GUIA DE ESTUDIO: COMUNICACIN CELULAR Mecanismos generales de comunicacin celular La comunicacin celular puede establecerse de distintas formas que

incluyen: a) la comunicacin paracrina: la seal acta sobre clulas vecinas; b) endocrina: la seal viaja por el torrente sanguneo y alcanza clulas lejanas; c) autocrina: la seal llega a la misma clula de la cual sali; d) neurotransmisin: la seal es liberada por la clula emisora al espacio sinptico, donde es captada por la clula receptora; e) contactos clula-clula: la seal permanece anclada a la membrana de la clula emisora mientras interacta con la clula receptora y f) mediante gaps: la seal se difunde desde la clula emisora a la receptora. El reconocimiento de la seal En cada organismo existen distintos tipos de seales qumicas que reciben el nombre de ligandos y forman complejos con receptores especficos. Cada tipo celular es sensible a distintas seales y cada interaccin ligando-receptor est asociada a una funcin particular. Cada clula responde a un conjunto de seales. El complejo ligando-receptor transmite el mensaje al interior de la clula e inicia un camino que lleva a la ejecucin de una respuesta biolgica especfica. Por este proceso completo se transduce la seal. Ciertas molculas pequeas y/o hidrfobas atraviesan la membrana celular y se unen a receptores internos. Estos complejos suelen unirse al DNA y actuar como factores de transcripcin. Los receptores de membrana son variados. Pueden formar parte de canales inicos, presentar actividad enzimtica o estar asociados con enzimas. Existen receptores que activan una protena adaptadora, la protena G, que transmite el mensaje al siguiente intermediario. Fig. 1. Ubicacin de los receptores

Los receptores pueden encontrarse en el interior de la clula o bien anclados en la membrana plasmtica. (a) Receptor intracelular; (b) receptor de membrana.

Los receptores intracelulares Los glucocorticoides y los mineralocorticoides, las hormonas sexuales y las hormonas tiroideas son ejemplos de ligandos que se unen a receptores intracelulares que actan como factores de transcripcin. Todos los receptores intracelulares tienen una zona de unin al DNA y otra de reconocimiento del ligando. Las protenas chaperonas mantienen el plegamiento especfico de los receptores que se encuentran libres en el citoplasma. Luego de la unin de una hormona al receptor, el complejo se transloca al ncleo, se separa de la chaperona y forma un dmero con otro complejo similar. Estos dmeros interactan con secuencias especficas del DNA, disparando la transcripcin gnica. Los receptores de membrana Las hormonas polipeptdicas se unen generalmente a sus receptores especficos en la membrana celular. El receptor reconoce caractersticas estructurales de la hormona que generan un alto grado de especificidad y afinidad. La unin de la hormona al receptor puede provocar cambios conformacionales en la molcula de receptor que permiten la asociacin con el transductor, en el que pueden tener lugar cambios adicionales para permitir la interaccin con una enzima en el lado citoplasmtico de la membrana celular. Los cambios conformacionales en la enzima, a su vez, hacen que se active su sitio cataltico. Es ms, en algunos casos, el complejo receptor "activado" podra, fsicamente, abrir un canal inico en la membrana o tener otros impactos profundos sobre su estructura. Este proceso se conoce como TRANSDUCCIN DE LA SEAL y a las molculas participantes en las interacciones se los llama genricamente transductores o molculas transductoras. Muchas de las hormonas que se unen a receptores de membranas transmiten sus seales mediante: 1) aumento del AMPC y la activacin de la ruta de la protena quinasa A 2) el aumento del GMPC y la activacin de la ruta de la protena quinasa G 3) activacin de la hidrlisis del fosfatidilinositl 4,5 bifosfato y la estimulacin de la ruta de la protena quinasa C. Los receptores ionotrpicos se encuentran en la membrana celular y permiten el pasaje de iones al interior o exterior de la clula. En general, responden a neurotransmisores y controlan procesos de contraccin muscular y transferencia neuronal de informacin. Existen dos tipos de receptores de membrana asociados con enzimas: los que se activan y funcionan como enzimas y los que activan enzimas del lado interno de la membrana celular. En la gran mayora de los casos, la actividad enzimtica asociada es de proteincinasa. Estos receptores participan en cascadas de sealizacin, cuyas respuestas biolgicas se relacionan con la regulacin de la proliferacin, la diferenciacin, la produccin de la matriz extracelular, la reparacin de tejidos y la regulacin inmunitaria. Luego de la interaccin entre el ligando y el receptor, se produce la formacin de varios complejos ligando-receptor en la membrana celular. Los dominios catalticos permiten la fosforilacin recproca en residuos de tirosina, serina o treonina (segn de qu receptor se trate). Esta autofosforilacin es seguida por el reclutamiento de molculas sealizadoras

citoslicas, que transmiten el mensaje al interior de la clula. Otros receptores presentan actividad guanilato ciclasa, que cataliza la produccin de cGMP a partir de GTP. Fig. 2. Receptores con actividad de tirosina cinasa

(a) Antes de que se una la molcula seal, los receptores existen como polipptidos individuales. La parte intracelular de estos receptores contiene mltiples tirosinas. (b) Cuando se une la molcula seal, por ejemplo un factor de crecimiento, se produce la asociacin de dos receptores, formndose un dmero. (c) La dimerizacin activa la regin del receptor con funcin de enzima, la tirosina cinasa (que no estaba fosforilada y por lo tanto, inactiva). Las tirosinas de la tirosina cinasa adicionan un grupo fosfato que provienen del ATP. (d) Ahora el receptor est activado y puede fosforilar protenas intracelulares. La fosforilacin en tirosina de estas protenas modifica su conformacin. Cuando se trata de enzimas, la fosforilacin les cambia la actividad. En el caso de protenas sin actividad enzimtica, la fosforilacin les permite la interaccin con otras protenas. Por ambos mecanismos se transduce la seal del ligando al interior celular. Esto activa una serie de vas que conducen a la respuesta celular.
Algunos receptores de membrana estn acoplados a protenas G, que intermedian la interaccin entre aquellos y otras protenas de membrana. La cantidad de ligandos que se une a este tipo de receptores es enorme (entre ellos, las hormonas adrenalina, glucagn, adrenocorticotrofina, luteinizante, foliculoestimulante y angiotensina II). Fig. 3. Receptores acoplados a protenas G

(a) Este tipo de receptores consiste en un polipptido que atraviesa la membrana plasmtica siete veces. Este esquema muestra la topologa del receptor b2-adrenrgico que se ha estudiado ampliamente. (b) Una seal interacta con el receptor que se activa y cambia de forma. La protena G inactiva se une al receptor y se activa. Luego se desplaza hacia otra protena de membrana que se encuentra en estado inactivo. Cuando la protena G se une a esta protena, altera su actividad. Esto conduce a una respuesta.

Transduccin de la seal: activacin de la adenilciclasa. Protenas G. La hormona se une al receptor en la membrana (Paso 1); esto produce un cambio conformacional en el receptor que deja expuesto un sitio para la fijacin de protena G subunidad (Paso 2); la protena G puede ser tanto estimuladora, Gs, como inhibidora, Gi, en relacin con el efecto final sobre la actividad de la adenilato ciclasa; el receptor interacciona con la subunidad de la protena G permitiendo que la subunidad intercambie el GDP unido por GTP (Paso 3); la disociacin de GDP provoca la separacin entre la subunidad y la subuni dad de la protena G con lo que en la superficie de la subunidad de la protena G se origina un sitio de unin para la interaccin con la adenilato ciclasa (Paso 4); la subunidad se une a la adenilato ciclasa y activa el centro cataltico, de modo que el ATP es convertido en cAMP (Paso 5); el GTP se hidroliza a GDP por la actividad GTPasa de la subunidad , devolvindola a su conformacin original y permitiendo de nuevo su interaccin con la subunidad (Paso 6); el GDP se asocia con la subunidad y el sistema retorna al estado no estimulado en espera de otro ciclo de actividad. Es importante destacar las pruebas que sugieren que los complejos , pueden desempear funciones importantes en la regulacin de determinados factores, includa la adenilato ciclasa.(figura 7) Un mecanismo similar de activacin de protenas G se propone para la activacin de la guanilatociclasa, enzima que cataliza la sntesis de GMPc a partir de GTP.

Transmisin de la seal al interior de la clula Cuando un ligando interacta con su receptor de membrana, la seal es transmitida al interior de la clula. Entonces se dispara una cascada de eventos que incluye la sntesis de segundos mensajeros y la fosforilacin de enzimas catalizada por proteincinasas. Fig. 4. Fosforilacin en cascada

La cascada involucra la fosforilacin de enzimas por proteincinasas. Supongamos que la proteincinasa 1 activa fosforila 100 molculas de proteincinasa 2, activndolas. Cada una de ellas fosforilar otras 100 molculas de proteincinasa 3, activndolas. Cada una de ellas fosforilar a otras 100 molculas de protena blanco inactiva responsable de una respuesta celular. En suma, la activacin de una molcula de proteincinasa 1 produce la fosforilacin de 100 x 100 x 100 molculas de protena blanco inactiva. De esta manera, se amplifica la seal.

Los segundos mensajeros son molculas pequeas que se generan en gran cantidad y rpidamente en respuesta a la activacin de un receptor. Llevan la seal a otras partes de la clula y la amplifican mediante la activacin de cinasas y otras enzimas. Los nucletidos cclicos, el ion Ca2+ y ciertos lpidos son ejemplos de segundos mensajeros.

Fig. 5. Los fosfolpidos segundos mensajeros

son

La hidrlisis del fosfatidilinositol difosfato libera por un lado el inositol trifosfato (IP3) y por el otro diacilglicerol (DAG). La fosfolipasa C es la enzima que cataliza esta reaccin. Esta enzima puede ser activada por protenas Gq como se muestra en el esquema o mediante la interaccin con receptores. El IP3 liberado al citoplasma interacta con receptores localizados en los depsitos de Ca2+ del retculo endoplasmtico y estimula la liberacin de este ion al citoplasma. Sobre el margen superior izquierdo del esquema se observa la estructura del fosfatidilinositol difosfato.

La fosforilacin y desfosforilacin de protenas son parte de la transduccin del mensaje. Esto significa que la mayora de los mensajes que se transmiten al interior de las clulas producen la activacin de cinasas que regulan su funcin mediante la fosforilacin de diversos sustratos. Los caminos de transduccin pueden ser lineales, pero tambin pueden existir puntos potenciales de regulacin y de interseccin entre distintos caminos. La respuesta celular est

conformada por un circuito complejo de activacin que involucra ms de un camino de sealizacin. Una molcula seal puede ser reconocida por diferentes receptores asociados a distintos mecanismos de transduccin. Tambin puede ocurrir que un mismo receptor active diferentes vas. El final de la va: la respuesta biolgica La transduccin de las seales externas produce una respuesta por parte de la clula blanco. Esta respuesta es una alteracin como resultado de la activacin o inhibicin de alguna va metablica, y de modificaciones en la forma o el movimiento de las clulas. El papel de estos procesos en el control de la diferenciacin, de la proliferacin y del crecimiento celular es esencial para el desarrollo y el funcionamiento normales del organismo. Segundos mensajeros

AMP cclico.
La formacin de cAMP en la clula normalmente activa la protena quinasa A, lo que se denomina ruta de la protena quinasa A. La ruta completa utiliza cuatro molculas de cAMP en la reaccin que forma un complejo entre dos subunidades reguladoras (R), liberndose dos subunidades catalticas (C) de la protena quinasa. Las subunidades catalticas de proteinquinasa A liberadas son capaces de fosforilar protenas para producir un efecto celular. Por ltimo, puede tambin activarse una protena llamada CBP que migrando al ncleo reconocen enhancers ("potenciador") especficos llamados sitios CREB, elementos de respuesta a cAMP, con lo que se puede modificar actividades enzimticas por induccin o represin de genes. Son muchas las hormonas que actan a travs de este mecanismo. IP3, DAG, Calcio-calmodulina El descubrimiento del regulador de la actividad de la fosfodiesterasa dependiente de calcio proporcion la base para comprender la manera en que el Ca2+ y el AMPc interactan dentro de la clula. El trmino con el que se conoce ahora a la protena reguladora dependiente del calcio es calmodulina, una protena de 17 KDa homloga a la protena muscular troponina C en estructura y funcin. La calmodulina tiene cuatro sitios para fijacin del calcio y la ocupacin total de estos sitios conduce a un cambio notable de la conformacin, de modo que la mayor parte de la molcula asume una estructura de hlice alfa. Se presume que este cambio de conformacin confiere a la calmodulina la propiedad para activa o inactivar enzimas. La interaccin de calcio con la calmodulina (con el cambio resultante de actividad de la ltima) es conceptualmente anloga a la fijacin del AMPc a la protena cinasa y la activacin subsiguiente de esta molcula. Con frecuencia, la calmodulina es una de las subunidades reguladoras de protenas oligmeras, entre ellas varias cinasas y enzimas, participando en el metabolismo de combustibles como en la generacin y degradacin de nucletidos cclicos y el transporte de iones. Adems de estos efectos, el complejo calcio/calmodulina regula la actividad de numerosos elementos estructurales en las clulas.. Los niveles de calcio citoslicos pueden modificarse tanto por ingreso del calcio extracelular como por la liberacin desde su principal depsito intracelular: el retculo endoplsmico.

La variacin de los niveles de calcio puede controlarse directamente por ligado de la hormona al receptor (ej: neurotransmisores) tanto como a travs de las modificaciones en los niveles de IP3- DAG por accin de la fosfolipasa C (ej: insulina). Una hormona que opera a travs de este sistema se une a un receptor especfico de la membrana celular, que interacciona con una protena G segn un mecanismo similar al de la ruta de la protena quinasa A y transduce la seal, lo que da como resultado la estimulacin de fosfolipasa C. Esta enzima cataliza la hidrlisis de fosfatidilinositol 4,5-bifosfato (PIP2) para formar dos segundos mensajeros, diacilglicerol (DAG) e inositol-1,4,5-trisfosfato (IP3). El inositol 1,4,5-trisfosfato difunde hacia el citoplasma y se une a un receptor de IP3 en la membrana de un depsito de calcio, que puede estar separado del retculo endoplasmtico, o bien formar parte del mismo. Esta unin da como resultado la liberacin de iones calcio, que contribuye a un gran incremento del calcio citoplasmtico. Por otro lado, el IP3 se metaboliza por eliminacin progresiva de grupos fosfato hasta formar inositol. Este se combina con cido fosfatdico (PA) para formar fosfatidilinositol (PI) en la membrana celular. Este ltimo es fosforilado doblemente por una quinasa para formar PIP2, que bajo estmulo hormonal ya puede entrar en otra ronda de hidrlisis y formacin de segundos mensajeros (DAG e IP3). Si el receptor todava est ocupado por una hormona, pueden producirse varias rondas del ciclo antes de que se disocie el complejo hormonareceptor. Por ltimo, es importante destacar que no todo el IP3 es desfosforilado durante la estimulacin hormonal. Parte del IP3 es fosforilado mediante la IP3 quinasa para dar lugar a inositol 1,3,4,5-tetrafosfato (IP4), que puede mediar en algunas de las respuestas hormonales ms lentas o prolongadas -a travs de la activacin de cascadas de quinasas/fosfatasas -con la modificacin final de la expresin gentica. El DAG activa la ruta de la protena quinasa C. Simultneamente al aumento de Ca2+ citoplasmtico inducido por el IP3, el cual procede de la hidrlisis de PIP2, el DAG produce diversos efectos. El DAG activa una importante protena quinasa de serna/treonna denominada protena quinasa C por su dependencia de calcio. El aumento inicial del calcio citoplasmtico inducido por IP3 parece alterar de algn modo la protena quinasa C, de modo que sta es translocada desde el citoplasma hacia la cara citoplasmtica de la membrana plasmtca. Una vez translocada, es activada por una combinacin de calcio, DAG y el fosfolpido negativo de la membrana, fosfatidilserina. Tras su activacin, la protena quinasa C fosforila protenas especficas en el citosol o, en ocasiones, en la membrana plasmtica. Estas protenas fosforiladas llevan a cabo funciones especficas que no pueden realizar en el estado desfosforilado. Por ejem plo, una protena fosforilada podra migrar hasta el ncleo e incrementar la mitosis y el crecimiento. Adems, el sistema IP3-DAG puede modificar la actividad de una familia de enzimas llamadas genricamente fosfodiesterasas, de las cuales es ms abundante la fosfodiesterasa 1 (FD1), cuya activacin permite la destruccin de molculas de cAMP. De este modo hormonas cuyo segundo mensajero es el IP3 pueden reducir los niveles de cAMP en forma indirecta. GMP cclico. Ruta de la protena quinasa G. El tercer sistema es el sistema de la protena quinasa G, que se estimula por el aumento de cGMP citoplasmtico. El GMP cclico es sintetizado por la guanilato ciclasa a partir de GTP. Al igual que la adenilato ciclasa, la guanilato ciclasa est vinculada a una seal biolgica especfica a travs de un receptor de membrana. El dominio extracelular de la guanilato ciclasa puede ejercer la funcin de receptor hormonal.

El cGMP producido activa una protena quinasa G, que posteriormente fosforila protenas celulares para que se expresen muchas de las acciones de esta ruta. Es necesario conocer ms datos acerca de la protena quinasa G.
Referencias: Curtis et al: Biologa (2008), 7ma edicin. Editorial Panamericana