UTILIZACION DE ENZIMAS EN LA INDUSTRIA

Las industrias biotecnolgicas se basan en el uso de microorganismos vivos, en particular, de levaduras. Una levadura produce alcohol a partir de un azcar como la glucosa. Pero las operaciones bioqumicas que van del azcar al alcohol no se producen espontneamente: las realizan unos catalizadores biolgicos, los enzimas. Toda clula contiene varios miles de enzimas, cada uno de los cuales es capaz de catalizar un determinado tipo de reacciones qumicas. No sorprende que los industriales hayan pensado en utilizar estos catalizadores para realizar ciertas reacciones que la qumica no poda efectuar con la misma eficacia. As, las nuevas biotecnologas se basan en el uso de microorganismos vivos, pero tambin en el de enzimas aislados de clulas y en el interior de clulas muertas que actan como depsito de enzimas. Por tratarse de protenas, cuyo funcionamiento depende de la precisa secuencia de los aminocidos que forman su estructura, no resulta prctica la sntesis qumica de enzimas a gran escala. Estos enzimas los fabrican microorganismos crecidos en cultivo o se obtienen directamente a partir de vegetales y animales. Hoy, los costos hacen que resulten ms favorables los mtodos microbiolgicos. La explotacin comercial de los enzimas arranca de la ltima dcada del siglo pasado, cuando se introdujo extractos de clulas fngicas en las industrias cerveceras para acelerar la degradacin de almidn a glucosa. Como todos los catalizadores, los enzimas aceleran y orientan reacciones cuyo estado final no depende ms que de las condiciones termodinmicas. Pero poseen unas propiedades particulares que los diferencian de los catalizadores clsicos. De una parte, los enzimas pueden acelerar las reacciones segn factores considerables, del orden de 103 a 105 veces, en condiciones suaves (medios acuosos, temperatura y presin ambientales). De otra, son unas entidades macromoleculares dotadas de una capacidad de reconocimiento selectivo de estructura tridimensional. Esta especificidad se expresa a nivel reaccional: cada enzima cataliza un tipo particular de reacciones (corte hidroltico de los enlaces peptdicos por proteasas, fijacin de grupos fosfato por fosfotransferasas). Se expresa tambin a nivel posicional, pues los enzimas son capaces de catalizar una reaccin qumica en un punto preciso de la molcula sustrato. Por ltimo, los enzimas son esteroespecficos, es decir, reconocen selectivamente una molcula entre otras aunque se trate de molculas muy prximas, como los ismeros pticos. Los enzimas son, pues, unos catalizadores muy especficos, provistos de bazas determinantes, que, no obstante, adolecen de ciertos inconvenientes de utilizacin. Debido a su naturaleza proteica, los enzimas son muy sensibles a su entorno, al contrario que la mayora de catalizadores qumicos. De ah que presenten una estabilidad funcional generalmente insuficiente con el tiempo. Adems, los
ENZIMAS (www.rincondelasciencias.com) Pedro Fernndez Garca Pgina 1

enzimas se desnaturalizan en pH extremo y se supone que slo funcionan en medio acuoso. Pese a estas limitaciones, la utilizacin industrial de los enzimas es una realidad. Pero una realidad modesta y limitada si se tienen en cuenta las potencialidades de la ingeniera enzimtica. La produccin, y el consumo, de enzimas brutos sigue una progresin constante del orden del 5% anual. De hecho, slo se utilizan industrialmente unos quince enzimas: el 90% de las aplicaciones de la ingeniera enzimtica se sirven de unos enzimas (las hidrolasas) que catalizan degradaciones por corte hidroltico. Los detergentes, las industrias del almidn y las industrias queseras representan el 80% del mercado de los enzimas producidos. En estos sectores tradicionales no ha tenido lugar ninguna revolucin tecnolgica en los ltimos aos. El dinamismo y el esfuerzo de las sociedades productoras de enzimas han permitido la mejora de los procedimientos existentes y la introduccin de enzimas ms interesantes para el proceso. Es previsible que se mantenga esta evolucin, en particular gracias al estudio de microorganismos que resisten condiciones extremas y a la intervencin de la ingeniera gentica, que hace econmicamente viable la

produccin de estos nuevos enzimas. Pese al progreso tecnolgico que represent su aparicin hace unos veinte aos, hay que reconocer que la inmovilizacin de enzimas sobre soportes slidos no ha experimentado el desarrollo que caba esperar hace tan slo unos aos. La inmovilizacin de los enzimas es necesaria para su utilizacin prolongada en un reactor continuo. No est justificada en los grandes procedimientos industriales convencionales, donde el coste del tratamiento enzimtico es a menudo inferior al 1% de la materia prima que transformar. Las inversiones importantes en equipos costosos, los riesgos de contaminacin por microorganismos, la aparicin de subproductos y la baja actividad debida a limitaciones en la difusin de los productos y sustratos han sido muy a menudo obstculos para la utilizacin de reactores continuos. A pesar de todo, hay ciertas producciones que se llevan a cabo con la ayuda de enzimas inmovilizados. El actual carcter limitado de la utilizacin industrial de los enzimas se debe a que numerosas reacciones enzimticas necesitan, adems del enzima y del sustrato que transformar, la presencia de cofactores portadores de hidrgeno, de electrones, de energa, etc. Aunque bien conocidos por los bioqumicos, estos cofactores son caros y no cabe pensar en aadirlos continuamente a un reactor enzimtico industrial. Se tendra que poder disponer de sistemas que los regeneraran eficazmente y a bajo coste. El desarrollo de estas nuevas aplicaciones de los enzimas est parcialmente basado en el dominio de reacciones acopladas que regeneren los cofactores. La regeneracin de los cofactores de oxidorreduccin (NAD, FAD, etc.) parece estar en buen camino; no obstante, no cabe decir lo mismo de la del ATP. Pero en algunos casos se han obtenido resultados prometedores.
ENZIMAS (www.rincondelasciencias.com) Pedro Fernndez Garca Pgina 2

Por suerte, hay reacciones de sntesis que no requieren un aporte energtico ni de cofactores costosos y que se realizan por medio de enzimas pertenecientes al grupo de las transferasas. Estas son una clase de enzimas que catalizan la transferencia de una parte A de una molcula A-B, que hace el papel de dador, a otra molcula C que hace el de aceptor. Como todo enlace qumico contiene energa, en teora la energa del enlace A-B del dador puede utilizarse para la creacin de los enlaces B-C A-C. La puesta a punto de reactores industriales que realicen estas sntesis plantea menos problemas que las que exigen la utilizacin de ATP; se logran as varias sntesis de inters industrial o mdico. Hay otro captulo de las sntesis sin consumo de energa cara que est asociado a la utilizacin de hidrolasas. Estos enzimas catalizan la ruptura de ciertos enlaces qumicos en presencia de agua. Pero una de las propiedades de los enzimas consiste en que generalmente operan en condiciones de reversibilidad. En otras palabras, modificando las concentraciones de los reactivos presentes, es tericamente posible transformar una reaccin de hidrlisis en otra de sntesis por medio del mismo enzima. Si A + H2O da lugar a B + C, para producir A basta reducir la concentracin de agua o aumentar las de B y las de C.

Biotecnologa: Tecnologa enzimtica

Las enzimas son catalizadores de origen biolgico que parecen cumplir muchos de los requisitos necesarios para impulsar esta nueva industria qumica. Son catalizadores muy activos en medios acuosos y en condiciones muy suaves de temperatura,

presin, pH, etc. Son catalizadores muy especficos: pueden modificar un nico substrato en una mezcla de substratos muy similares e incluso pueden discernir entre dos ismeros. Son catalizadores muy selectivos: pueden modificar un nico enlace o un nico grupo A pesar de esas excelentes propiedades catalticas, las enzimas han ido evolucionando a travs de los siglos para cumplir mejor las necesidades fisiolgicas de los seres vivos y no para ser utilizadas en sistemas qumicos industriales. As, las enzimas son catalizadores solubles, generalmente muy inestables y que sufren inhibiciones por substratos y productos. Adems, las enzimas muchas veces no poseen todas las propiedades ideales (actividad, selectividad, etc) cuando queremos que canalicen procesos distintos de los naturales (por sntesis en lugar de hidrlisis), sobre substratos no naturales, en condiciones experimentales no convencionales (en disolventes orgnicos no-txicos).
FUENTES DE ENZIMAS

Las fuentes de enzimas pueden ser de tipo vegetal, animal y microbiana.

Las enzimas de tipo vegetal, se encuentran las porteasas, carbohidrasas ( las cuales descomponen residuos de azcares de carbohidratos superiores, a-amilasas y b-amilasa

Entre las enzimas de tipo animal estn las esterasa ( Lipasa se produce en la mucosa gstrica, el pncreas y las semillas de ricino, fosfotasas: Se obtiene de tejidos animales seo, muscular, tripsina y quimotripsina se produce en el pncreas y , pectasas )

Las enzimas del tipo microbiano provienen de. Bacterias, hongos.

TECNOLOGIA ENZIMATICA MODERNA

A mediados de los aos 50, la tecnologa de las enzimas vivi su poca de gran esplendor, creciendo a un ritmo desenfrenado. El progreso de la bioqumica ha derivado en una mejor comprensin de la gran variedad de enzimas presentes en las clulas vivas, as como un mejor conocimiento acerca de su modo de accin. Por ejemplo, su eficacia se puede aumentar extrayndolas de los microorganismos y mantenindolas

aisladas. Las enzimas purificadas a travs de este sistema no pierden sus propiedades; al contrario, estas preparaciones "sin clulas" devienen incluso ms eficaces. "A comienzos de 1970 la tecnologa enzimtico comenzaba a entrar en periodo de desarrollo industrial, dirigido a la produccin de aminocidos y azcares a partir de glucosa isomerizada. En aquel momento, los mercados Europeos y Americanos se encontraban dominados por la comercializacin de las enzimas proteolticas utilizadas en la industria de los detergentes, pero existian grandes expectativas sobre el mercado de enzimas aplicadas a la industria alimentara, al cual se le auguraba un crecimiento importante (Dunnill, 1980; Lewis y Kristiansen, 1985). En 1981 el mercado mundial del azcar se valor en 200 millones de dlares y en 1985 la oficina de Valores Tecnolgicos de USA lo cifraban en 250 millones. La interpretacin mas clara es el mercado para las enzimas utilizadas en la industria ha crecido espectacularmente a lo largo de los aos 1970, y que este crecimiento ha sido paralelo al desarrollo de un gran nmero de aplicaciones a la industria alimentara. Se puede esperar en el futuro que el mercado experimente un aumento cuando las enzimas comiencen a utilizarse en procesos de produccin de la industria qumica."(1) En poca ms reciente se ha visto que puede utilizarse diversos tejidos vegetales y homogenados tisulares, obtenidos de distintas fuentes, como alternativas a las clulas microbianas y a las enzimas purificadas. Por consiguiente, la conclusin evidente es que existen una serie de preparaciones biocatalticas para resolver una situacin concreta, entre las cuales debe realizarse una eleccin. Por tanto, es conveniente considerar los criterios que debe manejarse en la eleccin del biocatalizador.
Energa

Otra actividad que llama a las aplicaciones biotecnolgicas es la produccin de energa, siendo la ventaja de las fuentes orgnicas con respecto a los combustibles fsiles el que las primeras sean renovables. Cada ao crecen unas 200 mil millones de toneladas de biomasa (madera, cereales, etc), de las cuales los humanos usamos slo un 3%. Por lo

tanto, este rubro ofrece un enorme potencial que puede ser aprovechado. Un ejemplo clsico de biocombustible es el alcohol obtenido por fermentacin de material rico en azcares y almidn, o de residuos orgnicos varios, incluyendo los forestales. El principal obstculo para la viabilidad de esta propuesta es el costo, puesto que el petrleo sigue siendo ms barato. Sin embargo, los avances tecnolgicos estn permitiendo acortar la brecha. Hay tambin diversos sectores de la industria en los que la adaptacin o sustitucin de procesos qumicos o fsico-qumicos por otros de base biolgica puede contribuir al desarrollo sustentable. Beneficios concretos a escala industrial ya se observan con la introduccin de enzimas en la produccin de celulosa, de textiles y del cuero, entre otros. "
Tratamiento de desechos

"Pero es el tratamiento de desechos donde la biotecnologa puede tener un mayor impacto a nivel mundial. Los Estados Unidos gastan US$ 40 mil millones al ao para combatir la polucin que generan los 600 millones de toneladas de desechos industriales. Bacterias, microalgas, levaduras, hongos y plantas han mostrado una notable eficiencia para metabolizar residuos orgnicos, xenobiticos y metales pesados (biorremediacin y fitorremediacin), reduciendo hasta 20 veces el costo involucrado en la incineracin de dichos residuos. Por otra parte, se han hecho grandes avances en el tratamiento de derrames de petrleo con microorganismos. En fin, hay muchas otras reas suceptibles de ser abordadas exitosamente mediante el empleo de diversas biotecnologas. Sin embargo, a pesar de los promisorios resultados obtenidos hasta el momento, persisten an varias limitaciones tcnicas y econmicas que requieren ser resueltas. Por ello, la biotecnologa no debe ser vista como una panacea y en cada caso habr que ponderar sus ventajas con respecto a las

tecnologas tradicionales. Al considerar las aplicaciones enzimticas en el tratamiento de los residuos, se debe hacer hincapi entre las situaciones donde el residuo de un proceso es el material crudo y los siguientes, por ejemplo, conversin de almidones, y procesos que ayudan a reducir los costos asociados del tratamiento. Existen un amplio nmero de industrias de procesamiento de alimentos que producen residuos que necesariamente deben ser posteriormente tratados. La aplicacin de grupos de enzimas depende de la necesidad de hidrolizar polmeros complejos para incrementar su posterior degradacin microbiolgica. Entre los diversos ejemplos se puede incluir el empleo de las lipasas asociadas con cultivos bacterianos para eliminar los depsitos de grasa procedentes de las paredes de las tuberas que transportan el efluente. Otra enzima degradante de polmeros utilizados de forma similar son las celulosas, proteinasas y amilasas. Una aplicacin particular que puede describirse como tratamiento de residuos, es el empleo de proteinasas en las preparaciones comerciales de detergentes, denominadas como polvo de lavado biolgico. Adems de estas hidrlisis de materiales polimricos, existen tambin aplicaciones de enzimas capaces de degradar compuestos altamente txicos que podran inhibir procesos de tratamiento basado en el empleo microbigico. Un ejemplo especfico es el uso de la peroxidasa de la cola de caballo para iniciar la degradacin de fenoles y aminas aromticas que se presentan en muchas industrias con aguas residuales. "(8) En trminos ms amplio es posible anticipar que los procesos basados en el empleo de organismos construidos genticamente para degradar los compuestos indicados anteriormente, podra representa un proceso mucho ms econmico.
Productos mdicos y farmacuticos

Aunque las posibilidades de utilizacin de las enzimas en la medicina y campos relacionados sea potencialmente inmersa, en la actualidad el nmero concreto de aplicaciones es relativamente pequeo. No obstante, los resultados obtenidos con este pequeo nmero de ideas afortunadamente son realmente excitantes y demuestran claramente la capacidad potencial existente en las tcnicas empleadas. Puesto que las aplicaciones mdicas y farmacuticas de las enzimas abarcan un amplio espectro de materias, es conveniente dividirlas en tres reas importantes de inters: terapia enzimtica, uso analtico y productos de compuestos farmacuticos. Cada una de estas reas, auque cubre un gran nmero de aplicaciones, presenta una serie de principios predominantes que son esencialmente para que la utilizacin de las enzimas se realice con xito. A diferencia de otros usos industriales para las enzimas, las aplicaciones mdicas y farmacuticas de las mismas requieren generalmente pequeas cantidades de enzimas muy purificadas. En parte, esto refleja el hecho de que para una enzima sea efectiva slo debe modificarse helelos compuestos de inters contenido en un fluido o tejidos fisiolgicos complejo. Esto contrasta con muchos procesos industriales en los que el medio de cultivo est relativamente bien definido y por, consiguiente, puede utilizarse un extracto enzimtico sin purificar. Adems, si el destino de una enzima o de un producto obtenido por mtodos enzimticos es su administracin a un paciente, resuelta evidente que el preparado debe contener las menores cantidades posibles de material extrao para evitar probables efectos secundarios.

Produccin de aminocidos enzimticamente La produccin de aminocidos mediante tecnologa con enzimas est adaptada convenientemente. Aunque se pueden sintetizar empleando un proceso qumico, se debe sealar que en este caso se obtiene una mezcla de D y L ismeros. Puesto que solamente el L-ismero es biolgicamente activo, la mezcla debe ser separada en sus dos componentes. Este proceso puede llevarse a cabo mediante el empleo de la enzima aminoacilasa. Una vez sintetizado, la mezcla del DL aminocidos se acetila. En la produccin de otros aminocidos se han incluido tambin una etapa mediada por enzimas, incluyendo a la D-feniglicina, utilizada en la sntesis de penicilina

semisinttica, y en el caso del L-triptfano, un aminocido esencial que puede sintetizarse a partir del infolio. Estas son dos reas importantes en el desarrollo de esta tecnologa. En trminos de aplicacin a gran escala, la produccin de aminocidos esenciales como suplementos dietticos presenta una importancia particular. Si una protena celular sencilla queda establecida en los mercados de alimentacin animal y humana, se puede esperar que la demanda para aminocidos esenciales incrementara, ya que muchas protenas microbianas son deficitarias en algunos de estos residuos cruciales.

Tratamientos teraputicos con enzimas .-" El fundamento de esta forma de terapia es simplemente la administracin de una enzima concreta a un paciente, esperando con optimismo que produzca una progresiva mejora en el mismo. El problema principal relacionado con este mtodo es que las respuestas defensivas del organismo inactive o eliminen los compuestos extraos incorporados. En consecuencia cualquier tratamiento que utilice la administracin de una enzima, bien por va sangunea o por cualquier otra, debe tener en cuenta este posible inconveniente."(9) rganos artificiales .- "Para sustituir algunas funciones del rin y el hgado se han desarrollado rganos artificiales que contienen enzimas. Una lesin renal crnica se trata con hemodilisis peridica, a menos que sea posible el transplante del rgano. El hgado es un rgano multifuncional y sera imposible conseguir un sustituto artificial con la tecnologa disponible actualmente. Sin embargo, s puede reproducirse una funcin importante del hgado: la desintoxicacin. A partir de clulas hepticas se pueden obtener varias enzimas microsomales capaces de llevar a cabo la desintoxicacin de una gran variedad de compuestos."(10)

Aplicaciones Analticas .- "En la medicina moderna, el anlisis de las distintas muestras fisiolgicas tiene un papel clave y, dentro del mismo el uso de las enzimas (tanto en forma libre como inmovilizadas) constituyen un aspecto muy destacado. Los tipos de aplicacin de las encimas al anlisis se pueden dividir en dos granes grupos. El primero de ellos recibe aquellos mtodos que miden directamente un compuesto, mientras que el segundo lo hace con aquellos que utilizan una enzima para amplificar otra respuesta (por ejemplo inmunoenzarios con enzimas acopladas)."(11)

Antibiticos semi-sintticos.- Las penicilinas semisintticas son los principales productos farmacuticos obtenidos por tecnologa enzimtico. El mtodo de fermentacin tradicional permite producir la benzil-penicilina (penicilina g) como la fenoximetil- penicilina (penicilina b) y en el pasado estos dos antibiticos con gran xito. Sin embargo, estos compuestos presentan limitaciones en su eficacia contra ciertas bacterias patgenas
APLICACIONES INDUSTRIALES

En relacin con las enzimas, la tecnologa moderna contribuye al ahorro. Por ejemplo, permite la utilizacin del excedente de suero derivado de la fabricacin del queso. La lactosa transforma el azcar del suero en una mezcla de glucosa y galactosa con un sabor ms dulce. As, se refina el producto y se concentra en una especie de jarabe cuyo sabor recuerda el de la miel, con lo que las aplicaciones en el sector de la confitera industrial se hacen innumerables. Se usan tambin muchos otros tratamientos de las enzimas en la produccin de edulcorantes modernos. Por ejemplo, EE.UU. se puede constatar que el jarabe del almidn de maz tiene un alto contenido en fructosa, razn por la cual ha llegado a eclipsar a la sacarosa.

Las enzimas presentan muchsimas aplicaciones. Con los procedimientos modernos de fabricacin de alimentos, benefician tanto a los sectores industriales como a los consumidores. Sus caractersticas especficas permiten a los industriales ejercer un control de calidad ms estricto. Con un menor consumo de energa y unas condiciones de tratamiento ms ligeras, su eficacia favorece el entorno. Pueden utilizarse para tratar los desechos biolgicos resultantes de la fabricacin de alimentos, puesto que las propias enzimas son biodegradables. Mediante una rpida absorcin natural, las enzimas son el tpico ejemplo de "tecnologa verde". La utilizacin de enzimas en los alimentos presenta una serie de ventajas, adems de las de ndole econmica o tecnolgica. La gran especificidad de accin que tienen los enzimas hace que no se produzcan reacciones laterales imprevistas. Asimismo se puede trabajar en condiciones moderadas, especialmente de temperatura, lo que evita alteraciones de los componentes ms lbiles del alimento. Desde el punto de vista de la Para garantizar la seguridad de su uso deben tenerse en cuenta no obstante algunas consideraciones: en aquellos enzimas que sean producidos por microorganismos, estos no deben ser patgenos ni sintetizar a la vez toxinas, antibiticos, etc. Los microorganismos ideales son aquellos que tienen ya una larga tradicin de uso en los alimentos (levaduras de la industria cervecera, fermentos lcticos, etc.). Adems, tanto los materiales de partida como el procesado y conservacin del producto final deben ser acordes con las prcticas habituales de la industria alimentara por lo que respecta a pureza, ausencia de contaminantes, higiene, etc...
CONCLUSIONES

1. Las enzimas son catalizadores de origen biolgico que cumplen muchos requisitos para impulsar nuevas industrias qumicas. 2. La tecnologa enzimtica tiene mltiples aplicaciones, como fabricacin de alimentos, los progresos que estn realizando actualmente la ingeniera gentica

y la biotecnologa permiten augurar el desarrollo cada vez mayor del uso de las enzimas. 3. La utilizacin de enzimas en los alimentos presentan una serie de ventajas, adems de las de ndole econmico y tecnolgico. 4. Las enzimas utilizadas dependen de la industria y del tipo de accin que se desee obtener. 5. Las fuentes de enzimas pueden ser de origen vegetal, animal o microbiano. 6. se puede manipular genticamente, la biosntesis de enzimas para optimizar los procesos, pero se debe tener en cuenta, las respectivas normas. 7. La produccin de enzimas a gran escala tiene su principal aplicacin en la industria de la fermentacin
(http://es.scribd.com/doc/6061842/Tecnologia-Enzimatica)