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MANUAL DE PRACTICAS DE BIOTECNOLOGIA MSc JHON GARCIA LOPEZ -----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

La fermentacin de las levaduras


En esta actividad los alumnos podrn comprobar la produccin de un producto gaseoso como resultado de la actividad metablica de las levaduras. Teniendo en cuenta que se trata de un proceso anaerobio, se puede concluir que el gas desprendido es dixido de carbono. Materiales: Tubos de ensayo Agua Azcar Levaduras Bao de Hielo Bao de agua tibia (30C) Globitos de goma (bombitas) Procedimiento: la siguiente tabla muestra los materiales que se deben colocar en cada tubo:

Preguntas para el anlisis de la experiencia: 1. Cul es el proceso que estudia este experimento? Explicar en qu consiste. 2. Qu variables se probaron? 3. Cmo es posible explicar las diferencias obtenidas en los diferentes tubos?

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Fijacin Biolgica de Nitrgeno


Objetivo: Comprobar los beneficios de la Fijacin Biolgica de Nitrgeno atmosfrico y de la inoculacin. Se sugiere dividir el curso en tres grupos. Material por grupo de alumnos: 20 semillas de poroto o soja 10 frascos de plstico con tapa para usar como macetas Tierra (suficiente para llenar 10 frascos) Inoculante (se puede conseguir una muestra en una semillera o productora de inoculantes) Lavandina comercial Agua hervida durante 15 minutos Procedimiento por grupo - Esterilizar la mitad de la tierra. Una forma sencilla de esterilizarla consiste en hervir la tierra disuelta en agua durante 15 minutos en una olla de presin o durante 30 minutos en una olla comn. - Filtrar la tierra con una tela y dejarla enfriar. - Hacer pequeos agujeros en la base de los frascos para permitir que drene el agua de riego de las macetas. - Llenar dos de las macetas con tierra estril y dos con tierra no estril. - Hacer cuatro agujeros en cada una de las tapas (suficientemente grandes como para que entren las semillas) y tapar las macetas. - Esterilizar las semillas: diluir el cloro al 20% (un volumen de cloro por cuatro de agua) y sumergir las semillas en esta solucin durante 20 minutos. Luego enjuagarlas con agua hervida o desinfectada. - Slo dos de los tres grupos usarn el inoculante. Inocular la mitad de las semillas segn recomendaciones del fabricante. - Sembrar las semillas segn los siguientes tratamientos: 1: Sembrar 10 semillas no inoculadas en 5 macetas con tierra estril (2 semillas por maceta). 2: Sembrar 10 semillas no inoculadas en 5 macetas con tierra no estril (2 semillas por maceta). 3: Sembrar 10 semillas inoculadas en 5 macetas con tierra estril (2 semillas por maceta). 4: Sembrar 10 semillas inoculadas en 5 macetas con tierra no estril (2 semillas por maceta). Nota: cuidar que las semillas queden cubiertas con tierra. - Cultivar las plantas durante 20 das, regndolas con agua hervida (fra). o Solicitar a los alumnos que escriban los resultados que esperan obtener al momento de hacer la siembra. o Analizar los resultados obtenidos. Comparar las 4 tratamientos: buscar presencia de ndulos, tamao de las plantas, color de las hojas, actividad de los ndulos (una coloracin rojiza indica que estos ndulos son activos. Otros colores, como verde o blanco indican ausencia de actividad.) o Contrastar los resultados obtenidos con los esperados. - Cada alumno escribir en su cuaderno la conclusin que sacan a partir de los resultados obtenidos.

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MANUAL DE PRACTICAS DE BIOTECNOLOGIA MSc JHON GARCIA LOPEZ ----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------Resultados esperados: en los tratamientos 2, 3 y 4 las plantas deberan crecer ms que las del tratamiento 1, debern ser de un color verde ms intenso y presentar ndulos en sus races, debido a la presencia de bacterias fijadoras de nitrgeno preexistentes en la tierra o por causa de la aplicacin de inoculantes. Las semillas inoculadas deberan presentar mayor nmero de ndulos que en el tratamiento sin inoculacin. En el tratamiento 1 no deberan visualizarse ndulos porque los microorganismos preexistentes deberan haberse degradado por la esterilizacin. Importante: si la tierra es muy rica en nitrgeno o es muy cida, las diferencias no podrn observarse con facilidad, ya que ambos factores acten inhibiendo la nodulacin, por lo cual se recomienda que las pruebas se realicen con tierra de diferentes zonas, para asegurar el xito de esta actividad.

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Germinacin de porotos de soja in vitro


Esta actividad experimental incluye varios pasos, por lo que se sugiere una lectura previa con los alumnos de toda la experiencia, antes de ir al laboratorio para interpretar cada etapa, familiarizarse con la metodologa a emplear, conocer los objetivos de la experiencia, y las observaciones y registros que debern realizar. Al llegar al laboratorio, es importante identificar los materiales, organizar la tarea y ordenar el trabajo en los grupos de manera de hacer un trabajo seguro y controlado tomando todos los recaudos necesarios, fundamentalmente, al trabajar con fuego. Si los grupos deben compartir elementos de trabajo, es importante que el docente ordene los grupos para trabajar de manera organizada, sin que se amontonen alumnos y se corran riesgos. a. Preparacin de medio de cultivo Materiales: - 1 sobre de gelatina sin sabor, cantidad para 1 litro de gelatina. Nota: en el prctico se lo disuelve con menos lquido para que resulte ms consistente. - 20 g de azcar - 750 ml. de agua caliente - Mechero de Bunsen - Olla a presin - 2 botellas de litro de vidrio resistente al calor, con tapa Procedimiento 1. Dividir el agua en dos botellas de litro de vidrio y agregar la gelatina sin sabor de forma equitativa en los dos frascos. 2. Agregar en cada frasco 10 g de azcar y mezclar hasta que la mezcla quede homognea. 3. Esterilizar en olla a presin durante 20 minutos con las tapas de los frascos flojas Nota: si las botellas estn cerradas corren riesgo de explosin. Nunca llenar las botellas por completo con el medio de cultivo porque se derramar y adems no alcanzar la temperatura de esterilizacin necesaria. 4. Apagar el fuego y dejar que se iguale la presin interna de la olla con el exterior. 5. Abrir la olla y cerrar las botellas. b. Preparacin de material de vidrio para distribuir el medio de cultivo Materiales: Frasquitos de vidrio estriles con tapa Procedimiento 1. Distribuir 50 o 100 ml de medio de cultivo, preparado y esterilizado, en los frasquitos (segn el volumen de los mismos). 2. Realizar este procedimiento por delante de un mechero prendido, abriendo los frascos y botella cerca de la llama (no hablar ni soplar para no contaminar). 3. Distribuir e inmediatamente cerrar los frascos tambin cerca de la llama. 4. Dejar que la preparacin se solidifique y enfre.

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MANUAL DE PRACTICAS DE BIOTECNOLOGIA MSc JHON GARCIA LOPEZ ----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------c. Desinfeccin de granos o porotos de soja Materiales: - Granos de soja comercial - Alcohol 70% (70 ml de alcohol diluido en 30 ml de agua) - Lavandina 20% (20 ml de lavandina comercial diluida en 80 ml de agua) - Agua estril (esterilizar de la misma forma que el medio de cultivo) - Pinza de metal - Recipientes bien limpios para desinfectar las semillas Procedimiento 1. Usando una pinza estril, pasar los granos de soja durante un minuto por una solucin de alcohol 70%. 2. Luego sumergirlos en lavandina al 20% durante 15 minutos y por ltimo, darles 4 lavados en agua estril. Nota: Tanto para la desinfeccin como para la siembra, la pinza se esterilizar de la siguiente manera: mojar la pinza en alcohol puro, quemarla a rojo en el mechero, dejar enfriar Esto se realizar al inicio de cada etapa que requiera el uso de la pinza. Si la pinza se usa muchas veces para lo mismo, solo se mojar la pinza con alcohol y se quemar sin llevar a rojo. No usar guantes mientras se trabaja con el mechero. d. Siembra 1. Sembrar con pinza estril 4 granos por frasco de modo que el hilio (punto oscuro) quede hundido en el medio de cultivo y el resto del grano por encima del mismo. 2. Asegurarse de que los porotos queden firmes o agarrados al medio pero no totalmente hundidos (por lo menos la mitad del poroto debe salir hacia la superficie, de lo contrario no germinar). Nota: Esta etapa se realizar cerca del mechero. Esterilizar la pinza cada vez que tomo un nuevo grano 3. Tapar cada frasco con papel film (el de envolver alimentos) y dejar a una temperatura entre 24 y 26 (no debe ser menor a 20C), en un lugar donde reciba luz directa durante el da. e. Observaciones y Registro Desde el comienzo de la actividad se aconseja que los alumnos diseen un cuadro de 10 filas en el cual registrarn los cambios que observen durante 10 das: 1. Si hay imbibicin de las semillas (si absorben lquido y se hinchan); 2. Si hay emergencia de races 3. Cul es la longitud de la raz y cmo va variando a lo largo de los das. 4. Una vez obtenida la germinacin completa, se le pedir a los alumnos distinguir los cotiledones (hojas de reserva) del resto de las hojas, si hay presencia de pelos en las hojas, etc.

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Proteasas del anan


Objetivo: En la siguiente actividad, se propone probar la actividad de ciertas enzimas presentes en el anan y compararlas con otras frutas. Algunas frutas tropicales producen enzimas con actividad proteasa, es decir, que rompen las protenas el romper las uniones covalentes entre los aminocidos que la constituyen. Por ejemplo, la papaya produce una proteasa conocida con el nombre de papana y el anan produce la bromelina (nombre derivado del nombre del grupo de plantas al cual pertenece el anan, las Bromeliades). Procedimiento: Marcar 4 tubos de ensayo con los nmeros del 1 al 4. Colocar en el tubo 1 un pequeo trozo de anan fresco, en el tubo 2 algunas gotas de jugo de anan, en el tubo 3 un trozo pequeo de manzana, y dejar vaco el tubo 4. Preparar en un recipiente gelatina siguiendo las instrucciones del envase. Agregar a cada tubo aproximadamente 3 ml de la gelatina recin preparada todava lquida, mezclar haciendo rotar los tubos, y colocar todos los tubos en un bao de hielo durante 5 a 10 minutos. Cuando el tubo 4 contenga una gelatina firme, observar los restantes tubos y comparar los resultados. Registrar los resultados observados en cada tubo en una tabla.

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Tincin casera de flores


El objetivo de esta actividad es poner en prctica un mtodo simple de tincin de flores y analizar la diferencia entre esta metodologa y la aplicada a travs de tcnicas de ingeniera gentica. Materiales Recipientes transparentes de unos 250 ml. Colores vegetales, anilinas, o tinta china Claveles u otras flores blancas con tallo Agua Una navaja o un cuchillo Soluciones a diferente pH Procedimiento 1. Disolver en agua, en cantidades iguales, el colorante y colocarlo en un recipiente. 2. Sin separar el tallo de la flor, introducirlo en el recipiente con la solucin colorida. 3. Dejarla en reposo durante varias horas y anotar las observaciones. (Atencin: para acelerar el proceso se puede proporcionar calor a la flor mediante un secador). 4. Luego, cambiar de florero y colocar la flor en agua limpia o en soluciones con diferentes pH. 5. Dejarla en reposo durante varias horas y anotar las observaciones.

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Extraccin de ADN vegetal


Los estudiantes extraern ADN de bananas licuadas con agua. Una parte de esta mezcla de banana, luego es tratada con shampoo y sal, mezclada durante 5-10 minutos, y luego escurrida a travs de un filtro de caf. A lo filtrado se le agrega alcohol fro y es ste el momento cuando el ADN de la solucin de banana se precipita y se hace visible. El detergente disuelve los lpidos (molculas grasas) y las protenas de la membrana celular, rompiendo las uniones que mantienen la integridad de la misma. De esta forma se libera el contenido celular. Luego, el detergente forma complejos con los lpidos y las protenas, permitiendo que los mismos sean separados del ADN por filtracin. As se libera el ADN. La sal permite que el ADN precipite en una solucin fra de alcohol y que las cadenas de ADN no se corten. Nota para el docente: se recomienda que el material vegetal utilizado sea con poca coloracin para facilitar la observacin de los resultados, como ser, bananas o cebollas. En este caso se har extraccin de ADN de banana. Al final de la gua prctica se sugiere una serie de preguntas para analizar con los alumnos los resultados de la experiencia. Materiales: 1 tazas o vaso de plstico (por grupo) Licuadora Una cuchara plstica para medir y mezclar 2 filtros de papel de caf N 2 (conos) 20 ml de agua destilada Shampoo de color claro 1 banana Sal de mesa, con o sin Iodo 1 pipeta de transferencia plstica o un gotero mdico 1 tubo de ensayo sellado que contenga 95% de etanol o 91% de alcohol isoproplico 1 conservadora con hielo para enfriar los tubos con alcohol 1 varilla de vidrio o 1 pipeta Pasteur Procedimiento para la extraccin del ADN Preparar una solucin de banana procesada con sal, agua destilada y shampoo (detergente) mediante los siguientes pasos: 1. En una licuadora, mezclar una banana por taza de agua destilada (250ml). 2. Licuar por 15-20 segundos, hasta que la solucin se mezcle. 3. En una taza, preparar una solucin consistente en una cucharadita de t de shampoo y dos pizcas de sal. 4. Agregar 20 ml (4 cucharaditas) de agua destilada. 5. Disolver la sal y el shampoo revolviendo lentamente con la cuchara de plstico evitando formar espuma. 6. A la solucin preparada en el paso 3, agregar tres cucharaditas de t de la mezcla de banana del paso 1. 7. Mezclar la solucin con la cuchara por 5-10 minutos.

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MANUAL DE PRACTICAS DE BIOTECNOLOGIA MSc JHON GARCIA LOPEZ ----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------8. Mientras uno de los miembros del grupo mezcla la solucin de banana, otro miembro pondr el filtro N 2 de caf dentro de otra taza de plstico. Doblar el borde del filtro alrededor de la taza para que el filtro no toque el fondo de la taza. 9. Filtrar la mezcla vertindola dentro del filtro y dejar que la solucin drene por algunos minutos hasta que sean 5 ml aproximadamente de filtrado para testear. 10. Tomar un tubo de ensayo con alcohol fro. Para mejores resultados el alcohol debe estar tan fro como sea posible. 11. Llenar la pipeta plstica con la solucin de banana y agregarla al alcohol. El ADN no es soluble en alcohol. Cuando el alcohol se agrega a la mezcla, los componentes, excepto el ADN, permanecen en la solucin mientras el ADN precipita en la capa de alcohol. 12. Dejar la solucin reposar por 2 a 3 minutos sin mover. Es importante no batir el tubo de ensayo. Se puede observar el ADN blanco el cual precipita en la capa de alcohol. 13. Cuando se obtienen buenos resultados, habr suficiente ADN para levantar con una varilla de vidrio (el ADN se enrolla a la varilla). O usando una pipeta de Pasteur que haya sido calentada en la punta para formar un gancho, se puede recuperar (tomar) algo de ADN. El ADN tiene la apariencia de mucus blanco y fibroso.

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Extraccin de ADN de levaduras


Materiales taza de levadura (de la que se usa para hacer pan) 300 ml de agua fra 4 cucharaditas de sal fina dos chorros de jugo de limn colador de t tres cucharaditas de alcohol dos gotas de detergente Procedimiento 1. Mezclar media taza de levadura con 150 ml de agua fra, _ de cucharadita de sal y dos chorros de jugo de limn. 2. Agitar suavemente (para que se abran las paredes de las clulas). 3. Pasar la mezcla por un colador de t y conservar la pulpa. 4. Repetir el filtrado y conservar nuevamente la pulpa. 5. Preparar 150 ml de agua fra con _ cucharadita de sal, tres cucharaditas de alcohol y dos gotas de detergente. 6. Agregar la pulpa y mezclar (el detergente disuelve el ADN). 7. Revolver suavemente durante 20 minutos. 8. Agregar 3 cucharaditas de sal y agitar 10 minutos ms. 9. Dejar reposar hasta que se forma un precipitado slido (se tira). Conservar el lquido. 10. Diluir el lquido con tres veces su volumen de alcohol. 11. El ADN precipita en el fondo del vaso en forma de finas hebras blancas. Sugerencia para el prctico: Si algn grupo quiere traer algn otro producto de la verdulera para extraer su ADN, se sugiere que no sea muy colorido (por ejemplo, repollo colorado, aj morrn) para que no opaque la visin del ADN ni muy duro (zanahoria cruda, poroto de soja, granos de trigo, etc), porque se dificultar la molienda y en consecuencia se obtendr menor cantidad de ADN.

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Produccin de biogas
El biogas es un gas producido por la accin de microorganismos sobre materia orgnica de desecho, por ejemplo restos vegetales (cscaras de frutas, hojarasca, etc.) o estircol (excremento de animales). Durante este proceso de transformacin de la materia los microorganismos obtienen energa mediante diferentes procesos. Algunos de los microorganismos liberan dixido de carbono en el proceso de respiracin, que otros microorganismos emplean en la fermentacin y producen metano que liberan al entorno. El metano producido por este mtodo es una fuente de energa alternativa, denominada bioenerga, que puede reemplazar a las fuentes tradicionales de energa. Propsito de la actividad La experiencia consiste en la construccin de un digestor de materia orgnica, donde se podr comprobar la produccin de biogs por la accin de los microorganismos anaerobios (bacterias metangenas), que estn presentes en los desechos orgnicos. Mediante esta experiencia es posible demostrar la accin de un tipo de microorganismos que se incluye en el grupo de los extremfilos: las bacterias metangenas que viven en ausencia de oxgeno. Construccin del digestor de materia orgnica Materiales botella plstica de dos litros de capacidad, con tapa manguera de goma pinza o llave para cerrar la manguera tapn agujereado por donde atravesar la manguera de goma o un tubo de vidrio al que se unir la manguera de goma mechero caja de cartn, de madera o de telgopor lmpara de 60-75 watt que proveer de calor al sistema estircol de caballo, de vaca o de aves y restos vegetales agua hervida (sin cloro) agua de cal (se utiliza para comprobar la presencia de dixido de carbono). 2. Armado del digestor colocar los restos orgnicos dentro de la botella hasta la mitad de su capacidad; llenar la botella con agua hasta cubrir la materia orgnica (y un poco ms); cerrar la botella con el tapn que ya tiene atravesada la manguera o el tubo de vidrio; adems de poner el tapn se puede sellar la botella con una resina o con la misma tapa a rosca de la botella (que debe estar perforada para que entre el tapn) para evitar la fuga de gas o que el tapn se libere (ya que puede ser despedido por la presin que ejerce el gas que se acumula en la botella); unir la manguera al mechero y cerrarla con la pinza; colocar la botella dentro de la caja junto con la lmpara que debe permanecer encendida todo el tiempo para mantener la temperatura a 40oC aproximadamente. 3. Desarrollo Al cabo de 7 - 10 das, aproximadamente, el lquido de la botella tendr burbujas. Al tocar la manguera que la cierra, es posible comprobar que la presin es diferente a ambos lados de la llave.

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MANUAL DE PRACTICAS DE BIOTECNOLOGIA MSc JHON GARCIA LOPEZ ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- Colocar el extremo de la manguera dentro de un recipiente con agua de cal. Abrir la manguera para dejar salir el gas acumulado en la botella. Si el agua se pone turbia indica que la manguera despidi dixido de carbono que se produjo en la botella. Estrangular la botella para sacar la mayor cantidad posible de dixido de carbono. Volver a cerrar la llave de la manguera. A partir de este momento, habiendo poco oxgeno en la botella (consumido en una primera etapa por la respiracin de algunos microbios) se intensifica la produccin de gas metano por otro tipo de bacterias que no necesitan oxgeno. La produccin de biogs (metano) lleva varios das y, a medida que se produce, la botella estrangulada se hincha. Para comprobar la produccin de biogs abrir la llave de la manguera y prender el mechero. Aclaracin: hay que tener en cuenta que se trabaja con microorganismos que, como otros seres vivos, necesitan condiciones adecuadas para cumplir con sus actividades. Puede ocurrir que haya fluctuaciones en las condiciones de la experiencia y que la produccin de biogs sea escasa. En ese caso, se debe probar nuevamente hasta que se encuentren las condiciones adecuadas.

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Fabricacin de una hoja de papel


El objetivo de la actividad es conocer los principios bsicos del reciclado de papel, partiendo de papel de desecho. Puede realizarse con alumnos de diferentes edades. Materiales La materia prima: el papel a reciclar. Una licuadora. Una tela donde formar la hoja de papel. Se puede usar un bastidor con una tela de fibra. El bastidor puede ser rectangular, o se podra usar uno de los que existen en el comercio para bordados. Papel filtro para secar la hoja formada. Un rodillo o palo de amasar del tamao del bastidor. Mtodo 1. Picar manualmente en trozos pequeos el papel a reciclar (aproximadamente 6 gramos) 2. Remojar el papel picado en ms o menos un litro de agua. 3. Disgregar en licuadora la mezcla de agua y papel. Se obtiene una suspensin de fibras en agua. 4. Tomar una muestra homognea de suspensin (aproximadamente 400 ml) y agregarla al bastidor, sobre la tela. 5. Dejar que drene, moviendo manualmente. 6. Cuando ya se vea formada una hoja hmeda de papel poner sobre ella el papel secante, y pasar el rodillo. 7. Retirar la hoja formada y dejar secar Variaciones: a.- Teir con algn colorante vegetal las fibras al formar la suspensin para obtener papel de color. b.- Tapar algn sector de la tela con gotas de vela (se puede dibujar un logo por ejemplo) y este dibujo quedar en el papel.

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Produccin casera de yogur


En esta actividad se propone a los alumnos realizar yogur artesanal con pocos elementos y de una forma muy sencilla. Se sugiere que antes de comenzar la actividad, los alumnos analicen los pasos a seguir y comparen con los pasos que se realizan en la elaboracin industrial del yogur. Materiales: 1 litro de leche 3 cucharadas de yogur (entero o descremado) 6 cucharadas de azcar Termmetro Tiras para medir el PH. Procedimiento: 1. Se colocan en un recipiente la leche con el azcar. 2. Medir el PH y anotar. 3. Calentar (sin llegar a hervir) durante 5 minutos. Luego, dejar enfriar hasta los 45C aproximadamente y agregar el resto de los ingredientes (yogur, gotas de vainilla). Mezclar bien y colocar en un termo. 4. Dejar reposar durante 7 a 8 horas. 5. Cumplidas las horas establecidas, se obtendrn 10 vasos de yogur. 6. Medir nuevamente el pH. 7. Colocar de inmediato en la heladera.

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Elaboracin de queso
Este tipo de queso se puede elaborar aadiendo un agente acidificante a la leche (limn o vinagre) o empleando bacterias cido lcticas. El empleo de las bacterias ofrece la ventaja de que es la lactosa (azcar de la leche) la que se metaboliza produciendo un sabor, una textura y una digestibilidad superior a la del producto obtenido por la simple acidificacin. Como consecuencia de la fermentacin, en la cual las bacterias degradan el azcar de la leche (lactosa) se obtiene cido lctico. Un aumento en la acidez de la leche estimula la accin de enzimas que causan la coagulacin de las protenas lcticas (fundamentalmente casena) y esto resulta en la formacin de estructuras de mayor tamao que se separan de la parte acuosa de la leche (suero). Adems, la acidez inhibe el desarrollo de grmenes indeseables, incluyendo los potencialmente patgenos. El queso que se obtiene en este caso tiene un sabor marcadamente cido y su estructura es muy blanda. Nota: se puede probar aumentar o disminuir las dosis de fermento, los tiempos de acidificacin y de cuajado, trabajar a diferentes temperaturas y dejar madurar el queso bajo diferentes circunstancias para llegar a realizar una gama amplia de productos. Materiales necesarios: 1 litro de leche Olla grande para el bao Mara si la temperatura es inferior a 22 C Recipiente de plstico, acero inoxidable o vidrio. No se recomienda la porcelana, ni el aluminio, ni cualquier recipiente que pueda ser afectado por la accin del cido o no se pueda limpiar con facilidad. Gasa Fermento (bacterias lcticas). Se pueden adquirir o emplear un yogur comercial cido. Cucharn Colador Cuchillo de punta Cuchara sopera Termmetro (rango de 0C a 100C) Proceso de elaboracin: Pasteurizar la leche si se trabaja con leche no comercial: calentar la leche hasta 70C al bao Mara -nunca directamente- y mantener esta temperatura de 1 a 3 minutos. Enfriar rpidamente introduciendo el recipiente de la leche en agua fra. Bajar la temperatura hasta los 30C. Tomar 1 o 2 litros de leche pasteurizada y templarla a bao Mara hasta unos 30 C aproximadamente. Tomar la dosis de fermento iniciador y diluirla en una cucharada de leche tibia. Del fermento iniciador se debe aadir una cucharita por cada 1 o 2 litros de leche. Diluir la cucharada de leche con el fermento en el litro de leche revolviendo suavemente. Dejar reposar la mezcla en un sitio tibio (nunca inferior a 20C ni superior a 35C) durante 8 a 24 horas segn la temperatura ambiente. Es conveniente cubrir con una tela o trapo para permitir que la leche se airee pero evitar que se ensucie.

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MANUAL DE PRACTICAS DE BIOTECNOLOGIA MSc JHON GARCIA LOPEZ ----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- La cuajada est lista para desuerar cuando al introducir el cuchillo y levantar la punta hacia arriba se produce una grieta en la superficie. Esto significar que la leche se ha coagulado o solidificado y por lo tanto la cuajada est a punto. - Humedecer con agua la gasa de quesera y forrar con ella el colador. - Sacar con cuidado la cuajada y depositarla sobre la tela. Si fuera necesario, tomar la tela por sus extremos y levantarla ligeramente para destaponar la parte de la gasa que est en contacto con la cuajada y dejar salir el suero. - El tiempo de desuerado es muy variable y depende de la consistencia buscada y la temperatura ambiente. Llevar entre 4 y 8 horas. Al enfriarse, el queso se endurece.

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La accin de las enzimas en detergentes para la ropa


Mediante esta experiencia se propone comprobar la accin de sustancias biolgicas introducidas en los detergentes sobre los sustratos especficos. Introduccin Las proteasas son enzimas que aceleran la degradacin de protenas. Muchos fabricantes de detergentes para lavadoras de ropa las agregan a las formulaciones para remover manchas derivadas de protenas como huevo, sangre, etc. Muchas de estas proteasas son derivadas de cepas bacterianas de Bacillus sp. Las proteasas bacterianas son extremadamente estables a pH alcalinos, largos perodos de almacenamiento y temperaturas variables. Estas bacterias tambin han sido modificadas por ingeniera gentica para aumentar la capacidad de las proteasas que ellas producen, ante la presencia de blanqueadores que de otro modo podran afectarlas. La gelatina est compuesta por cadenas proteicas que son fcilmente degradadas en sus aminocidos componentes. Se prepara del colgeno, una protena presente en tendones y piel de animales. Materiales Frasco o vaso de precipitado de 250 ml. Dos tubos o frascos de 100 ml. 1 sobre de gelatina con azcar Marcadores Detergentes para lavarropas Agua Precaucin! los detergentes para lavar ropa son extremadamente bsicos. No aspirarlos porque pueden causar daos en las vas respiratorias. . Procedimiento 1. Preparar la gelatina: por cada 50 ml de agua, usar 18 g de gelatina. 2. Llenar dos tubos o vasos de precipitado graduado con 10 ml de la solucin de gelatina cada uno (tubo 1 y tubo 2) y colocarlos en heladera hasta que solidifique. 3. Sacar los tubos de la heladera. La gelatina debe estar slida. 4. Marcar sobre el vidrio de cada tubo con el marcador la altura de la gelatina slida. 5. Preparar una jarra con la solucin de detergente (10ml de detergente en 90ml agua = 10%). 6. En el tubo 1 agregar 30 gotas de la solucin enzimtica sobre la gelatina slida. 7. En el tubo 2 agregar 30 gotas de agua sobre la gelatina slida. 8. Dejar reposar durante la noche y chequear ambos tubos a las 24 horas. Marcar la posicin de la gelatina slida. 9. Chequear nuevamente a las 48 horas, y marcar la altura de la gelatina slida.

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