PRCTICA No.

10: Hidrlisis de polisacridos

Objetivo

1. Fundamento terico
Las disoluciones capaces de mantener firmemente la estabilidad de la concentracin de los iones
hidrogeno (pH) cuando sobre ellas actan cantidades relativamente pequea de cido o lcalis
fuertes, como tambin durante la dilucin, se denominan disoluciones amortiguadora
1
. Esta
capacidad es debida gracias a la presencia de sustancias amortiguadoras en la composicin de la
disolucin, cuyo papel es desempeado por las mezclas que constan de:
- cidos dbiles y sales muy disociables de estos cidos; por ejemplo, el amortiguador de
acetato es cido actico/acetato sdico; el amortiguador de bicarbonato es cido
carbnico/bicarbonato sdico; el amortiguador de borato es cido brico/borato sdico;
el amortiguador de barbitricos es medinal/veronal y as consecuentemente.
- Bases dbiles y sales muy disociables de estas bases; por ejemplo, el amortiguador
amnico es hidrxido amnico/cloruro amnico.
- Sales mono y disustituidas de cidos polibsicos; por ejemplo, el amortiguador de fosfato
es NaH
2
PO
4
/Na
2
HPO
4

La capacidad amortiguadora la poseen los electrolitos anfteros, por ejemplo, los aminocidos,
protenas y algunas otras sustancias.
El pH de las disoluciones amortiguadoras depende de la proporcin de stas entre cido y sal, y a
una proporcin dada ser siempre invariable. De aqu que, cuando se preparan las disoluciones
amortiguadora, se puede calcular tericamente el pH segn la frmula:
|E
+
] =
C
cidc
C
scl
K o |E
+
] =
C
bcsc
C
scl
K
donde C
cido
es la concentracin, C
sal
es la concentracin de la sal, C
base
es la concentracin de la
base y K es la constante de disociacin electroltica del cido o base segn el caso. De aqu se
deduce que al cambiar las proporciones entre las concentraciones de los componentes de la
mezcla amortiguadora, es posible preparar disoluciones con diferentes pHs dentro de los lmites
determinados por la constante de disociacin de los cidos o bases. La proporcin de los
componentes que constituyen la mezcla amortiguadora se quedan invariables. Cada disolucin
amortiguadora se caracteriza por una capacidad amortiguadora determinada. Esta capacidad es la

1
Chechetkin A.V. y otros. Prcticas de bioqumica del ganado y aves de corral. Ed. Mir, Mosc. Rusia 1984
medida de la accin amortiguadora de la disolucin y se expresa por el nmero de equivalentes
gramo de cido o de base que deben ser agregados a 1 L de disolucin amortiguadora para
desplazar su pH en una unidad. La capacidad amortiguadora de las disoluciones depende de su
concentracin absoluta y con la dilucin disminuye de una manera directamente proporcional al
grado de dilucin.
2. Reactivos y materiales (por grupo)
- 2 Pipetas graduadas de 10 mL
- 1 Soporte para tubos de ensayo
- 14 Tubos de ensayo
- 60 mL de disolucin 0,15 M de fosfato potsico monosustituido
- 30 mL de disolucin 0,15 M de fosfato sdico disustituido
- 28 mL de disolucin 0,1 N de cido actico
- 35 mL de disolucin 0,1 N de acetato sdico
- pH metro
3. Procedimiento

3.1. Preparacin soluciones Buffer cidas.
En seis tubos de ensayo previamente numerados, verter las disoluciones de cido actico y
acetato sdico en las proporciones dadas en la Tabla 10.2:
Disolucin Nmero del tubo de ensayo
1 2 3 4 5 6
Cantidad de cido
actico 0,1 N ( mL)
9 8 5 3 2 1
Cantidad de acetato
sdico 0,1 N (mL)
1 2 5 7 8 9
pH calculado
pH experimental

Tabla 10.1 Soluciones buffer cidas
Con la ayuda de un pH metro, determine el pH experimental de cada muestra.
3.2. Preparacin de soluciones Buffer bsicas.
En ocho tubos de ensayo previamente numerados, verter las disoluciones de fosfato potsico
monosustituido y fosfato sdico disustituido en las proporciones dadas en la Tabla 10.2

Disolucin Nmero del tubo de ensayo
1 2 3 4 5 6 7 8
Cantidad de fosfato
potsico
monosustituido 0,15
M (mL)
9,5 9 8 7 6 5 4 3
Cantidad de fosfato
sdico disustituido
0,15 M (mL)
0,5 1 2 3 4 5 6 7
pH calculado
pH experimental

Tabla 10.2 Soluciones buffer bsicas
Con la ayuda de un pH metro, determine el pH experimental de cada muestra.
4. Expresin de resultados

4.1 De acuerdo con la expresin matemtica dada en el Fundamento Terico, halle y escriba el pH
calculado para cada una de las soluciones preparadas tanto para el buffer cido como bsico.
4.2 Compare los valores de pH calculados con los valores experimentales determinados con el pH
metro.

5. Cuestionario
5.1 Para un mismo tipo de solucin amortiguadora, por qu varia el pH de las diferentes
soluciones preparadas?