Manual 2013.2 2

UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA
Instituto de Biologia Departamento 1 Biologia Geral

BIO 158 Biologia Celular e Molecular Medicina
DOCENTES: Rodrigo Barban Zucoloto (Coordenador) e Tania Regina Silva
COMPONENTE CURRICULAR
BIOLOGIA CELULAR E MOLECULAR (MDULO MORFO-FUNCIONAL I)

Prof. RODRIGO BARBAN ZUCOLOTO (Coordenador)
Profa. TNIA REGINA SILVA
Orientaes
para
funcionamento
do
componente curricular no sistema de mdulos

do novo currculo de medicina, semestre
2013.2.
Salvador, BA
(2013)
BIBLIOGRAFIA:
ALBERTS, B., JOHNSON, A., LEWIS, J., RAFF, M., ROBERTS, K., WALTER, P. Biologia molecular da clula. Trad. de Ana
Letcia de Souza Vanz et al. 5 ed. Porto Alegre: Artmed. 2010. 1396 p. Il.
COOPER, G. M. A Clula: uma abordagem molecular. 3.ed. Porto Alegre: Artmed. 2007.
LODISH, H.; BERK, A.; MATSUDAIRA, P.; KAISER C.A.; KRIEGER, M.; SCOTT, M.P. Biologia celular e molecular. Trad. de
Ana Leonor Chies Santiago-Santos. 5 ed. Porto Alegre: Artmed. 2005. 1054 p. il.
INSCRIO NO MOODLE:
Para inscrio no MOODLE, procurar Instituto de Biologia, disciplina Biologia Celular e Molecular para o curso de
Medicina em: http://www.moodle.ufba.br/. Todos devem se inscrever usando o cdigo bio158ci, para ter acesso disciplina.
ROTEIROS DAS AULAS:
Os roteiros das aulas tanto tericas quanto prticas esto disponveis a seguir neste manual.
Orientaes para o estudo (OE) - Os roteiros de aula possuem uma sesso denominada Orientao para o estudo que
deve ser utilizada para nortear o estudo em casa, antes da aula a que se referem.
Aulas tericas Exposio participativa com discusso do roteiro. Sero ministradas no Pavilho de aulas do canela
(PAC).
Aulas prticas Sero abordados alguns temas do contedo terico, possibilitando a observao direta ou indireta de
fenmenos celulares. Proporcionaro aos alunos uma iniciao manipulao de material laboratorial. Sero ministradas no
Instituto de Biologia (IBIO).
Salas de aula:
Turma: Colegiado (IBIO)
Horrio
Sala
T01 (T01) 20 alunos
Seg (07-10 h)
108 PAC Prof. Rodrigo
T02 (T02) 20 alunos
Seg (07-10 h)
202 PAC Profa. Tnia
T03 (T03) 20 alunos
Seg (13-16 h)
108 PAC Prof. Rodrigo
T04 (T04) 20 alunos
Seg (13-16 h)
202 PAC Profa. Tnia
010100 (P01) 10 alunos
Qua (07-09 h)
010 IBIO Prof. Rodrigo
010200 (P02) 10 alunos
Qua (09-11 h)
020300 (P03) 10 alunos
Qua (07-09 h)
014 IBIO Profa. Tnia
020400 (P04) 10 alunos
Qua (09-11 h)
030500 (P05) 10 alunos
Qua (13-15 h)
030700 (P06) 10 alunos
Qua (15-17 h)
040800 (P05) 10 alunos
Qua (13-17 h)
040900 (P06) 10 alunos
Qua (15-17 h)

AVALIAO DE APRENDIZAGEM:
Avaliao Terica (AT): Sero realizadas trs avaliaes valendo 10 pontos cada, totalizando 30 pontos.
Avaliao Prtica (AP): Ser realizada uma avaliao que corresponde elaborao de um relatrio em grupo referente
aula prtica de Endocitose. Os grupos sero definidos no primeiro dia de aula prtica. Este relatrio dever ser redigido
segundo o roteiro Orientaes para os relatrios de aulas prticas, disponvel neste manual e dever ser entregue no
Moodle, valendo 2,5 pontos.
Obs.: Os assuntos tratados nas aulas prticas podero ser fonte para perguntas nas avaliaes tericas.
Estudo de Caso (EC): Os grupos formados para a redao do relatrio de prtica sero tambm utilizados para a discusso
dos caso em formato PBL. A nota do Estudo de Caso (EC) ser individual considerando a participao de cada aluno durante a
discusso em sala, valendo 2,5 pontos por caso, totalizando 7,5 pontos.
MDIA DE CURSO (MC): A mdia do curso ser ponderada com pesos diferenciados para as avaliaes tericas
conforme a frmula abaixo.
MC = [(AT1 x 1,0) + (AT2 x 2,0) + (AT3 x 2,0)] + [(AP1 + EC1 + EC2 + EC3) x 1,0] / 6,0.
Obs.: Sero aprovados os alunos que alcanarem MC igual ou superior a 5,0.
ATENO! Os alunos que no comparecerem realizao das avaliaes tericas nas datas estabelecidas podero realizar a
2a. chamada, com justificativa devidamente comprovada mediante apresentao de atestado mdico ao respectivo
professor, impreterivelmente at 48h aps a execuo da referida atividade, de acordo com o regulamento desta
Universidade. Para aqueles que comparecerem a todas as avaliaes tericas nas datas estabelecidas e no tiverem
obtido mdia 5,0, ser facultada a realizao de uma avaliao substitutiva para a recuperao da menor nota de
avaliao terica que esteja abaixo da nota 5,0. Neste caso a recuperao na mdia servir para atingir at 5,0 pontos.
CRONOGRAMA
ATIVIDADE DIA
1e2
CONTEDO
AVALIAO
07/10 e 09/10 Semana do calouro

14/10 Seg
Apresentao do curso. Superfcie celular: Estrutura

e regulao da fluidez.
16/10 Qua
Prtica de microscopia.
21/10 Seg
Superfcie celular: Transporte.
23/10 Qua
Prtica de diversidade celular.
28/10 Seg
Dia do servidor pblico.
30/10 Qua
Prtica de regulao osmtica.
04/11 Seg
Endomembranas: Ncleo e retculo endoplasmtico.
06/11 Qua
Prtica de endocitose.
11/11 Seg
Endomembranas: Golgi, lisossomos e vias

endocticas.
13/11 Qua
ESTUDO DE CASO I: PBL.
18/11 Seg
AT 1 (Superfcie celular: Estrutura, regulao da fluidez e transporte. Endomembranas: Ncleo e retculo

endoplasmtico, golgi, lisossomos e vias endocticas). Durao 3:00 h.
14
20/11 Qua
Prtica de citoesqueleto e motilidade celular.
Previa da entrega do Relatrio AP1 (Endocitose)
15
25/11 Seg
Citoesqueleto e junes.
Entrega da Avaliao Terica 1
27/11 Qua
Prtica de Impresso digital do DNA.
Entrega da Avaliao do Relatrio de Prtica. Entrega da

avaliao do caso I.
02/12Seg
Mecanismos de comunicao celular: Molculas,

receptores, vias de sinalizao e apoptose.
04/12 Qua
ESTUDO DE CASO II: PBL.
09/12 Seg
Estrutura do material gentico.
11/12 Qua
ESTUDO DE CASO III: PBL.
16/12 Seg
AT 2 (Citoesqueleto e junes. Mecanismos de comunicao celular: Molculas e receptores. Vias de

sinalizao e apoptose. Estrutura do material gentico). Durao 3:00 h.
22
18/12 Qua
Prtica de mitose. Montagem do caritipo.
23
23, 25 e 30/12 Recesso de Natal e Fim/Inicio de ano

e 01/01
24
06/01 Seg
Replicao e reparo do DNA.
13/01 Seg
Transcrio e Processamento de RNAs: Transcrio

e sua regulao.
20/01 Seg
Transcrio e Processamento de RNAs: Transcrio

e sua regulao. Transcrio e Processamento de
RNAs: Processamento de RNAs.
27/01 Seg
Traduo do RNAm em protena: Cdigo gentico e

traduo em procariotos.
03/02Seg
AT 3 (Replicao e reparo de DNA. Transcrio e Processamento de RNAs: Transcrio e sua regulao.

Processamento de RNAs. Traduo do RNAm em protena: Cdigo gentico e traduo em procariotos.
Traduo em eucariotos e mecanismos de regulao). Durao: 3:00 h.
29
05/02 Qua
Entrega da Avaliao Terica III
30
10/02 Seg
Segunda chamada das avaliaes tericas + Avaliao substitutiva
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
16
17
18
19
20
21
25
26
27
28
AP 1 (Endocitose). No Moodle at 23:55 h.
Entrega da avaliao do caso II.
Entrega da avaliao do caso III.
Entrega da Avaliao Terica 2
Obs.: Feriados e recessos segundo o calendrio da cidade de Salvador (http://www.webcid.com.br/?

pg=calendario&ano=2013&loc=30). Bom trabalho!

ROTEIROS DE AULAS TERICAS
SUPERFCIE CELULAR
- INTRODUO:
Todas as clulas possuem um envoltrio que separa e protege seus constituintes qumicos, evitando a sua perda
ou mistura com o meio circundante. ainda por meio desse envoltrio, denominado de membrana plasmtica, que
nutrientes so internalizados e resduos so eliminados, possibilitando a sobrevivncia e o crescimento celular.
Nas clulas eucariticas, as membranas internas que encapsulam organelas, como o retculo endoplasmtico e as
mitocndrias, apresentam estrutura e propriedades semelhantes da membrana plasmtica, o que possibilita a
esses compartimentos realizarem atividades prprias (adaptado de Alberts et al., 2010).
- OBJETIVOS:
1. Caracterizar os componentes lipdicos da membrana plasmtica, associando suas propriedades funo de
barreira que impede a mistura dos componentes intra e extracelulares.
2. Relacionar a fluidez da membrana com a composio e estrutura das molculas lipdicas.
3. Caracterizar os componentes proticos da membrana celular, considerando a forma de associao com a
membrana e as suas funes no transporte de molculas e na comunicao celular.
4. Descrever as diferentes formas de passagem de pequenas molculas atravs da membrana de acordo com
seus gradientes de concentrao.
- PROCEDIMENTO:
A partir da leitura dos captulos 10 (pgs. 617 a 648) e 11 (pgs. 651 a 669; 675 a 683) de Alberts et al. (2010) ou
dos captulos 2 (pgs. 4447; 7884), 10 (pgs. 399408) e 12 (pgs. 475509; 523524) de Cooper e Hausman
(2007), responda as questes propostas abaixo, para posterior discusso em classe:
OBS.: Para um melhor aproveitamento nas discusses, a leitura deve ser realizada ANTES da data programada
para a realizao da aula.
- QUESTES PARA ORIENTAO DO ESTUDO:
Estrutura e propriedades das membranas celulares:
1. Analise propriedades dos fosfolipdeos que favorecem a formao de bicamadas em meio aquoso.
2. Descreva a estrutura bsica das membranas celulares, considerando a distribuio dos lipdeos e as
diferentes formas de associao das protenas com a bicamada lipdica.
3. Aponte a importncia da assimetria da bicamada lipdica na comunicao celular.
4. Explique como a composio e a estrutura dos lipdeos constituintes da membrana influenciam na sua fluidez.
5. De acordo com a resposta acima, como voc esperaria que fosse a constituio das membranas celulares de
peixes que vivem em guas geladas?

6. Muitas protenas de membrana difundem-se no plano da bicamada lipdica, como demonstrado nos
experimentos de fuso celular realizados por Frye e Edidin. As clulas, entretanto, podem limitar a mobilidade
lateral das protenas. De que maneira isso pode ocorrer? Qual a importncia dessa restrio de movimento
das protenas em clulas epiteliais?
7. Justifique a ausncia de glicolipdeos na monocamada citoslica da bicamada lipdica.
8. Caracterize o glicoclice quanto sua composio e suas funes.
Transporte de pequenas molculas atravs da membrana:
9. Analise a funcionalidade da permeabilidade seletiva da membrana plasmtica.
10. correto afirmar que os canais permitem que os solutos atravessem uma membrana com taxas muito mais
rpidas do que os carreadores? Justifique sua resposta.
11. Analise a participao de diferentes tipos de canais inicos na conduo do impulso nervoso.
12. Caracterize o transporte ativo dirigido por hidrlise de ATP a partir do mecanismo de funcionamento da bomba
de Na+/K+.
13. O transporte descrito acima (bomba de Na+/K+) poderia ser dirigido por gradiente de ons? Justifique sua
resposta.
14. Relacione o funcionamento da bomba de Na+/K+ com o equilbrio osmtico em clulas animais.
15. Caracterize a famlia de transportadores ABC, considerando sua importncia clnica.
.- CASO CLNICO:
1. Para que haja contrao em uma clula muscular necessrio um aumento na concentrao intracelular de
clcio (Ca+2). O relaxamento celular subsequente se d pela sada de clcio, que ocorre, principalmente,
atravs de um antiportador na membrana plasmtica, que troca Ca +2 por Na+ extracelular. Algumas drogas,
como os digitlicos so importantes para o tratamento de pacientes com doena cardaca porque elas fazem o
msculo cardaco se contrair mais fortemente. Essas drogas inibem parcialmente a bomba de Na +-K+ na
membrana da clula muscular cardaca.
a. Explique o mecanismo de ao dos digitlicos.
- BIBLIOGRAFIA BSICA:
ALBERTS, B., JOHNSON, A., LEWIS, J., RAFF, M., ROBERTS, K., WALTER, P. Biologia molecular da clula.
Trad. de Ana Letcia de Souza Vanzet al. 5 ed. Porto Alegre: Artmed. 2010. 1396 p. Il.
COOPER, G. M.; HAUSMAN, R. E. A Clula: uma abordagem molecular. 3.ed. Porto Alegre: Artmed. 2007.
- BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTAR:
LODISH, H.; BERK, A.; MATSUDAIRA, P.; KAISER C.A.; KRIEGER, M.; SCOTT, M.P. Biologia celular e
molecular. Trad. de Ana Leonor Chies Santiago-Santos. 5 ed. Porto Alegre: Artmed. 2005. 1054 p. il.
ENDOMEMBRANAS
- INTRODUO:
A clula eucaritica subdividida em compartimentos funcionalmente distintos envoltos por membranas,
cada um contendo seu prprio conjunto de enzimas e outras molculas especializadas. Para entender a clula
eucaritica essencial conhecer como ela cria e mantm esses compartimentos, o que ocorre em cada um deles
e como as molculas se movem entre eles (Alberts et al., 2010).
- OBJETIVOS:
1. Caracterizar estrutural e funcionalmente os compartimentos intracelulares.
2. Analisar o trnsito de protenas e RNAs entre o ncleo e o citoplasma.
3. Analisar o trnsito de macromolculas nas vias secretora e endoctica.
- PROCEDIMENTO:
A partir da leitura dos captulos 12 e 13 de Alberts et al. (2010) ou dos captulos 7 (pgs. 297 a 307), 8 (pgs.
321 a 332), 9 (pgs. 351 a 388) e 12 (pgs. 500 a 509) de Cooper & Hausman (2007), responda as questes
propostas abaixo para posterior discusso em classe.
OBS.: para um melhor aproveitamento nas discusses, a leitura deve ser realizada ANTES da data programada
para a realizao da aula.
QUESTES PARA ORIENTAO DO ESTUDO:
1. Discuta a importncia da evoluo dos compartimentos celulares presentes nas clulas eucariticas.
2. Caracterize as diferentes formas de endereamento de protenas entre os compartimentos celulares.
Ncleo
1. Descreva a estrutura do envelope nuclear considerando a presena da lmina nuclear e dos complexos de
poro.
2. Analise o papel da protena Ran na importao e exportao de protenas nucleares.
3. Caracterize duas estratgias de regulao do processo de importao de fatores de transcrio para o ncleo.
4. Discuta a importncia biolgica da fragmentao nuclear durante a mitose.
Retculo endoplasmtico
5. Caracterize o Retculo Endoplasmtico (RE) considerando sua estrutura e funes.
6. Descreva o mecanismo de transporte de protenas solveis e de membrana para o RE.
7. Descreva o processo de glicosilao e enovelamento de protenas no RE.
8. Analise o papel do RE na montagem das bicamadas lipdicas.
9. Analise a distribuio de lipdeos e protenas a partir do RE.

Aparelho de golgi e trfego intracelular de vesculas
10. Caracterize o Aparelho de Golgi (AG) considerando sua estrutura e funes.
11. Localize o AG no contexto da via secretora de protenas.
12. Analise a glicosilao de protenas no AG.
13. Analise a participao das protenas de cobertura nos processo de brotamento de vesculas.
14. Descreva o processo de direcionamento e fuso de vesculas com a membrana-alvo.
15. Caracterize as vias secretoras constitutiva e regulada.
Lisossomos e endocitose
16. Caracterize os lisossomos considerando sua estrutura e funo.
17. Descreva o processo de direcionamento das hidrolases cidas para os lisossomos e sua relao com doenas
de armazenamento.
18. Relacione as vias secretora e endoctica na formao dos lisossomos.
19. Analise o destino das molculas especficas captadas pela clula.
20. Relacione fagocitose e autofagia com lisossomos.
- CASO CLNICO:
1. A doena de incluso celular (do ingls, inclusion-cell disease), causada por mutao num gene estrutural que
codifica a enzima GlcNAc fosfotransferase, consiste numa doena grave, na qual todas as enzimas hidrollicas
esto ausentes dos lisossomos de fibroblastos. Ela classificada como uma das doenas de depsito ou
estocagem lisossmica, que consiste no acmulo em lisossomos de susbstrato no digerido. Indivduos com
essa doena apresentam grandes incluses em suas clulas que consistem em lisossomas contendo material
no digerido. Neles, todas as hidrolases, ausentes nos lisossomos, so encontradas no sangue circulante.
a. Explique como alteraes no trajeto das hidrolases lisossomais (do seu local de sntese at a chegada
aos lisossomos) podem levar patologia descrita acima.
CITOESQUELETO E JUNES
- INTRODUO:
A capacidade de migrao das clulas uma das realizaes que coroam a evoluo. Em organismos
multicelulares, entretanto, a migrao de clulas isoladas e de grupos de clulas de uma parte de um embrio
para outra crtica para o desenvolvimento do organismo. Em organismos adultos as clulas buscam por
invasores estranhos como parte da defesa do hospedeiro contra a infeco; por outro lado, a migrao celular
descontrolada um sinal funesto de uma clula cancerosa. At mesmo as clulas estacionrias, que predominam
no corpo, podem exibir alteraes dramticas na sua morfologia: a contrao das clulas musculares, o
alongamento dos axnios dos neurnios, a formao de protuberncias na superfcie celular, a constrio de uma
clula em mitose, se dividindo. Ainda mais sutis que esses movimentos so aqueles que ocorrem dentro das
clulas: a separao ativa dos cromossomos, a corrente do citosol, o transporte de vesculas de membrana. Esses
movimentos internos so elementos essenciais no crescimento e na diferenciao das clulas, e so controlados
cuidadosamente pela clula para que ocorram em momentos e em locais especficos. Lodish et al. (2005).
- OBJETIVOS:
1. Caracterizar o citoesqueleto quanto sua organizao e dinmica funcional.
2. Analisar a estrutura e a dinmica dos diferentes filamentos do citoesqueleto.
3. Analisar a participao do citoesqueleto na forma, organizao espacial e movimentos celulares.
4. Descrever a participao de filamentos do citoesqueleto em junes celulares.
5. Analisar os mecanismos de reorganizao rpida do citoesqueleto.
- PROCEDIMENTO:
Responda as questes propostas a partir da leitura dos captulos 16 (pgs. 965 a 1052) e 19 (pgs. 1131
a 1163) de Alberts et al (2010) ou dos captulos 8 (pgs. 342347) e 11 (pgs. 427469) de Cooper e Hausman
(2007), para posterior discusso em classe.
Pontos para orientao de estudo
1. Descreva o mecanismo de polimerizao dos filamentos de actina e microtbulos.
2. Relacione a instabilidade dinmica com a rpida reorganizao do citoesqueleto.
3. Analise o efeito de frmacos na organizao do citoesqueleto, associando com a terapia anticncer.
4. Analise o efeito da ligao de protenas na organizao e na dinmica dos filamentos de actina e
microtbulos.
5. Caracterize estruturalmente os filamentos intermedirios.
6. correto afirmar que todas as clulas eucariticas apresentam filamentos intermedirios citoplasmticos?
Justifique sua resposta.
7. Descreva a organizao intracelular dos filamentos intermedirios e sua participao em junes celulares.
8. Analise o envolvimento de filamentos intermedirios em doenas de pele e do sistema nervoso.
9. Analise a participao das protenas motoras no transporte intracelular de organelas.
10. Descreva o mecanismo de contrao muscular.
10

11. Descreva o processo de deslizamento celular.
12. Descreva a organizao e a base molecular do movimento de clios e flagelos.
13. Analise a participao do citoesqueleto nos mecanismos de adeso e comunicao celulares.
- CASO CLNICO:
1. Nos seres humanos e no camundongo, duas isoformas de queratina K4 e K14 formam heterodmeros que so
montados em protofilamentos. Um mutante K2 com delees no domnio N- ou C- terminal pode formar
heterodmeros, in vitro, mas no montado em protofilamentos. A expresso dessas protenas mutantes de
queratina nas clulas faz com que as redes de FI se fragmentem em agregados. Os camundongos
transgnicos que exibem a protena K14 mutante nas clulas-tronco basais da epiderme exibem
anormalidades grosseiras na pele, principalmente a formao de bolhas na epiderme que se assemelha
doena de pele humana epidermlise bolhosa simples. O exame histolgico da rea com bolhas revela uma
alta incidncia de morte das clulas basais.
a. Explique qual a possvel causa da morte celular, levando em considerao a estrutura e as funes
dos filamentos intermedirios.
MECANISMOS DE COMUNICAO CELULAR

- INTRODUO:
A formao de um organismo multicelular exige que as clulas se comuniquem, bem como ocorre com os
seres humanos, os quais necessitam da comunicao para se organizarem em uma sociedade complexa. A
comunicao entre as clulas mediada, principalmente, por molculas-sinal extracelulares. A maioria das clulas
em um organismo multicelular emite e recebe sinais. A recepo dos sinais depende das protenas receptoras,
geralmente (mas nem sempre) localizadas na superfcie celular, s quais as molculas-sinal se ligam. A ligao
ativa o receptor, o qual, por sua vez, ativa uma ou mais vias intracelulares de sinalizao (Alberts et al.,2010).
- OBJETIVOS:
1. Compreender a importncia da regulao do comportamento de cada clula individual para a homeostase dos
organismos multicelulares;
2. Descrever o funcionamento dos diferentes receptores envolvidos na sinalizao celular;
3. Analisar vias celulares de recepo e transduo de sinais.
4. Descrever os mecanismos de comunicao celular que regulam a sobrevivncia celular e a morte celular
programada.
- PROCEDIMENTO:
Responda as questes propostas a partir da leitura do captulo 15 (pgs. 879-954) e 18 (pgs.1115-1128)
de Alberts et al. (2010) ou do captulo 13 (pgs. 533575) de Cooper e Hausman (2007), para posterior
discusso em classe.
QUESTES:
1. Identifique modelos de sinalizao intercelular.
2. Caracterize tipos de molculas sinalizadoras.
3. Descreva a ao dos receptores acoplados protena G, bem como as vias de formao e ao dos
mediadores intracelulares AMPc e IP3;
4. Compare o processo de ativao de receptores protena-tirosina quinases com o de receptores de citocinas.
5. Identifique e caracterize receptores ligados a outras atividades enzimticas.
6. A partir de exemplos, caracterize diferentes vias de transduo de sinal intracelular.
7. Descreva o funcionamento das protenas intracelulares na transduo dos sinais;
8. Descreva os mecanismos de comunicao celular que regulam a sobrevivncia celular e a morte celular
programada.
12

- CASO CLNICO:
1. Receptores associados protena G ativam essas protenas porque reduzem a fora de ligao GDP. Isto
resulta em uma dissociao rpida da GDP ligada, que substituda por GTP, que est presente no
citoplasma em concentrao muito mais alta do que a GDP. Quais seriam as consequncias de uma mutao
que causasse a reduo da afinidade da subunidade alfa pela GDP, sem mudana significativa na sua
afinidade pela GTP?
a. Compare os efeitos dessa mutao com os efeitos da toxina colrica.
ESTRUTURA DO MATERIAL GENTICO
- INTRODUO:
O comprimento total do DNA celular impe um problema importante para as clulas. O DNA de uma nica
clula humana, com cerca de 2 metros de comprimento total, deve ser acondicionado dentro de uma clula com
um dimetro menor que 10 m, em uma proporo de compactao de mais de 10 5. Protenas eucariticas
especializadas, associadas ao DNA nuclear, fazem a compactao das estruturas de DNA e protenas,
observadas como cromossomos individuais durante a mitose. As mitocndrias e os cloroplastos tambm
apresentam DNAs, provavelmente resqucios evolucionrios de suas origens, que codificam componentes
essenciais desses organelas vitais. (Lodish et al. 2005, pg. 400).
- OBJETIVOS:
1. Analisar a estrutura e a funo do DNA
2. Analisar a estrutura e a funo dos cromossomos.
3. Descrever a organizao dos genes nos cromossomos.
4. Descrever a dinmica da organizao do material gentico ao longo do ciclo celular.
5. Caracterizar a organizao interna do ncleo interfsico.
6. Estudar a evoluo dos genomas.
- PROCEDIMENTO:
A partir da leitura e interpretao do captulo 4 (pgs. 195-262) de Alberts et al. (2010) ou dos captulos 2
(pgs. 4749; pg. 7778), 3 (pgs. 8994), 4 (pgs. 139158), 8 (pgs. 332336; 345346) de Cooper e Hausman
(2007), responder as questes propostas para posterior discusso em sala de aula.
- ORIENTAES PARA O ESTUDO:
1. Por que a estrutura dos cidos nuclicos DNA e RNA importante para suas funes na clula?
2. Analise a estrutura e a funcionalidade do centrmero e dos telmeros nos cromossomos eucariticos.
3. Discuta a funo dos mecanismos de regulao da cromatina para as mudanas de condensao da
cromatina durante o ciclo celular de eucariotos.
4. Relacione a estrutura interna do ncleo interfsico com seus processos celulares.
14

- CASO CLNICO:
1. Em pessoas com Lupus eritomatoso sistmico (LES), clulas T helper (linfcitos Th) exibem aumentada e
prolongada expresso do receptor de membrana CD154, havendo tambm a superproduo de interleucina10 (IL-10) e uma baixa produo de interferon-gama (IFN-y). A reduo na produo de IFN-y determina uma
inibio no sistema de defesa do organismo, enquanto a superexpresso de CD154 e IL-10 colabora com o
reconhecimento de antgenos do prprio organismo, caracterstico da doena auto-imune. Foi demonstrado
que o uso de Trichostatin A, um inibidor de desacetilases (HDACs), aumenta a expresso de IFN-y, causando
uma reverso da patologia observada no lupus (Fonte: PNAs, February 27, 2001, Vol. 98, n. 5, p.2628-2633).
a. Descreva como as histona acetilases (HATs) e desacetilases (HDACs) influenciam a expresso gnica.
b. Justifique como o Tricostatin A pode ajudar na reverso do LES.
REPLICAO, REPARO E RECOMBINAO DO DNA

- INTRODUO:
A cada vez que uma clula se divide, todo o seu genoma deve ser duplicado, sendo necessria uma
complexa maquinaria enzimtica para copiar as grandes molculas de DNA que constituem os cromossomos
procariticos e eucariticos. Alm disso, as clulas desenvolveram mecanismos para corrigir os erros eventuais
que ocorrem durante a replicao do DNA e para reparar as leses que resultam da ao de agentes ambientais
tais como radiaes. Anormalidades nestes processos resultam na falta de acurcia na replicao e na
manuteno do DNA genmico falha esta que pode ter consequencias desastrosas, como o desenvolvimento de
cncer....Apesar da importncia de uma replicao e manuteno exatas do DNA, os genomas das clulas no
so estticos. De maneira a permitir a evoluo das espcies, mutaes e rearranjos gnicos so necessrios
para manter a diversidade gentica entre indivduos. (Cooper e Hausman, 2007).
- OBJETIVOS:
1. Descrever o processo de replicao em procariotos, distinguindo aspectos que o particularizam em eucariotos.
2. Descrever as origens de replicao no material gentico de procariotos e eucariotos.
3. Analisar os mecanismos relacionados com os processos de mutao e reparo do DNA.
4. Caracterizar mecanismos de recombinao.
- PROCEDIMENTO:
A partir da leitura e interpretao do captulo 5 (pgs. 263 a 328) de Alberts et al. (2010) ou do captulo
5 (pgs. 177 a 223) de Cooper e Hausman (2007), responder as questes propostas para posterior discusso
em sala de aula.
- ORIENTAOS PARA O ESTUDO:
Replicao
1. Destaque os mecanismos necessrios para a replicao do DNA em procariotos.
2. Analise as semelhanas e diferenas da replicao do DNA nos procariotos com relao a replicao do DNA
de eucariotos.
3. Analise a importncia da sntese do DNA ser 5 3 para a fidelidade da replicao e para a evoluo dos
seres vivos.
Reparo
4. Identifique fontes de dano ao DNA e relacione com os mecanismos de reparo.
5. Relacione falhas nos sistemas de reparo com a possibilidade de surgimento de doenas.
Recombinao
6. O que recombinao homloga? Qual a exigncia fundamental para que ela ocorra? D exemplo.
7. Explique como a juno Holliday est envolvida no processo de recombinao homloga.
8. O que recombinao stio-especfica?
9. Como o DNA de um fago se integra ao genoma de uma bactria?
10. Destaque o papel da recombinao stio-especfica no desenvolvimento do sistema imune.
11. O que so transposons?
16

12. Qual a diferena entre transposons e retrotransposons?
13. Quais so os tipos de retrotransposons j identificados e em que se diferenciam entre si?
14. Destaque a funo da amplificao gnica para algumas atividades celulares.
TRANSCRIO E SUA REGULAO
- INTRODUO:
Em termos moleculares, um gene comumente definido como a sequencia completa de cidos nuclicos
necessria para a sntese de um produto gnico funcional (polipetdeo ou RNA). De acordo com essa definio, o
gene inclui mais do que os nucleotdeos que codificam a sequencias de aminocidos de uma protena, chamada
regio codificante. O gene inclui, tambm, todas as sequencias necessrias para sntese de um determinado
transcrito de RNA. Nos genes eucariticos as regies de controle da transcrio, conhecidas com amplificadores
(enhancers), podem estar a um distncia de 50 kb ou mais da regio codificante. Outras regies no-codificantes
crticas nos genes eucariticos so as sequencias que especificam a clivagem e a poliadenilao da extremidade
3, conhecidas como stios poli A, e o processamento (splicing) do RNA primrio, conhecido como stios de
processamento. (Lodish et al. 2005).
- OBJETIVOS:
1. Caracterizar o processo de transcrio em procariotos e eucariotos.
2. Situar a transcrio no fluxo da informao gentica.
3. Analisar aspectos da regulao gnica em procariotos e eucariotos, considerando a organizao do genoma.
4. Analisar a importncia dos processos de regulao gnica.
5. Caracterizar mecanismos de processamento de RNA.
6. Analisar o significado biolgico dos RNAs catalticos.
- PROCEDIMENTO:
A partir da leitura e interpretao dos captulos 6 (pgs. 331 a 366; 400 a 410) e 7 (pgs. 411 a 453), de Alberts
et al. (2010) ou dos captulos 1 (pgs. 4 a 7), 3 (pgs. 96 a 99), 6 (pgs. 229 a 272) e 8 (pgs. 336 a 341) de
Cooper e Hausman (2007), responda as questes propostas para posterior discusso em sala de aula.
- PERGUNTAS PARA ORIENTAO DE ESTUDO:
Transcrio e sua regulao
1. Descreva o processo de transcrio em clulas procariticas, considerando a ao da RNA polimerase e a
ocorrncia de sequencias sinal de incio e trmino do processo.
2. Analise aspectos que diferenciam a transcrio em procariotos e eucariotos.
3. Analise mecanismos de regulao positiva e negativa em procariotos.
4. Relacione a atuao de sequencias regulatrias na expresso de genes eucariticos com a ao de seus
ativadores e repressores transcricionais.
5. Relacione a estrutura da cromatina com a regulao da transcrio.
Processamento de RNAs
6. Caracterize o processamento de RNAs ribossomais em procariotos e eucariotos.
7. Caracterize o processamento de RNAm em eucariotos, considerando alteraes e fatores implicados.
18

8. Disserte sobre a importncia da atividade cataltica de RNAs para o entendimento de mecanismos de
processamento de RNA.
9. Analise o significado biolgico do splicing alternativo e da edio no processamento de RNA.
10. Analise a degradao de RNA como um meio de regulao da expresso gnica.
- CASO CLNICO:
1.
A terapia gnica, aplicada s doenas que variam desde os distrbios hereditrios raros, causados por
mutaes nicas, at cncer, AIDS e aterosclerose, tem sido alvo de intensiva investigao. Em humanos, a
terapia gnica busca inserir em clulas do paciente o novo gene que deve ser expresso. Para isso, o DNA
contendo o gene de interesse deve ser ligado a um promotor que funcione em clulas humanas. Os mdicos que
esto desenvolvendo essa medicina molecular enfrentam desafios impostos pela engenharia gentica como o
uso de vetores eficazes, garantia da captao eficiente do gene a ser introduzido, induo da expresso e
processamento de mRNA e protenas apropriadas, alm da seleo das clulas receptoras do DNA recombinante
dentro do organismo. Uma das tcnicas de biotecnologia a utilizao de vetores virais para levar o gene bom
para dentro das clulas humanas. Esse procedimento in vivo est sendo tentado para vrios tipos de cncer. Por
exemplo, clulas de cncer de pulmo so acessveis se o vetor viral contendo o DNA a ser inserido nas clulas
do paciente administrado como um aerossol pelo sistema respiratrio. Vetores virais carregando alelos
funcionais de genes que sofreram mutao nas clulas do tumor tm sido introduzidos dessa maneira em clulas
de pacientes com cncer de pulmo.
a. Justifique a necessidade da ligao do DNA contendo o gene de interesse a um promotor,
considerando aspectos da iniciao da transcrio em eucariotos.
b. Justifique a ateno dispensada ao processamento de pr-mRNAs eucariticos na medicina
molecular, analisando a funcionalidade de cada etapa deste processo.
TRADUO DO RNAm EM PROTENA
- INTRODUO:
Esta faanha da traduo atraiu a ateno dos bilogos primeiramente no fim dos anos 1950, quando foi
colocado o problema da codificao: como a informao em uma sequencia linear de nucleotdeos no RNA
traduzida para uma sequencia linear de um conjunto de subunidades quimicamente bastante diferentes - os
aminocidos em protenas? Esta questo fascinante gerou grande excitao entre os cientistas naquele
momento. Havia um criptograma montado pela natureza que, aps mais de trs bilhes de anos de evoluo,
poderia finalmente ser resolvido por um dos produtos da evoluo os seres humanos. De fato, no somente o
cdigo foi finalmente decifrado passo por passo, mas, no ano 2000, a elaborada maquinaria pela qual as clulas
lem esse cdigo o ribossomo foi finalmente revelada em seus detalhes atmicos. (Alberts et al. 2004).
- OBJETIVOS:
1. Analisar a base molecular e as caractersticas do cdigo gentico.
2. Situar a traduo no fluxo da informao gentica.
3. Caracterizar o processo de traduo em procariotos e eucariotos.
4. Identificar mecanismos de atuao de antibiticos relacionados traduo.
5. Caracterizar os mecanismos de regulao da traduo.
- PROCEDIMENTO:
A partir da interpretao dos captulos 6 (pgs. 366 a 400) e 7 (pgs. 488 a 495) de Alberts et al. (2010) ou dos
captulos 3 (pgs. 99 e 100), 7 (pgs. 279 a 297) e 8 (pgs. 341 a 342) de Cooper e Hausman (2007), responda
as questes propostas para posterior discusso em sala de aula.
- PERGUNTAS PARA ORIENTAO DE ESTUDO:
1. Caracterize o cdigo gentico considerando a colinearidade entre genes e protenas.
2. Discuta a importncia do aminoacil-RNAt no processo de decodificao da informao gentica.
3. Caracterize o ribossomo considerando sua estrutura e descreva sua montagem no nuclolo.
4. Descreva o processo de traduo em procariotos e compare com o dos eucariotos considerando os elementos
envolvidos.
5. Analise mecanismos que contribuem para a acurcia do processo de traduo.
6. Considerando diferenas entre fatores durante o processo de traduo procaritico e eucaritico pesquise
sobre a especificidade de antibiticos.
7. Analise mecanismos de regulao da traduo, considerando o envolvimento de protena repressoras, a
modulao da atividade de fatores de iniciao e a poliadenilao do RNAm.
20

- CASO CLNICO:
1. Descobre-se que um homem anmico de vinte anos possui uma forma anormal de hemoglobina, que
apresenta 172 aminocidos ao invs dos 141 encontrados na protena normal.
a. Que tipo de mutao pontual (troca de apenas um nucleotdeo) consistente com essa anormalidade?
ROTEIROS DE AULA PRTICAS
22

ORIENTAES PARA OS RELATRIOS DE AULAS PRTICAS
Semestre: Data:
Equipe (Nomes separados por vrgula):
Nome da aula prtica (escrever em letra maiscula):
Regras de formato: O texto do relatrio dever estar em letra Arial 10, com espaamento simples entre linhas,
pargrafo com primeira linha de 1,5 cm e 6 pontos de separao entre um pargrafo e outro. As citaes ao longo
do texto devero estar conforme as regras do arquivo Citacoes_abnt.pdf e as referncias bibliogrficas conforme
o arquivo Normalizacao_de_referencias_abnt.pdf. O relatrio dever conter os seguintes itens:
Avaliao:
-INTRODUO (0,5): Contextualizao histrico-cientfica fundamentada em literatura a respeito do tema da aula
(meia pgina no mximo).
-MATERIAIS E MTODOS (0,2): Listar os materiais sumarizados no roteiro de cada aula e quanto ao mtodo,
registrar neste item os procedimentos adotados durante as aulas para a obteno dos resultados observados.
-RESULTADOS (0,6): Registro dos resultados observados durante a aula (duas pginas no mximo).
-DISCUSSO (1,0): Registro das explicaes de sua equipe para os fatos observados no item anterior
RESULTADOS, que dever ser fundamentado em literatura (duas pginas no mximo).
-REFERNCIAS BIBLIOFRFICAS (0,2): Indicao dos textos consultados pela equipe para a elaborao do
relatrio, conforme o arquivo Normalizacao_de_referencias_abnt.pdf (Nmero de pginas indeterminado).
Obs.: O total de pginas de cada sesso no relatrio poder variar, desde que o relatrio no total no
ultrapasse 5 (mais ou menos uma pgina). Os relatrios discrepantes neste quesito no sero
considerados para avaliao.
ORIENTAO PARA OS ESTUDOS DE CASOS CLNICOS EM FORMATO PBL
Os estudos de casos clnicos em formato PBL abordaro temas atuais visando a interface Biologia Celular
e Molecular e Medicina, aprofundando o entendimento da organizao e funcionamento das clulas,
atravs da apresentao e discusso de casos pelos alunos. A atividade ser realizada em grupos de
cinco a seis alunos definidos no primeiro dia de aula pratica (os grupos sero os mesmos formados para a
construo do relatrio de aula pratica de endocitose).
OBJETIVOS:
Estabelecer a aproximao da disciplina Biologia Celular e Molecular com a Medicina.
PROCEDIMENTO:
1) Os casos clnicos sero distribudos pelos professores no moodle.
2) A apresentao dever ser planejada para o tempo mximo de 30 minutos, com mais 20 minutos para
discusso.
2.1) A apresentao dever ser objetiva e contemplar a aplicao dos fundamentos da Biologia Celular e
Molecular ao problema mdico indicado no caso clnico.
AVALIAO:
A nota desta atividade ser composta por: (1) Nota dada ao material utilizado para a exposio do caso clnico
(0,5 ponto). Ex.: Qualidade e contedo das figuras, grficos, vdeos e outros recursos. (2) Nota individual
considerando a relevncia e abrangncia do contedo apresentado pelo aluno (1,5 pontos) e (3) Auto-avaliao
(0,5 ponto).
24

PRTICA MICROSCOPIA
INTRODUO:
Em 1830, Matthias Schleiden e Theodore Schwann sugeriram que as clulas constituam a unidade fundamental
da vida. Essa primeira idia sobre a teoria celular foi baseada em observaes realizadas com um microscpio
ptico um tanto primitivo. Os biologistas celulares modernos dispem de ferramentas mais eficazes para revelar a
arquitetura celular. Por exemplo, variaes do microscpio de luz convencional permitem que os cientistas vejam
objetos que eram indetectveis dcadas atrs. (Lodish et al., 2005)
OBJETIVOS:
1. Identificar os componentes principais de um microscpio ptico.
2. Realizar o procedimento padro para a focalizao de um objeto.
3. Identificar fatores que interferem na resoluo do aparelho.
4. Aplicar procedimentos para a conservao do microscpio.
5. Comparar diferentes tipos de microscpios.
6. Estabelecer relaes entre as unidades de medida utilizadas em microscopia.
7. Discutir a relevncia da microscopia na biologia celular.
MATERIAL:
Microscpio
Conta-gotas
Estilete
Lmina de barbear
Papel de filtro
Letra digitada
Lminas
Linhas de costura
Lamnulas
Bquer com gua
PROCEDIMENTO:
Leia o captulo 1 (pgs. 20 a 28) do livro: A clula: uma abordagem molecular (Cooper e Hausman,
2007). Siga as orientaes do professor para identificar os componentes principais do microscpio ptico e, em
equipe, realize os procedimentos sugeridos.
1. Identificando os componentes principais do microscpio ptico
O microscpio ptico composto assim chamado porque utiliza dois sistemas de lentes: as objetivas, que
produzem a imagem ampliada e as oculares, que a amplia mais.
Os sistemas objetiva e ocular do microscpio composto so combinaes elaboradas de partes individuais
adaptadas umas s outras, segundo uma frmula determinada, cujo propsito proporcionar a melhor imagem do
objeto examinado. Para saber qual o aumento proporcionado pelo microscpio basta multiplicar o nmero gravado
na ocular pelo nmero gravado na objetiva. Esses nmeros indicam quantas vezes aquela lente aumenta a
imagem do objeto observado.
Tambm integram a parte ptica do microscpio composto a FONTE DE ILUMINAAO (espelho ou
lmpada eltrica), o CONDENSADOR (curto tubo metlico que contm um sistema de lentes convergentes que,
ao ser atravessado pelos raios luminosos, projeta um cone de luz sobre a preparao), o DIAFRAGMA (pea
situada abaixo do condensador que gradua a quantidade de raios luminosos que atingiro a preparao) e
FILTROS.
26

1.
2.
Parte Mecnica Descrio

Base ou p
Brao ou coluna
3.
Mesa ou platina
4.
Charriot
5.
7.
Presilha ou Valete
Parafusos
macro
micromtricos
Revlver
8.
Tubo ou canho
6.
Parte ptica
Fonte de luz
9.
Diafragma
10.
11.
Condensador
12.
13.
Objetivas
Oculares
a pea que sustenta todas as outras.

Sustenta as partes superiores do microscpio.
Recebe e sustenta a preparao microscpica. No seu centro h uma abertura para
a passagem dos raios luminosos.
Conjunto de peas mveis da mesa ou platina. Apresenta uma presilha que prende
a lmina.
Fixa a lmina na platina.
e
Permitem a focalizao do objeto.

Sustenta as lentes objetivas. uma pea circular dotada de movimento de rotao.
a parte mais superior do microscpio que recebe em sua extremidade as lentes
oculares.
Normalmente constituda por uma pequena lmpada.
Controla o tamanho da rea iluminada na preparao.
Fornece uma iluminao uniforme ao preparado. Pode ser levantado e abaixado por
meio de um parafuso lateral.
Lentes que fornecem imagem ampliada do objeto.
Lentes que ampliam a imagem real formada pela objetiva.
2. Cuidados com o microscpio ptico

Acompanhe as instrues do professor durante a aula e anote os cuidados mais importantes para com o
microscpio.
3. Observando uma imagem ao microscpio ptico
Siga os procedimentos abaixo, para realizar as observaes:
3.1.Coloque o papel com a letra eem posio de leitura, sobre uma lmina limpa e, sobre ela, uma gota
dgua. A seguir pegue uma lamnula e coloque-a de modo que um dos seus lados encoste na
lmina formando um ngulo de 45, aproximadamente. Abaixe-a vagarosamente sobre a letra (isto
evitar que se formem bolhas de ar na preparao).
3.2.Ligue a lmpada do microscpio.
3.3.Abra o diafragma.
3.4.Gire o revlver com cuidado e encaixe a objetiva de menor aumento.
3.5.Verifique, atravs da ocular, se o campo est iluminado.
3.6.Coloque a preparao (lmina) sobre a abertura da platina, prendendo-a com as presilhas.
3.7.Utilize os parafusos macromtricos para aproximar a objetiva da preparao, atravs do deslocamento da
mesa.
3.8.Olhe atravs da(s) ocular(es) e levante lentamente a mesa at conseguir focar o material a ser observado.
3.9.Utilize agora os parafusos micromtricos a fim de conseguir a nitidez ideal.
3.10.
Aperfeioe a focalizao buscando obter a imagem mais ntida e substitua essa objetiva pela de
ampliao imediatamente superior.
3.11.
Faa observaes com o diafragma aberto e fechado e com o condensador prximo e afastado da
preparao. Anote as diferenas observadas.
3.12.
Repita as orientaes dos tens de 3.1 at 3.10, substituindo o objeto por fragmentos de 1cm de
linha colorida, sobrepostos formando um X. Focalize a preparao no ponto de cruzamento das
linhas.
3.13.
REGISTRE TODAS AS SUAS OBSERVAES COM DESENHOS E ANOTAES.
4. Utilizando unidades de medidas
As principais unidades de medida usadas para mensurar clulas e seus componentes so o micrmetro (m) e
o nanmetro (nm). Medidas usadas em microscopia:
- milmetro (mm)= 1/1000 m
- micrmetro (m)= 1/1000 mm
- nanmetro (nm) = 1/1000 m
- ngstrom ()= 1/10 nm = 1/10000 m.
1 m= 103mm = 106m = 109nm = 1010
BIBLIOGRAFIA:
-ORIENTAES PARA O ESTUDO: Aps a leitura do texto indicado no captulo 1 (pgs. 20 a 28) do livro: A
clula, uma abordagem molecular (Cooper e Hausman, 2007), considerando tcnicas e instrumentos de
microscopia, registre no relatrio a discusso de sua equipe para as seguintes questes:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Explique sua observao em relao letra e.

Explique sua observao em relao a lmina com as linhas cruzadas em X.
Conceitue resoluo, identificando os fatores envolvidos nesse parmetro.
Discuta a utilidade do leo de imerso na microscopia ptica.
Discuta a relao entre ampliao e resoluo na microscopia.
Compare diferentes tcnicas de microscopia.
Faa um breve comentrio sobre a aplicao de tcnicas de microscopia na Medicina.
28

PRTICA - DIVERSIDADE CELULAR
-INTRODUO:
Muitos organismos, como bactrias, amebas e leveduras, so constitudos de clulas isoladas que so
capazes de se replicar independentemente. Oganismos mais complexos so compostos de uma coleo de
clulas que funcionam de uma maneira coordenada, com diferentes clulas especializadas para realizar uma
funo determinada. O corpo humano, por exemplo, composto por mais de 200 tipos de clulas diferentes, cada
uma especializada para funes distintas, como memria, viso, movimento e digesto. A diversidade exibida por
esses vrios diferentes tipos de clulas surpreendente; considere, por exemplo, as diferenas entre as bactrias
e as clulas do crebro humano. (Cooper e Hausman, 2007).
-OBJETIVOS:
1. Observar diferentes tipos de clulas ao microscpio ptico.
2. ldentificar diferenas entre as clulas observadas.
3. Discutir a diversidade celular em organismos pluricelulares.
-MATERIAL:
Microscpio ptico
Esptula de madeira (descartvel)
Lminas permanentes
Conta-gotas
Lminas e lamnulas
Soluo de azul de metileno
Papel de filtro
Bquer com gua
PROCEDIMENTO:
Leia o captulo 1 (pgs. 8 a 15) do livro: A clula: uma abordagem molecular (Cooper e Hausman,
2007).
1. OBSERVAO DE CLULAS EUCARITICAS

1.1. Protozorio - Leishmania
1.1.1.
Observar ao microscpio a lmina permanente com leishmania usando as objetivas a seco e a de

imerso.
1.1.2.
Registrar suas observaes com desenhos.
1.2. Macrfagos
1.2.1.
Observar ao microscpio a lmina permanente com macrfagos peritoniais infectados com

Leishmania, usando as objetivas a seco e a de imerso.
1.2.2.
1.3.Clulas da mucosa bucal
2.
1.3.1.
Fazer um bochecho com gua potvel, a fim de limpar a cavidade bucal.
1.3.2.
Com o auxlio de uma esptula, raspar a face interna (mucosa) da bochecha.
1.3.3.
Desprezar o material mucoso obtido e raspar, novamente, na mesma regio.
1.3.4.
Depositar o material coletado em uma lmina limpa, fazendo um esfregao.
1.3.5.
Adicionar uma gota de soluo de azul de metileno e colocar lamnula.
1.3.6.
Retirar o excesso de corante com papel de filtro.
1.3.7.
Observar atentamente os limites e os ncleos das clulas.
1.3.8.
OBSERVAO DE CLULAS PROCARITICAS

2.1.Observar ao microscpio as lminas permanentes com bactrias usando as objetivas a seco e a de
imerso.
2.1 Registrar suas observaes com desenhos.
- BIBLIOGRAFIA:

1. Compare clulas procariticas e eucariticas, estruturalmente.
2. Descreva as diferenas entre os tipos celulares observados.
3. Discuta a importncia da diversidade celular para o organismo humano.
30

PRTICA REGULAO OSMTICA
-INTRODUO:
A gua tende a atravessar uma membrana semipermevel de uma soluo de baixa concentrao de
soluto para uma de alta concentrao, um processo denominado osmose, ou fluxo osmtico.
As bicamadas de fosfolipdeos puras so praticamente impermeveis gua, mas a maioria das
membranas celulares contm protenas de canal de gua que facilitam o movimento rpido da gua para dentro e
para fora das clulas.
O movimento da gua atravs da membrana citoplamtica tambm determina o volume particular de cada
clula, o qual deve ser regulado para evitar danos clula (LODISH et al., 2005).
- OBJETIVOS:
1. Analisar, microscopia ptica, o efeito da alterao da osmolaridade do meio sobre clulas vegetais.
2. Discutir os resultados observados de acordo com o modelo do mosaico fluido.
3. Identificar a propriedade da membrana plasmtica evidenciada pelo experimento realizado.
4. Identificar processos celulares que envolvem a participao de aquaporinas.
- MATERIAL:
Ramo de Rhoeodiscolor.
Vidro de relgio.
gua destilada.
Soluo de NaCI 5%.
Pincel.
Dois conta-gotas.
Lmina de barbear.
Lminas e lamnulas.
Papel de filtro.
Microscpio.
- PROCEDIMENTO:
1. Com uma lmina de barbear, corte um fragmento da epiderme dorsal da folha de Rhoeodiscolor e coloque
em um vidro de relgio com gua destilada.
2. Coloque no centro de uma lmina, uma gota de gua destilada e o fragmento da epiderme da folha. Cubra
com a lamnula.
3. Leve a lmina ao microscpio e observe com as objetivas a seco.
4. Desenhe o que foi observado.
5. Mantendo a lmina focalizada, coloque um pedao do papel de filtro junto a uma das bordas da lamnula
para retirar a gua da preparao; ao mesmo tempo, coloque uma gota de soluo salina junto borda do
lado oposto.
6. Observe o que acontece com as clulas e registre num desenho.
7. Usando um novo pedao de papel de filtro, troque a soluo salina por gua destilada, de acordo com o
tem 5. Repita o processo para ter certeza de que a soluo salina foi realmente retirada. Faa novas
observaes.
- BIBLIOGRAFIA:
Trad. de Ana Letcia de Souza Vanz et al. 5 ed. Porto Alegre: Artmed. 2010. 1396 p. Il.
1. Explique as modificaes sofridas pelas clulas quando colocadas em solues de diferentes
concentraes a partir do movimento da gua atravs da membrana plasmtica.
2. Discuta os mecanismos envolvidos na regulao da osmolaridade em clulas animais e vegetais.
3. Analise o transporte de gua atravs da membrana plasmtica, enfatizando o papel das aquaporinas.
4. Descreva, em seres humanos, um processo fisiolgico que envolve a participao de aquaporinas.
32

PRTICA ENDOCITOSE
- INTRODUO:
O termo endocitose foi cunhado por Christian deDuve em 1963 para incluir tanto a ingesto de grandes
partculas (como bactrias) como a captao de fluidos ou macromolculas em pequenas vesculas (COOPER e
HAUSMAN, 2007).
- OBJETIVOS
1. Interpretar resultados experimentais com base em mecanismos celulares relacionados com a
internalizao de substncias.
2. Relacionar a membrana plasmtica com o sistema de endomembranas em vias celulares de internalizao
de material extracelular.
- MATERIAL
Soluo de vermelho neutro (0,02%)
04 pipetas de 1,0 ou 2,0 ml
Soluo de cido clordrico (1%)
02 funis de vidro ( 4,6 cm de dimetro)
Soluo de bicarbonato de sdio (1%)
Papel de filtro ( 7,5 cm de dimetro)
Soluo de hidrxido de sdio (0,01M)
02 conta gotas
Soluo de hidrxido de potssio (0,01M)
01 becker de 50 ml
Soluo de hjdrxido de amnia (5%)
01 basto de vidro
Fermento Granulado (levedura)
01 colher pequena
Estante para tubo de ensaio
01 pregador de tubo de ensaio
01 tubo de ensaio de 15cm x 2cm
Etiquetas
08 tubos de ensaios de tamanho mdio
01 caixa de fsforos
01 pipeta de 10,0 ml
Lamparina lcool
01 pipeta de 5,0 ml
- PROCEDIMENTO:
Para alcanar os objetivos propostos, siga os passos seguintes:
1. Ponha 1,0 ml de vermelho neutro em tubo de ensaio e coloque soluo de bicarbonato de sdio, gota a
gota, at que haja mudana de colorao. Anote o observado.
2. Em outro tubo de ensaio, repita a operao substituindo a soluo de bicarbonato por cido clordrico.
Anote o resultado.
3. Coloque 15,0 ml da soluo de bicarbonato de sdio no tubo de ensaio maior (15 x 2).
4. Acrescente uma colher pequena de fermento granulado (levedura).
5. Adicione, gota a gota, 2,0 ml de vermelho neutro, observando a colorao. Anote suas observaes.
6. Em seguida, com o auxlio de um basto de vidro, proceda a homogeneizao do contedo do tubo de
ensaio e anote os novos fatos.
7. Numere outros tubos de ensaio de 1 a 6.
8. Distribua 2,0 ml da mistura, obtida no procedimento 6, nos tubos de ensaio 1, 3, 4, 5 e 6.
9. Filtre o contedo do tubo 1 no tubo 2, utilizando um pequeno filtro de papel. Anote o observado.
10. Aquea o contedo do tubo 3. Anote o observado.
11. Acrescente, nos tubos 4, 5 e 6, respectivamente, 1mI de: hidrxido de sdio (0,01 M), hidrxido de
potssio (0,01 M) e hidrxido de amnia (5 %). Anote os resultados.
34

- BIBLIOGRAFIA:

1. Analise os resultados obtidos nas diferentes etapas do procedimento e elabore hipteses para explic-los.
2. Descreva vias celulares que relacionam a membrana plasmtica com o sistema de endomembranas em
processos de internalizao de componentes extracelulares.
PRTICA CITOESQUELETO E MOTILIDADE CELULAR
-INTRODUO:
Todas as clulas eucariticas possuem um esqueleto interno denominado citoesqueleto, que dota as
clulas de uma forma, de capacidade de movimento, habilidade de arranjar as organelas e transport-las de uma
parte outra da clula. Os filamentos de actina permitem clulas eucariticas individuais rastejar. Os microtbulos
so os principais geradores de fora em clios e flagelos, que servem como instrumento de propulso. Os
filamentos de actina e microtbulos so tambm essenciais para o movimento interno que ocorre no citoplasma de
todas as clulas eucariticas.Tais estruturas datam dos primeiros estgios da evoluo, por serem encontradas
quase inalteradas na maior parte dos eucariotos. (Alberts et al., 1995, adaptado)
- OBJETIVOS:
5.
Observar a locomoo de organismos unicelulares.
6.
Observar movimentos intracelulares em clulas vegetais.
7.
Examinar flagelos e clios em microrganismos.
8.
Interpretar os movimentos observados com base em mecanismos moleculares.
- MATERIAL:
Cultura de algas Tetrasselmis.
Clara de ovo.
Cultura de protozorios ciliados.
Lminas e lamnulas.
Ramos de Elodea.
Bquer com gua.
Soluo de lugol.
Conta gotas e pincis.
Soluo de azul de metileno.
Papel absorvente.
Soluo de vermelho neutro.
Microscpio.
Soluo de lcool:ter (70:30)
Papel Klennex para limpeza dos microscpios
- PROCEDIMENTO:
1. Observao do movimento flagelar em Tetrasselmis.
1.1.Colocar uma gota da cultura de Tetrasselmis em uma lmina limpa e recobr-la com lamnula;
1.2.Observar ao microscpio usando as objetivas a seco e registrar os resultados;
1.3.Repetir a observao adicionando ao material uma gota de lugol;
1.4.Focalizar a preparao usando, respectivamente, as objetivas a seco; substituir a objetiva de maior
aumento a seco pela objetiva de imerso e examinar a preparao. Registrar a observao.
2. Observao do movimento ciliar em protozorios.
2.1.Colocar sobre a lmina uma gota da cultura de protozorios e recobr-la com uma lamnula.
Particularmente buscamos encontrar o Paramecium (Figura 1), mas outros microorganismos podem ser
encontrados nas preparaes.
2.2.Observar ao microscpio utilizando sucessivamente as objetivas a seco, e registrar as observaes.
2.3.Repetir os procedimentos dos tens2.1 e 2.2 adicionando ao material uma pequena quantidade de clara de
ovo.
2.4.Repetir os procedimentos dos tens2.1 e 2.2 adicionando uma gota de lugol suspenso de protozorios.
Examinar o material usando objetiva de imerso.
2.5.Repetir os procedimentos dos itens 2.1 e 2.2 adicionando a cada lmina, respectivamente, uma gota de
vermelho neutro e uma gota de azul de metileno. Examinar o material e registrar os resultados.
36

Figura 1. Parameciumsp.
3. Observao de ciclose em Elodea.
3.1.Colocar sobre uma lmina limpa uma gota de gua e nela imergir uma pequena folha retirada de um ramo
da Elodea;
3.2.Focalizar a preparao usando sucessivamente as objetivas a seco e registrar as observaes.
- BIBLIOGRAFIA:
1.
Que estruturas celulares esto relacionadas com a motilidade de Tetrasselmis e de protozorios,
respectivamente? Descreva estas estruturas considerando componentes do citoesqueleto.
2.
Que estruturas celulares foram evidenciadas com a utilizao de vermelho neutro e de azul de metileno?
3.
Relacione os movimentos intracelulares observados nas clulas de Elodea com componentes do
citoesqueleto.
4.
Discuta a base molecular dos movimentos celulares observados.
PRTICA IMPRESSO DIGITAL DO DNA
- INTRODUO:
A expresso impresso digital do DNA foi utilizada para fazer aluso ao uso tradicional das impresses
digitais como caractersticas exclusivas de identificao de seres humanos. No entanto, enquanto as impresses
digitais clssicas analisam uma caracterstica fenotpica, a tipagem de DNA analisa diretamente a informao
genotpica. Quando realizados de maneira correta, os testes baseados em DNA podem fornecer evidncias
positivas da identidade de um indivduo.
O pesquisador britnico Alec Jeffreys foi o primeiro a perceber que os polimorfismos de DNA poderiam ser
utilizados para o estabelecimento da identidade de um indivduo humano. Ele cunhou a expresso impresses
digitais de DNA e foi o primeiro a usar os polimorfismos de DNA em testes de paternidade, casos de imigrao e
assassinatos (MICKLOS et al., 2005).
- OBJETIVOS
1. Relacionar os minissatlites com a tcnica de impresso digital do DNA.
2. Identificar recursos materiais necessrios tcnica.
3. Descrever os passos bsicos da tcnica de impresso digital do DNA.
4. Analisar situaes-problema a partir da interpretao de resultados em gel.
5. Analisar aplicaes da tcnica de impresso digital do DNA.
- ANLISE DE SITUAES-PROBLEMA:
1. A auto radiografia abaixo foi utilizada em um caso criminal no qual o ru era acusado de ter esfaqueado
mortalmente uma jovem mulher. As linhas contm as seguintes fontes:
1, 2, 3, 9 e 10 - amostras de DNA controle; 4 - sangue do ru; 5 mancha de sangue na cala do ru; 6 e 7
mancha de sangue na camisa do ru; e 8 sangue da vtima.
Analise os padres de bandas e discuta suas concluses sobre o caso (KARP, 2005).
38

2. Nesta atividade, apresentamos a simulao de experimentos nos quais amostras de DNA de diferentes pessoas
so tratadas com uma enzima de restrio hipottica, que corta as molculas onde houver dois pares C-G/C-G em
sequncia. Abaixo esto representados segmentos de DNA de cinco pessoas (P-1 a P-5). Cada uma tem dois
segmentos, correspondentes a um par de cromossomos homlogos (C A e CB). As sequencias de bases dos
homlogos podem ser ligeiramente diferentes.
a)
Localize, nos dois segmentos de DNA de cada pessoa, todas as sequencias de corte e faa um trao
horizontal de modo a separar os pares C-G/C-G.
b)
Organize os fragmentos obtidos por ordem de tamanho. Para isso conte o nmero de pares de bases de
cada fragmento e preencha o grfico que representa um gel. Cada coluna do grfico simula o padro
eletrofortico de uma pessoa.
c)
Responda s questes abaixo:

Restos de pele encontrados sob as unhas de uma pessoa assassinada foram submetidos ao teste de DNA,
revelando o padro eletrofortico P-5. Trs pessoas, P-1, P-2 e P-3, suspeitas do crime, tambm foram
submetidas ao teste de DNA. Qual delas a provvel culpada?
Dois homens, P-1 e P-2, disputam a paternidade de uma criana, P-4, filha da mulher P-3. Com base no
teste de DNA dos quatro implicados, quem o provvel pai da criana?
d)
Justifique as consideraes abaixo, a partir da identificao de causas e consequencias implicadas.

A identificao positiva do DNA de um suspeito por esta tcnica, particularmente se forem utilizados
diferentes tipos de enzimas de restrio, atinge mais de 99% de acerto.
H a probabilidade nfima de duas pessoas no-gmeas idnticas apresentarem o mesmo padro
eletrofortico do DNA.
- BIBLIOGRAFIA:
KARP, G. Biologia celular e molecular: conceitos e experimentos. 3. ed. Barueri: Manole. 2005. 786 p. il.
MICKLOS, D. A., FREYER, G. A., CROTTY, D. A. A cincia do DNA. 2 ed. Porto Alegre: Artmed. 2005.
- ORIENTAES PARA O ESTUDO: Aps a leitura do livro de LODISH et al., 2005 (p. 407 a 409), discuta as
seguintes questes:
3. Justifique as diferenas existentes nos minissatlites de indivduos da mesma espcie.
4. Comente as solues para as situaes-problema propostas.
5. Discuta aplicaes e limitaes dessa tcnica.
P1
P2
P3
P4
P5
Ca
Cb
Ca
Cb
Ca
Cb
Ca
Cb
Ca
Cb
C-G
C-G
A-T
T-A
T-A
A-T
A-T
A-T
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C-G
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G-C
C-G
C-G
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C-G
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C-G
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C-G
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40

PRTICA MITOSE E MONTAGEM DO CARITIPO
- INTRODUO:
O ncleo de uma clula em intrfase contm fibras cromatinicas tremendamente grandes. O estado
estendido da cromatina interfsica ideal para os processos de transcrio e replicao, mas no para a
segregao em duas clulas-filhas. Antes de segregar seus cromossomos, a clula os converte em estruturas
mais curtas e grossas atravs de um processo notvel de compactao cromossmica (ou condensao
cromossmica), que ocorre durante a prfase inicial. (Karp, 2005).
- OBJETIVOS:
1. Identificar diferentes etapas da diviso celular com base na organizao e distribuio dos cromossomos.
2. Observar diferentes graus de compactao do material gentico.
3. Observar a estrutura de cromossomos metafsicos.
4. Analisar caritipos humanos.
- MATERIAL:
Razes de cebola
Pina
Lamparina a lcool
Esmalte incolor
Lmina de barbear
Papel de filtro
Microscpio
Orcena actica
Vidros de relgio
Lminas e lamnulas
Estilete
Papel de filtro
- PROCEDIMENTO:
1. MITOSE EM RAIZ DE CEBOLA
1.1.Cortar cerca de 3 mm da extremidade da raiz da cebola.
1.2.Colocar os fragmentos em um vidro de relgio, mergulhando-os em orcena actica recm filtrada.
1.3.Aquecer o material, com o apoio de um pegador de madeira, evitando ferver em demasia.
1.4.Colocar uma gota de orcena fria sobre uma lmina.
1.5.Transferir cada um dos fragmentos, previamente aquecido, para a lmina contendo orcena fria.
1.6.Corar por 3 minutos.
1.7.Cobrir a preparao com lamnula e, com o auxlio de um pequeno basto, esmagar o material, de
maneira a dissociar as fibras, sem danificar as clulas.
1.8.Retirar o excesso de orcena com papel de filtro.
1.9.Observar a preparao ao microscpio com as objetivas de menor, mdio e maior aumento, para
identificar clulas em diferentes fases do ciclo celular.
2. CARITIPO HUMANO
A tcnica para obteno de caritipo humano segue os seguintes passos: (1) Coleta de sangue, (2)
Cultivo das clulas em meio de cultura apropriado (para obteno de clulas em diviso), (3) Tratamento das
clulas com colchicina (age sobre o fuso mittico parando a diviso na metfase e mantendo os cromossomos
espalhados), (4) Colorao das clulas com corantes bsicos (reagem com a cromatina que cida), (5) Preparo
de lminas, (6) Anlise ao microscpio (procurando-se metfases com bom espalhamento) Na figura abaixo as
setas indicam algumas metfases, entre muitas outras clulas em intrfase, (7) Fotografia e (8) Montagem do
caritipo. Como uma simulao da montagem do caritipo humano execute as seguintes tarefas:
42

2.1.Monte o caritipo humano a partir da metfase apresentada na ltima pgina deste roteiro.
2.2.Identifique o nmero de pares de cromossomos da espcie humana?
2.3.Identifique o sexo do indivduo cujo caritipo foi investigado, justificando a resposta.
2.4.Classifique os cromossomos dos grupos: B, D e F, conforme a posio do centrmero.
Algumas tcnicas de anlise cromossmica revelam marcas diferenciadas ao longo da cromatina permitindo
identificar os cromossomos, como mostrado no caritipo abaixo. Esta tcnica chamada de bandeamento G e
revela pores heterocromticas dos cromossomos.
Montando o caritipo humano
A figura abaixo a foto de uma metfase humana.
Identifique cada grupo de cromossomos com base no caritipo organizado na pgina seguinte.
Recorte cada um dos cromossomos da metfase em anexo e agrupe-os de acordo com seu
tamanho e posio do centrmero.
Cole cada um deles na ficha vazia na pgina seguinte.
44

Foto: Gentica humana e clnica (Otto, P.A. et al., 2004)
___________________________________
1
2
A
___________________________________
45
B
_____________________________________________________________________________
6 12 e X
C
___________________________________
13 15
___________________________________
16
17
18
___________________________________
___________________________________
19 20
21 22 e Y
46

-BIBLIOGRAFIA:
KARP, G. Biologia celular e molecular: conceitos e experimentos. 3. ed. Barueri: Manole. 2005. 786 p. il.
OTTO, P. A., FROTA-PESSOA, O., OTTO, P. G. Gentica humana e clnica. 2. ed. So Paulo: Editora Roca,
2004.

1. Explique a razo da escolha da ponta de raiz de cebola.
2. Relacione os diferentes aspectos morfolgicos dos cromossomos, com a dinmica de compactao da
cromatina.
3. Discuta a utilizao de substncias anti-mitticas para o estudo dos cromossomos.
48

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Instituto de Biologia Departamento 1 Biologia Geral

BIOLOGIA CELULAR E MOLECULAR (MDULO MORFO-FUNCIONAL I)

componente curricular no sistema de mdulos

T01 (T01) 20 alunos

108 PAC Prof. Rodrigo

T02 (T02) 20 alunos

202 PAC Profa. Tnia

T03 (T03) 20 alunos

108 PAC Prof. Rodrigo

T04 (T04) 20 alunos

202 PAC Profa. Tnia

010100 (P01) 10 alunos

010 IBIO Prof. Rodrigo

010200 (P02) 10 alunos

010 IBIO Prof. Rodrigo

020300 (P03) 10 alunos

014 IBIO Profa. Tnia

020400 (P04) 10 alunos

014 IBIO Profa. Tnia

030500 (P05) 10 alunos

010 IBIO Prof. Rodrigo

030700 (P06) 10 alunos

010 IBIO Prof. Rodrigo

040800 (P05) 10 alunos

014 IBIO Profa. Tnia

040900 (P06) 10 alunos

014 IBIO Profa. Tnia

UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA

07/10 e 09/10 Semana do calouro

Apresentao do curso. Superfcie celular: Estrutura

Superfcie celular: Transporte.

Prtica de diversidade celular.

Dia do servidor pblico.

Prtica de regulao osmtica.

Endomembranas: Ncleo e retculo endoplasmtico.

Endomembranas: Golgi, lisossomos e vias

ESTUDO DE CASO I: PBL.

AT 1 (Superfcie celular: Estrutura, regulao da fluidez e transporte. Endomembranas: Ncleo e retculo

Prtica de citoesqueleto e motilidade celular.

Previa da entrega do Relatrio AP1 (Endocitose)

Entrega da Avaliao Terica 1

Prtica de Impresso digital do DNA.

Entrega da Avaliao do Relatrio de Prtica. Entrega da

Mecanismos de comunicao celular: Molculas,

ESTUDO DE CASO II: PBL.

Estrutura do material gentico.

ESTUDO DE CASO III: PBL.

AT 2 (Citoesqueleto e junes. Mecanismos de comunicao celular: Molculas e receptores. Vias de

Prtica de mitose. Montagem do caritipo.

23, 25 e 30/12 Recesso de Natal e Fim/Inicio de ano

Replicao e reparo do DNA.

Transcrio e Processamento de RNAs: Transcrio

Transcrio e Processamento de RNAs: Transcrio

Traduo do RNAm em protena: Cdigo gentico e

AT 3 (Replicao e reparo de DNA. Transcrio e Processamento de RNAs: Transcrio e sua regulao.

Entrega da Avaliao Terica III

Segunda chamada das avaliaes tericas + Avaliao substitutiva

AP 1 (Endocitose). No Moodle at 23:55 h.

Entrega da avaliao do caso II.

Entrega da avaliao do caso III.

Entrega da Avaliao Terica 2

Obs.: Feriados e recessos segundo o calendrio da cidade de Salvador (http://www.webcid.com.br/?