Agradecimentos....

REPRODUO ARTIFICIAL DE PEIXES NATIVOS: estratgias e inovaes

Elizabeth Romagosa
Instituto de Pesca - APTA, SAA, So Paulo
eromagosa@pesca.sp.gov.br

ESPCIES DE PEIXES NATIVOS

informaes cientficas!!

REPRODUO

at o momento, apontam para as questes que afetam direta ou indiretamente, desenvolvimento da produo aqucola
piscicultura comercial e de preservao

Estratgias quanto s prticas de manejos, reprodutivo - gametas X nutricional

DESAFIOS DA PRODUO DE PEIXES NATIVOS (2 dcadas) dominar tcnicas com preciso e melhor eficincia reprodutiva = BIOLOGIA REPRODUTIVA ESTRATGIAS REPRODUTIVAS que os peixes adotam
(% fmeas maturao final e taxa de fecundao e/ou induo da ovulao X espermiao - artificial),

modo a garantir uma prole vivel

Entretanto, independentemente se os

REPRODUTORES

desova total ou desova parcelada, peixes nativos ........ peixes cativeiro, NO conseguem eliminar seus GAMETAS de forma espontnea.......

SUCESSO REPRODUTIVO
depende de um ajuste temporal havendo a necessidade de existir sincronia migrao (piracema) : CONFINADOS dificuldade induo a desova!!??
migrao confinamento

Quando o alimento ser ofertado??!! (antes ou durante o perodo reprodutivo)

momento da liberao GAMETAS (desova)

confinamento
alimento estocado na fmea-me antes da ovulao, proporciona aos descendentes, fonte E - desenvolvimento da prole

Maanos et al. (2008)

boa qualidade
essencial na produo de peixes mantidos

GAMETAS

sistemas de confinamento

Como as informaes chegam nas gnadas ?

hipotlamo hipfise - gnadas

crebro

GnRh

hipotalmo
hipfise ou pituitria gnadas

(?)

FSH
Lh (?)

CATIVEIRO
* Reprodutor bem alimentado
impede ovulao ou espermiao/ desova

Esterides gonadais e gametas

(?)

TERAPIAS HORMONAIS

Disfuno hormonal?
associado falhas na maturao ou liberao dos gametas

TH = efeito positivo
URGENTE novos indutores??!!!! padronizao dosagem

qualidade ovcitos

n ovos liberados

MANIPULAES REPRODUTIVAS
Processo de gametognese e/ou Final de maturao devem ser realizadas corretamente para que ocorra a liberao de GAMETAS (hbitat natural)

MANIPULAES ERRNEAS
disfunes reprodutivas (falhas maturacionais): complexa e intrigante!!!??

REPRODUO X NUTRIO ..... efeitos marcantes!!!

nutrio inadequada, diminuio do nmero de ovcitos liberados (fecundidade) ou a qualidade dos ovos e, conseqentemente n descendentes.

MANEJO REPRODUTIVO
dificuldades operacionalizar plantel de reprodutores geneticamente (metodologia gentico-molecular) e cri-las, indoor e outdoor. manuteno grande n peixes at a fase adulta ciclos maturacionais requer instalaes de grande porte, demanda por alimentos de alta qualidade; preo razovel; cuidados com a sade, condies ambientais favorveis, etc.

indicadores

QUALIDADE DOS GAMETAS

Em geral, INSUCESSO REPRODUTIVO aos OVCITOS OU OVOS,

MACHOS so evidentes as dificuldades na ESPERMIAO

ou a POBRE-QUALIDADE DO SMEN.......CATIVEIRO

OTIMIZAR USO REPRODUTORES E SUAS TCNICAS maximinizar eficincia...... Relao espermatozides:ovcito jundi-cinza, R. quelen - 89.497 espermatozides:ovcito curimbat, P. lineatus - 1.007.660 espermatozides:ovcito

Volume ideal gua = 105,5mL gua : 2mL ovcitos

micrpila cachara

HAINFELLNER, 2011

Desenvolvimento ovariano para reprodutores de curimbat em sistemas de criao (360 dias experimento) : VE X TR

VE (10X20X1,5m) = 1 peixe.m-3 50 peixes/cada = 100 peixe/VE = 17peixes.m-3

TR (2X2x1,5m) = 6,8kg. peixe. m-3 no recomendado REPRODUTOR!!!!!! Efeitos negativos: baixo volume de ovcitos; heterogeneidade do plantel ; atraso e reduo do perodo reprodutivo; nveis de esterides gonadais?? Afetado??
rao extrusada 28% PB natureza? VE? TR? sistemas criao distintos

DOMESTICAO DE MATRIZES
esse processo requer dcadas de desenvolvimento e experimentao
prticas peridicas de manipulao evitar endogamia geraes produzidas e criadas em cativeiro (domesticadas)

melhoramento gentico
ESTRESSE induzir reabsoro dos GAMETAS

peixes nativos???domesticao

DOMESTICAO DE MATRIZES
1. Epigenticos Ovcitos Espermatozides afetam a expresso gnica no desenvolvimento do embrio fase de blstula dependente RNAs sendo transmitida atravs do ovo (vitelo) e smen.

(2) genticos. Matrizes ou Embries diferentes fentipos entre populaes selvagens e cativas.

ALIMENTAO DE REPRODUTORES

ALIMENTAO DE REPRODUTORES
Para cada fase de desenvolvimento do peixe? Dietas apropriadas e diferenciadas? Qual a dieta mais adequada?
Frente imensa diversidade de espcies de peixes presentes nas bacias hidrogrficas brasileiras?

Sexos diferenciados? Diferentes sistemas de criao?

maior custo - produtor e formulaes esto em constante estudo?? benefcio e custo??

ALIMENTAO DOS REPRODUTORES

Espcies de peixes outros continentes : requerimentos nutricionais Espcies nativas: exigncias nutricionais ????!!!!
protenas; carboidratos; % protena-carboidrato; cidos graxos essenciais; vitaminas C, E e B9, carotenides e minerais, entre outros.

Exemplo: ARA altamente necessrio na maturao gonadal

DHA + antioxidante = melhora qualidade do smen

REIDEL et al., (2010) - jundi, R. quelen, TR

DIETAS - PB e ED
A: 25%; B: 30%; C: 35% com 3.250 Kcal g-1 e D: 25%; E: 30%; F: 35% com 3.500 K calg-1

Antecipou o processo maturao 2 ms de vida

Apresentou 4 picos de desova (normalmente 3)

Produo contnua clulas espermatognicas.

Macroscopic (1 - 6; 13 - 18) and histological paraffin sections (7 - 12; 19 - 24) are stained with HE. Females: (1; 7, 10 X) Immature; (2; 8, 10X) Initial Maturation; (3; 9, 10 X) Intermediate Maturation; (4; 10, 100 X) Final Maturation; (5; 11, 100X) Partial Regression; (6; 12, 100 X); Total Regression. Males: (13; 19, 20 X) Immature; (14; 20, 10 X) Initial Maturation; (15; 21, 10 X) Intermediate Maturation; (16; 22, 10 X) Final Maturation; (17; 23, 100X) Partial Regression; (18; 24, 100 X) Total Regression.

FMEAS - jundi, Rhamdia hilarii, em tanques-rede

10,00 9,00 8,00 7,00 6,00 5,00 4,00 3,00 2,00 1,00 0,00

means GSI

IGS = 15 % Trat. C, diferindo, portanto, dos outros (p0,05)

means GSI

16,00 14,00 12,00 10,00 8,00 6,00 4,00 2,00 0,00

(C) 35% ; 3.250Kcal g-1

E F

16,00 14,00 12,00

means GSI

10,00 8,00 6,00 4,00 2,00 0,00

Oct.

Nov.

Aug.

m onths

2006

Sept.

Mar.

Dec.

Jan.

Feb.

Jun.

Apr.

May

Jul.

TPICOS INVESTIGADOS:
1. Biologia reprodutiva
2. Controle do sexo 3. Terapias hormonais : aumentar a produo de smen e estimular ovulao 4. Programas de reproduo induzida novos protocolos??? 5. Otimizao dos mtodos de coleta dos gametas e criopreservao de smen

6. Manejo nutricional dietas adequadas para a fase de vida do peixe e espcie

7. Manejo criatrio para reprodutores (adensamento; estresse, etc)

Nestes ltimos dez anos avanos:

biologia molecular, gentica, genmica, biotecnologia.

Faltam estudos de biologia reprodutiva..........

QUALIDADE DO SMEN
TESTCULOS - grande variabilidade morfofisiolgica. SMEN - boa qualidade habilidade dos espermatozides em atingir os ovcitos CAPACIDADE DE PRODUZIR EMBRIES VIVEIS

No me e data

Programa CASA - ferramenta comportamento espermatozides

motilidade espermtica : software imagens computadorizadas - vdeos
(A) setas finas pretas EPZ em movimento lento = imveis. (B) setas largas = EPZ no considerados na anlise do plugin CASA configurar e avaliar parmetros
Ex: tamanho, velocidade, cabea, etc.
45 40 VCL VAP VSL

35
"y" p o sition (m)

30
25 20 15 10 5

Trajetrias individuais espermatozides

"y" p o sition (m)

30

VCL

VAP

VSL

25
20 15

Comportamento espermatozide

10
5

0
0 5 10 15 20 25
"x" position (m)

TEMPOS DE VELOCIDADE
20

Sanches et al., 2010 jundi Sanches et al., 2011 surubim-do-Paraiba

0
0 5 10
"x" position (m)

15

CRIOPRESERVAO DO SMEN E EMBRIES

Benefcios Conservao de recursos genticos (coleta de gametas), inclusive para o melhoramento gentico
Fornecer embries em determinados perodos do ano Resfriamento (temperaturas ????) Crioprotetores (DMSO, glicerol ,metanol, etileno-glicol X tempo)
eficincia, sensibilidade toxicidade injrias

BIOTECNOLOGIA DE CLULAS DE PEIXES PGCs clulas germinativas primordiais transplantes

origem dos gametas transmitindo informao material gentico nas prximas geraes

Tecnologia dessas clulas nas piscigranjas ser possvel resolver: (i) maturao precoce (ii) problemas de transferncia gentica, (ii) esterilidade e (iii) controle do sexo (iv) controle da reproduo

PEIXES (modo geral)

Vantagens tcnicas comparados a outros vertebrados: (1) fecundidade elevada; (2) embries grandes e transparentes; (3) rpido desenvolvimento.

peixes ornamentais
zebrafish e medaka

Pesquisadores brasileiros (UFMG) vem realizando experimentos

transplante intra-especficos e inter-especficos de clulas germinativas

Peixe-modelo tilpia-do-nilo e tucunar conhecer os arranjos csticos dos tbulos espermatognicos; acompanhar a viabilidade do smen; viabilidade das clulas PCG congeladas ou cultivadas e, a funo dos testculos.

Para tal, so utilizados marcadores das PCG com protenas fluorescentes verdes.

Prximos aos grandes centros urbanos

Conservao das Inibe a produo de espcies

hormnios

gua Livre de Poluentes

Interao entre os metais e a micrpila;

Injurias s membranas celulares; Grande potencial de oxireduo dos metais.

Deformidades celulares;
Deformidades nas estruturas corporais;

Grandes problemas morfologia e mobilidade espermtica; Formao de vacolos e deslocamentos mitocndriais Diminuio tamanho do flagelo e aumento cabea; Modificaes estruturais do DNA; Diminuio respirao e fornecimento de ATP natao dos espermatozides Mais susceptveis que os ovcitos.

Diferenciao sexual

Transmisso DNA modificados/ proles

Injrias no aparelho reprodutivo

Hermafrodita 1 s peixe f : m

PERSPECTIVAS FUTURAS
Mecanismos reprodutivos complexos envolvem formao dos GAMETAS DE PEIXES,
revelar etapas do conhecimento em um futuro prximo

por intermdio de estudos bsicos e aplicaes tecnolgicas,

contribuindo tambm, para o crescimento da aqicultura industrial.

A tecnologia traz benefcios e riscos, por isso deve ser bem administrada,

Obrigado