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ESCUELA SUPERIOR POLITCNICA DEL LITORAL

Informe de qumica analtica

PRACTICA 9:
Medicin de la absorbancia a la clorofila

Andrea Jaramillo

22-ago-13

Objetivos:

o Mediante la espectrofotometra, cuantificar distintas soluciones de clorofila. o Establecer las diferencias que hay la medicin de la concentracin del acetona usando agua
y acetona como sustancia patrn. Introduccin terica: La clorofila es el pigmento de color verde presente en plantas y algas siendo elemento bsico para la transformacin de la energa del sol en el proceso de la fotosntesis. Este pigmento tpicamente dos picos de absorcin en el espectro visible, uno en el entorno de la luz azul (400-500 nm de longitud de onda), y otro en la zona roja del espectro (600-700 nm); sin embargo reflejan la parte media del espectro, la ms nutrida y correspondiente al color verde (500-600 nm). Esta es la razn por la que las clorofilas tienen color verde y se lo confieren a los organismos, o a aquellos tejidos, que tienen cloroplastos activos en sus clulas, as como a los paisajes que forman. La clorofila puede ser extrada con acetona al 80% de hojas verdes, aparece color verde. El extracto de clorofila puede variar con profundidad del verde o tinte de verde dependiendo del material vegetal del cual se extrajo. Por muy cuidadoso que sea el anlisis basado en inspeccin visual, este es meramente cualitativo y excluye medidas cuantitativas o la habilidad para distinguir variantes en la molcula de clorofila. Para aprender ms acerca de la clorofila extrada, se requiere de un espectrofotmetro para anlisis electrnico. Tal procedimiento nos proveer con informacin cuantitativa basada en la luz absorbida y en largos de onda especficos.

Materiales y reactivos: Espectrofotmetro Celdas para espectrofotmetro 2 pipetas graduadas de 5 ml0.01 Piseta con agua destilada. Balanza Tubos de ensayo Mortero Hojas verdes Acetona Agua destilada

Procedimiento:
1. Recolectar hojas verdes provenientes de rboles y pesar 5 gramos aproximadamente de ellas. Anotar la masa exacta.

2. Poner los gramos de hojas pesados en un mortero y agregar 10ml de acetona. Moler las hojas lo ms posible. 3. Colocar el lquido extrado en un tubo de ensayo. sta ser la muestra madre. 4. De la muestra madre extraer 0.25 ml, 0.50 ml, 0.75ml y 1.00 ml y colocarlos en diferentes tubos de ensayos. Enrasar hasta 10ml con acetona. 5. Medir la absorbancia y transmitancia de las soluciones de clorofila con el espectrofotmetro. El blanco en este caso ser la acetona. Colocar una longitud de onda de 643 nm. 6. Repetir el mismo procedimiento pero esta vez con el agua como blanco. Imgenes:

Figura 1: Soluciones de clorofila a distintas concentraciones.

Figura 2: Extracto de las hojas.

Obtencin de datos:
Tabla #1: Concentraciones de clorofila con solucin de acetona.

ml de muestra madre 0.25ml 0.50ml 0.75ml 1.00ml

A (absorbancia) 0.208 0.406 0.671 1.037

T (transmitancia) 62.0 39.2 21.2 09.2

Tabla #2: Concentraciones de clorofila con solucin de agua.

ml de muestra madre 0.25ml 0.50ml 0.75ml 1.00ml

A (absorbancia) 0.349 0.676 1.200 1.506

T (transmitancia) 44.8 21.2 6.3 3.1

Clculos: Concentracin de clorofila:

Para C2= 500mg0.25ml/10ml = 12.5mg Para 0.50ml C2= 500mg0.50ml/10ml = 25mg Para 0.75ml

0.25ml C2= 500mg0.75ml/10ml = 37.5mg Para 1.00ml C2= 500mg1.00ml/10ml = 50

Grficos:

Absorbancia vs Concentracin (Solucin Acetona)


1.2 1 0.8

Absorbancia

0.6 0.4 0.2 0 0 10 20 30 40 50 60

Concentracin (mg)

Absorbancia vs Concentracin (solucin en agua)


1.6 1.4 1.2

Absorbancia

1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0 10 20 30 40 50 60

Concentracin (mg)

Conclusiones: Luego de realizar esta prctica pudimos cumplir con los objetivos propuestos ya que analizamos la concentracin de clorofila presente en las hojas. Para esto utilizamos la acetona y el agua como blanco y para hacer las soluciones. Despus de preparar las soluciones de clorofila a distintas concentraciones, se pudo observar una relacin directamente proporcional entre la absorbancia y la concentracin de la clorofila tanto en las soluciones con agua como en acetona. A pesar de que la acetona es un disolvente orgnico y en teora debi haber extrado una mayor cantidad de clorofila que el agua, se obtuvieron mayores concentraciones de absorbancia con las soluciones de clorofila y agua.

Recomendaciones: Preparar adecuadamente la solucin madre para obtener valores exactos de la concentracin de las soluciones. Agitar las soluciones antes de colocarlas en el espectrofotmetro para tener buenas mediciones. Bibliografa: o Introduccin a la qumica analtica / Skoog, Douglas a.; West, Donald m.
o Anlisis qumico, Jeffery Berry, segunda edicin, 1999

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