Componente Curricular: Qumica dos Alimentos Prof. Barbosa e Prof.

Daniel 4 Mdulo de Qumica Procedimento de Prtica Experimental

Competncias: Identificar as propriedades dos alimentos. Identificar procedimento de amostragem. Selecionar mtodos de anlises para alimentos

Determinao de cafena por mtodo espectrofotomtrico Este mtodo aplicvel a refrigerantes e refrescos que contenham cafena (trimetilxantina), natural ou adicionada, e baseia-se na extrao com clorofrmio em meio alcalino e determinao por espectrofotometria na regio do ultravioleta. Material Espectrofotmetro UV/VIS, cubeta de quartzo de 10 mm, balana analtica, algodo hidrfilo, funil de separao de 250 mL, bquer de 100 mL, pipetas volumtricas de 1, 2, 3, 4, 5, 10 e 20 mL, proveta de 50 mL e bales volumtricos de 50 e 100 mL. Reagentes Cafena com pureza mnima de 99% Clorofrmio, grau espectrofotomtrico Soluo redutora - Pese 5 g de sulfito de sdio e 5 g de tiocianato de potssio, dissolva em gua e dilua a 10 mL em balo volumtrico. Soluo de hidrxido de sdio a 25% m/v Soluo de permanganato de potssio a 1,5% m/v Soluo de cido fosfrico -- Dilua 15 mL de cido fosfrico (d=1,69g/cm3) em 85 mL de gua Sulfato de sdio anidro Soluo-padro de cafena - Pese 100 mg de cafena, dissolva e dilua em clorofrmio num balo volumtrico de 100 mL. Pipete 10 mL da soluo-estoque de cafena e dilua a 100 mL com clorofrmio. Esta soluo contm 0,1 mg de cafena por mL de clorofrmio.

Procedimento - Pipete de 20 a 50 mL da amostra descarbonatada para um funil de separao. Junte 10 mL da soluo de permanganato de potssio a 1,5 % e agite. Aps 5 minutos, junte 20 mL da soluo redutora com agitao contnua. Adicione 2 mL da soluo de cido fosfrico e agite. Adicione 2 mL da soluo de hidrxido de sdio a 25 % e agite. Extraia a cafena com trs pores de 30 mL de clorofrmio. Aps a separao, retire a camada inferior e filtre-a em sulfato de sdio anidro e algodo e recolha os filtrados em um mesmo balo volumtrico de 100 mL. Lave a haste do funil de separao e o filtro com pores de 2 mL de clorofrmio, aps cada extrao. Complete o volume com clorofrmio. Determine a absorbncia a 276 nm, usando clorofrmio como branco. Para amostras com alto teor de cafena, faa uma diluio pipetando uma alquota de 10 mL para balo volumtrico de 50 mL, complete o volume com clorofrmio e faa a leitura da absorbncia a 276 nm. Curva-padro - Pipete 1, 2, 3, 4, 5 e 6 mL da soluo-padro de cafena para bales volumtricos de 50 mL e complete o volume com clorofrmio. Estas solues contm, respectivamente, 0,2; 0,4; 0,6; 0,8; 1 e 1,2 mg de cafena por 100 mL de clorofrmio. Determine a absorbncia dessas solues a 276 nm,

usando clorofrmio como branco. Trace a curvapadro, registrando os valores de absorbncia nas ordenadas e as concentraes de cafena em mg/100 mL de clorofrmio nas abcissas.

Clculo Calcule a concentrao de cafena na amostra usando a curva-padro. C x 100 x f = cafena em mg/100 mL A C = concentrao de cafena na amostra correspondente leitura da curva-padro A = volume da amostra, em mL f = fator de diluio para o caso de amostra com alto teor de cafena. Referncia Bibliogrfica ASSOCIATION OF OFFICIAL ANALYTICAL CHEMISTS. Official methods of analysis of the Association of Official Analytical Chemists (method 962.13) Arlington: A.O.A.C., 1995. chapter 29. p. 3.