Anlisis de Melazas

Los peces, segn su especie, presentan una capacidad diferencial para utilizar carbohidratos en su dieta, por lo cual se considera importante contar con un mtodo rpido para la determinacin de azcares totales disponibles. Reactivos:

Solucin de Fehling (modificada por Soxhlet): a. Disuelva 34.639g de Sulfato de Cobre 5H2O en agua destilada, afore a 500ml, filtre. b. Disuelva 173 g de tartrato de sodio y potasio 4.H2O y 50 g de Hidrxido de Sodio en agua destilada, diluya a 500 ml, deje reposar por 2 das y filtre a travs de asbesto preparado. Estndar de Azcar invertida. Prepare una solucin stock adicionando 5ml de HCL (Sp. g 1.18) a 9.5g de sacarosa en solucin y diluya a 100ml con agua destilada. Despus de almacenar por 2 das a temperatura ambiente, afore a 1000 ml con agua destilada. Prepare soluciones de trabajo que contengan 5mg/ml, para lo cual mida con una pipeta volumtrica una alcuota de 100 ml de la solucin stock. Vace a un matraz volumtrico de 200 ml y neutralice con una solucin de NaOH al 20%, usando fenoftalena como indicador, lleve a volumen y mezcle. Acido Clorhdrico concentrado (Sp.g 1.18). Acido Clorhdrico (0.5N). Hidrxido de Sodio, Solucin 20%. Indicador de Fenoftalena (1% en etanol). Indicador de azul de metileno (1% en agua).

Materiales y Equipo

Calentador elctrico Matraces erlenmayer de 500 ml

Procedimiento Disuelva 8g de melaza y llvela a 500ml con agua destilada (filtre). Hidrolice 100 ml del filtrado con 5ml de HCI (Sp. g 1.18) y deje reposar por 24 h. Neutralice con NaOH al 20% usando fenoftalena como indicador y diluya a 200 ml. Estandarizacin de la Solucin Soxhlet: Mida 10ml de la solucin Soxhlet (a) y (b) con una pipeta volumtrica y vace a un matraz erlenmayer, mezcle y agregue 30ml de agua. Adicione con una bureta un volumen de estndar de trabajo casi suficiente para reducir el Cobre en la solucin Soxhlet. Llvelo a ebullicin y djelo hervir por 2 min., adicione 4 gotas de azul de metileno y rpidamente complete la titulacin mientras est hirviendo, hasta que se obtenga un color naranja brillante. Repita varias veces y determine el volumen de solucin requerido para reducir completamente 20 ml de solucin Soxhlet. Titulacin de Muestra: Primero realice una titulacin aproximada; pase a un matraz 10ml de las soluciones (a) y (b), adicione alcuotas de 10ml de la solucin muestra.

Aada 40 ml de agua y llvelo a ebullicin. Si persiste el color azul, titule con una solucin estndar de trabajo y calcule el contenido aproximado de azcar en la muestra. Para determinar con precisin el contenido de azcar, pase a un matraz 10 ml de las soluciones Soxhlet (a) y (b); adicione una alcuota de la solucin muestra. El volumen de muestra usado depender del contenido de azcar en la muestra. Adicione agua como se indica en la tabla, mezcle y hierva. Durante la ebullicin, agregue estndar de trabajo con una bureta hasta que la titulacin sea casi completa. Aada azul de metileno y complete la titulacin. VOLUMEN DE MUESTRA USADO EN LA TITULACION SOXHLET (AOAC, 1970) ml de H2O ml de muestra g de muestra en alcuota Total como azcar invertida (%) 40 10 0.08 73 35 15 0.12 82-58 30 20 0.16 61-41 25 25 0.20 49-35 20 30 0.24 49-29 Calcule el % de azcar (como invertida) = (F - M) I 100/w Donde: F= Volumen de estndar necesario para reducir 20 ml de Solucin Soxhlet. M= Volumen de solucin estndar de azcar requerido para completar la titulacin I= Peso de la azcar invertida en 1 ml de Standard de trabajo. W= Peso de la muestra en la alcuota usada.

FIGURA 23 Determinacin de azcares totales disponibles en melaza