Efectos de los agentes fsicos y qumicos sobre los microorganismos

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Efecto de los agentes
fsicos y qumicos sobre
los microorganismos
Daisy P. Rodrguez Gonzlez
INTRODUCCIN
Agentes antimicrobianos son aquellos utilizados para destruir o impedir el crecimiento
de los microorganismos. Por su estado pueden ser: lquidos, slidos o gases y por su
naturaleza, fsicos y qumicos.
La eficacia de estos agentes est condicionada por varios factores como son: la natura-
leza y concentracin del mismo, as como la concentracin y caractersticas de la poblacin
microbiana presente, la temperatura, la duracin del contacto entre el agente y los
microorganismos, la naturaleza del material a descontaminar, particularmente la presencia de
material orgnico, y el pH.
Los agentes antimicrobianos actan sobre la estructura de la clula bacteriana y sobre
sus procesos metablicos, y sus modos posibles de accin son: desnaturalizacin de la
protena, rompimiento de la membrana o de la pared celular, remocin de grupos sulfhidrilo
libres, interferencia con reacciones enzimticas de los microorganismos y accin sobre el
ADN.
A continuacin vamos a exponer algunos de los trminos relacionados con los agentes
antimicrobianos y los procesos de esterilizacin y desinfeccin.
Bacteriosttico. Agente que inhibe el crecimiento de la bacteria; este se reanuda cuan-
do se retira el agente.
Bactericida. Agente que mata a las bacterias. La mayora no mata a las esporas bacterianas.
Esta accin es irreversible.
Germicida. Agente capaz de matar microorganismos rpidamente, algunos de estos
agentes actan matando ciertos microorganismos, pero solamente inhiben el crecimiento de
otros.
Virucida. Agente que inactiva a los virus.
Fungicida. Agente que mata a los hongos.
Esporicida. Agente que mata a las esporas bacterianas o micticas.
Desinfectante. Agente qumico usado para matar microorganismos sobre objetos inani-
mados, pero que resulta txico para ser aplicado directamente a los tejidos.
Microbiologa y Parasitologa Mdicas
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Antispticos. Son desinfectantes que pueden ser utilizados sobre la piel y, en casos
especiales, sobre las mucosas.
Estril. Libre de vida de cualquier clase. Tenemos que sealar, que dado que el criterio
de muerte para los microorganismo es su incapacidad para reproducirse, el material estril
puede contener clulas microbianas metablicamente intactas.
Sptico. Presencia de microorganismos perjudiciales en el tejido vivo.
Asptico. Ausencia de microorganismos patgenos.
ESTERILIZACIN Y DESINFECCIN
Los procesos de esterilizacin y desinfeccin son mtodos esenciales, utilizados de
manera sistemtica en los hospitales, en el tratamiento y en la prevencin de infecciones y
tambin en la prevencin de la contaminacin de los cultivos microbianos de los laboratorios
y de la industria farmacutica y alimentaria.
Estos trminos son empleados en referencia a la destruccin o remocin de
microorganismos, pero antes de adentrarnos en ellos, por su importancia, vamos a describir
el concepto de muerte bacteriana.
Muerte bacteriana. Para una clula bacteriana, muerte significa la prdida irreversible de
la capacidad de reproducirse (crecer y multiplicarse). Pero cuando se trata de microorganismos,
la muerte no se mide en una clula individual, sino la muerte de una poblacin, y la prueba de
la muerte es la incapacidad de producir una colonia cuando se cultiva en un medio slido.
Pero la veracidad de esta prueba depende de la eleccin del medio de cultivo y de las
condiciones en que este se realice, ya que si no hubo destruccin fsica de la clula microbiana,
ella slo est muerta en relacin con las condiciones empleadas para probar su viabilidad.
En dependencia del agente antibacteriano usado, tenemos que las clulas no viables o
muertas pueden mostrar o no, alteraciones en propiedades como la morfologa, los caracte-
res tintoreales y la actividad enzimtica. Estos criterios no pueden ser usados como pruebas
de viabilidad.
Habiendo definido el concepto de muerte bacteriana, pasemos al concepto de esterili-
zacin, que es el proceso de destruccin o remocin de todas las formas de vida, patgenas
o no, de un material o un objeto. Ahora, si consideramos la anterior definicin de muerte
bacteriana, tenemos que no existe la posibilidad, desde el punto de vista conceptual, de
garantizar la esterilizacin de una preparacin.
En contraste con el concepto de esterilizacin, desinfeccin significa la remocin de
determinado objeto o de su superficie, de la totalidad o parte de los microorganismos
patgenos, de manera que no constituyan una amenaza de enfermedad. A la desinfeccin
aplicada a los tejidos vivos se le denomina antisepsia.
Los agentes antimicrobianos, segn su accin, se pueden considerar bacteriostticos o
bactericidas, y ya habamos descrito que segn su naturaleza pueden ser fsicos o qumicos.
Entre los agentes fsicos de esterilizacin se utiliza especialmente el calor (calor hmedo
y calor seco), la filtracin y las radiaciones.
En cuanto a los agentes qumicos, algunos tienen inconvenientes para su uso, por no
cumplir el principio de toxicidad selectiva, porque resultan muy txicos e irritantes para el
hombre o porque afectan los materiales a esterilizar.
Hay agentes qumicos que pueden emplearse como esterilizantes, por su enrgica ac-
cin sobre los microorganismos, pero muchos tienen que ser utilizados diluidos, con el
objetivo de disminuir su toxicidad y poder irritante, y en este caso se usan habitualmente
como desinfectantes o antispticos.
AGENTES FSICOS
Calor
La utilizacin de temperaturas elevadas es uno de los mtodos ms eficaces en la des-
truccin de microorganismos, y se recomienda su uso, siempre que el material a esterilizar no
sea deteriorado por el proceder. Puede ser empleado en una variedad de mtodos:
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Calor hmedo. La muerte por accin del calor hmedo resulta de la desnaturalizacin y
coagulacin de las protenas que constituyen las clulas microbianas. La destruccin de
enzimas y membranas est influida por la capacidad del agua de promover la destruccin de
los puentes de hidrgeno. La temperatura altera la estabilidad de la membrana citoplasmtica
bacteriana, lo que ocasiona la salida de los constituyentes intracelulares como los iones
potasio, aminocidos y otros.
Calor hmedo bajo presin: puede ser obtenido en los equipos de esterilizacin llama-
dos autoclaves, cuyo funcionamiento es similar al de una olla de presin domstica. El calor
hmedo es ms eficaz porque las bacterias se mueren ms rpidamente cuando se encuen-
tran hmedas y la difusin del vapor caliente dentro del equipo es mejor. El aumento de la
presin hace que aumente la temperatura en el interior del autoclave y la destruccin de los
microorganismos se debe al efecto de la temperatura, no a la presin por s misma. Una
temperatura de 121 C y una presin de 15 lb/pulg
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, en un tiempo de 15 min, se emplea para la
esterilizacin del material quirrgico, las ropas y los medios de cultivo.
Calor hmedo a temperatura inferior a 100 C: se utiliza en el proceso conocido como
pasteurizacin. De empleo frecuente en la industria alimentaria, no es equivalente al proceso
de esterilizacin, porque no todos los microorganismos son susceptibles a este proceder.
Esta tcnica reduce la contaminacin microbiana de productos en los que la temperatura de
esterilizacin puede afectar el sabor, aspecto, textura o las caractersticas nutricionales. Por
ejemplo, en la pasteurizacin de la leche se pueden emplear dos mtodos; en uno, conocido
como pasteurizacin baja, se utiliza una temperatura de 62,8-65,6 C, durante 30 min; y en
otro, conocido como pasteurizacin alta, se somete la leche a temperatura de 71,7 C,
durante 15 s, seguidos de un enfriamiento rpido. Mediante estos procederes son eliminadas
las clulas vegetativas de microorganismos patgenos como el Mycobacterium tuberculo-
sis, Mycobacterium bovis, Brucella abortus, diversas especies de Salmonella y varios
otros microorganismos.
Calor hmedo a temperatura de 100
0
C:
- Agua en ebullicin: la ebullicin a 100
0
C durante 5 a 10 min, destruye todas las
formas vegetativas de los microorganismos presentes en el agua y muchas de las
esporas. Pero algunas esporas resisten los 100
0
C por perodos superiores a una
hora, por lo que este mtodo no asegura la esterilidad.
- Vapor fluente: con este mtodo el material a descontaminar es baado por una co-
rriente de vapor a 100
0
C durante 30 min, lo que permite su calentamiento rpido.
Calor seco. El calor seco acta sobre los microorganismos provocando la oxidacin de
los componentes de las clulas y la coagulacin de sus protenas.
Se utilizan las estufas de aire caliente, tambin llamadas hornos tipo Pasteur. Con este
mtodo es necesario mantener temperaturas de 160-180 C, por 1-2 horas. Mediante este
proceder se esterilizan materiales de vidrio, objetos de metal, aceites, grasas slidas y sus-
tancias en polvo. Productos como la vaselina, los aceites, las grasas slidas y lquidas, y los
polvos, tienen un porcentaje de agua muy pequeo y no se dejan penetrar por la humedad,
por lo que no es posible su esterilizacin en autoclave.
Incineracin. Es el proceso ideal, ya que mata rpidamente por carbonizacin todos los
microorganismos presentes en el material o preparacin. Se utiliza en los laboratorios para
esterilizar los instrumentos de siembra (asas y agujas de platino), pinzas y otros, con la
exposicin directa a la llama del mechero de gas y el calentamiento al rojo vivo del material a
esterilizar. Durante el proceso se pueden formar aerosoles que contienen microorganismos
todava viables, los cuales pueden contaminar los cultivos o infectar al operador. La incine-
racin se emplea tambin en la destruccin de residuos hospitalarios y de laboratorios.
Filtracin
Es un mtodo que se usa habitualmente para la remocin de microorganismos de lqui-
dos, gases termolbiles y del propio aire atmosfrico. El producto a filtrar, lquido o gas, se
hace pasar por superficies filtrantes, que pueden ser de diferentes materiales como: amianto,
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porcelana, vidrio poroso y otros, y poseen poros de dimensiones que no permiten el paso de
los microorganismos, quedando de esta forma retenidos. Este mtodo es muy usado en los
laboratorios de microbiologa y en la industria farmacutica, con el objetivo de remover
microorganismos de soluciones lbiles al calor, como, por ejemplo, las preparaciones de
azcares que se utilizan para la identificacin bioqumica de los microorganismos, el plasma,
las vitaminas y otras. En los laboratorios se emplean habitualmente los filtros tipo Millipore,
con discos o membranas de celulosa, que estn disponibles en el mercado, con una gran
variedad de tamao de poros. Cuando se usan estos filtros, hay que tener en cuenta que la
mayora de los discos que se utilizan comnmente, son incapaces para retener determinados
virus pequeos. Los filtros de membrana se han empleado, adems, para concentrar
microorganismos de grandes volmenes de muestras, como ocurre en el anlisis bacteriol-
gico de las aguas. En los equipos de flujo laminar que se utilizan en los laboratorios y en
unidades de hospitales y la industria, donde se requiere un ambiente con determinadas
caractersticas, se trata el aire mediante los filtros de elevada eficiencia para partculas exis-
tentes en el aire (High Efficiency Particle Air filter), conocidos con el nombre de filtros HEPA.
Radiaciones
Radiaciones no ionizantes. Las radiaciones ultravioletas deben su efecto microbicida a
su absorcin por diferentes componentes celulares y a la alteracin estructural del ADN. Su
aplicacin en la esterilizacin est limitada por el pobre poder de penetracin que poseen. Se
utilizan en los laboratorios farmacuticos y en hospitales, para la esterilizacin de superficies
de determinados ambientes.
Radiaciones ionizantes. Los rayos gamma, rayos X y rayos catdicos, tienen accin
directa sobre los constituyentes de las clulas, sobre el ADN y sobre las protenas celulares.
Estas radiaciones poseen un gran poder, penetrando embalajes de productos medicamentosos
y otros, pero deben ser usadas con precaucin, por el dao potencial que pueden causar a
las clulas humanas. Se utilizan para la esterilizacin de sustancias termolbiles y tienen gran
aplicacin en la industria farmacutica, en la esterilizacin de inyectables, de equipos mdi-
cos como catteres y jeringuillas, y en la esterilizacin de alimentos empacados.
AGENTES QUMICOS
Existen determinadas sustancias qumicas las cuales pueden actuar sobre los
microorganismos con una cierta especificidad de accin, que conocemos con el trmino de
toxicidad selectiva y se utilizan en la prctica mdica como antibiticos y quimioterpicos.
Estas sustancias sern tratadas en otro captulo de este libro.
Aqu vamos a hacer referencia a agentes qumicos con una accin no selectiva sobre las
clulas en las que actan, y que se conocen como desinfectantes y antispticos. Ya anterior-
mente habamos definido que un desinfectante se emplea para el control de los
microorganismos sobre objetos inanimados y el antisptico puede ser aplicado sobre tejidos
vivos.
Los antispticos pueden causar la muerte de los microorganismos, la inhibicin de su
reproduccin o de sus actividades metablicas, pero a pesar de su relativa inocuidad, su
aplicacin en heridas puede retardar la cicatrizacin y daar las clulas de los tejidos.
Los desinfectantes permiten remover de objetos inanimados y del medio ambiente parte
o la totalidad de los microorganismos patgenos que pueden ser susceptibles de causar
enfermedades; estos agentes destruyen las formas vegetativas de los microorganismos,
pero no necesariamente sus esporas, aunque algunos como, por ejemplo, el xido de etileno,
tienen poder esterilizante.
Estos agentes son, generalmente, muy txicos.
Propiedades deseables de los desinfectantes
1. Elevada actividad germicida.
2. Amplio espectro antimicrobiano.
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3. Letal para bacterias, hongos, virus y protozoos.
4. Accin rpidamente mortal.
5. Penetrar grietas, cavidades y por debajo de pelculas de materia orgnica.
6. Lograr concentraciones letales en presencias orgnicas como sangre, esputo, heces.
7. Compatible con jabones o cualquier otra sustancia qumica que pudiera encontrarse en el
material sometido a desinfeccin.
8. Marcada estabilidad qumica.
9. Costo razonable.
Para que la accin de los desinfectantes sea eficaz, es necesario la limpieza previa con
agua y jabn. El arrastre mecnico disminuye el tenor bacteriano y elimina la materia orgni-
ca, facilitando la accin eficaz de los productos qumicos.
Desinfectantes y antispticos ms utilizados en la prctica
Fenoles y sus derivados. Son sustancias muy efectivas, usadas como desinfectantes y
antispticos. La solucin al 2 % de fenol USP (United States Pharmacopea) (cido carblico),
es muy utilizada, pero se debe tener precauciones al emplearse, porque resulta muy txico e
irritante para el hombre y puede causar dermatitis y otras lesiones tisulares. Otros derivados
fenlicos son: el lisol, utilizado como desinfectante, y el hexaclorofeno, empleado como
antisptico. Estos agentes actan alterando la estructura y los mecanismos de permeabilidad
selectiva de la membrana celular de los microorganismos y, adems, desnaturalizan las pro-
tenas. Se usan como desinfectante general, en la descontaminacin de instrumentos clni-
cos y de secreciones y excreciones de pacientes, en preparaciones antispticas para la piel y
en preparaciones cosmticas, pero el riesgo de toxicidad restringe su utilizacin. El fenol se
emplea, adems, como patrn para la validacin de la actividad antimicrobiana de otros
agentes, cuya actividad es referida como coeficiente fenlico.
Alcoholes. Cuando son usados apropiadamente, matan las clulas vegetativas de mu-
chas bacterias, sin embargo, su accin sobre las esporas es pobre o nula. Los alcoholes
actan precipitando las protenas y solubilizando los lpidos presentes en las membranas
celulares. Como solvente tambin actan sobre los tejidos humanos. El alcohol etlico en una
concentracin entre el 70 y el 90 %, es utilizado como antisptico y desinfectante; y el
alcohol isoproplico y proplico en concentraciones entre el 40 y el 80 %, presentan, con
respecto al etanol, una mayor eficacia sobre las formas bacterianas vegetativas, por lo que
son aplicados con frecuencia en sustitucin del alcohol etlico. Se emplean, entre otros usos,
en la desinfeccin de la piel del paciente, antes de la realizacin de procederes invasivos y
para el tratamiento de las manos del personal, en reas donde el lavado higinico de las
mismas resulta insuficiente.
Halgenos. El cloro y los agentes liberadores de cloro son desinfectantes eficaces de
uso general contra todo tipo de microorganismos, y con un papel especial en el tratamiento
del agua, pero tienen el inconveniente de que corroen los metales y su actividad se reduce
notablemente en presencia de materia orgnica. Entre los compuestos liberadores de cloro, el
hipoclorito de sodio y los compuestos N-clorados son los desinfectantes ms utilizados en
las instituciones de salud. Los halgenos son oxidantes fuertes, que destruyen la actividad
de las protenas celulares por oxidacin de sus grupos sulfhidrilos. Se emplean como ya
hemos mencionado en el tratamiento del agua de consumo y de piscinas; en la desinfeccin
de objetos y superficies no metlicas, y en la cristalera de laboratorio como, por ejemplo, las
pipetas usadas. Las concentraciones recomendadas de hipocloritos varan en funcin del
objeto de la desinfeccin; as, se utiliza 1 000 mg/L (1000 ppm) de cloro disponible para la
desinfeccin de superficies limpias, y 10 000 mg/L (10 000 ppm) de cloro disponible, en
presencia de abundante materia orgnica, con un tiempo de contacto superior a 1 hora. Las
diluciones de uso provenientes de las soluciones de hipocloritos, deben conservarse en
recipientes oscuros y una observacin prctica es tener la precaucin de no agregar cidos
a los hipocloritos, ya que puede desprenderse gas de cloro, muy txico.
Aldehdos. Son agentes alquilantes que se emplean para el tratamiento de ambientes y
de instrumentos mdicos y quirrgicos, los cuales soportan las temperaturas exigidas por las
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tcnicas que esterilizan basndose en la accin del calor. En este grupo se encuentran
sustancias tan utilizadas como el formaldehdo, el xido de etileno y el glutaraldehdo. La
accin de estos agentes se lleva a cabo en la clula, inactivando enzimas y protenas, me-
diante la sustitucin de tomos lbiles de hidrgeno por radicales alquilo.
El formaldehdo es usado en su forma gaseosa para la desinfeccin y esterilizacin de
ambientes especiales como los salones de operaciones, ropas, muebles y otros artculos, y
se utiliza tambin en solucin acuosa en la esterilizacin de algunos instrumentos.
El xido de etileno mezclado con gases inertes, para disminuir el peligro de explosin, se
emplea exclusivamente en equipos o cmaras especiales. Por su accin penetrante, permite la
esterilizacin de materiales empacados en papel o en polietileno, y se utiliza en artculos de
plstico o de goma como jeringuillas y sondas.
El glutaraldehdo en solucin al 2 % es idneo para la desinfeccin de equipos de
hospital como citoscopios, equipos de anestesia y de laboratorio, susceptibles de corrosin.
No penetra fcilmente en la materia orgnica, por lo que slo se debe usar en superficies
limpias. Para el uso de todos estos agentes es muy importante tener control de la adecuada
concentracin del producto, el tiempo de exposicin y la temperatura y humedad relativa a la
que se emplean. Adems, por sus propiedades txicas, su empleo debe estar restringido a
aplicaciones especiales, ya que los riesgos y consecuencias de su uso no solamente pueden
afectar al paciente, sino tambin al que utiliza y manipula los materiales as esterilizados
(enfermeras, cirujanos y otros), as como al personal de los servicios de esterilizacin.
Iones de metales pesados. Las sales de metales pesados actan como antimicrobianas,
pero, generalmente, a altas concentraciones resultan perjudiciales para los tejidos humanos.
El mercurio y sus sales fueron los primeros agentes empleados en el tratamiento de la sfilis,
ms al igual que otros metales pesados empleados como desinfectantes, han sido sustitui-
dos por su alta toxicidad. Las sales de mercurio, plata y cobre desnaturalizan las protenas en
concentraciones altas, pero es desaconsejable su uso en humanos. En bajas concentracio-
nes, como habitualmente se utilizan, actan combinndose con los grupos sulfhidrilo. La
aplicacin de los compuestos mercuriales est restringida al tratamiento de infecciones de la
piel y heridas pequeas. Los compuestos de otros metales como, por ejemplo, el nitrato de
plata en solucin al 1 %, han sido ampliamente utilizados en la prevencin de la oftalma
gonocccica del recin nacido; y los compuestos con cobre y zinc se han empleado como
fungicidas.
Detergentes catinicos, En estos detergentes, sus caractersticas tensioactivas estn
asociadas a la porcin catinica de la molcula. Su propiedad de concentrarse en la interfase
entre la membrana de una clula bacteriana, que contiene lpido, y el medio acuoso que la
rodea, les permite actuar alterando la funcin de la membrana celular bacteriana. Son repre-
sentantes de este grupo los compuestos de amonio cuaternario, como el cloruro de
benzalconio, el cetavln, y el cetrimida, todos de amplio uso hospitalario como antispticos
y desinfectantes de superficies y equipos.
El uso inadecuado o excesivo de los desinfectantes es un hecho presente en muchos
hospitales del mundo; para solucionar esto, las instituciones de salud deben tener normas
escritas sobre el empleo de los desinfectantes qumicos. Para hacer estas normas, hay que
partir del conocimiento de los desinfectantes en uso en el medio del cual se trate y de sus
aplicaciones.
Se debe suprimir la utilizacin de los desinfectantes en las situaciones en que una buena
limpieza sea suficiente; tambin cuando, por el contrario, se requiera la esterilizacin y en los
casos en que sea posible la desinfeccin trmica o resulte ms econmico el empleo de
artculos desechables.
Se debe seleccionar un nmero limitado de desinfectantes para las aplicaciones en que
se considere su uso.
La eficacia de las diluciones de uso de los desinfectantes, se debe comprobar peridica-
mente mediante pruebas de uso, como la desarrollada por Kelsey y Maurer, a la que nos
referiremos en el captulo sobre infeccin intrahospitalaria.
RESUMEN
Los agentes antimicrobianos son utilizados para destruir o impedir el crecimiento
de los microorganismos. Por su naturaleza pueden ser: fsicos o qumicos y tienen
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diferentes modos de actuar sobre la estructura de la clula bacteriana y sus procesos
metablicos.
Estos agentes se emplean en los procesos de esterilizacin y desinfeccin en los hospi-
tales, en relacin con la atencin de pacientes; tambin en los laboratorios para evitar la
contaminacin microbiana de los cultivos y en la industria farmacutica y alimentaria.
En este captulo se enuncian conceptos relacionados con los agentes antimicrobianos,
se describen los principales agentes, su modo de accin y los usos ms frecuentes.
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