segue a lei de Beer, mas no fornece nenhuma indicao da preciso
relativa nos vrios nveis de absorvncia. A Figura 14 mostra a curva obtida relacionando-se a
porcentagem de transmitncia em funo do logaritmo da concentrao. Se se abrange um intervalo
suficientemente grande de concentraes, sempre resulta uma curva em S, algumas vezes chamada
curva de Ringbom. Se o sistema segue a lei de Beer, o ponto de inflexo ocorre a uma transmitncia
de 37% ; se no, a inflexo ocorre em outro valor, mas a forma geral da curva a mesma. A curva
geralmente apresenta uma considervel regio em que praticamente reta. A extenso dessa parte
reta indica diretamente o intervalo timo de concentraes para uma determinada anlise
fotomtrica.

16

Figura 14 Curvas padro para o permanganato.
As curvas contnuas foram determinadas nos
seguintes comprimentos de onda: 1) 526 nm; 2)
480 nm; 3) 580 nm. A curva pontilhada 4 contm
valores obtidos com um fotmetro de filtro em 430
nm.

Figura 15 Espectro de absoro do
permanganato de potssio em soluo aquosa.

Alm disso, a preciso da anlise pode ser calculada pela inclinao da curva, pois, quanto
mais ngreme for a curva, mais sensvel ser a determinao. Por um procedimento diferencial,
pode-se mostrar que, se o erro fotomtrico absoluto for de 1 %, o erro relativo percentual na anlise
ser dado por 230/S, onde S a inclinao considerada como a variao de transmitncia em
porcentagem (lida na escala de ordenada), correspondendo a uma variao de dez vezes na
concentrao. O erro relativo na determinao do permanganato pela curva 1 da Figura 14
mostrado por uma aplicao dessa relao como sendo aproximadamente 2,8% para 1% de erro
fotomtrico absoluto. Se o erro na leitura do fotmetro (reprodutibilidade) for 0,2% (um valor
razovel com os instrumentos modernos), ento o erro relativo da anlise ser ao redor de 0,6%.
Uma anlise semelhante por meio da curva 4 seria bem menos precisa. A preciso com as curvas 2
ou 3 aproximadamente a mesma que com a curva 1, mas o intervalo de concentraes utilizveis
deslocado para valores maiores. Uma comparao detalhada das Figuras 14 e 15 mostrar os
motivos disso.
17
O intervalo de concentraes convenientes para anlises com preciso adequada, como
indicado pela poro reta do grfico de T em funo de log c, pode ser muito pequeno para aplicao
a substncias desconhecidas. H vrios mtodos pelos quais esse intervalo til pode ser estendido na
direo de maiores concentraes. O mais bvio simplesmente a diluio quantitativa da soluo
para lev-la aos limites exigidos. Essa aproximao, se levada muito longe, pode falhar em suas
prprias finalidades, pois os erros volumtricos acumulados parcialmente destroem a vantagem da
preciso fotomtrica. De modo semelhante, uma soluo mais diluda pode ser preparada tomando
uma pequena amostra, limitando-se assim a preciso sensibilidade da balana disponvel. Esses
mtodos geralmente so suficientes para permitir o uso de mtodos absorciomtricos, sensveis a
amostras ricas no analito.
Referncias Figura 14 mostram que as anlises tambm podem ser feitas com concentraes
maiores, escolhendo-se outros comprimentos de onda. O intervalo til para o permanganato cerca
de 6 a 60 ppm de mangans a 580 nm, comparado com 2 a 20 ppm a 526 nm.

11) INSTRUMENTAL
11.1) COMPONENTES DE UM INSTRUMENTO
Muitos instrumentos espectroscpicos so feitos basicamente de cinco componetes:
1) Uma fonte estvel de energia radiante;
2) Um seletor de comprimentos de onda que permita o isolamento de uma regio restrita de
comprimento de onda;
3) Um ou mais compartimentos para a amostra e/ou referncia;
4) Um detector, o qual converta a energia radiante a um sinal mensurvel (usualmente eltrico);
5) Um processador de sinal e leitura.

O diagrama da Figura 16 apresenta a disposio destes componentes em uma configurao
tpica de um espectrmetro de UV-VIS.
Vale a pena observar que, muito embora nas medidas de absorvncia o feixe da fonte passe
atravs da amostra aps deixar o seletor de comprimentos de onda, em alguns instrumentos as
posies da amostra e do seletor so invertidas.

11.1.1) FONTES
Os equipamentos destinados absorciometria no UV-VIS, necessitam de uma fonte de
radiao externa que seja constante e intensa o suficiente que torne a deteco e a medida, fceis.
Tpicamente, a potencia radiante de uma fonte varia exponencialmente com a tenso de sua fonte
eltrica. Por esta razo, so requeridos, frequentemente, reguladores de tenso para alimentar as
fontes de potncia destes equipamentos.
O problema da estabilidade da fonte algumas vzes resolvido atravs da diviso do feixe da
fonte em um feixe de referncia, o qual passa atravs do solvente, e de um feixe de amostra, o qual
passa atravs da soluo do analito. O detector ento iluminado alternadamente como os dois
feixes, ou os feixes so monitorados por dois detectores simultneamente (detectores casados). A
razo das intensidades dos dois feixes fornece um parmetro analtico que grandemente
independente de flutuaes da fonte. Sero descritas brevemente, a seguir, as fontes contnuas mais
comuns de ultravioleta e visvel.

18

Figura 16 Componentes dos instrumentos de feixe simples (a) e feixe duplo (b).

Lmpadas de hidrognio e deutrio
Um espectro verdadeiramente contnuo na regio do UV produzido pela excitao eltrica
do deutrio ou hidrognio a baixa presso. O mecanismo pelo qual um contnuo produzido envolve
a formao de uma molcula excitada (D
2
*
ou H
2
*
) pela absoro de energia eltrica. Estas espcies
se dissociam para produzir dois tomos de hidrognio ou deutrio mais um fton ultravioleta. As
reaes para o hidrognio so:
H
2
+ E
e
H
2
*
H
+ H
+ h
Onde E
e
a energia eltrica absorvida pela molcula. A energia do processo total

+ + = = h E E E E
' ' ' *
2
H H H
e

onde
*
2
H
E a energia quntica fixada de H
2
*
e
'
H
E e
' '
H
E so as energia cinticas do sdois tomos
de hidrognio. A soma destas duas ltimas energias pode variar de zero at H
2
*
. Assim a energia e a
frequncia dos ftons pode tambm variar cdentro desta faixa de energia. Assim, quando as suas
energias cinticas so pequenas, h grande, e quanto as duas energias so grandes h pequeno. A
consequncia um espectro verdadeiramente contnuo de cerca de 160 nm at o incio da regio do
visvel.
As lmpadas de deutrio e hidrognio fornecem um espectro contnuo na regial de 160 a 375
nm, como mostrado na Figura 17.

Figura 17 Sada de radiao de uma lmpada de deutrio.

19
A intensidade de uma lmpada de deutrio maior que aquela da lmpada de hidrognio, o
que leva a um maior uso da primeira. Em comprimentos de onda mais longos (>360 nm), as
lmpadas geral linhas de emisso, as quais so superimpostas em um contnuo. Em virtude do
grande rudo observado, no so boas para fins analticos. Contudo podem ser usadas para calibrao
de instrumentos.

Lmpadas de filamento de tungstnio
A fonte mais comum de radiao visvel e infravermelho prximo a lmpada de filamento
de tungstnio. A distribuio de energia prxima a de um corpo negro e assim dependente da
temperatura. A Figura 18 apresenta o espectro caracterstico desta fonte na temperatura de 3000 K.
Em muitos equipamentos a temperatura de operao de 2900 K, sendo que a maior parte da energia
emitida na regio do infravermelho. Uma lmpada de filamento de tugstnio usual na regio de
320 a 2500 nm. O limite mais baixo imposto pela absoro do vidro da lmpada.
Lmpadas de halognio/tungstnio contm uma quantidade pequena de iodo dentro do
envelope de quartzo que forma o corpo da lmpada. O quartzo permite ao filamento ser operado a
uma temperatura de cerca de 3500
o
C, a qual leva a intensidades mais altas e aumenta a faixa da
lmpada no UV (240-2500 nm). O tempo de vida desta lmpada mais que o dobro daquele de uma
lmpada comum de tungstnio, pois a vida desta ltima limitada pela sublimao do tungstnio do
filamento. Na presena de iodo, o tungstnio sublimado reage para produzir molculas de WI
2

gasoso, o qual ento se difunde de volta para o filamento quente, onde se decompe e redeposita
como tomos de tungstnio. Estas lmpadas tm encontrado maior uso em instrumentos modernos
em virtude de sua faixa extendida de comprimento de onda, maior intensidade e vida mais longa.

Figura 18 Espectro produzido por vrias
fontes, dentre elas a de tungstnio.

11.1.2) SELETORES DE COMPRIMENTOS DE ONDA
Os equipamentos espectroscpicos para medidas de absorvncia so equipados com um
dispositivo que restringe a radiao sendo medida a uma banda estreita que absorvida pelo analito.
Tais dispositivos so essenciais na melhoria da seletividade e da sensibilidade de um instrumento, j
que larguras de banda estreitas aumentam a aderncia lei de Beer.
Deve-se deixar bem claro que nenhum seletor capaz de produzir radiao de um simples
comprimento de onda. Ao contrrio, a sada de tal dispositivo uma faixa de comprimentos de onda
20
contguos chamada de banda; estes comprimentos de onda so distribudos mais ou menos
simtricamente em torno do comprimento de onda nominal central. Como mostrado na Figura 19
largura efetiva de banda ou largura de banda de um seletor definida como a largura da banda em
unidades de comprimento de onda meia altura do pico. As larguras de banda variam muito de um
equipamento para outro. Por exemplo, um espectrmetro de boa qualidade na regio do visvel, pode
ter uma banda efetiva de alguns dcimos de nanmetro, ao passo que um filtro na mesma regio
pode possuir uma largura de banda de 200 nm ou mais. Como mostrado na Tabela 3, dois tipos
gerais de seletores de comprimento de onda, filtros e monocromadores, so usados para produzir
bandas estreitas de radiao. Os monocromadores tm a vantagem de que o comprimento de onda de
sua sada pode variar contnuamente sobre umafaixa espectral considervel.

Tabela 3 Seletores de comprimentos de onda para espectroscopia.
TIPO
FAIXA DE
OMPRIMENTO DE
ONDA
OBSERVAO
CONTNUAMENTE VARIVEL
REDE 100 40000
3000 linhas/mm no
UV
PRISMA 120 - 30000

DESCONTNUA
FILTRO DE INTERFERNCIA 200 - 14000

FILTRO DE
ABSORO
380 750

Figura 19 Sada de uma fenda de sada quando o monocromador
faz a varredura de
1
- para
1
+.

21
11.1.2.1) FILTROS
Os filtros operam pela absoro total de uma banda restrita de radiao de uma fonte
contnua. Como mostrado na Figura 20, um filtro geralmente caracterizado pelo seu comprimento
de onda nominal, sua transmitncia percentual mxima e sua largura efetiva de banda.

Figura 20 Larguras de bandas de dois tipos de filtros.

11.1.2.1.1) Filtros de Interferncia
Os filtros de interferncia encontram uso com radiao UV e visvel assim como com
comprimentos de onda at 14m na regio do infravermelho. Como o nome implica, um filtro de
interferncia funciona na base de interferncia ptica para fornecer uma banda relativamente estreita
de radiao.
Consiste de uma camada muito fina de um material transparente (frequentemente CaF
2
ou
MgF
2
) recoberto de ambos os lados com um filme metlico que fino o suficiente para transmitir
cerca de 50% da radiao incidente, refletindo o restante. Este arranjo colocado entre duas placas
de vidro que o protegem contra a atmosfera. Quando a radiao atinge a arranjo central a um ngulo
de 90 graus, aproximadamente metade transmitida pela primeira camada metlica e a outra
refletida. A radiao transmitida sofre uma partio similar quando atinge a segunda camada
metlica. Se a poro refletida da segunda camada do prprio comprimento de onda, ela
parcialmente refletida da poro interna da primeira camada em fase com a luz penetrante de mesmo
comprimento de onda. O resultado uma interferncia construtiva da radiao deste comprimento de
onda e remoo destrutiva da maioria dos outros comprimentos de onda. fcilmente mostrado que
o comprimento de onda nominal para um filtro de interferencia de
mx
dado pela equao:

mx
= 2t/n

onde t a espessura da camada central de fluoreto, seu ndice de refrao e n um nmero
inteiro chamado ordem de interferncia. As camadas de vidro do filtro so selecionadas de forma a
absorver um dos comprimentos de onda transmitidos pela camada central, restringindo assim, a
transmisso do filtro a uma simples ordem. A Figura 20 ilustra a performance caracterstica de um
22
filtro de interferncia. Muitos filtros deste tipo possuem larguras de banda melhores que 1,5% do
comprimento de onda nominal, embora esta figura seja diminuda para 0,15% em alguns filtros de
banda estreita; este ltimo possui uma transmitncia mxima de 10%.

11.1.2.1.2) Filtros de Absoro
Filtros de absoro, os quais so geralmente menos caros e mais robustos que os filtros de
interferncia, so limitados aplicao na regio do visvel. Este filtro consiste em uma placa de
vidro colorida que remove parte da radiao incidente por absoro. Filtros de absoro possuem
larguras efetivas de banda na faixa de 30 a 250 nm. Filtros que fornecem as bandas mais estreitas
tambm absorvem uma significante frao da radiao desejada tendo uma transmitncia de 1% ou
ou menor em seus mximos. A Figura 20 apresenta uma comparao entre as performances de um
filtro de absoro e de um de interferncia.
Filtros de vidro com mximo de transmitncia atravs do visvel so disponveis
comercialmente na forma de fontes prontas para uso. Enquanto suas performances caractersticas so
distintamente inferiores s daqueles de interferncia, seu custo muito menor tendo a vantagem de
serem perfeitamente adequados em muitas aplicaes rotineiras.

11.1.2.2) MONOCROMADORES
Os monocromadores podem ser de dois tipos: de rede de difrao ou de prisma. A Figura 21
mostra um diagrama de um monocromador de rede tpico. A radiao entra no monocromador
atravs de uma abartura retangular estreita chamada fenda de entrada. Para finalidade ilustrativa, a
figura apresenta um feixe de radiao consistindo de apenas dois comprimentos de onda,
1
e
2
,
sendo que o primeiro mais longo que o segundo (ou seja o primeiro est mais para o vermelho e o
segundo mais para o azul). O caminho da radiao mais longa aps ser refletida pela rede mostrado
por linhas tracejadas; as linhas slidas mostram o caminho do comprimento de onda mais curto.
Observem que a radiao
2
refletida pela rede em um ngulo mais estreito do que
1
. Assim, a
disperso angular da radiao ocorre. A disperso angular resulta da difrao, a qual ocorre na
superfcie refletora. Os dois comprimentos de onda so focalizados por outro espelho concavo no
plano focal do monocromador, onde eles aparecem como duas imagens da fenda de entrada, um para
1
e outro para
2
. Rotacionando-se a rede, ambos
1
ou
2
podem ser focalizados na fenda de sada
do monocromador. Se colocarmos um detector aps a fenda de sada, e se a rede rotacionada,
poderemos investigar todo o espectro produzido pela rede, no que chamamos de varredura
espectral. A largura de banda efetiva do monocromador, depende do tamanho e da qualidade do
elemento dispersor, das larguras das fendas de da distncia focal do monocromador. Um
monocromador de alta qualidade exibir uma largura de banda de alguns dcimos de nm, ou menos,
no UV e visvel. Uma largura de banda satisfatria para muitas aplicaes quantitativas encontra-se
na faixa de 1 a 20 nm.
Muitos monocromadores so equipados com fendas ajustveis para permitir um controle
sobre a largura de banda. Uma fenda estreita diminui a largura da banda mas diminui tambm a
potncia do feixe emergente. Assim, uma largura de banda mnima que seja prtica deve ser limitada
pela sensibilidade do detector. Para anlise qualitativa, fendas estreitas e larguras de banda mnimas
so requeridas se um especro consiste de picos estreitos. Para trabalho quantitativo, ao contrrio,
fendas largas permitem a operao do sistema do detector a uma amplificao baixa, a qual diminui
fornece maior reprodutibilidade de resposta.

23

Figura 21 Dois tipos diferentes de monocromadores (a)
rede de difrao em uma montagem tipo Czerny-Turner; (b)
monocromador de prisma de Bunsen. Para os dois,
1
>
2
.

11.1.2.3) DETECTORES E TRANSDUTORES
Um detector um dispositivo que indica a existncia de algum fenmeno fsico. Por
exemplo, um filme fotogrfico, o nvel de uma balana, o nvel do mercrio em um termmetro, o
olho humano, etc.
Um transdutor um tipo especial de detector que converte sinais, tais como intensidade
luminosa, pH, massa e temperatura em sinais eltricos que podem ser subsequentemente
amplificados, manipulados, e finalmente convertidos em nmetros proporcionais magnitude do
sinal original.
Um transdutor ideal de radiao eletromagntica responde rapidamente a baixos nveis de
energia radiante sobre uma larga faixa de comprimentos de onda. Em adio, produz um sinal
eltrico que facilmente amplificado, produzindo um nvel de rudo relativamente baixo.
Geralmente a sada dos instrumentos analticos flutua de forma aleatria como consequncia de uma
srie de variveis que fogem ao controle do analista. Estas flutuaes definem o limite de
sensibilidade de um instrumento e so chamadas de rudo. O termo rudo veio da terminologia
utilizada em rdio-transmisso, onde a presena de flutuaes no sinal de udio reconhecida pelo
ouvido como um chiado, tambm conhecido simplesmente como esttica. As causas mais comuns
para a produo de rudo incluem, vibrao, oscilao na linha de 60Hz, variaes de temperatura, e
variaes de frequncia ou tenso na fonte de potncia.
Muitos detectores exibem uma pequena resposta constante, mesmo quando nenhuma
radiao atinge sua superfcie, conhecida como corrente escura. Podemos defini-la mais
simplesmente como a corrente produzida por um detector fotoeltrico na ausncia de luz.
24
Instrumentos com detectores que possuem uma resposta com corrente escura alta, so equipados
com um circuito de compensao que permite a subtrao do sinal proporcional corrente escura,
reduzindo sua leitura a zero.
Como mostrado na Tabela 4, so dois os tipos de transdutores os mais usados: os que
respondem a ftons e os que respondem ao calor. Todos os detectores de ftons, so baseados na
interao da radiao com uma superfcie reativa para produzir eltrons (fotoemisso) ou para
promover os eltrons a estados de energia nos quais eles possam conduzir eletricidade
(fotoconduo). Apenas a radiao ultravioleta, visvel ou infravermelha prxima tem suficiente
energia para causar estes processos; assim os detectores de ftons so limitados a comprimentos de
onda mais curtos do que cerca de 2 m.
Os detectores fotnicos podem ser divididos em quatro grandes grupos: 1) fototubos; 2) tubos
fotomultiplicadores; 3) fotodiodos de silcio; 4) clulas fotovoltaicas.

11.1.2.3.1) Fototubos
Como apresentado na Figura 22 um fototubo consiste de um catodo semicilndrico e um fio
como anodo selados vcuo, dentro de um envelope transparente. A superfcie cncava do catodo
suporta uma camada de material emissivo, tal como um metal alcalino ou seu xido, que tende a
emitir eltrons quando sendo irradiado. Quando um potencial aplicado atravs dos eletrodos, os
fotoeltrons emitidos fluem para o anodo, produzindo uma corrente que facilmente amplificada e
direcionada para um mostrador ou simplesmente gravada.
O nmero de eltrons ejetados da superfcie fotoemissiva diretamente proporcional
potncia radiante do feixe que atinje aquela superfcie. Com um potencial aplicado de cerca de 90V,
todos esses eltrons atingem o anodo para produzir uma corrente que tambm proporcional
potncia radiante. Os fototubos frequentemente produzem uma pequena corrente escura na ausncia
de radiao, que resulta da emisso eletrnica trmicamente induzida.

Figura 22 Diagrama de um fototubo e o circuito acessrio.
A fotocorrente induzida pela radiao causa uma queda de
potencial no resistor, o qual ento amplificado para
direcionar um medidor ou registrador.

25
11.1.2.3.2) Tubos fotomultiplicadores
O tubo fotomultiplicador (PMT), Figura 23, similar em construo ao fototubo, porm,
muito mais sensvel. A superfcie do catodo similar em composio do fototubo, no qual eltrons
so emitidos quando esta submetida a exposio de radiao. Os eltrons emitidos so acelerados
para um dinodo, mantido a um potencial 90 V mais positivo do que o catodo. Em atingindo a
superfcie do dinodo, cada fotoeltron acelerado produz muitos eltrons adicionais, os quais so, por
sua vez, acelerados para um segundo dinodo, 90 V mais positivo que o anterior. Aqui, nova
amplificao de eltrons ocorre. Este processo repetido em cada um dos dinodos remanescentes at
que no final (9 dinodos) uma cascata de 10
6
a 10
7
eltrons so produzidos para cada fton. Esta
cascata finalmente coletada no anodo. A corrente resultante ento amplificada eletronicamente e
medida.

Figura 23 Tubo fotomultiplicador. (a) seco
transversal; (b) circuito eltrico.

11.1.2.3.3) Fotodiodos de silcio
O silcio cristalino um semicondutor que um material cuja condutividade eltrica
menor do que a de um metal mas, maior que a de um isolador. O silcio um elemento do Grupo IV
da tabela peridica, possuindo quatro eltrons de valncia. Em um cristal de silcio, cada um desses
eltrons combinado com os eltrons de quatro outros tomos de silcio para formar quatro ligaes
covalentes. Na temperatura ambiente, uma suficiente agitao trmica ocorre nestra estrutura para
liberar um eltron ocasional de seu estado de ligao, deixando-o livre pra se mover pelo cristal. A
excitao trmica de um eltron deixa atras de si uma regio positivamente carregada chamada de
vacncia, a qual, como o eltron, tambm mvel. O mecanismo do movimento da vacncia do
tipo passo-a-passo, com um eltron de um tomo vizinho pulando para a regio deficiente e assim
26
criando uma vacncia positiva. A conduo em um semicondutor envolve o movimento de eltrons e
vacncias em direes opostas.
A condutividade do silcio pode ser aumentada atravs de um processo chamado dopagem.
Neste processo, uma quantidade controlada ( 1 ppm) de um elemento do Grupo V ou III
distribuda homogneamente pelo cristal de silcio. Por exemplo, quando um cristal dopado com
um elemento do Grupo V, tal como arsenio, quatro de cinco eltrons de valncia do dopante formam
ligaes covalentes com quatro tomos de sicio deixando um eltron livre para contribuir para a
condutividade do cristal. De forma contrria, quando o silcio dopado com um elemento do Grupo
III, tal como o glio, o qual tem trs eltrons de valncia, um excesso de vacncias se desenvolvem,
as quais tambm aumentam a condutividade. Um semicondutor ocntendo eltros no ligados (cargas
negativas) chamado semicondutor tipo-n e um que tenha excesso de vacncias (cargas positivas)
chamado semicondutor tipo-p.

11.1.2.3.4) Clulas fotovoltaicas
Uma clula fotovoltaica (ou fotoclula), o transdutor de radiao mais simples que existe.
Consiste de um eletrodo plano de cobre ou ferro sobre o qual depositada uma camada de material
semicondutor, como o selnio ou xido de cobre (I). A camada externa do semicondutor coberta
com um filme transmparente de ouro, prata ou chumbo, o qual serve como segundo eletrodo
(eletrodo coletor). Quando a radiao absorvida sobre a superfcie do semicondutor, eltrons e
vacncias so formados, migrando em direes opostas criando, assim, corrente eltrica. Se os dois
eletrodos so conectados atravs de um circuito externo de baixa resistncia, a corrente produzida
diretamente proporcional potncia do feixe incidente. As correntes so grandes o suficiente (10 a
100 A) para serem medidas com um simples microampermetro sem amplificao.
Uma clula fotovoltaica tpica tem uma sensibilidade mxima em 550 nm, com a resposta
caindo a pelo menos 10% do mximo, a 350 e 750 nm. A fotoclula constitui um detector robusto e
de baixo custo, de radiao visvel, que tem a vantagem de no requerer uma fonte externa para
funcionar. No sensvel como outros detectores e, ainda, sofre de fadiga, a qual causa um
decrscimo gradual na corrente de sada com iluminao contnua. A despeito destas desvantagens
este tipo de detector bem utilizado em instrumentos de filtro de baixo custo.

11.1.2.4) COMPARTIMENTOS PARA AMOSTRAS
Os compartimentos para as amostras so geralmente chamados de celas ou cubetas.
Possuem janelas (as prprias laterais) fabricadas de um material transparente na regio espectral de
interesse. Assim, janelas de quartzo ou slica fundida so requeridas para a regio do ultravioleta
(abaixo de 350 nm) e podem ser usadas na regio do visvel e at 3000 nm no infravermelho. Devido
seu baixo custo utilizam-se, comumente, cubetas de vidro para a regio entre 375 e 2000 nm.
Cubetas de plstico tambm tm aplicao na regio do visvel. O comprimento mais comum de
cubetas para estudos no UV e visvel de 1 cm. Outras celas de caminhos pticos entre 0,1 cm e at
10 cm, podem ser encontradas comercialmente.
Um cuidado particular deve ser tomado para se repetir a posio das cubetas com respeito ao
feixe de radiao; de outra forma, variaes no caminho ptico e perdas por reflexo nas superfcies
podem levar a erros significativos.
A qualidade dos dados crticamente dependente da forma com a qual as cubetas so usadas
e limpas. Impresses digitais, graxa ou outros depsitos sobre as paredes certamente alteraro as
caractersticas de transmisso de uma cubeta. Assim, uma limpeza cuidadosa antes e aps o uso
muito importante, e deve-se tomar cuidado para no tocar as janelas aps uma limpeza.
27
11.2) INSTRUMENTOS ESPECTROSCPICOS
11.2.1) TIPOS DE INSTRUMENTOS
Um espectroscpio um instrumento para a identificao de elementos em uma amostra que
foi excitada em uma chama ou outro meio quente. Consiste de um monocromador modificad onde o
plano focal contendo a fenda de sada trocado por uma objetiva mvel que permite a deteco
visual das linhas de emisso. O comprimento de onda de uma linha determinado do ngulo entre o
feixe incidente eo caminho da linha at a objetiva.
Estritamente falando, um colormetro um instrumento para medidas de absoro no qual o
olho humano serve como o detector. Um ou mais padres de comparao so requeridos cada vez
que o instrumento usado.
Um fotmetro um instrumento simples que pode ser usado para medidas de absoroi,
emisso ou fluorescncia com radiao UV, visvel ou infravermelha. Um fotmetro distinguido
pelo uso de filtros de absoro ou filtros de interferncia para seleo de comprimentos de onda e
um dispositivo fotoeltrico para a medida da potncia da radiao. Os instrumentos utilizados para
medias de absoro com radiao visvel so, algumas vzes, chamados colormetros fotoeltricos,
ou mesmo simplesmente colormetros. O uso do ltimo termo pode levar a uma ambiguidade. Um
fotmetro que utilizado para medidas de fluorescncia chamado frequentemente de fluormetro.
Um espectrgrafo grava o espectro em uma chapa fotogrfica ou um filme localizado ao
longo do plano focal do monocromador. Assim, os monocromadotes podem ser convertidos em
espectrgrafos trocando-se o detector eltrico por um filme fotogrfico. O espectro aparecer como
uma srie de imagens negras da fenda de entrada. Os espectrgrafos so usados para anlise
elementar qualitativa.
Um espectrmetro um monocromador equipado com uma fenda fixa no plano focal. Um
espectrmetro equipado com um fototransdutor na fenda de sada chamado de espectrofotmetro.
Os espectrmetros podem ser usados para medidas de absoro, emisso ou fluorescncia. Os de
fluorescncia so chamados de espectrofluormetros. Vale a pena mencionar que atualmente, a
IUPAC recomenda o uso do termo espectrmetro em substituio ao espectrofotmetro, contudo no
descarta a aplicao eventual do segundo termo.

11.2.2) DESENHO DE INSTRUMENTOS
Os instrumentos podem ser geralmente de trs tipos: (1) feixe simples; (2) feixe duplo; (3)
multicanal.

11.2.2.1) Instrumentos de feixe simples
A Figura 24a, apresenta um instrumento de feixe simples para medidas de absoro. Consiste
de uma fonte de radiao, um filtro ou monocromador para seleo de comprimentos de onda celas
que possam ser colocadas no feixe de radiao, um detector, um amplificador e um dispositivo de
leitura.
28

Figura 24 Diagrama esquemtico de instrumentos para medidas de absoro: (a) de
feixe simples; (b) de feixe duplo

A medida da percentagem de transmitncia com um instrumento de feixe simples manual
envolve trs passos: (1) o ajuste do zero de transmitncia, 0%T; (2) o ajuste do cem por cento de
transmitncia, 100%T; e (3) a determinao de %T do analito. Em muitos aparelhos manuais atuais,
tem-se a opo de se determinar ou %T ou a A do analito atravs de uma chave ou boto seletor. O
ajuste do 0%T feito com o obturador posicionado entre a fonte e o fotodetector. O medidor
mecanicamente ou eltricamente ajustado at que a leitura seja zero. O passo dois ento dado
colocando-se o solvente no caminho ptico, abrindo-se o obturador e variando-se a intensidade da
radiao ou a amplificao do sinal eltrico do detector at que se leia 100 no medidor (100%T). A
intensidade do feixe pode ser variada de vrias formas, incluindo o ajuste da potncia eltrica da
fonte. Alternativamente, o feixe pode ser atenuado por um diafragma, uma placa metlica ou um
pente ptico que bloqueie uma frao da radiao (a quantidade removida pode ser variada). No
passo trs, a cela do solvente trocada por outra contendo o analito, e a percentagem da
transmitncia lida em uma escala ou em um mostrador digital.
Normalmente um instrumento de feixe simples requer uma fonte de tenso estabilizada para
evitar erros resultantes de mudanas na intensidade do feixe durante o tempo requerido para fazer o
ajuste do 100%T e determinar o %T, ou A, para o analito.
Estes instrumentos variam em complexidade e caractersticas de performance. O mais
smples e menos caro consiste de um bulbo de tugstnio operado a bateria como fonte, um conjunto
de filtros de vidro para seleo de comprimentos de onda, tubos de teste para o compartimento de
amostra, uma cela fotovoltaica como detector, e um pequeno microampermetro como dispositivo de
leitura. No outro extremo, esto os equipamentos sofisticados controlados por computador com faixa
de operao de 200 a 1000 nm ou mais. Possuem lmpadas de tungstnio e deutrio como fontes,
usam celas de quartzo e so equipados com uma rede de alta resoluo com fendas variveis. Tubos
fotoamplificadores so usados como detectores e a sada frequentemente digitalizada e gravada, de
tal forma que possa ser manipulada de vrias formas.

29
11.2.2.2) Instrumentos de feixe duplo
Muitos fotmetros modernos e espectrmetros so baseados em um design de feixe duplo.
A Figura 24b ilustra um equipamento de duplo feixe no qual os dois feixes so formados no espao
atravs de um espelho no formato de V chamado de divisor de feixe. Um feixe passa atravs da
soluo de referncia para um fotodetector, e o segundo, simultneamente atravessa a amostra para
um segundo detector combinado. As duas sadas so amplificadas e a sua razo (ou o log da razo)
determinado eletrnicamente e mostrado pelo dispositivo de leitura. Com instrumentos manuais, a
medida uma operao envolvendo dois passos. Primeiramente, o ajuste do zero com um obturador
no lugar entre o seletor e o divisor de feixe. Em segundo lugar, o obturador aberto e a
transmitncia ou absorvncia lida diretamente no medidor.

11.2.2.3) Instrumentos multicanal
A partir de meados da dcada de 80, um nmero crescente de equipamentos multicanal foram
desenvolvidos e disponibilizados comercialmente. A Figura 25 apresenta um esquema simplificado
mostrando o desenho ptico de um instrumento multicanal chamado de espectrmetro diode-array.
A radiao de uma lmpada de tungstnio ou de deutrio focalizada no amostra ou no
compartimento do solvente e ento passa no monocromador com uma rede fixa. A radiao
dispersada incide em uma malha de fotodiodos, composta de centenas de fotodiodos formados ao
longo de uma pastilha de silcio. Tpicamente, as pastilhas tm entre 1 e 6 cm em comprimento e as
larguras individuais dos fotodiodos varia de 15 a 50 m. A pastilha, ou chip, tambm contm um
capacitor e um interruptor eletrnico para cada diodo. Um registrador controlado por computador
sequancialmente fecha cada interruptor momentneamente, o que resulta na carga de cada capacitor
a -5V. A radiao, incidindo em qualquer diodo causa a descarga parcial deste capacitor. Esta perda
de carga trocada durante o prximo ciclo do interruptor. As correntes de carga resultantes, as quais
so proporcionais potncia radiante, so amplificadas, digitalizadas e gravadas na memria do
computador. Um ciclo completo realiza-se em alguns poucos milisegundos.
A largura da fenda do monocromador de um instrumento deste tipo usualmente feito
idntico largura de um dos diodos de silcio. Assim, a sada de cada diodo corresponde radiao
de diferentes comprimentos de onda, e um espectro optido pela varredura dessas sadas
sequencialmente.. J que o processo muito rpido, os dados de um espectro inteiro so acumulados
em 1s ou menos.

Figura 25 Diagrama de um
espectrmetro multicanal do tipo diode
array.

30
Um instrumento de malha de diodos uma ferramenta poderosa para se esturar
intermedirios transientes em reaes moderadamente rpidas, para estudos cinticos, e pra
determinao qualitativa e quantitativa dos componentes saindo de uma coluna cromatogrfica. At
algum tempo atrs, estes instrumentos sofriam pela sua limitada resoluo e custo relativaemnte alto.
Contudo atualmente podem-se encontrar, facilmente no mercado, instrumentos de alta resoluo,
embora o custo continue alto.

12) ESPECTROSCOPIA DE ABSORO MOLECULAR
A espectroscopia de absoro molecular baseada na radiao UV, visvel ou infravermelha,
largamente utilizada para a identificao e determinao de um sem nmero de espcies orgnicas e
inorgnicas. A espectroscopia de UV/VIS empregada primriamente para anlise quantitativa e
provavelmente mais utilizada nos laboratrios clnicos e qumicos ao redor do mundo, do que
qualquer outra tcnica.

12.1) ESPECTROSCOPIA DE ABSORO NO UV/VIS
12.1.1) ABSORO POR COMPOSTOS ORGNICOS
Dois tipos de eltrons so responsveis pela absoro de radiao UV e visvel por molculas
orgnicas: (1) eltrons partrilhados que participam diretamente na formao de ligaes e so assim
associados com mais de um tomo, e (2) eltrons externos no compartilhados localizados em
tomos tais como oxignio, halognios, enxofre, e nitrognio.
Os comprimentos de onda nos quais uma molcula orgnica absorve depende de quo
fortemente seus vrios eltrons esto ligados. Assim, os eltrons compartilhados em ligaes simples
tais como C-C e C-H, so to firmemente ligados que suas excitaes requerem energias
correspondentes aos comprimentos de onda na regio do UV no vcuo (abaixo de 180 nm). Espectro
de ligaes simples no so usados para propsitos analticos devido s dificuldades experimentais
de se trabalhar nesta regio. Estas dificultades so atribuveis ao fato de que tanto o quartzo e a
atmosfera absorvem radiao abaixo de 180 nm, uma circunstncia que exige o uso de
espectrmetros evacuados e equipados com ptica de fluoreto de ltio (limite mnimo em torno de
140 nm)
Compostos orgnicos contendo ligaes duplas ou triplas geralmente exibem picos de
absoro na regio do UV prximo, mais acessvel, pois os eltrons nas ligaes insaturadas so
relativamente fceis de serem excitados. Grupos funcionais orgnicos insaturados que absorvem no
UVe visvel so chamados de cromforos. A Tabela 4 apresenta alguns destes grupamentos e a
localizao aproximada de seus maximos de absoro.

31
Tabela 4 Caractersticas de absoro de alguns cromforos
orgnicos mais comuns.

12.1.1) ABSORO POR COMPOSTOS INORGNICOS
O espectro de muitos ons complexos e molculas inorgnicos, lembram aqueles dos
orgnicos. Com poucas excees, os ons e complexos dos 18 elementos nas primeiras duas sries de
transio so coloridos em um se no todos os seus estados de oxidao. A absoro de energia
visvel por estas espcies envolve transies de eltrons entre orbitais d preenchidos e no
preenchidos que diferem em energia como consequncia de complexantes ligados aos ons
metlicos. A diferena de energia entre os orbitais d (e assim a posio do pico de absoro
correspondente) depende do estado de oxidao do elemento, sua posio na tabela peridica e o tipo
de ligante acoplado a este on. O espectro para os ons dos lantandeos e actindeos representam uma
importante exceo. Os eltrons responsveis pela absoro por estes elementos (4f e 5f
respectivamente) encontram-se blindados das influncias externas por eltrons que ocupam orgitais
com nmeros qunticos principais maiores.

12.1.1.1) Absoro por transferncia de carga
Para propsitos quantitativos, a absoro por transferncia de carga importante devido ao
fato de que suas absortividades molares so muito grandes (
max
>10000), uma circunstncia que leva
a alta sensibilidade. Muitos complexos inorgnicos e orgnicos exibem este tipo de absoro e so
chamados de complexos de transferncia de carga.
Um complexo de transferncia de carga consiste de um grupo doador de eltrons ligado a um
grupo receptor. Quando este produto absorve radiao, um eltron do doador transferido para um
orbital que grandemente associado com o receptor. O estado excitado assim o produto de um
32
processo interno de oxidao/reduo. Este comportamento difere daquele de um cromforo
orgnico no qual o eltron excitado encontra-se em um orbital molecular que compartilhado por
doi sou mais tomos.
Exemplos familiares de complexos de transferncia de carga incluem o complexo fenlico de
Fe (III), o complexo de Fe(II) com 1,10-fenantrolina, o complexo do on iodeto com o iodo
molecular, e o complexo ferro/ferricianeto responsvel pela cor azul da Prssia. A cor vermelha do
complexo de Fe(III)/tiocianato ainda um exemplo de absoro de transferncia de carga. A
Absoro de um fton resulta na transferncia de um eltron do on tiocianato para um orbital que
largamente associado com o on Fe(III). O produto uma espcie excitada envolvendo
predominantemente Fe (II) e o radical tiocianato SCN. Assim como outros tipos de estados
eletrnicos excitados, o eltron neste complexo, retorna ao seu estado original aps um breve
perodo.
Em muitos complexos de transferncia de carga envolvendo um on metlico, o metal serve
como receptor de eltrons. Excees so os complexos de Fe(II) e Cu(I) com 1,10-fenantrolina, onde
o ligante o receptor e o metal o on doador.

12.1.2) ASPECTOS QUANTITATIVOS DA ESPECTROMETRIA NO UV/VIS
A espectroscopia baseada na radiao UV e visvel uma das mais prticas ferramentas que
o qumico tem para a anlise quantitativa. As caractersticas mais importantes dos mtodos
espectrofotomtricos e fotomtricos so:
1) Grande aplicabilidade. Um nmero enorme de espcies inorgnicas, orgnicas e bioqumicas
absorvem radiao UV ou visvel e so assim, fceis de serem determinadas quantitativamente.
Muitas espcies no absorventes podem tambm ser determinadas aps converso qumica para
derivados absorventes. Estima-se que perto de 90% das anlises feitas em laboratrios clnicos so
baseadas na espectroscopia no UV/VIS.
2) Alta sensibilidade. Os limites de deteco tpicos para espectroscopia de absoro esto na faixa
entre 10
-4
at 10
-5
M. Esta faixa pode frequentemente ser estendida para 10
-6
ou mesmo 10
-7
M com
certas modificaes nos procedimentos.
3) Seletividade alta a moderada. Frequentemente um comprimento de onda pode ser encontrado no
qual o analito absorve sozinho, tornando separaes anteriores no necessrias. Ainda assim, onde as
bandas de absoro se sobrepem, correes baseadas em medidas adicionais em outros
comprimentos de onda algumas vzes eliminam a necessidade de um passo de separao.
4) Boa preciso. Os erros relativos na concentrao, encontrados em um procedimento
espectrofotomtrico ou fotomtrico tpico, empregando radiao UV ou visvel, situam-se na faixa
de 1 a 5%. Tais erros podem frequentemente ser diminudos para poucos dcimos com precaues
especiais.
5) Facilidade e convenincia. Medidas espectrofotomtricas e fotomtricas so feitas fcilmente e
rapidamente com instrumentos modernos. Em adio, estes mtodos podem ser fcilmente
automatizados.

12.1.2.1) DETALHES DE PROCESSAMENTO
Ao se desenvolver um procedimento espectrofotomtrico ou fotomtrico, deve-se,
inicialmente, estabelecer condies que levem a uma relao reprodutvel (preferencialmente linear)
entre a concentrao e a absorvncia.

33
Seleo de comprimento de onda. A sensibilidade mxima conseguida quando o comprimento de
onda selecionado para as medidas o mesmo que o mximo de absoro para o analito, pois aqui
que se observa uma maior mudana na absorvncia por unidade de concentrao. Adicionalmente, a
curva de absoro apresenta frequentemente um patamar no seu mximo, o que leva a uma boa
linearidade da curva analtica e uma menor possibilidade de erro provocado por falha na reproduo
precisa do ajuste de comprimento de onda do instrumento. Para medidas com um fotmetro,
escolhido um filtro que possua a cor que seja a complementar da soluo do analito. Tal escolha leva
a uma sensibilidade melhorada assim como uma maior probabilidade de se obter uma curva analtica
linear.

Variveis que influenciam a absorvncia. A absorvncia de uma soluo frequentemente
influenciada por tais variveis como a natureza do solvente, pH, temperatura, concentrao do
eletrlito, tempo de reao, e a presena de substncias interferentes. Os efeitos destas variveis
devem ser estudados de forma a se estabelecer um conjunto de condies que produzam dados
analticos reprodutveis.

Limpeza e manuseio das celas. Medidas espectrofotomtricas precisas requerem o uso de celas de
boa qualidade, que so regularmente calibradas contra uma outra para se detectar diferenas vindas
de riscos ou abraso. Igualmente importante a limpeza dos lados exteriores (as janelas) antes de as
celas serem inseridas no equipamento. O mtodo preferido o de se limpar as janelas com um papel
tipo Klinex que tenha sido humidecido em metanol; o metanol evaporado ao ar, deixando as
janelas livres de contaminantes. Este procedimento superior quele onde simplesmente passa-se
uma toalha de papel seca nas janelas, o que leva a se deixar um resduo de fibras e um filme sobre a
janela.

Determinao da relao entre absorvncia e concentrao. As solues de referncia para a
calibrao, devero se aproximar da composio da soluo das amostras assim como devero
estabelecer uma srie de concentraes razovel. No prudente se assumir aderncia lei de Beer e
se utilizar apenas uma soluo de referncia, assim como basear uma anlise na absortividade molar
determinada na literatura pois elas frequentemente variam de instrumento para instrumento mesmo
quando mesmos modelos so empregados.

O mtodo de adio padro. As dificuldades que atingem a produo de um conjunto de padres
cuja composio aproxima-se daquela da amostra podem ser muito grandes para no dizer que levam
a uma impraticabilidade na operao. Sob estas condies a aproximao do mtodo de adio
padro pode ser de grande ajuda. Neste procedimento, uma quantidade conhecida do padro
adicionada a uma alquota da amostra com a absorvncia sendo medida antes e aps a adio. Desde
que a lei de Beer seja obedecida (e isto confirmado experimentalmente), a concentrao do analito
pode ser determinada a partir das duas absorvncias, dos dois volumes, e da concentrao do padro.

Anlise de misturas Aditividade de absorvncias. A absorvncia total de uma soluo em um
dado comprimento de onda igual soma das absorvncias dos componentes individuais na
soluo. Esta relao torna possvel, a princpio, se determinar as concentraes dos componentes
individuais de uma mistura mesmo se seu espectro se sobrepor totalmente. Por exemplo, a Figura 26
mostra trs espectros, um para a soluo de espcies A, um segundo para a soluo de B, e o terceiro
para uma mistura dos dois. evidente que os dois componentes contribuem para a absorvncia da
34
mistura em cada comprimento de onda. Para analisar esta mistura, as absortividades molares para a e
B so determinadas nos comprimentos de onda
1
e
2
com padres suficientes para se ter a certeza
do obedecimento da lei de Beer sobre a faixa de absorvncias que acompanha a absorvncia da
amostra. Observem que os comprimentos de onda selecionados so aqueles onde os dois espectros
diferem significativamente. Para completar a anlise, a absorvncia da mistura determinada nos
mesmos dois comprimentos de onda.

Figura 26 Espectro de absoro para uma mistura de
dois componentes.

12.1.2.2) TITULAES FOTOMTRICAS
As medidas fotomtricas e espectrofotomtricas podem ser utilizadas para se localizar o
ponto de equivalncia de uma titulao. Esta aplicao obviamente requer que um ou mais dos
reagentes ou produtos absorvam radiao ou que um indicador que absorva esteja presente.

Curvas de titulao. Uma curva de titulao fotomtrica um grfico de absorvncia (corrigida
para mudanas de volume) como uma funo do titulante adicionado. Se forem escolhidas condies
prprias, a curva consiste de duas regies de linhas estreitas com diferentes inclinaes, uma
ocorrendo no incio da titulao e a outra localizada alm da regio do ponto de equivalncia; o
ponto final tomado como a interseco das pores lineares extrapoladas das duas linhas.
A Figura 27 mostra curvas tpicas de titulaes fotomtricas. A Figura 27a, acurva para a
titulao de uma espcie no absorvedora com um titulante absorvedor que descolorizado pela
reao. Um exemplo a titulao do on tiosulfato com o on triiodeto. A curva para a formao de
um produto absorvente a partir de reagentes sem cor mostrada na Figura 27b; um exemplo a
titulao de iodeto com uma soluo padro de iodato para formar triiodeto. As figuras restantes
ilustram curvas obtidas com vrias conbinaes de analitos, titulantes e produtos absorventes.
De forma a se obter curvas de titulao com pores lineares que possam ser extrapoladas, o
sistema absorvente dever obedecer lei de Beer. Alm disso, as absorvncias devero ser corrigidas
para mudanas de volume, multiplicando-se a absorvncia observada pelo fator:
V
) v V ( +

onde V o volume original da soluo e v o volume adicionado de titulante.

35

Figura 27 Curvas de titulao fotomtrica.
As absortividades molares da substncia
titulada, do produto, e do titulante so
s
,
p
e
t
, respectivamente.

Estas titulaes so feitas com um espectrofotmetro ou fotmetro modificado de forma a
que um vaso de titulao possa ser colocado no caminho ptico. Aps ajuste do equipamento da
forma usual, a radiao passa atravs da soluo do analito para o detector, o instrumento ento
ajustado para uma leitura absorvncia conveniente, variando a intensidade da fonte ou a
sensibilidade do detector. Ordinariamente, nenhuma tentativa feita para medir a absorvncia
verdadeira j que valores relativos so perfeitamente adequados para a deteco do ponto final. Os
dados da titulao so ento coletados sem alterao nos ajustes iniciais do aparelho. A potncia da
fonte da radiao e a resposta do detector devem permanecer constantes durante a titulao.
Normalmente, celas cilndricas so utilizadas, e muito cuidado deve ser tomado para se evitar
qualquer movimento da cela que possa alterar o caminho da radiao. Tanto fotmetros quanto
espectrofotmetros tm sido usados para titulaes fotomtricas sendo que este ltimo prefervel
em virtude de que suas larguras de banda em sendo mais estreitas, aumentam a probabilidade de
aderncia lei de Beer.

12.1.2.3) ESTUDO DE ONS COMPLEXOS
A espectrofotometria uma ferramenta valiosa para se elucidar a composio de ons
complexos em soluo e para determinar suas constantes de formao. O poder da tcnica reside no
fato de que medidas quantitativas de absoro podem ser feitas sem perturbar o equilbrio em
considerao. Embora muitos estudos espectrofotomtricos de complexos envolvam sistemas nos
quais um reagente ou um produto absorvem, sistemas no absorventes podem tambm ser
investigados com sucesso. Por exemplo, a composio e a constante de formao para um complexo
de Fe(II) e um ligante no absorvente poderia provavelmente ser determinada medindo-se o
decrscimo de cor que ocorre quando solues do complexo Fe(II) com 1,10-fenantrolina so
misturadas com vrias quantidades do ligante. Para esta aproximao ser vlida, necessrio que a
constantes de formao e a composio do complexo com 1,10-fenantrolina sejam conhecidos.
As trs tcnicas mais comuns empregadas para estudos de ons complexos so: (1) o mtodo
das variaes contnuas ou mtodo de Job; (2) o mtodo da razo molar; e (3) o mtodo da rao de
inclinao.

12.1.2.3.1) O mtodo das variaes contnuas
36
Neste mtodo, solues do ction e do ligante com concentraes analticas idnticas so
misturadas de tal forma que o volume total e o nmero total de moles dos reagentes em cada mistura
seja constante mais a razo molar dos reagentes varie sistematicamente (e.g., 1:9; 2:8; 3:7, e assim
por diante). A absorvncia de cada soluo ento medida e corigida para qualquer absorvncia que
a mistura possa exibir se nhenhuma reao tenha ocorrido. A absorvncia corrigida graficada
contra a frao de volume da soluo de um dos reagentes, assim, V
M
/(V
M
+V
L
), onde V
M
o
volume da soluo do ction e V
L
, a do ligante. Um grfico tpico mostrado na Figura 28. Um
mximo (ou mnimo, se o complexo absorver menos que os reagentes) ocorre a uma razo de
volumes V
M
/V
L
correspondente razo em que ction e ligante esto combinados no complexo. Na
Figura 28, V
M
/(V
M
+V
L
) 0,33 e V
L
/(V
M
+V
L
) 0,66; assim V
M
/V
L
encontra-se na proporo de 1:2,
sugerindo que o complexo tenha a formula geral ML
2
.
A curvatura das linhas experimentais na Figura 28 o resultado vindo do fato de que a reao
de formao do complexo no se completou. A constante de formao para o complexo pode ser
avaliada de medidas dos desvios das linhas retas tericas.

Figura 28 Grfico de variaes contnuas para
um complexo 1:2, ML
2
.

12.1.2.3.2) O mtodo da razo molar
No mtodo da razo molar, uma srie de solues preparada, nas quais a concentrao
analtica de um dos reagentes (geralmente o ction) mantida constante enquanto que a do outro
varia. Um grfico de absorvncia versus razo molar dos reagentes ento preparado. Se a constante
de formao favorvel, duas linhas retas de diferentes inclinaes que interceptam-se na razo
molar que corresponde razo de combinao no complexo so obtidas. Grficos tpicos de razo
molar so mostrados na Figura 29. Observem que o ligande co complexo 1:2 absorve no
comprimento de onda selecionado de tal forma que a inclinao alm do ponto de equivalncia
maior que zero. Deduzimos que o ction no complexado envolvido no complexo 1:1 absorve,
porque o ponto inicial tem uma absorvncia maior que zero. As constantes de formao podem ser
avaliadas dos dados na poro curva dos grficos de razo molar.
37
Figura 29 Grficos da razo molar para um complexo 1:1 e para um
1:2. O complexo 1:2 mais estvel como indicado pela menor
curvatura prxima razo estequiomtrica.

12.1.2.3.2) O mtodo da razo de inclinao
Esta aproximao particularmente til para complexos fracos mas aplicvel apenas a
sistemas nos quais um nico complexo formado. O mtodo assume: (1) que a reao de formao
do complexo pode ser forada a se completar atravs de um grande excesso de um dos dois
reagentes e (2) que a lei de Beer seguida sob estas circunstncias.
Consideremos a reao na qual o complexo M
x
L
y
formado pela reao de x moles do ction
M com y moles de um ligante L:
xM + yL M
x
L
y

As expresses de balano de massa para este sistema so:
C
M
= [M] + x[M
x
L
y
]
C
L
= [L] + y[M
x
L
y
]

onde C
M
e C
L
so as concentraes analticas molares dos dois reagentes. Agora vamos assumir que
em altas concentraes analticas de L, o equilbrio deslocado para a direita de modo que
[M]<< x[M
x
L
y
]. Sob estas circunstncias, o primeiro balano de massa simplifica-se para:
C
M
= x[M
x
L
y
]

Se a lei de Beer obedecida, obtemos, A
1
= b[M
x
L
y
] = bC
M
/x
Um grfico de absorvncia em funo de C
M
linear se suficiente L estiver presente para
satisfazer a assuno de que [M]<< x[M
x
L
y
]. A inclinao deste grfico b/x.
Quando o termo C
M
feito muito grande, assumiremos que [L] << y[M
x
L
y
], e ento o
segundo balano de massa se reduz a:
C
L
= y[M
x
L
y
] e A
2
= b[M
x
L
y
] = bC
L
/y

Novamente, se nossas assunes so vlidas, um grfico linear A
2
versus C
L
observado a
altas concentraes de M. A inclinao desta linha b/y.
A razo das duas inclinaes das duas linhas retas, d a razo de combinao entre M e L:
x
y
y / b
x / b
=

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Absorciometria no UV-VIS Prof.

Evelton Casartelli DEQUIM ICE UFRRJ 1/2003

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