COLIBASILOSIS NEONATAL Jos Alejandro Snchez Leyva Es una diarrea causada por Escherichia coli.

Es observada mas comnmente en cerdos de 0 -4 dias de edad y es causada por ETEC (Escherichia coli enterotoxigenica) Es una enfermedad econmicamente importante en cerdos. Escherichia coli es el agente eteoligico mas importante en diarrea neonatal y pos destete HISTORIA El gnero Escherichia lleva el nombre del pediatra alemn Theodor Escherich (1857-1911). Se clasifica con la familia Enterobacteriaceae, que consiste varillas facultativamente anaerobias gram-negativas. Los primeros trabajos en la dcada de 1960 y 1970 elucidado los mecanismos patognicos de la diarrea por E. colineonatal inducida, y dio lugar a la elaboracin de vacunas maternas que controlan eficazmente esta forma de la enfermedad.

ETIOLOGIA Escherichia coli son gram-negativas, varillas flageladas peritricas de longitud variable y con un dimetro de aproximadamente 1 m. Las colonias en medios slidos alcanzan su tamao completo en el plazo de 1 da de incubacin y varan entre suave y spera o mucoide. Escherichia coli enterotoxignica (ETEC) y edema enfermedad Escherichia coli (EDEC) aislados de la produccin de la F4 (K88) o adhesina F18 y ciertas cepas productoras F6 (987P) son hemoltica en agar sangre. El resto de ETEC de cerdos son no hemolticas. Una amplia gama de medios de comunicacin selectiva est disponible para el crecimiento de E. coli. CLASIFICACIN Hay varias maneras de subdividir la especie en tipos. Hasta la fecha, los serotipos han mostrado el mejor aso-ciacin con ciertos rasgos de virulencia. Serotipificacin completa incluye la determinacin de O (somtico), K (capsular o microcapsular), H (flagelar) y F (antgenos fimbriales). A diferencia de las salmonelas, slo un pequeo porcentaje de aislados de E. coli son tipificable con antisueros disponibles, desde el serotipado se ha limitado a los aislados de patogenicidad demostrado o se sospecha. En la actualidad, al menos 175 O, 80 K, 56 H, y ms de 20 antgenos F son reconocidos oficialmente.

El trmino "patotipo" ahora se utiliza para identificar los tipos de E. coli sobre la base de su mecanismo de virulencia como se indica por la presencia de factores de virulencia que caracterizan la forma en que la enfermedad es causada. Este sistema identifica amplias clases de E. coli patgenas, tales como ETEC; Escherichia coli productor de toxina Shiga (STEC), que incluye el EDEC y Escherichia coli enterohemorrgica (EHEC), Escherichia coli enteropatgenas (EPEC) y Escherichia coli patgena extraintestinal (ExPEC) . La deteccin de los factores de virulencia es importante para la identificacin de especies patgenas de E. coli y el trmino "virotype" ahora se utiliza para referirse a la combinacin de estos factores para un aislado particular. La siguiente tabla resume patotipos importantes de E. coli, sus factores de virulencia y serogrupos comunes, as como enfermedades que causan.

AGENTE ETIOLGICO DE COLIBACILOSIS NEONATAL

Diarrea neonatal asociada con Escherichia coli enterotoxigenica . ETEC usualmente produce solo la enterotoxina termoestable STa y puede tener una o mas de las fimbrias F4 (K88), F5(K99), F6 (987P), y F41. De estas la ETEC positiva -F4 (K88) que frecuente pertenecen a los serogrupos O149, O8, O147 y O157. ETEC positiva a F5( K99), F6(987P) y F41 a serogrupos O8, O9, O64 y O101 respectivamente. IMPACTO EN SALUD PBLICA ETEC no es zoonotica pero sin embargo ciertas E. coli de STEC subgrupo EHEC, particularmente EHEC O157: H7, O26, y otros serogrupos non- O157, puede estar

presente espordicamente en los intestinos y heces de cerdos normales, y son zoonticos, ya que pueden causar diarrea con sangre,coltis hemorrgica y/o el sndrome urmico hemoltico en humanos infectados a travs de alimentos o agua contaminada con heces de animales. Los cerdos no se consideran una fuente importante de EHEC O157, la tasa de prevalencia es generalmente muy baja. El ganado vacuno y otros rumiantes son el principal reservorio de EHEC zoontica. Escherichia coli del ecosistema intestinal, tanto comensal y patgena, puede adquirir resistencia a los antimicrobianos despus de su administracin ya sea en la alimentacin como promotores del crecimiento o como tratamiento para las infecciones bacterianas, va oral o por inyeccin. Estas cepas, cuando son resistentes a los antimicrobianos- los cuales son tratamientos preferidos para infecciones graves y por las cuales las alternativas disponibles son limitadas en medicina humana, como las cefalosporinas de tercera generacin (por ejemplo, ceftiofur) y las fluoroquinolonas (por ejemplo, enrofloxacina) - constituyen una amenaza para la salud pblica cuando entran en la cadena alimentaria.

EPIDEMIOLOGIA La infeccione por Escherichia coli ocurre en los pases industrializados y en vas de desarrollo, en los climas templados, subtropicales y tropicales. Diarrea (ETEC neonatal, ETEC posdestete y EPEC), ED debido a EDEC, infecciones sistmicas por ExPEC, CM, y UTI ocurren en cerdos en todos los pases donde los cerdos se cran comercialmente. El hbitat primario de E. coli en el cerdo es el tracto gastrointestinal. La flora E. coli de cerdos individuales es extremadamente complejo, mas de 25 cepas estn identificados en el tracto gastrointestinal de un individuo. Cepas dominantes cambian a intervalos de 1 da a varias semanas, lo que lleva a las oleadas sucesivas de cepas dominantes. La proliferacin de E. coli tiene lugar principalmente durante el paso por el intestino delgado, el nmero de bacterias permanece constante desde el leon al recto. El numero promedio en intestino grueso es alrededor de 10 7 CFU por gramo de contenido; sin embargo E. coli contribuye con menos del 1 % de la cuenta bacteriana. Fuera del intestino, E. coli se encuentran en alimentos , agua, el suelo contaminados con heces y el medio ambiente de la granja de los cerdos. Sobrevive mucho tiempo en el medio ambiente contribuye las bajas temperaturas y suficiente agua disponible, entre otros factores. En las muestras de lodos, E. coli porcino cepa O139: K82 se mantuvo viable durante ms de 11 semanas. La propagacin de E. coli patogena se presume que se produce a travs de

aerosoles, piensos, otros vehculos, cerdos y posiblemente otros animales. La transmisin area entre los cerdos en jaulas de alambre de 1,5 m de distancia se observ en varias ocasiones en los experimentos de transmisin con cepa ETEC positiva- F4 (K88). Las infecciones intestinales causadas por ETEC, EDEC y EPEC se consideran contagiosas. La misma cepa generalmente se encuentra en muchos cerdos enfermos y a menudo en lotes consecutivos de cerdos. En contraste, las infecciones causadas por ExPEC y E. coli, que causan CM y UTI, no se comportan como las enfermedades transmisibles. La limpieza de rutina y desinfeccin son generalmente insuficientes para romper el ciclo de la infeccin por E. coli. En condiciones experimentales la transmisin puede prevenirse por estrictas medidas higinicas. Estos son solo datos limitados sobre la susceptibilidad de los aislados de E. coli a los desinfectantes usados comunmente. Segn un estudio dans, E. coli fecal aslado de la ganadera no parecen haber desarrollado resistencia al cloruro de benzalconio, H2O2, clorhexidina, formaldehdo, o cloruro de zinc. PATOGENESIS La infeccin depende de la bacteria causal, condiciones medioambientales y ciertos factores del hospedero. El cerdo recin nacido al salir del utero y antes de alcanzar las tetas de la cerda se encuentra con un medio ambiente contaminado resultando en la ingestin de los microbios de la flora intestinal de la cerda. E coli es uno de los primeros microorganismos que se encuentran en los neonatos a pocas horas de nacer. En condiciones de pobre higiene o en un sistema de partos continuos, la acumulacin del patgeno E. coli en el ambiente puede conducir a un brote de diarrea neonatal por E. coli. El calostro contiene factores bactericidas no especficos y anticuerpos especficos (IgG e IgA) que inhiben la adherencia de E. coli patgena en el intestino. Si la madre no ha sido vacunada o expuesta a E. coli patgena presente en el ambiente de los lechones, los anticuerpos especficos no estarn presentes en el calostro y los lechones sern susceptibles a la infeccin. Igualmente si los lechones no han tenido acceso al calostro, debido a una lesin o inhabilidad para competir o debido a agalactia o tetas insuficientes de la cerda, estos son ms susceptibles a infectarse. La temperatura ambiental en la sala de partos es tambin impactan en la severidad de la enfermedad. En cerdos mantenidos a temperaturas a bajo de 25 C la actividad peristltica intestinal se reduce bastante y el paso de bacterias y anticuerpos protectores a travs del intestino es retrasado. El incremento en el

nmero de E coli patgena en el tracto intestinal de estos cerdos resulta en una diarrea muy severa que en cerdos mantenidos a 30C. Las fimbrias se adhieren a receptores especficos en la membrana celular de clulas del epitelio intestinal y en los receptores especficos y no especficos de la capa mucosa del epitelio. ETEC que afecta a neonatos produce una o mas de estas fimbrias F4 (K88) la cual coloniza el yeyuno posterior y el ielon y F5 (K99) , F6 (987P), F41 las cuales por lo general colonizan el yeyuno posterior y el ileon. Los lechones son mas susceptibles a a la infeccin con ETEC positiva a F5 (K99) y F6 (987P) durante los primeros dias de vida y posteriormente llegan a ser resistentes. Esto podra deberse ala reduccin de receptores presentes en el epitelio intestinal con la edad. Ciertos cerdos no tienen receptores de adhesinas F4 en clulas del epitelio intestinal y estos son resistentes a la infeccin por ETEC F4-positiva. Esta resistencia es heredada. ETEC se adhiere a la mucosa intestinal y produce entero toxinas que cambian el flujo de agua y electrolitos del intestino delgado y puede conducir a diarrea si el exceso de fluido del intestino delgado no es absorbido en el intestino grueso. La excesiva secrecin conduce a la deshidratacin acidosis metablica y eventualmente la muerte. STa es una protena no inmunogenica con un peso molecular de 2000. STa es activa en el intestino de ratones infantes y lechones jvenes de menos de 2 semanas de edad pero es menos activa en cerdos adultos. Esto podra deberse ala concentracin de receptores intestinales con la edad. STa se liga a receptores guanilatociclasa de las clulas del epitelio intestinal en el borde de vellosidades y cripta clulas del epitelio intestinal y activa la guanilato ciclasa, que estimula la produccin de GMP cclico. Altos niveles de GMP inhiben el sistema de cotransporte para sodio y cloro, y reduce la absorcin de electrolitos y agua del Intestino. en el borde en cepillo de las clulas epiteliales intestinales de las vellosidades y las criptas y activa la guanilato ciclasa, que estimula la produccin de monofosfato de guanosina cclico (GMPc), que conduce a la secrecin de fluidos y electrolitos. Basada en la concentracin y afinidad de los receptores de Sta, el yeyuno posterior parece ser el sitio principal de la hipersecrecin en respuesta a STa

SIGNOS CLINICOS

Diarrea neonatal puede observarse por primera vez de 2-3 horas despus del nacimiento y puede afectar uno o algunos cerdos de toda la camada. Camadas de cerdas jvenes son frecuentemente mas afectadas que las de cerdas multparas. La morbilidad en una piara afectada es muy variable. El promedio es de 30 -40 %, pero puede ser alto hasta 80% en algunas piaras. La mortalidad puede llegar a 70% en camadas afectadas. En baja proporcin de cerdos la infeccin puede ser rpida que la muerte ocurre antes del desarrollo de la diarrea. El primer aviso son charcos de heces en el suelo. Los animales siguen mamando durante los primeros estadios, pero pierden el apetito a medida que la enfermedad avanza. La temperatura suele ser normal o subnormal La diarrea puede ir de leve con nula evidencia de deshidratacin a clara , acuosa y profusa. Las heces varan en color de clara a blancuzca , color amarillo a parduzco varios tonos marrones. En brotes muy severos una pequea proporcin de animales puede vomitar. En casos severos el 30-40 % del peso corporal puede perderse y resultar en signos de deshidratacin. La musculatura abdominal puede ser flcida, los cerdos apticos con los ojos hundidos y la piel puede estar cianotica en color y apergaminada en textura. La perdida de fluidos y peso corporal resulta en la exageracin de prominencias oseas. El padecimiento es progresivo; la diarrea y la deshidratacin continua, los lechones se debilitan mucho y permanecen recostados lateralmente con dbiles movimientos de remo en las extremidades. En pocas horas aparecen muy deshidratados y encogidos y suelen morir alas 24 horas de haber aparecido los signos. En casos muy crnicos o menos severos el ano y el perineo puede estar inflamado por contacto con el material fecal alcalino. Los cerdos con deshidratacin menos graves pueden continuar bebiendo y, si se trata adecuadamente, recuperarse con slo efectos mnimos a largo plazo. LESIONES Pocas lesiones especificas son observadas. Grandes lesiones pueden incluir deshidratacin, dilatacin del estomago (el cual puede contener leche sin digerir) infartos venosos en la curvatura mayor del estomago y dilatacin del intestino delgado con alguna congestion de la pared del intestino delgado. Microscpicamente capas de E. coli son observadas adheridas in parches sobre las clulas de la mucosa epitelial de la mayor parte del yeyuno e ileon en el caso de aislados de ETEC positivo -F4(K88) y en el yeyuno posterior y /o el ileon en el caso de otra ETEC. Bacterias adheridas pueden encontrarse en las criptas de Lieberkuhn, o mas frecuentemente cubriendo las criptas y las puntas de las vellosidades. Otras lesiones a veces observadas incluyen congestion vascular en

la lamina propia con hemorragias dentro del lumen intestinal, numero de neutrfilos y macrfagos incrementados en la lamina propia y leve atrofia de vellosidades. DIAGNOSTICO DIFERENCIAL La diarrea neonatal causada por ETEC se debe diferenciar de otras causas infecciosas comunes de diarrea, incluyendo Clostridium difficile y perfringens tipo A y C, virus de la gastroenteritis transmisible (TGEV) , grupos de rotavirus A, B, y C , y PRRSV. En lechones de 5 das y de ms edad, Isospora suis tambin debe ser considerado. Puede ser til para determinar el pH fecal. Como ETEC produce heces alcalinas, mientras que las diarreas de malabsorcin producidas por virus TGEV y los rotavirus producen heces cidas. DIAGNOSTICO El diagnostico de ETEC neonatal es basado en los signos clnicos, lesiones microscopias y la presencia de bacterias en forma de bastn gramnegativos colonizan la mucosa del intestino delgado. La colonizacin puede ser visualizada en tejidos fijados en formalina, embebidos en parafina, por histopatolgia de rutina. o los organismos de E. coli pueden ser definitivamente identificados y se visualizados mediante inmunohistoqumica o en secciones congeladas usando inmunofluorescencia indirecta. Este diagnstico se ve reforzada por el aislamiento de hisopos rectales o intestinales de E. coli del serogrupo apropiado o, ms importante, de la posesin de factores de virulencia. Utilizar el medio de transporte de Stuarts. Tambin se utiliza ELISA; PCR . PREVENCION Y CONTROL En los lechones recin nacidos, el tratamiento con antibiticos puede ser de forma individual o camada, por va oral o inyeccin parenteral. Es importante confirmar el diagnstico de la infeccin por E. coli para el cultivo y las pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos, ya que la sensibilidad a los antimicrobianos vara mucho entre los aislados de E. coli. La resistencia in vitro de aislados de E. coli va de una amplia gama de agentes antimicrobianos se ha incrementado dramticamente en los ltimos aos. Antimicrobianos comnmente utilizados son la ampicilina, apramicina, ceftiofur, gentamicina, neomicina, espectinomicina, furizolidone y las sulfonamidas potenciadas. Un enfoque alternativo para el tratamiento de la infeccin por E. coli entrica es el uso de bacterifagos, un enfoque que ha sido experimentalmente exitosa pero no se ha aplicado extensamente en el campo.

Terapia de fluidos, que consiste en soluciones de reposicin de electrolitos que contengan glucosa administrada por va oral, es til para el tratamiento de la deshidratacin y acidosis. Los frmacos que inhiben los efectos de secrecin de enterotoxina, tales como clorpromazina y sulfato de berberina, pueden ser tiles para el tratamiento de la diarrea, aunque muchos de estos frmacos tienen efectos secundarios indeseables. El uso de tales frmacos antisecretores como bencetimida y loperamida, solo o en combinacin con agentes antibacterianos, tambin se ha sugerido. Un programa para la prevencin de la infeccin por E. coli entrica debe estar dirigido a la reduccin del nmero de E. coli patgenos en el medio ambiente, una buena higiene, el mantenimiento de las condiciones ambientales adecuadas, y la provisin de un suministro abundante de calostro al nacer y un alto nivel de inmunidad. Bioseguridad estricta se debe utilizar para controlar la introduccin de diferentes de E. coli virotypes u otros agentes infecciosos en la piara. Los animales en el hato tendrn poca inmunidad a los antgenos fimbriales de E. coli con los que no han tenido contacto. La buena higiene en el rea de paricin conduce a una reduccin en los nmeros de E. coli presentados a los lechones a un nivel que es capaz de controlar a travs de su propios mecanismos de defensa. Las parideras deben estar completamente limpias y desinfectarse entre camadas . Un sistema todo dentro-todo fuera de parto con la desinfeccin a fondo de la sala de parto entre lotes reducir la poblacin de E. coli en el medio ambiente. Un ambiente seco, caliente reduce la humedad disponible para la supervivencia y el crecimiento de E. coli. Esto es en gran parte afectada por las tasas de ventilacin, aunque si la temperatura ambiente es demasiado alta, las cerdas tienden a tratar de difundir el agua sobre su zona de descanso para refrescarse, frustrando con ello otros procedimientos de higiene. La cerda debe estar a una temperatura de aproximadamente 22 C, lo que exige una zona de fluencia ms caliente para los lechones. Es importante asegurarse de que los lechones jvenes se mantienen a una temperatura constante de 30-34 C. La vacunacin materna ha sido una de las maneras ms eficaces de prevencin de la diarrea por ETEC neonatal en lechones. Una de las primeras tcnicas de vacunacin consisti en tomar los pequeos contenidos intestinales de un cerdito con diarrea, el cultivo en leche, y la alimentan con el cultivo a las cerdas preadas, generalmente cerca de un mes antes del parto Esta tcnica es efectiva, lo que

confiere una inmunidad duradera en todo el amamantamiento perodo, y todava se utiliza, en particular en los Estados Unidos. Las vacunas disponibles comercialmente comnmente utilizadas se aplican por va parenteral y pueden ser bacterinas completas de clulas muertas o vacunas fimbriales purificadas. Ambos tipos de vacunas parecen funcionar igualmente bien. Las bacterinas contienen generalmente cepas que representan a los serogrupos ms importantes y que producen los antgenos fimbriales F4 (K88), F5 (K99), F6 (987P), y F41 . Por lo general, se administran por va parenteral a las 6 semanas y 2 semanas antes del parto. En los casos en que la vacunacin es ineficaz, es importante identificar los serotipos involucrados para su posible inclusin en una bacterina autgena. Adems de la caracterizacin de estas cepas puede identificar nuevas variantes o adhesinas fimbriales importantes en la patognesis de la diarrea por ETEC.

BIBLIOGRAFIA 1. Zimmerman, J. J. et al. 2012. Diseases of swine.10th edition. Iowa, USA. Ed. Wiley-Blackwell. 2. Smith, W. J.Taylor, D.J, Penny, R.H. 1990.Atlas en color de patologa porcina.2nd Edition.Ed McGraw-Hill Interamericana. 3. http://www.3tres3.com/diarreas-en-lactacion/colibacilosis_4335/ 4. http://www.engormix.com/MA-porcicultura/sanidad/articulos/colibacilosisporcina-neonatal-t4142/165-p0.htm