INFORME: TCNICAS DE TINCIN FACULTAD DE INGENIERA AMBIENTAL Universidad Santo Toms

Presentado por: Camila Leguizamn 2135334, Estudiante USTA Laboratorio de microbiologa ambiental Rafael Barragn Gonzlez 23/09/2013

1. Diagrama de Flujo
Tcnicas de tincin Camila Leguizamn. 2135334

En una lmina portaobjetos limpia y marcada, colocar

una gota de la muestra

Utilizar el asa bacteriolgica estril

Extender la muestra en un rea no mayor a dos centmetros cuadrados

Seguir instrucciones del profesor

Dejar secar la muestra, fijar con el calor

Colorear

Tincin simple

Coloracin de Gram

Colocar la lmina sobre una rejilla

Preparar un frotis segn se indic en la seccin anterior, de la columna de Winogradsky

Cubrir la preparacin con: Cristal violeta: 2 minutos Azul de metileno: 5 minutos Fucsina de gram: 1 minuto Cubra el frotis con pocas gotas del colorante cristal violeta de Gram, dejar 2 minutos, lavar con agua destilada

Eliminar el colorante, lavar con agua a chorro y dejar secar

Realizar la decoloracin con la mezcla alcohol-acetona, por 30 segundos, lavar Agregar el colorante de contraste (fucsina de Gram o safranina) dejar 15 segundos, lavar

Colocar la preparacin en la platina y observar con el objetivo de menor aumento (10x y 40x) Colocar una gota de aceite de inmersin y sobre la preparacin

Observar con objetivo 10X, 40X y 100X. Registrar lo observado

Girar el revolver para que el objetivo 100x, en contacto con el aceite, lograr nitidez

Fin

2. Cuestionario A. Describa y explique el fundamento de 3 tinciones utilizadas en microbiologa, diferentes a las realizadas Tincin cido resistente: una vez teidos, conservan su color resistente al lavado con cido mineral reducido. Con esta tincin las bacterias cido-resistentes conservan el colorante primario color rosa o rojo, los dems microorganismos son decolorados por el cido y toman el color azul. Tincin de Giemsa: el colorante se aplica a un frotis de sangre y se utiliza cuando se sospeche protozoos en la sangre para obtener los ncleos de las clulas. Tincin de esporas: se usa verde malaquita en contraste con sopramina se utiliza para poder distinguir la morfologa celular bacteriana para poder realizar una aproximacin a la degeneracin de las siguientes bacterias que estn en la muestra. B. Cul es el fundamento de la coloracin de Gram Se dice de gram positiva a aquellas bacterias que quedan con tinte morado y gram negativa a aquellas que quedan de color morado. C. Cul es la importancia del gnero Mycobacterium? Por su importancia para la medicina se estudia una sub-rama de la microbiologa llamada microbacteriologa. Son bacterias aerobias y no mviles tienen resistencia al alcohol y al cido, no produce endoesporas ni capsulas y suelen considerarse gram-positivas, las microbacterias colonizan a su husped pero este puede que no muestre signos de enfermedad, esta depende del sitio donde viva ya que puede crear una respuesta unnime por lo acostumbrado que est en el cuerpo, mycrobacterias tuberculosis, mycrobacterias leprae. 3. Resultados Tincin simple:

Tincin compuesta:

Observaciones tomadas con el microscopio (100x)

Morfologas encontradas en las muestras (Tincin de Gram) Cocos Bacilos Vibrios Espirilos Sarcinas Estreptococos Diplococos Gram M1 X X + Acuario M2 X X X X + Acuario M3 X X Columna

4. Anlisis de resultados Cocos, bacilos y diplococos fueron las morfologas ms abundantes en las muestras.

5. Conclusiones

Se logro tener nitidez en las muestras con el diafragma a una altura media y con el consensador arriba. La