# 3: cultura Ergot

NOTA: O contato com os compostos da cravagem do centeio pode ser perigoso. S depois de
um
entendimento bsico das tcnicas empregues na manipulao de
organismos perigosos ou txicos alcanado se deve prosseguir com
a cultura da cravagem do centeio.

A necessidade de esterilidade absoluta no pode ser enfatizada. Consultar
qualquer texto elementar sobre bacteriologia para o equipamento correto e
procedimentos. Evite o contato prolongado com compostos da cravagem do centeio, como
eles
so txicos e podem ser fatais.

A) Obter uma fonte de fungo Claviceps Purpurea




Se nenhuma fonte pode ser encontrado, voc pode fazer uma viagem de campo para obter



isto a partir de centeio ou outros cereais gramneas. Azevm a melhor



escolha. A cravagem aparecer como um crescimento escuro na



topos do centeio, onde as sementes so. Eles so aproximadamente



a mesma forma que as sementes e so referidos como "cabeas" or



"Ergot". A partir dessas cabeas ou cravagem brotar as Claviceps



Fungos purpurea.




Eles tm caules longos e cabeas bulbosas quando visto sob um



vidro forte ou microscpio. So estes que devem ser removidos



a partir da cravagem, livres de contaminao, e utilizado para inocular



o material de cultura.

B) Faa um meio de cultura




Combina-se os seguintes ingredientes em cerca de 500 ml de destilado



gua em garrafa pequena pescoo a 2 L:




Sacarose 100 g




Chick pea refeio 50 g



1 g nitrato de clcio



Ca (NO3) 2



Monopotssico fosfato 0,25 g



KH2PO4



Sulfato de magnsio 0,25 g



MgSO4



Cloreto de potssio 0,125 g



KCl



Sulfato ferroso hepta 8,34 mg



FeSO4? 7h20



Sulfato de zinco hepta 3,44 mg



ZnSO4? 7h20




Adicione a gua para formar um litro




Ajusta-se at pH 4 com uma soluo de amonaco e cido ctrico




Esterilizar em autoclave

C) Faa uma cultura




Inocular o meio esterilizado com Claviceps purpurea em



condies estreis, rolha com algodo esterilizado e



incubar durante duas semanas, o teste periodicamente e manter



pH 4. Depois de duas semanas de uma cultura de superfcie pode ser visto na



mdio. Produo em larga escala do fungo pode agora comear.

D) A produo em grande escala




Obter vrios gales comuns 1.




Coloque uma rolha de dois furos no pescoo dos jarros.




Montar um tubo curto (6 polegadas) em um buraco, deixando dois centmetros



Por cima da tampa. Instale um tubo de borracha curto para isso. Encha uma



pequeno frasco (500 ml) de Erlenmeyer com uma soluo diluda de



hipoclorito de sdio (NaClO). Estender um tubo de vidro a partir do



borracha de modo que a extremidade imersa na hipoclorito.




Montar um longo tubo de vidro no outro orifcio rolha. Deve



chegar perto da parte inferior do bocal, e ter cerca de dois centmetros



mostrando acima da rolha. Anexar um tubo de borracha para o vidro



tubo e encaixar um tubo de vidro curta para o final do tubo de borracha.




Encher um grande tubo de vidro (1 "x 6"), com algodo estril e se encaixam



rolhas de um buraco na extremidades. Encaixe o tubo de vidro pequeno em



a extremidade do tubo de borracha em uma rolha do tubo grande.



Montar um outro tubo de vidro pequeno para o outro batente. A borracha



tubo est ligado a esta e fixada a pequena bomba de ar



(Obtido a partir de uma loja de peixes tropicais).




Com este equipamento de aerao voc pode garantir um fornecimento de energia limpa



ar ao fungo Claviceps purpurea, mantendo um



ambiente estril no interior da soluo.




Desmontar os aeradores. Colocar todos os tubos de vidro, borracha



tubos, rolhas e algodo em um saco de papel, feche firmemente com



grampos de arame e esterilizar em autoclave.




Encher os jarros de 1 galo de 2/3 a 3/4 com o meio de cultura



e autoclave.




Enquanto estas coisas esto sendo esterilizados, homogeneizar em um



liquidificador a cultura j obtidos e us-lo para inocular



o material nos gales. O misturador deve ser estril.




Tudo deve ser estril.




Montar os aeradores. Inicie as bombas. Um borbulhamento lento



cada jarro ir fornecer oxignio suficiente para as culturas. Uma nica



bomba pode ser ligada a vrios filtros.




Deixe tudo descansar em temperatura ambiente (25 C) em um lugar escuro



(Nunca expor alcalides da cravagem do centeio luz brilhante - eles vo



decompor) durante um perodo de dez dias.




Aps dez dias, a cultura para ajustar a 1% de etanol utilizando 95%



etanol sob condies estreis. Manter o crescimento para um outro



duas semanas.

E) Extrato de alcalides da cravagem do centeio




Depois de um perodo total de 24 dias de crescimento, a cultura deve ser



considerada madura. Faa o cido cultura com cido tartrico



e homogeneizar num misturador durante uma hora.




Ajustar o pH para 9 com hidrxido de amnio e extrai-se com



benzeno ou clorofrmio / mistura de iso-butanol.




Extrair mais uma vez com cido tartrico alcolico e evapora-se num



vcuo at secura.




O material seco o sal (sal do cido tartrico, o



tartarato) dos alcalides da cravagem do centeio, e armazenada sob esta forma



porque o material bsico gratuito muito instvel e se decompe



prontamente na presena de luz, calor, humidade e ar.




Para recuperar a base livre para extraco da amida ou



sntese de LSD, faa o tartarato bsico com amnia em pH



9, extrai-se com clorofrmio, e evapora-se in vcuo.





# 4: Sntese de LSD de alcalides da cravagem do centeio ou LSA




(Incluindo sees sobre isomerizao, separao,



purificao e cristalizao)

NOTA: os produtos qumicos e reaces a seguir descritos so potencialmente
perigoso at mesmo para um qumico orgnico em um laboratrio bem equipado.

As editoras, portanto, negar a responsabilidade por qualquer dano ou
leso resultante do manuseio inadequado dos produtos qumicos e
tcnicas descritas, e recomendo vivamente a todas as pessoas sem ressalvas a
realizar as reaces, em vez de usar o comparativamente mais fcil,
cultura cravagem segura e processo de extraco de LSA.

A) Sntese do LSD



(Iso-e dietilamida do cido lisrgico-dextro)

PREPARATRIO: obter um vermelho e um amarelo segurana fotogrfica
luz e uma fraca luz ultravioleta de onda longa. Estes so utilizados para
prevenir a hidrlise de compostos de cido lisrgico.

NOTA: A folha de alumnio deve ser usado para cobrir os produtos qumicos quando a luz
est presente. As luvas de borracha devem ser usados, estes compostos so
extremamente venenosa.




[A fonte implica, mas no afirma que se pode substituir



"Ergot alcalide" a seguir, com a semente derivado semi-



LSA puro concentrado de # 2. - Ed.]

Usando a luz AMARELA:




Coloque um volume de alcalide da cravagem do centeio em uma pequena base redonda



balo. Adicionar dois volumes de hidrazina anidra e refluxo durante 30



minutos, ou a mistura pode ser aquecida num tubo selado a 112



Celsius durante 30 minutos. Se a tcnica de refluxo for utilizado,



manter a presso atmosfrica por meio de um recipiente aberto ou



fraccionamento da coluna.




Aps aquecimento / refluxo, adicionar 1,5 volumes de gua



mistura e deixe ferver suavemente durante 15 minutos. Depois de ebulio



concluda, arrefecer a mistura num frigorfico at



solidificao. O material slido obtido iso-lisrgico



hidrazida do cido.

Usando a luz RED:




Frio todos os produtos qumicos (reagentes), a ser utilizados para 0 graus Celsius. Lugar



num frasco aberto num banho de gelo. Adicionam-se 100 ml de concentrado



cido clordrico (arrefecido a 0 C).




Adiciona-se rapidamente 2,82 g de hidrazida do cido lisrgico



cido clordrico, tendo o cuidado de manter uma temperatura



0 Celsius.




Adicionam-se 100 ml de uma soluo a 0,1 N (1/10th Normal) soluo de sdio



nitrito (arrefecido a 0 C) e agita-se vigorosamente durante 3 minutos.




Continuar a agitao a 0 graus Celsius e adicionar gota a gota 130 ml de



cido clordrico.




Quando a adio de cido completa, a agitao continua durante 5



minutos, em seguida neutralizar a soluo com bicarbonato de sdio,



utilizando uma soluo de bicarbonato aquosa saturada.




Extrai-se a soluo com ter, remover a camada de gua, e



dissolver a substncia pastosa em ter. Adicione a isto o ter



camada.




Adiciona-se 3 g de dietilamina para cada 30 ml do extrato etreo.




Deixe este suporte no escuro e, gradualmente, aquecer a 20



Celsius durante pelo menos 24 horas.




Evapora-se esta soluo em vcuo.




O material restante uma mistura de inactivos



iso-lisrgico dietilamida do cido eo cido lisrgico ativo



dietilamida (LSD-25). O ismero inactivo deve ser agora



convertidos (isomerizado) para o ismero ativo para muito



aumentar o rendimento, uma vez que o composto inactivo predomina



nesta sntese.

B) Isomerization de iso-LSD para o ativo LSD-25

UTILIZAO DA LUZ VERMELHA:




Dissolve-se o material sintetizado na quantidade mnima de



lcool etlico.




Misturar uma soluo de 4 normal de hidrxido de potssio em etanol.



A quantidade de soluo necessria duas vezes o volume do



soluo iso-LSD/ethanol.




Adicione as duas solues em conjunto e deixe a mistura descansar por 4



horas temperatura ambiente.




Neutraliza-se a mistura com cido clordrico diludo, depois



tornam-se ligeiramente bsica com hidrxido de amnio.




Extrai-se a mistura com clorofrmio, o clorofrmio sparate



camada e extrair estes quatro vezes com um volume de 25% de gua.




Evapora-se o clorofrmio sob vcuo. Descarte a gua



extratos. O material deixado aps evaporao numa mistura de



iso-LSD e LSD-25, o predomnio do LSD ativo.




A mistura pode agora ser separados por cromatografia e o



iso-LSD novamente isomerizada pelo processo acima.

C) Separao, purificao e cristalizao de LSD-25

UTILIZAO uma cmara escura:




O material obtido a partir do processo de isomerizao agora



Dissolveu-se em uma soluo preparada a partir de 3 partes de benzeno / 1 parte



clorofrmio. Use 50 ml de solvente por 1 grama de material LSD.




Misturar uma pasta de alumina bsica em benzeno. Embal-lo em um de 1 polegada



coluna chromatoghraphy at encher 6 polegadas.




Quando o chorume se instala, drenar o benzeno / clorofrmio at



o nvel de alumina bsica, e cuidadosamente adicionar um igual



montante do LSD / soluo de solvente.

USANDO UM FRACO, LONG-WAVE luz ultravioleta:
(A seguir a faixa azul somente)




Drenar a soluo atravs da coluna. O mais rpido em movimento,



banda fluorescente azul contm o LSD-25. Recolha este



fraco e evaporou-se no vcuo. O xarope remanescentes



cristalizar espontaneamente, mas lentamente. No aquea.




Use a luz UV s acolhedora, necessrio seguir a banda azul



a fim de evitar a decomposio dos compostos.




Dissolve-se o xarope ou um cristal em uma soluo de cido tartrico e



recristaliza-se para formar o produto final estvel (dextro lisrgico



tartarato de dietilamida do cido).




O material restante na coluna pode ser removido com



metanol, evaporado num vcuo, e reciclada atravs do



isomerizao e posterior procedimentos por si s ou combinado



com material fresco.



Alm disso, todas as solues e os restantes resduos podem ser neutralizados



socium com bicarbonato, evaporou-se sob vcuo, e extrada



com clorofrmio amoniacal, evaporou-se o extracto at secura,



e o resduo foi reutilizado.




# 5: Preparao de cido lisrgico a partir da amida

NOTA: esta sntese to difcil e perigoso como o resto, e
de uso somente se estiver usando um dos seguintes dois sntese de LSD
mtodos que requerem cido lisrgico como o composto de partida. O
amida do cido lisrgico obtido a partir do extracto de cravagem ou sementes
no precisa de ser convertido para o cido antes da sua utilizao na sntese
do LSD, desde que a sntese usado como 4 dado acima, e
dar o material de partida "alcalide ergot".




Dissolve-se 10 g de amida do cido lisrgico, em 200 ml de metanol



soluo de hidrxido de potssio.




Remove-se o metanol por meio de vcuo assim que a amida



dissolvido.




Dissolve-se o resduo que deixado em 200 ml de um 8%



soluo de hidrxido de potssio em gua.




Aquecer esta mistura num banho de vapor durante 1 hora.




Passe um vapor de gs nitrognio atravs do frasco durante o



processo de aquecimento. (A amnia, que desenvolvido no gs



fluxo pode ser titulada com cido clordrico a fim de



seguir a reaco.)




Neutralize a mistura com cido tartrico (neutro para congo



vermelho) e execut-lo atravs de um papel de filtro.




Extrai-se a mistura com ter num funil de separao. Salvar



a camada de gua, elimine a camada de ter.




Filtrar a soluo atravs de um filtro de papel e evaporar.




Aps evaporao, os cristais secos de cido lisrgico ser



obtida.














# 6: Sntese de LSD



usando cido lisrgico



a maneira mais rpida para fazer puro LSD-25
PREPARATRIO: ver # 4

NOTA: Os produtos qumicos e as tcnicas descritas so
potencialmente
perigoso. altamente recomendvel que a fsica e qumica
propriedades dos reagentes usados ??serem estudados por
aquelas pessoas
familiarizado com eles antes que a sntese tentada.

USANDO A luz amarela:




5,36 g de cido d-lisrgico so suspensos em 125 ml



acetonitrilo, e a suspenso arrefecida at cerca de -20



Celsius num banho de acetona arrefecida com gelo seco.




suspenso adicionada uma soluo fria (-20 C) de 8,82 g



de anidrido trifluoroactico em 75 ml de acetonitrilo. O



mistura deixada em repouso a -20 C durante aproximadamente 1
1/2 (um e



meia) horas.




(Durante este tempo, o material suspenso dissolve-se e o



d-lisrgico ID de cido convertida no anidrido misto



cidos lisrgico e trifluoroactico.)




O anidrido misto pode ser separada, sob a forma de um leo por



evaporao do solvente in vcuo a uma temperatura abaixo de
cerca



0 Celsius.




Tudo o que deve ser mantido anidro.

UTILIZAO DA LUZ VERMELHA:




A soluo de anidridos mistos em acetonitrilo a partir de cima



adicionados a 150 ml de acetonitrilo contendo 7,6 g de



dietilamina.




A mistura realizada no escuro temperatura ambiente por cerca
de



2 horas.




O acetonitrilo evaporado sob vcuo, deixando um resduo de



LSD-25, alm de impurezas.




O resduo dissolvido em 150 ml de clorofrmio e 20 ml de
de gua gelada.




A camada de clorofrmio removido e a camada aquosa
extraiu-se com vrias pores de clorofrmio. O clorofrmio
so pores so combinadas e, por sua vez, foi lavado com 50 ml
de quatro
pores de gua gelada.
A soluo de clorofrmio ento seca sobre sulfato de sdio anidro
sulfato de potssio e evaporou-se in vcuo.
NOTA: aps a concluso desta sntese, siga o
procedimentos descritos para a separao, purificao, e
cristalizao de LSD-25. Se um rendimento mais elevado for
desejado, siga
o procedimento em isomerizao aps fazer a separao,
purificao e cristalizao.
# 7: Sntese de LSD
usando cido lisrgico
alto rendimento e rpido

PREPARATRIO: ver # 4

NOTA: Os produtos qumicos e as tcnicas descritas so
potencialmente
perigoso. altamente recomendvel que a fsica e qumica
propriedades dos reagentes usados ??serem estudados por
aquelas pessoas
familiarizado com eles antes que a sntese tentada.

NOTA: O procedimento a seguir d um bom rendimento e muito
rpido,
com pouco cido iso-lisrgico a ser produzido. No entanto, o
estequiometria deve ser exata ou o rendimento vai cair

Usando a luz BRANCO:




Trixido de enxofre produzido num estado anidro com cuidado
decomposio de sulfato frrico anidro a cerca de 480
Celsius. Armazene sob condies anidras.
Usando a luz BRANCO:
Um balo de fundo redondo seco por litro cuidadosamente 22
equipado com um banho de gelo,
um funil de adio, um agitador mecnico e carregado com 10 a
11 litros de dimetilformamida (recm-destilado sob
presso reduzida).
O condensador e funil de decantao so ambos protegidos contra



umidade atmosfrica.
2 de trixido de enxofre (Sulfan B) so introduzidos, gota a gota,
cautelosamente, com agitao, durante 4 a 5 horas. O
a temperatura mantida a 0-5 graus Celsius durante a adio.
Aps a adio estar completa, a mistura agitada durante 1
de 2 horas at alguns separou-trixido de enxofre cristalino
complexo dimetilformamida dissolveu-se.
O reagente transferido para uma pipeta automtica estanque
conveniente para dispensar, e mantidos no frio. Embora o



reagente, que incolor, pode mudar para amarelo e vermelho, o
eficincia continua intacta durante trs a quatro meses de frio
armazenamento.
Uma alquota dissolvido em gua e titulada com a norma
NaOH a um ponto final de fenolftalena.
Usando a luz RED:
Uma soluo de 7,15 g de mono-hidrato do cido d-lisrgico (25
mmol)
e 1,06 g de hidrato de hidrxido de ltio (25 mmol) em 200 L de
MeOH preparada.




O solvente removido por destilao em banho de vapor sob
reduzida
presso.
O resduo de vidro como de ltio dissolvido em lysergate
400 ml de dimetil formamida anidra.
A partir desta soluo, cerca de 200 ml de dimetil formamida
destilao a 15 milmetros de presso atravs de uma hlice de 12
polegadas
embalado coluna.
A soluo resultante de ltio anidro lysergate deixou
trs arrefecida a 0 graus Celsius e, com agitao, tratada
rapidamente com 500 ml de soluo de SO3? DMF (1,00 molar).
A mistura agitada no frio durante 10 minutos e depois
9,14 g (125,0 mmol) de dietilamina adicionada.
A agitao eo arrefecimento so continuados por mais 10 minutos,
quando 400 ml de gua adicionada para decompor a reaco
complexo.
Depois de se misturar cuidadosamente, 200 ml de soluo salina
aquosa saturada
soluo adicionado. O produto amida isolado por repetida
extraco com pores de 500 ml de dicloreto de etileno.
O extracto combinado seco e, em seguida, concentrada at um
xarope
sob presso reduzida. No aquea o xarope durante
concentrao. O LSD pode cristalizar, mas os cristais
e o licor me pode ser cromatografado de acordo com o
Instrues na sntese do LSD # 4.