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INTRODUO

O mtodo de avaliao de alteraes cromossmicas em razes de Allium validado pelo Programa Internacional de Segurana Qumica (IPCS, OMS) e o Programa Ambiental das Naes Unidas (UNEP) como um eficiente teste para anlise e monitoramento in situ da genotoxicidade de substncias ambientais (Cabrera; Rodriguez, 1999). O sistema de teste de Allium bem aceito para o estudo de efeitos de citotoxicidade de plantas medicinais devido s suas razes permanecerem em contato direto com a substncia testada, permitindo a avaliao de concentraes diferentes. As alteraes cromossmicas e as da diviso das clulas meristemticas da raiz de cebola so freqentemente usados para alertar a populao sobre o consumo do produto (Vicentini et al., 2001). Os efeitos das infuses de plantas medicinais sobre o ciclo celular de Allium cepa tm sido relatados por vrios autores (Vicentini et al., 2001; Camparoto et al., 2002; Teixeira et al., 2003; Knoll et al., 2006; Fachinetto et al., 2007), os quais mostraram que os principais efeitos que ocorrem so mutagenicidade e anti-mutagenicidade, bem como aumento e diminuio da proliferao celular de pontas de razes tratadas com diferentes espcies de plantas medicinais. Alm de sua grande utilizao nos testes de citotoxicidade/mutagenicidade de plantas medicinais, o sistema teste de Allium cepa pode ser utilizado para o monitoramento da poluio ambiental e avaliao do potencial mutagnico de muitos compostos qumicos. Clulas meristemticas de razes de plantas so indicadores apropriados para a deteco de efeitos clastognicos causados por poluentes do meio ambiente, especialmente para o monitoramento de contaminantes da gua e do solo (Ma et al., 1995). El Shahaby et al. (2003), consideraram o sistema teste de Allium cepa o mais adequado para deteco de toxicidade/genotoxicidade para avaliao de nveis de poluio ambiental, os quais representam riscos diretos ou indiretos para a populao humana. Corantes so aditivos alimentares definidos como toda substncia que confere, intensifica ou restaura a cor de um alimento. Segundo o Item 1.2 da Portaria SVS/MS 540/97 , aditivo qualquer ingrediente adicionado intencionalmente aos alimentos com o objetivo de modificar suas caractersticas fsicas, qumicas, biolgicas ou sensoriais, durante sua fabricao, processamento, preparao, tratamento, embalagem, acondicionamento, armazenagem, transporte ou manipulao, sem o propsito de nutrir. O intensificador de sabor alimentcio mais conhecido e mais utilizado o Glutamato monossdico, designado pela sigla GMS. Trata-se de um aditivo colocado no alimento, para realar o seu sabor (entre outros, citamos como exemplos os famosos Aji-nomoto, caldo Maggi, caldo Knorr). Entra na composio de uma diversidade de alimentos industrializados, sendo tambm muito usado pelos restaurantes e lanchonetes no preparo de sua comida.

MATERIAIS E MTODOS

Os materiais utilizados no experimento foram os seguintes: 8 cebolas Copos pequenos de plstico ( Copos de gelatina) Palitos de dentes Caldo Knorr de carne Estilete Pina Lminas Lamnulas Papel toalha Caneta colorida Pipeta Caixa de plstico Poos gua destilada cido actico (3:1) Soluo de HCL 5N Orcena actica 2%

Primeiramente, com o auxlio do estilete, foi feita a raspagem das razes velhas das cebolas, tendo-se o cuidado de no retirar o meristema apical das mesmas e impedir assim o crescimento de novas razes. Em seguida, palitos de dente foram atravessados horizontalmente na parte superior da cebola (oposta ao bulbo). Adicionou-se gua destilada nos copos pequenos de plsticos em quantidade suficiente para que o bulbo entrasse em contato com a gua. Deixou-se as cebolas em repouso na gua destilada por 24 horas e aps tal tempo a gua foi trocada e as cebolas permaneceram em repouso no mesmo sistema por mais 24 horas. No terceiro dia de experimento, a gua destilada foi retirada e em seu lugar foram postas solues previamente preparadas de duas formas: uma feita de acordo com as instrues do fabricante (soluo uso), onde diluiu-se 1 tablete de caldo Knorr de carne em 500 ml de gua fervente; e a outra feita trs vezes mais concentrada (soluo 3x). Dividiu-se as cebolas nas solues de forma que 4 cebolas foram postas em soluo uso e as outras 4 cebolas postas em soluo 3x e tal sistema ficou em repouso por mais 24 horas. No dia seguinte, com o auxlio de uma pina, foram retiradas duas razes, que apresentaram bom crescimento, de cada cebola. Tais razes foram postas em poos contendo cido actico (3:1) por 30 minutos, e separando-as de acordo com suas classificaes: uso e 3x. Passados os 30 minutos, com o auxlio de uma pipeta retirou-se e descartou-se o cido actico. Nos poos contento as razes foi posta soluo de HCL 5 N e esperou-se mais 20 minutos. Posteriormente, esta soluo foi retirada com a pipeta e as razes foram lavadas com gua destilada, injetando e retirando gua diversas vezes rapidamente. As razes lavadas foram colocadas sobre lminas, devidamente identificadas de acordo com as suas solues, e sobre as razes pingou-se, com o auxlio da pipeta, orcena actica 2% e aguardou-se 5 minutos atentando-se sempre para que o corante no secasse. Em seguida, lamnulas foram postas sobre as razes com corante, cuidadosamente para se evitar a formao de

bolhas e, aps montadas, estas lminas foram embrulhadas no papel toalha e utilizando-se o polegar foi feito o esmagamento das razes. Depois de preparadas, as lminas foram postas em uma caixa de plstico e devidamente separadas de acordo com as suas identificaes. Para a realizao da anlise, estas lminas foram observadas em microscpio.

Resultados
Os resultados variaram de acordo com as concentraes das solues em que as razes foram expostas. Na soluo que apresentava a concentrao de uso pde-se observar um acmulo de clulas em prfase, representando assim uma estagnao do ciclo celular, alm de se verificar tambm indicaes de morte celular. Na soluo trs vezes (3x) mais concentrada observou-se a presena de gumes, muitas indicaes de morte celular e nenhuma clula em diviso.

Concluso
Com o teste de Allium cepa pde-se verificar as modificaes que o caldo alimentcio, no caso do determinado experimento o caldo Knorr de carne, causa nas clulas das razes das cebolas alm das interferncias causadas no crescimento das mesmas, comprovando assim sua toxicidade para as cebolas. Apesar dos resultados obtidos no se pde garantir que esta toxicidade afeta o organismo humano.

Referncias Bibliogrficas
Cabrera GL, Rodriguez DMG 1999. Genotoxicity of soil from farmland irrigated with wastewater using three plant biossays. Mutat Res 426: 211-214; Camparoto ML, Teixeira RO, Mantovani MS, Vicentini VEP 2002. Effects of Maytenus ilicifolia Mart. and Bauhinia candicans Benth infusions on onion root-tip and rat bone-marrow cells. Genet Mol Biol 25: 85-89. El-Shahaby AO, Abdel Migid HM, Soliman MI, Mashaly IA 2003. Genotoxicity screening of industrial wastewater using the Allium cepa chromosome aberration assay. Pak J Biol Sci 6: 23-28. Fachinetto JM, Bagatini MD, Durigon J, Silva ACF, Tedesco SB 2007. Efeito antiproliferativo das infuses deAchyrocline satureioides DC (Asteraceae) sobre o ciclo celular de Allium cepa. Rev Bras Farmacogn 17: 49-54. Knoll MF, Silva ACF, CantoDorow TS, Tedesco SB 2006. Effects of Pterocaulon polystachyum DC. (Asteraceae) on onion (Allium cepa) root-tip cells. Genet Mol Biol 29: 539-542. Ma TH, Xu Z, Xu C, McConnell H, Rabago EV, Arreola GA, Zhang H 1995. The improved Allium/Vicia root tip micronucleus assay for clastogenicity of environmental pollutants. Mutat Res 334: 185-195. Vicentini VEP, Camparoto ML, Teixeira RO, Mantovani MS 2001. Averrhoa carambola L., Syzygium cumini (L.) Skeels and Cissus sicyoides L.: medicinal herbal tea effects on vegetal and test systems. Acta Scientiarum 23: 593-598; www.infopedia.pt , acesso em 3 de maro de 2013 s 19h07

www.saudecompleta.blogspot.com.br , acesso em 3 de maro de 2013 s 19h22