Deteccin de glucosa en lentes de contacto: del banco encabezan al paciente

En los pocos aos pasados hemos visto el desarrollo de nuevas tecnologas para la supervisin continua y no invasiva de glucosa fisiolgica, como el GlucoWatch1, la piel que siente la glucosa como los accesos basados en un tatuaje que siente glucosa !n acercamiento que se diferencia del pensamiento de corriente est" basado en la determinacin y la supervisin de glucosa de rasgn, que es conocida para rastrear la glucosa de sangre con un tiempo de retraso de un #$ minuto apro%imado, usando lentes de contacto disponibles e incoloras Estas lentes de contacto pueden ser llevadas por los diab&ticos que pueden ver cambios de su color de lentes de contacto u otras propiedades a base de fluorescencia, dando a una indicacin de rasgn y niveles de glucosa de sangre Introduccin En los 'ltimos 1($ aos, la atencin significativa ha sido dado que el desarrollo de fisiolgicas de glucosa de vigilancia de biotecnologas ) 1,*,# , +,(,, ,- . / , 1$ ,11 . *+ 0 Esto es porque un aspecto importante de la gestin de la diabetes implica el control estricto de los niveles de glucosa en sangre, as como para gestionar la ingesta de alimentos y la dosificacin y tempori1acin de la inyeccin de insulina 2as pruebas para determinar la concentracin de glucosa en suero requieren tpicamente e%traccin de sangre mediante una t&cnica invasiva , por lo general una aguja u otro dispositivo que causa la puncin arterial o venosa 3ctualmente, millones de diab&ticos se quedan con muy pocas alternativas , salvo para e%traer sangre varias veces al da para determinar sus niveles de a1'car en la sangre 4ara este fin , muchas tecnologas se han desarrollado en los 'ltimos *$ aos en un intento de proporcionar una tecnologa que promete monitori1acin de la glucosa fisiolgica tanto no invasiva y continua Estos han incluido el uso de la espectroscopia de infrarrojo cercano ) 1+,1( 0 , rotacin ptica ) 1,,1- 0 , y colorim&trico ) 15,1/ 0 y la deteccin de fluorescencia ) *$.*+ 0 , por nombrar slo unos pocos 6ecientemente, hemos visto el lan1amiento de la nueva Gluco. 7nspeccin1 , que fue aprobado por la 893 en *$$1 y es el primer paso hacia el control continuo y no invasivo de la glucosa fisiolgica :in embargo, en de usar este reloj a base de sensores de glucosa de mueca , se recomend tambi&n que el monitoreo de la glucosa por otra t&cnica de e%traccin de sangre se utili1a de ve1 en cuando , lo que en nuestra opinin, ambas socavan el enfoque y objetivo , as como aumentando potencialmente el cuidado del paciente y el suministro costo diab&tica ;tras tecnologas emergentes incluyen parches para la glucosa de vigilancia de la piel , bombas de insulina , junto sensor de glucosa implantable y la e%traccin de sangre del laser, que se considera menos dolorosa que la puncin en el dedo con una lanceta o aguja ) *( 0 :in embargo , todava hay una necesidad de nuevas tecnologas que son verdaderamente no invasiva y

continuas <on este fin , hemos visto recientemente el desarrollo de lentes de contacto de la glucosa con sensores basados en fluorescencia <uando se usa por los diab&ticos , que a menudo requieren correccin de la visin en cualquier caso , estas lentes potencialmente pueden monitorear los niveles de glucosa de l"grimas , que son conocidos para controlar los niveles de glucosa en sangre = 8igura 1 > Estas lentes de contacto incorporan nueva fluorescent monosac"rido un tipo seali1acin del "cido brico que
Figure 1

contiene sondas =8igura * >, las qumicas y fotofsicas 'nicos rasgos de estas sondas de lentes obst"culos ambientales, tales como el p? y la polaridad superar 6ecientes halla1gos muestran que este enfoque podra de hecho ser adecuado para la monitori1acin no invasiva continua de la glucosa desgarro en el rango de concentracin *($ m@ a ( m@ , que es apro%imadamente die1 veces menor que el intervalo de concentracin que se encuentra en la sangre diab&tica

Ex

Em

Ex

Em Ex

Em

Viabilidad del lente y el diseo de la sonda En los estudios de lentes de contacto primero se consider necesario comprender el entorno de lentes de contacto, con respecto al p?, polaridad y posibles interferentes, antes se podra desarrollar cualquier lente 8luor.escence o de contacto a base de un sistema colorim&trico de deteccin )*,0 2entes comercialmente disponibles se probaron utili1ando "cido bornico bien caracteri1ado que contiene las sondas, en el que el grupo "cido bornico es bien conocido por monosac"ridos de quelato de )*-.#+0 y por lo tanto proporciona un posible mecanismo sensible a la glucosa 9ichas sondas se han utili1ado en otras tecnologas desarrolladas para controlar los niveles de glucosa 2as sondas pueden detectar una amplia gama de restos de a1'car y el grado de quelacin puede monitori1arse usando fluorescencia, colorim&trico, 8luor. escence o la polari1acin de m&todos basados )1.1#0 Estudios de viabilidad de lentes AdopadoA utili1an sondas de "cido.boronico que estando disponibles producen una respuesta deficiente de glucosa en efecto, que se atribuy al p? ligeramente "cido =,,*> y la polaridad.metanol como dentro de la lente de contacto )*,, #(0 Esto no era demasiado sorprendente, dado el hecho de que estas sondas fueron diseadas originalmente para detectar a un p? fisiolgico de -,+, las sondas que tienen tpicamente valores de pBa alrededor de / 4or lo tanto, para obtener una respuesta de la glucosa notable en el polmero de la lente de contacto, que era necesario disear nuevas sondas con valores de pBa significativamente reducidos de a1'car unida =8igura *> 2as sondas tambi&n tuvieron que ser sensibles a las concentraciones muy bajas de glucosa en l"grima =($$ m@ para una persona sana se eleva a varios milimolar para los diab&ticos, pero recordando que los niveles de glucosa en la sangre de una persona sana son die1 veces m"s alto que el nivel de rotura )#,, #-, #5,#/0> El pBa de "cido fenil bornico es conocido por ser sintoni1able con los sustituyentes adecuados )+$,+10, por ejemplo, un grupo aceptor de electrones reduce el pBa de la forma de a1'car enla1ado, mientras que un grupo donador de electrones la aumenta 4or consiguiente, la interaccin entre el nitrgeno cuaternario de los moi.dades ,.metil.y metho%yquinolinium, y el grupo "cido bornico puede ser utili1ado para reducir el pBa de la sonda En este sentido, las limitaciones ambientales de la lente de contacto se trataron mediante la sntesis de dos nuevas clases de "cido bornico isom&rica que contienen sondas =sondas de ocho en total, 8igura *> en el que el espaciamiento entre los restos que interact'an =es decir, el nitrgeno cuaternario de la , . metil.o Grupo ,.metho%yquinolinium y el grupo "cido bornico> se variaron Estas sondas han promovido una mayor comprensin de los mecanismos de deteccin y habilitado

El

desarrollo

de

un

nuevo

mecanismo

de

seali1acin

de

la

glucosa

Cmo perciben estas nuevas sondas de glucosa y traducir esto a una seal que puede ser controlado? 4ara entender esto, es importante considerar la figura #a El grupo de "cido bornico es un "cido de 2eCis deficiente en electrones que tiene macin 2a forma aninica del "cido bornico , formado en la presencia de glucosa , se caracteri1a por un "tomo de boro m"s sp# . hibridado rico en electrones con una geometra . tetrahe 9ra7 El cambio en las propiedades electrnicas y la geometra en el "tomo de boro induce los fluorescencia cambios espectrales de las sondas Dras la adicin de glucosa se aumenta la densidad de electrones en el "tomo de boro , facilitando la neutrali1acin parcial del nitrgeno cuaternario cargado positivamente del resto quinolina .nio Esta interaccin ha sido denominado un E mecanismo de neutrali1acin de carga . estabili1acinE ) +$,+1 0 , y una representacin esquem"tica de este mecanismo con respecto a la glucosa de unin F de deteccin se ilustra en la 8igura #a Reduccin del p a de las sondas : !ente compatibilidad medioambiental

8iguras #G y < muestra los espectros de emisin de H . = boronoben1yl > ., metho%yquinolinium bromuro de = o. G@;IG3 > y bromuro de H . = boronoben1yl > . , . metilquinolinio = o. G@IG3 > en medios tamponados que el p? sea aument de # a 11 2os espectros de emisin del "cido bornico que contiene sondas tpicamente muestran una disminucin constante de la intensidad de fluorescencia al aumentar el p? 4or el contrario , los compuestos de control , = H.bencil . , . meto%i . quinolinio bromuro de ) G@;I 0 y H . bencil. , . metil . quinolinio bromuro de ) <<@ 0 > que no tiene grupo "cido bornico , mostrar ning'n cambio en la intensidad de fluorescencia 2os valores de pBa aparente obtenidos a partir de las curvas de valoracin que se muestran en las 8iguras #G y < se dan en la 8igura * 3qu podemos ver valores de pBa considerablemente reducidos para el nuevo "cido fenilbornico contiene fluorforos en medios tamponados , en comparacin con las sondas de "cido bornico tpicos reportados en la literatura ) *,+,, , 5,1$ 0 , que son tpicamente en el rango de 5 ./ El nitrgeno cuaternario del n'cleo quino . 2inium no slo reduce el pBa de las sondas , pero tambi&n sirve para estabili1ar la boronatediester formado tras la complejacin del a1'car ) +$,+1 0 Esto a su ve1 se cree que aumenta la afinidad de las sondas para el a1'car 4or lo tanto , la reduccin de pBa de a1'car enla1ado de las sondas , junto con su mayor afinidad de la glucosa , es una nocin m"s atractivo para aplicaciones de lentes de contacto sensible a la glucosa , tomando nota de los resultados ante.riores de un p? de la lente alrededor de ,,* ) *, 0 Deteccin de glucosa a base de lentes de contacto 2as figuras +a y G muestra la respuesta de o. G@;IG3 J y lentes de contacto dopadas . ;. G@IG3 , respectivamente , en creciente concentraciones de glucosa 3l igual que con las mediciones basadas en soluciones reportados por Gadugu y colegas ) *( , #,,#- , #5,#/ 0 , las sondas muestran una disminucin en la intensidad de 8luorecencia Esto se

ha atribuido a la complementacin de glucosa con "cido bornico y el mecanismo de neutrali1acin de la carga posterior se describe anteriormente ) +$,+1 0 2os 7$ F 7 parcelas, donde 7$ y yo son las intensidades de fluorescencia en ausencia y presencia de a1'car , respectivamente =8iguras +c , d>, muestran la respuesta normali1ada como en comparacin con la respuesta de las lentes en la ausencia de a1'car <omo se observ en la solucin de ) +$,+1 0 , fructosa tena una respuesta mayor , lo que refleja la mayor afinidad de los derivados de "cido bornico de mono. fenilo para fructosa :in embargo , en los rangos de baja concentracin de a1'car = K a1'car * m@L figuras +e, f > la respuesta hacia ambos a1'cares era comparable ) #,.#/ 0 M el tiempo de respuesta del /$N =es decir, el tiempo de la seal de fluorescencia para cambiar por /$ N del valor inicial > fue de 1$ minutos 2as diferencias en la respuesta hacia la glucosa para los ismeros mostrados en la figura * tambi&n se observo en los lentes =8iguras +e , f >, donde se inform de m. G@;IG3 tener la mayor respuesta entre esta clase de sondas 9e las 8iguras +e y 8 , podemos ver claramente una respuesta notable en la lente hacia a1'cares , con p. G@IG3 que muestra un cambio de la seal de fluorescencia mayor que *$ N con glucosa tan poco como * m@ Esto no fue inesperado , y se e%plica simplemente por el pBa de las sondas que son K - , las sondas de ser compatible con el medio ambiente lente ligeramente "cido 2as constantes de disociacin = B9 > obtenidos para las seis sondas con la glucosa y la fructosa dentro de los lentes de contacto tambi&n se han publicado recientemente ) #,,#- , #5,#/ 0 !i"iviacin de la sonda # la vida $til y los inter%erentes Ho todos los cambios en la fluorescencia ser" el resultado de las interacciones con los a1'cares , y problemas tales como la li%iviacin podran reducir la intensidad :e inform de que hasta un cambio de 5 N en la intensidad de fluorescencia se pudo observar , atribuy a la li%iviacin de la sonda de la lente , para la clase G@;IG3 de sondas , con muy poco cambio despu&s de apro%imadamente *( min ) +* 0 4or el contrario , las sondas G@IG3 muestran un grado mucho mayor de li%iviacin durante el mismo perodo de tiempo y en condiciones id&nticas 9ado que las sondas G@IG3 tpicamente muestran una mayor respuesta hacia la glucosa en la lente , esto sugiere que las sondas G@IG3 pueden ser m"s accesibles dentro de la lente de las sondas G@;IG3 ) +* 0 :e obtuvieron resultados similares en #5 5< = temperatura interna > , pero con una tasa de li%iviacin diferente ) +* 0

:e llevaron a cabo mediciones, el volumen de fluido de la lente e%terior que rodea la lente de contacto se encontr que era no fluorescente que indica que tinte no haba li%iviado de la lente durante las mediciones de glucosa de deteccin reales ) #,,#- , #5 , #/ 0 <abe sealar que aunque <?E@7: .ses est"n disponibles para unir covalentemente las sondas dentro del polmero de lentes de contacto , lo que eliminara cualquier li%iviacin en absoluto , que es una consideracin de diseo importante de este enfoque que las lentes se mantuvieron sin modificar , de manera que sus caractersticas fisiolgicas F

biocompatibilities y par"metros pticos permanecen sin cambios El m&todo descrito aqu se dirige a reducir los futuros costos de rediseo de la lente para la industria mediante el uso de simples dopaje sonda 3l igual que con todos los sensores es importante considerar los efectos de los interferentes potenciales y sensor de la vida 'til de la respuesta de trabajo del dispositivo Oa hemos comentado anteriormente en la respuesta de las sondas hacia la fructosa , principalmente debido a su mayor afinidad conocida para el resto de "cido bornico ) *,+,, , 5,1$ 0 :in embargo , la concentracin de fructosa en la sangre es 1$ veces menor que la glucosa ) *, , #,,#- , #5,#/ 0 , una relacin que tambi&n se cree que ocurre en las l"grimas ) *, 0 4or lo tanto , la fructosa no se piensa que es un interferente importante en l"grimas , pero simplemente se muestra aqu para colocar las tendencias de unin en conte%to :in embargo , las l"grimas son una me1cla compleja de protenas y otros analitos , tales como sodio = 1*$.1-$ m@ > , potasio = ,.*, m@> y cloruro de = 1$$ m@ > ) +* 0 2as nuevas sondas de lentes de contacto se han probado con diversos haluros acuosas , dado que el contador de cationes sodio y potasio son conocidos por ser iones de metales no de e%tincin de los fluorforos comunes 2as sondas G@;IG3 est"n modestamente e%tingui mediante cloruro, con el estado de equilibrio constantes :tern. Polmer )+#0 en el rango de 1-$ a 15* @ 1 L las sondas G@IG3 tienen constantes de enfriamiento significativamente menores en el rango de 1-.++ @ 1 Este resultado se e%plica simplemente por el tiempo de vida m"s corta de las sondas G@IG3 en comparacin con las sondas G@;IG3 , y la probabilidad de un encuentro de iones cloruro del estado e%citado ) #5,+# 0 las sondas G@IG3 tpicamente muestran una mayor respuesta hacia la glucosa , as como ser el menos perturbado por cloruro acuosa En cualquier caso , las correcciones simples en la seal de fluorescencia se pueden hacer f"cilmente para tener en cuenta la interferencia de cloruro en la respuesta de la glucosa = v&ase la 8igura 1 > 4untos sensores sobre la superficie de la lente podran contener un compuesto de cloruro de referencia o de hecho otra sonda sensible a la glucosa y cloruro <on respecto a la lente de contacto . vida de almacenamiento sensible a la glucosa , las lentes que haban sido dopados , li%iviados y almacenados durante varios meses , tanto en h'medo como en seco , dio los resultados de a1'car de deteccin id&nticas , lo que indica no hay polmero lente interacciones de fluorforo m"s de este perodo de tiempo y no hay sondear la degradacin !os %uturos desarrollos basados en esta tecnolog&a ?emos descrito aqu la ra1n de diseo y prueba de sondas fluorescentes que son compatibles con el uso disponible en el mercado , todos los das las lentes de contacto desechables, que ya se han evaluado y optimi1ado con respecto a la correccin de la visin y la permeabilidad al o%geno Esta investigacin ha permitido que el primer prototipo a reali1ar <on respecto a la glucosa un monitoreo por parte de este enfoque, se especula abajo en varias mejoras en el futuro a esta tecnologa

!entes de contacto transparente o de color ? @uchos fluorforos que contienen "cido bornico absorben en el espectro visible ) *,+,, , 5,1$ 0 , lo que introducir color en una lente de dopado 3unque las lentes de colores son atractivos para algunas personas , como los deportes o incluso accesorios de moda, la mayora de los lentes de contacto usados hoy son claras 2as lentes incoloros descritos aqu son por lo tanto ideales en este sentido !na desventaja de estas lentes , sin embargo , es el requisito para una e%citacin y el dispositivo de deteccin , como se muestra en la 8igura 1 !na mejora de esta tecnologa podra ser el uso de lentes de contacto de color que cambian de color en respuesta a la concentracin de desgarro y por lo tanto la glucosa en sangre Esto se puede lograr mediante la unin del estado fundamental de la glucosa a "cido bornico , lo que conducira a cambios posteriores en el espectro de absorcin de fluorforo !n paciente los usa simplemente podra mirar en un espejo y comparar el color con una franja de color precalibrado para evaluar el grado de hiperglucemia El color incluso podra ser determinado por un sobre . espectador , haciendo de esta tecnologa m"s atractiva para los padres de nios diab&ticos jvenes o para los cuidadores de las personas mayores 'untos sensores <omo se mencion brevemente anteriormente y se muestra en la 8igura 1 , puntos sensores sobre la superficie de las lentes de contacto pueden corregir las respuestas de seal para interferentes tales como cloruro acuosa 9e hecho, los puntos o bien podra ser visible para el usuario =auto . lectura > o legible por un dispositivo de control e%terno En este respecto los puntos sensores tambi&n podra ser utili1ado para determinar las concentraciones de m'ltiples analitos en 3dem"s de la glucosa , tales como sodio y potasio !os m(todos de deteccin 3unque los m&todos colorim&tricos simples es probable que sean los m"s f"ciles de introducir en el mercado , las metodologas de deteccin de otros fluorescencia , tales como la polari1acin , tiempo de vida y de deteccin radiom&trica , ofrecen muchas ventajas de deteccin espectroscpica sobre la intensidad mediciones simples descritos para la lentes hasta la fecha ) #( 0 4or ejemplo , las mediciones de toda la vida de fluorescencia y radiom&tricas son independientes de la intensidad o fluctuaciones en la lu1 ambiente de la habitacin de lu1 total Cmo estas lentes en comparacin con las tecnolog&as de deteccin de glucosa) e"istentes? <omo se mencion brevemente en la introduccin, hay muy pocos monitores de glucosa fisiolgicos verdaderamente no invasiva y continua para los diab&ticos en el mercado hoy 7ncluso el GlucoWatch1 no deja de tener sus limitaciones , pero tiene ventajas particulares en que las alarmas de nivel de glucosa en la historia pasada y son

caractersticas incorporadas El enfoque de la lente de contacto sensible a la glucosa , aunque poco probable que someterse a cualquier forma de ensayos clnicos para varios aos , sin embargo, es probable que sea un competidor futuro significativa a la GlucoWatch1 o m&todos basados pincharse el dedo de hecho en1im"ticas Esto se debe a que muchos diab&ticos requieren correccin de la visin y ya llevan bien lentes de contacto o gafas, la tecnologa es verdaderamente continuo y no invasivo , y los pacientes pueden simplemente ver sus propios niveles de glucosa o incluso ser evaluada por mirones <on la prevalencia de la diabetes en aumento, este nuevo enfoque es probable que sea una alternativa importante para el cuidado y manejo de la diabetes Conclusiones En los 'ltimos aos una serie de nuevas lentes de contacto de deteccin de glucosa han sido desarrollados por dopaje con sondas fluorescentes diseados estrat&gicamente en las lentes de contacto disponible en el comercio 2as sondas son totalmente compatibles con los nuevos lentes y pueden detectar f"cilmente los cambios de glucosa de hasta varios milimolares , apropiado para el rango de concentracin de glucosa l"grima de los diab&ticos = ie$ ( . ( m@ > ) *(,#,,#- , #5,#/,+* 0 2os lentes tienen un tiempo de respuesta de /$ N de apro%imadamente 1$ min , 2os lentes tienen un tiempo de respuesta de /$ N de apro%imadamente 1$ min , una evaluacin de "cido bornico que contiene sondas Dambi&n se recomend tambi&n a los lectores consultar las referencias citadas en el mismo 2o que permite el seguimiento continuo y no invasivo de glucosa ocular Esta es una mejora significativa sobre los m&todos en1im"ticos basado en el muestreo de sangre por pincha1o de dedo , con muchos diab&ticos actualmente pruebas de mala gana entre cuatro y seis veces al da 2a diabetes est" ampliamente reconocida como una de las principales causas de muerte y discapacidad en el mundo occidental , este nuevo enfoque de la lente de contacto dopado representa un notable paso hacia el control continuo y no invasivo de la glucosa fisiolgica 3dem"s , el enfoque de la lente de contacto es probable que sea el primero de una amplia gama de plataformas de sensores de lentes de contacto para el seguimiento de analitos de fluidos oculares 3 este respecto , las nuevas lentes de contacto para la determinacin de m'ltiples analitos de l"grimas , tales como lactato , sodio y potasio , pueden ser reali1ados , e incluso podran ser desarrollados para el control de la temperatura central usando m'ltiples agentes de transduccin en m'ltiples puntos sensores como se muestra en 8igura 1 8inalmente, en el cierre, aunque el pronstico para la diabetes ha cambiado poco en los # $$$ aos desde su primer informe en el 4apiro de Ebers en 1($$ antes de <risto ) 1 0 , los 'ltimos *$ aos ha visto avances significativos en el diagnstico clnico