BIOTECNOLOGIA

El trmino "biotecnologa" es relativamente nuevo para el pblico amplio. Pero, la biotecnologa est presente en la vida cotidiana ms de lo que la gente se imagina. De hecho, la biotecnologa es una actividad antigua, que comenz hace miles de aos cuando el hombre descubri que al fermentar las uvas se obtena un producto como el vino. Tambin es biotecnologa la fabricacin de cerveza a partir de la fermentacin de cereales que el hombre empez a elaborar hace 4.000 aos, y la fermentacin de jugo de manzanas para la fabricacin de sidra. En estos procesos intervienen microorganismos que transforman componentes del jugo de frutas o de cereales en alcohol. Tambin es biotecnologa la fabricacin de pan mediante el uso de levaduras, la elaboracin de quesos mediante el agregado de bacterias, y tambin de salames. El yogurt tambin es un producto que se obtiene mediante procesos biotecnolgicos desde la antigedad. Aunque en ese entonces los hombres no entendan cmo ocurran estos procesos, ni conocan la existencia de microorganismos, podan utilizarlos para su beneficio. Estas aplicaciones constituyen lo que se conoce como biotecnologa tradicional y se basa en la obtencin y utilizacin de los productos del metabolismo de ciertos microorganismos. Se puede definir la biotecnologa tradicional como "la utilizacin de organismos vivos para la obtencin de un bien o servicio til para el hombre". Biotecnologa tradicional aplicada a la industria La biotecnologa se aplica a diferentes ramas de la industria: alimenticia, textil, detergentes, combustibles, plsticos, papel, farmacutica. En general lo que se usa son productos del metabolismo de los microorganismos. Por ejemplo, algunas de las aplicaciones de la biotecnologa tradicional a la industria son: El alcohol que se puede usar para la industria alimenticia o farmacutica, pero tambin se puede usar como combustible (en Brasil se produce alconafta a partir de la caa de azcar). Produccin de yogures probiticos en los que se usa el microorganismo entero que est presente en el producto final. A partir de microorganismos se pueden fabricar cidos orgnicos para diferentes aplicaciones, como el cido ctrico como resaltador de sabor y regulador de ph. Muchos antibiticos son fabricados por microorganismos, como la penicilina que la fabrica un hongo de la familia penicillium. Los plsticos son polmeros de diferentes estructuras qumicas. La mayora de ellos se producen a partir de derivados de petrleo. Pero hay microorganismos que fabrican polmeros que son biodegradables. Las enzimas son protenas que tiene la funcin de catalizadores biolgicos, que aceleran reacciones qumicas, haciendo que el proceso sea ms rpido y eficiente que cualquier otro proceso qumico. Las enzimas se utilizan habitualmente en los detergentes o polvo para lavar la ropa. Por ejemplo, lipasas para sacar manchas de grasas, proteasas para sacar manchas de protenas, etc. Cada tipo de enzima tiene un rango de temperaturas dentro del cual es activa. En la temperatura ptima acta al 100% y al alejarse de esa temperatura disminuye su funcin. Para determinados procesos en los cuales se necesitan temperaturas extremas, se van a emplear enzimas provenientes de organismos extremfilos que pueden actuar a temperaturas extremas (altas o bajas). Por ejemplo, la ropa de hospital que requiere esterilizacin se lava con productos que tengan enzimas que funciones a temperaturas altas, mientras que el lavado en agua fra emplea enzimas provenientes de microorganismos que se desarrollan en temperaturas bajas. En la industria alimenticia tambin se usan enzimas. Por ejemplo en la etapa final de la fabricacin de jugos cuando hay que sacar los restos de pepitas de frutas antes de la pasteurizacin, se emplea la enzima pectinasa que degrada la pectina, el principal componente de la semillas. Las enzimas tambin se usan en la industria textil para ablandar los jeans. En este caso se usa celulasa, que degrada la celulosa que es el principal componente de las clulas vegetales (entre ellas, las clulas del algodn que es el principal componente de la tela de jean). Mediante un proceso controlado (temperatura, tiempo, cantidad y tipo de celulasa) se logran diferentes texturas de jean. Tambin se usa la enzima celulasa en la industria del papel (que est formado por celulosa) para lograr diferentes texturas. La biotecnologa moderna Actualmente, los cientficos comprenden mucho ms cmo ocurren los procesos biolgicos que permiten la fabricacin de productos biotecnolgicos. Esto les ha permitido desarrollar nuevas tcnicas a fin de

modificar o imitar algunos de esos procesos y lograr una variedad mucho ms amplia de productos. Los cientficos hoy saben, adems, que los microorganismos sintetizan compuestos qumicos y enzimas que pueden emplearse eficientemente en procesos industriales. Estos conocimientos dieron lugar al desarrollo de la biotecnologa moderna. A diferencia de la biotecnologa tradicional, la biotecnologa moderna surge en la dcada de los '80, y utiliza tcnicas, denominadas en su conjunto ingeniera gentica, para modificar y transferir genes de un organismo a otro. El siguiente esquema resume la definicin actual del trmino biotecnologa:

A travs de la biotecnologa moderna es posible producir insulina humana en bacterias y, consecuentemente, mejorar el tratamiento de la diabetes. Por ingeniera gentica tambin se fabrica la quimosina, enzima clave para la fabricacin del queso y que evita el empleo del cuajo en este proceso. La ingeniera gentica tambin es hoy una herramienta fundamental para el mejoramiento de los cultivos vegetales. Por ejemplo, es posible transferir un gen proveniente de una bacteria a una planta, tal es el ejemplo del maz Bt. En este caso, los bacilos del suelo fabrican una protena que mata a las larvas de un insecto que normalmente destruyen los cultivos de maz. Al transferirle el gen correspondiente, ahora el maz fabrica esta protena y por lo tanto resulta refractaria al ataque del insecto. La biotecnologa moderna avanza y, en la actualidad, son muchos los pases que utilizan las tcnicas de ingeniera gentica para la obtencin de diferentes productos que tienen aplicacin en la produccin de alimentos, de medicamentos, y de productos industriales

Los organismos genticamente modificados o transgnicos

Qu son los organismos genticamente modificados (OGM) o transgnicos? Los alimentos transgnicos de los que empez a hablarse en los ltimos aos, derivan de organismos transgnicos o genticamente modificados. Un organismo genticamente modificado (OGM) es aquella planta, animal, hongo o bacteria a la que se le ha agregado por ingeniera gentica uno o unos pocos genes con el fin de producir protenas de inters industrial o bien mejorar ciertos rasgos, como la resistencia a plagas, la calidad nutricional, la tolerancia a heladas, entre otras caractersticas. Aunque comnmente se habla de alimentos transgnicos para referirse a aquellos que provienen de cultivos vegetales modificados genticamente, es importante recalcar que tambin se emplean enzimas y aditivos obtenidos de microorganismos transgnicos en la elaboracin y procesamiento de muchos de los alimentos que ingerimos. Los cultivos transgnicos Una de las principales aplicaciones de la ingeniera gentica en la actualidad es incorporar nuevos genes a las plantas con el fin de mejorar los cultivos. El empleo de la ingeniera gentica o transgnesis en el mejoramiento vegetal es lo que se denomina agrobiotecnologa o biotecnologa vegetal. Sus objetivos consisten en aumentar la productividad de los cultivos contribuyendo a una agricultura sustentable, que utiliza los recursos respetando al medio ambiente y pensando en las generaciones futuras. Tambin la agrobiotecnologa se propone mejorar los alimentos que derivan

de los cultivos vegetales, eliminando sustancias txicas o alergnicas, modificando la proporcin de sus componentes para lograr alimentos ms saludables o aumentando su contenido nutricional. Otra aplicacin de la biotecnologa vegetal es el empleo de las plantas como bioreactores o fbricas para la produccin de medicamentos, anticuerpos, vacunas, biopolmeros y biocombustibles. Los animales transgnicos Un animal transgnico es un animal genticamente modificado, que tiene un gen o grupo de genes que no le pertenecen con el fin de producir algo de inters. El genoma de los animales se puede modificar:

Insertando genes de la misma especie o de una especie diferente (por ejemplo para que una vaca produzca en su leche la hormona de crecimiento humana). Alterando ciertos genes presentes en el animal de manera que esta modificacin se transmita a la descendencia. En general esta estrategia se emplea para conocer la funcin de ese gen.

Los ratones fueron los primeros animales transgnicos que se obtuvieron en la dcada del 80, paralelamente con el advenimiento de la ingeniera gentica. El primer ratntransgnico, publicado en la revista cientfica Nature en 1982, produce la hormona de crecimiento de rata por lo cual se ve bastante ms grande que el ratn que no la tiene. El ratn transgnico produce mucha ms hormona de crecimiento que el ratn salvaje. Este experimento constituy una revolucin porque mostraba que un gen de una especie puede introducirse en otra especie diferente, integrarse al genoma y expresarse. Los ratones transgnicos se utilizan fundamentalmente:

Como herramientas de laboratorio para estudiar los genes, su funcin y cmo se regula su expresin, si se cambia el lugar o el tiempo de expresin de ese gen. Como modelos de enfermedades para el desarrollo de drogas y estrategias de tratamiento.

Otros animales transgnicos Hoy es posible obtener otros animales transgnicos, adems de roedores. Los animales ms grandes, como ovejas, cabras, cerdos y vacas pueden modificarse genticamente gracias al desarrollo de las tcnicas de clonacin. Los animales transgnicos se obtienen con los siguientes fines:

Ayudar a los investigadores a identificar, aislar y caracterizar los genes y as entender cmo funcionan. Como modelos de enfermedades que afectan al hombre y as poder desarrollar nuevas drogas y nuevas estrategias de tratamiento. Como fuente de tejidos y rganos para transplantes en humanos. Para mejoramiento del ganado y otros animales de importancia econmica. Para producir leche con mayor valor nutricional o que contenga protenas de importancia farmacutica.

Tracy fue la primera oveja transgnica, y vivi entre 1991 y 1998. Produca alfa-1-antitripsina en la leche que sirve para curar una enfermedad. Mansa es una ternera argentina que naci en 2002. Es la primera ternera clonada y transgnica. Produce la hormona de crecimiento humana en la leche. Mansa pertenece a una serie de experimentos que realiza la empresa Biosidus y que empieza con Pampa en el ao anterior, la primera ternera clonada del mundo (no transgnica) que demuestra que las vacas se pueden clonar y se pueden hacer transgnicas. Pampa se hizo con una tcnica similar a Dolly (la primera oveja obtenida por clonacin a partir de clulas somticas adultas en 1997), pero en lugar de clulas de la ubre se utilizaron clulas fetales. Luego sale Mansa, y sus hermanas que adems son transgnicas. La obtencin de productos en la leche de animales transgnicos es particularmente interesante para

protenas que se requieren en gran cantidad o que son muy complejas. La produccin en leche permite, adems, una purificacin relativamente simple de la protena de inters. Recientemente se public en la revista Nature Biotechnology un artculo que da cuenta de un nuevo OGM que est en proceso de desarrollo. Se trata de vacas transgnicas que produciran ms cantidad de la protena casena en la leche. Esto permitira fabricar ms queso con el mismo volumen de leche y ms rpido porque el tiempo de coagulacin sera menor. Microorganismos recombinantes Los productos de la biotecnologa se aplican hoy a un gran nmero de industrias entre las que cabe mencionar no slo la alimenticia, sino tambin la farmacutica, textil, del papel, de detergentes, etc. Antes del advenimiento de la ingeniera gentica ya se obtenan diversos productos derivados de bacterias, levaduras y hongos filamentosos. La incorporacin de la ingeniera gentica permiti optimizar la eficiencia del proceso de produccin y/o la calidad del producto. Por un lado, fue posible modificar el control de vas metablicas, por ejemplo para la sobreproduccin de algn producto y, por otro, permiti fabricar protenas bajo la forma de protenas recombinantes. Las ventajas que presenta la produccin de una protena bajo la forma de protena recombinante son:

Permite obtener a partir de un microorganismo, cultivo de clulas, planta o animal una protena completamente ajena, tal es el caso de la produccin de insulina en bacterias, anticuerpos humanos en plantas y vacunas en levaduras. Se obtienen grandes cantidades del producto, fcil de purificar y ms barato, en comparacin con el purificado a partir de su fuente natural (en el caso de la insulina, se obtena a partir de pncreas de animales). Se obtienen productos libres de patgenos y otros riesgos potenciales. Esto es particularmente importante en el caso de los productos farmacuticos, para evitar la transmisin de enfermedades. Pueden producirse protenas que no existen en la naturaleza, tiles en el diagnstico y tratamiento de algunas enfermedades.

Protenas recombinantes empleadas en la industria farmacutica y en la industria alimenticia. La industria farmacutica ha optado por el camino de la ingeniera gentica o metodologa del ADN recombinante. Mediante esta metodologa es posible obtener enormes cantidades de una protena, aislada de todos los componentes celulares del organismo de origen. Esto se consigue por introduccin y expresin del gen de inters en un organismo hospedador fcil de cultivar. Este organismo se denomina entonces organismo genticamente modificado o transgnico y la protena obtenida, protena recombinante. Actualmente los organismos empleados con este fin son microorganismos (bacterias y levaduras) y clulas de mamfero cultivadas in vitro, pero tambin es posible fabricar protenas recombinantes en plantas y en la leche de animales como vacas y cabras. La primera protena recombinante aprobada como medicamento fue la insulina, en 1982, para el tratamiento de pacientes con diabetes melitus. Hasta ese entonces los pacientes deban inyectarse insulina extrada del pncreas de vacas o cerdos; hoy varios laboratorios farmacuticos producen insulina humana, tanto a partir de bacterias como a partir de levaduras, y sin ningn riesgo para la salud. Los antgenos y los anticuerpos tambin pueden producirse como protenas recombinantes, y son empleados en la confeccin de kits o sistemas de diagnstico de diversas enfermedades. La tabla muestra la gran cantidad de protenas recombinantes que hoy se comercializan y emplean como frmacos en humanos. PRODUCTO Factores de coagulacin Insulina Hormona de crecimiento Eritropoyetina (EPO) Interfern alfa INDICACIN TERAPUTICA Hemofilia Diabetes mellitus Deficiencia de la hormona en nios Anemia Hepatitis B y C, cncer

Vacuna anti-hepatitis B Anticuerpos monoclonales recombinantes Protena C Beta-glucocerebrosidasa DNAsa

Inmunizacin contra hepatitis B Asma, artritis reumatoidea Sepsis severa Enfermedad de Gaucher Fibrosis qustica

La siguiente tabla resume algunas enzimas producidas como protenas recombinantes en bacterias y en hongos genticamente modificados, y que actualmente se usan en la industria alimenticia: ENZIMAS Alfa-amilasa Aminopepetidasa Fosfolipasa Glucosa isomerasa Hemicelulosa Lactasa Lipasa Pectinasa Proteasa Quimosina Xilanasa APLICACIN (elaboracin de....) Pan, bebidas, almidn Queso, lcteos, sabores Pan, grasas Almidn Pan, almidn Lcteos Grasas, quesos, sabores, pan Bebidas, derivados de frutas Queso, pan, bebidas, derivados de carne y pescado Queso Bebidas, almidn, pan

ADN, genes y cdigo gentico

Del ADN a la biotecnologa moderna El conocimiento del ADN (cido desoxirribonucleico), su estructura y funcin, fue determinante para el desarrollo de la biotecnologa moderna. La estructura de doble hlice del ADN, que los investigadores James Watson y Francis Crick propusieran en 1953 proporcion respuestas a muchas preguntas que se tenan sobre la herencia. Predijo la autorreplicacin del material gentico y la idea de que la informacin gentica estaba contenida en la secuencia de las bases que conforman el ADN. Ms an, con el correr de los aos y de las investigaciones, se pudo determinar que todos los seres vivos contienen un ADN similar, formado a partir de las mismas unidades: los nucletidos. Este cdigo gentico mediante el cual se "escriben" las instrucciones celulares es comn a todos los organismos. Es decir que el ADN de un ser humano puede ser "ledo" dentro de una bacteria, y una planta puede interpretar la informacin gentica de otra planta diferente. A esta propiedad de la informacin gentica se la conoce como "universalidad del cdigo gentico". El cdigo gentico universal es uno de los conceptos bsicos para comprender los procesos de la biotecnologa moderna. Por ejemplo, la posibilidad de generar organismos transgnicos, y que las instrucciones del ADN de un organismo puedan determinar nuevas caractersticas en organismos totalmente diferentes.

La funcin del ADN El ADN tiene la funcin de "guardar informacin". Es decir, contiene las instrucciones que determinan la forma y caractersticas de un organismo y sus funciones. Adems, a travs del ADN se transmiten esas caractersticas a los descendientes durante la reproduccin, tanto sexual como asexual. Todas las clulas, procariotas y eucariotas, contienen ADN en sus clulas. En las clulas eucariotas el ADN est contenido dentro del ncleo celular, mientras que en las clulas procariotas, que no tienen un ncleo definido, el material gentico est disperso en el citoplasma celular. La estructura del ADN El ADN est organizado en cromosomas. En las clulas eucariotas los cromosomas son lineales, mientras que los organismos procariotas, como las bacterias, presentan cromosomas circulares. Para cada especie, el nmero de cromosomas es fijo. Por ejemplo, los seres humanos tienen 46 cromosomas en cada clula somtica (no sexual), agrupados en 23 pares, de los cuales 22 son autosomas y un par es sexual. Una mujer tendr un par de cromosomas sexuales XX y un varn tendr un par XY. Cada cromosoma tiene dos brazos, ubicados por arriba y por debajo del centrmero. Cuando los cromosomas se duplican, previo a la divisin celular, cada cromosoma est formado por dos molculas de ADN unidas por el centrmero, conocidas como cromtidas hermanas.

Esquema de un cromosoma duplicado El ADN se compone de dos cadenas, cada una formada por nucletidos. Cada nucletido, a su vez, est compuesto por un azcar (desoxirribosa), un grupo fosfato y una base nitrogenada. Las bases nitrogenadas son cuatro: adenina (A), timina (T), citosina (C), y guanina (G), y siempre una A se enfrenta a una T y una C se enfrenta a una G en la doble cadena. Las bases enfrentadas se dice que son complementarias. El ADN adopta una forma de doble hlice, como una escalera caracol donde los lados son cadenas de azcares y fosfatos conectadas por "escalones", que son las bases nitrogenadas. La molcula de ADN se asocia a protenas, llamadas histonas, y se encuentra muy enrollada y compactada para formar el cromosoma. Esta asociacin de ADN y protenas se conoce como cromatina. La cromatina puede estar enrollada en mayor o menor grado, dependiendo de la etapa en que se encuentra la clula; por ejemplo, cuando el ADN se ha duplicado antes de que la clula se divida, la cromatina se compacta en su mayor grado, y como resultado se pueden visualizar los cromosomas duplicados al microscopio como corpsculos con forma de X.

Fuente: http://images.clinicaltools.com/images/gene/dnabasepairs.jpg La doble hlice de ADN con las bases nitrogenadas complementarias que se ubican hacia dentro y establecen uniones no covalentes (o fuerzas de atraccin) entre s que mantienen la estructura de la molcula. Las desoxirribosas (azcares) y los grupos fosfato constituyen las columnas de la molcula.

Fuente: http://www1.geneticsolutions.com/PageReq?id=1530:1873# Molecular%20Genetics La imagen representa una clula eucariota en la cual se ampla un cromosoma, y se muestra la estructura del ADN que lo constituye. Un fragmento particular del ADN forma un gen que determina una caracterstica particular. El ADN se forma a partir de la unin de nucletidos, que pueden tener cuatro bases nitrogenadas diferentes: A, T, C, G. Cuando la clula se divide, cada nueva clula que se forma debe portar toda la informacin gentica, que determine sus caractersticas y funciones. Para eso, antes de dividirse, el ADN debe replicarse, es decir generar una copia de s mismo. Durante la replicacin, la molcula de ADN se desenrolla, separando sus cadenas. Cada una de stas servir como molde para la sntesis de nuevas hebras de ADN. Para eso, la enzima ADN-polimerasa coloca nucletidos siguiendo la regla de apareamiento A-T y C-G. El proceso de replicacin del ADN es semiconservativo, ya que al finalizar la duplicacin, cada nueva molcula de ADN estar conformada por una hebra "vieja" (original) y una nueva.

Fuente: http://images.clinicaltools.com/images/gene/dnareplication.jpg Replicacin semiconservativa del ADN de una clula eucariota. Cmo se interpretan las instrucciones escritas en el ADN? La informacin est guardada en el ADN en el cdigo de secuencia de bases A, T, C y G que se combinan para originar "palabras" denominadas genes. Los genes son fragmentos de ADN cuya secuencia nucleotdica codifica para una protena. Es decir que a partir de la informacin "escrita" en ese fragmento de ADN se fabrica (sintetiza) un tipo particular de protena. Aunque, en realidad, los genes tambin llevan la informacin necesaria para fabricar molculas de ARN (ribosomal y de transferencia) que intervienen en el proceso de sntesis de protenas. El ARN (cido ribonucleico) es una molcula con una estructura similar al ADN. Un gen no es una estructura que se vea sino que se define a nivel funcional. Es una secuencia que va a empezar en algn lugar del ADN y va a terminar en otro. Para conocer un gen se secuencia, se determina la cantidad de los nucletidos que lo forman y el orden en que se ubican. Todas las clulas de un organismo tienen el mismo genoma, o conjunto de genes. Pero, en cada clula se expresan los genes que se usan. Por ejemplo, aunque una clula de la piel tiene toda la informacin gentica al igual que la clula del hgado, en la piel solo se expresarn aquellos genes que den caractersticas de piel, mientras que los genes que dan caractersticas de hgado, estarn all "apagados". Por el contrario, los genes que dan rasgos de "hgado" estarn activos en el hgado e inactivos en la piel. Lo que no se usa se encuentra mayormente compactado. Este empaquetamiento puede ser temporal o definitivo. La sntesis de protenas Las protenas son macromolculas que cumplen funciones variadas. Hay protenas estructurales, otras son enzimas, otras transportan oxgeno como la hemoglobina, hay protenas involucradas en la defensa inmunitaria, como los anticuerpos, otras cumplen funciones de hormonas como la insulina, etc. As como el ADN est compuesto a partir de nucletidos, las protenas estn compuestas a partir de aminocidos. Hay 20 aminocidos diferentes, y cada protena tiene una secuencia de aminocidos particular. El proceso de sntesis de protenas consta bsicamente de dos etapas: la transcripcin y la traduccin. En la primera etapa, las "palabras" (genes) escritas en el ADN en el lenguaje de los nucletidos se copian o transcriben a otra molcula, el ARN mensajero (ARNm). Luego, en la etapa siguiente, el ARNm se traduce al idioma de las protenas, el de los aminocidos. Este flujo de informacin se conoce como el "dogma central de la biologa".

Fuente: http://images.clinicaltools.com/images/gene/mrnahighlight3.jpg Proceso de sntesis de protenas en una clula eucariota. La transcripcin ocurre dentro del ncleo y la traduccin en los ribosomas en el citoplasma. La transcripcin Durante la transcripcin la enzima ARN polimerasa, copia la secuencia de una hebra del ADN y fabrica una molcula de ARN complementaria al fragmento de ADN transcripto. El proceso es similar a la replicacin del ADN, pero la molcula nueva que se forma es de cadena simple y se denomina ARN. Se denomina ARN mensajero porque va a llevar la informacin del ADN hacia los ribosomas, las organelas encargadas de fabricar las protenas. El ARN, o cido ribonucleico, es similar al ADN aunque no igual.

Fuente: http://www.answers.com/main/content/wp/en/thumb/e/eb/300px-RNA-comparedto-DNA.png Como muestra la imagen, el ARN se diferencia del ADN en que es de cadena simple, en lugar del azcar desoxirribosa tiene ribosa, y en lugar de la base nitrogenada timina, (T), tiene uracilo (U). La traduccin y el cdigo gentico La molcula del ARN mensajero se traslada a los ribosomas donde ocurre la etapa de traduccin. Durante esta etapa el ribosoma lee la secuencia de nucletidos del ARN mensajero por tripletes o tros de nucletidos, denominados codones. A medida que el ribosoma lee la secuencia de codones va formando una protena, a partir de la unin de aminocidos. Segn cul es el codn que el ribosoma "lee" va colocando el aminocido que corresponde. Si se considera la combinacin de cuatro bases tomadas de a tres, existe un total de 64 codones posibles. Cada codn determina qu aminocido se colocar en la

protena que se est fabricando. De los 64 codones, 61 corresponden a aminocidos y 3 son codones de terminacin (stop), responsables de la finalizacin de la sntesis proteica. La siguiente tabla es el cdigo gentico o "diccionario" que permite traducir la informacin escrita en el lenguaje de los cidos nucleicos (nucletidos) al lenguaje de las protenas (aminocidos), y es universal, o sea, es vlido para todos los seres vivos.

Fuente: http://images.clinicaltools.com/images/gene/codontable.jpg La tabla del cdigo gentico es universal y permite conocer a partir de la secuencia del ARN mensajero cmo ser la secuencia de la protena para la cual el gen correspondiente codifica. As, la secuencia ATG (AUG en el ARNm) codifica para el aminocido metionina, y el codn TTT (UUU en el ARNm) codifica para el aminocido fenilalanina en todos los organismos vivos. Como slo existen 20 aminocidos en la naturaleza, varios codones pueden codificar para el mismo aminocido (por ejemplo, al aminocido glicina le corresponden los codones GGU, GGC, GGA y GGG). Cada codn del ARNm es ledo por otro ARN, llamado ARN de transferencia (ARNt), que acta como un "adaptador" entre la informacin que lleva el ARNm y los aminocidos que deben ir colocndose para formar la protena correspondiente. El ARNt es muy pequeo comparado con los ARNm y tiene una secuencia, denominada anticodn que aparea (es decir, es complementaria) con el codn. Cada ARN de transferencia tiene un anticodn y "carga" un aminocido en particular. Por ejemplo, el ARNt que tiene el anticodn UCA, se aparea al codn AGU, y carga el aminocido serina (Ser). De la misma manera, el ARNt que carga tirosina (Tyr) se aparea, a travs de su anticodn, con el codn UAC. As se va formando una cadena polipeptdica (protena) a medida que los anticodones de los ARNt reconocen sus respectivos codones en el ARNm. Este proceso de sntesis proteica ocurre en los ribosomas. Qu son las mutaciones? A veces, y este es un fenmeno relativamente frecuente, la enzima que se encarga de la replicacin del ADN (ADN polimerasa) se equivoca, es decir, coloca un nucletido en lugar de otro. Si, por ejemplo, la enzima ADN polimerasa coloca una T en lugar de una A podra ocurrir que al traducirse, se coloque en la protena un aminocido diferente del que correspondera. Por lo tanto, la protena generada sera diferente en un aminocido a la original. Este cambio en el ADN, llamado mutacin, podra alterar o anular la funcin de la protena. Este ejemplo ilustra el efecto de los cambios o mutaciones puntuales (debidos a un nico cambio en la secuencia) en la protena final. En algunos casos las mutaciones pasan inadvertidas, pero tambin pueden provocar la falta de actividad de una protena esencial y causar una enfermedad. De todas formas, la mayora de las mutaciones no se manifiestan, o porque estn en regiones del ADN donde no hay genes, o porque no cambian el aminocido, o porque ese cambio no altera la funcin de la protena. O bien podra alterarse la funcin y esto no resultar perjudicial. Tal es el

caso del carcter color de ojos, donde el color claro se produce por falta de ciertas enzimas que fabrican los pigmentos del iris. En realidad, las mutaciones son la base de la biodiversidad. Es decir que las pequeas diferencias en el ADN es lo que determina que los seres vivos sean diferentes entre s. Esta diversidad en las caractersticas sumada a la existencia de un cdigo gentico comn entre los seres vivos, son dos hechos determinantes en el desarrollo de la biotecnologa moderna. El ADN y la biotecnologa moderna Cuando los cientficos comprendieron la estructura de los genes y cmo la informacin que portaban se traduca en funciones o caractersticas, comenzaron a buscar la forma de aislarlos, analizarlos, modificarlos y hasta de transferirlos de un organismo a otro para conferirle una nueva caracterstica. Justamente, de eso se trata la ingeniera gentica, a la que podramos definir como un conjunto de metodologas que nos permite transferir genes de un organismo a otro, y que dio impulso a la biotecnologa moderna. La ingeniera gentica permite clonar (multiplicar) fragmentos de ADN y expresar genes (producir las protenas para las cuales estos genes codifican) en organismos diferentes al de origen. As, es posible obtener protenas de inters en organismos diferentes del original del cual se extrajo el gen, mejorar cultivos y animales, producir frmacos, y obtener protenas que utilizan diferentes industrias en sus procesos de elaboracin

Qu es la Ingeniera Gentica?
Cuando los cientficos comprendieron la estructura de los genes y cmo la informacin que portaban se traduca en funciones o caractersticas, comenzaron a buscar la forma de aislarlos, analizarlos, modificarlos y hasta de transferirlos de un organismo a otro para conferirle una nueva caracterstica. Justamente, de eso se trata la ingeniera gentica, que se podra definir como un conjunto de metodologas que permite transferir genes de un organismo a otro y expresarlos (producir las protenas para las cuales estos genes codifican) en organismos diferentes al de origen. El ADN que combina fragmentos de organismos diferentes se denomina ADN recombinante. En consecuencia, las tcnicas que emplea la ingeniera gentica se denominan tcnicas de ADN recombinante. As, es posible no slo obtener protenas recombinantes de inters sino tambin mejorar cultivos y animales. Los organismos que reciben un gen que les aporta una nueva caracterstica se denominan organismos genticamente modificados (OGM) o transgnicos. A su vez, la ingeniera gentica es lo que caracteriza a la biotecnologa moderna que implementa estas tcnicas en la produccin de bienes y servicios tiles para el ser humano, el ambiente y la industria (ver Cuaderno N1). Etapas para la obtencin de un organismo transgnico La siguiente tabla resume los pasos bsicos de la ingeniera gentica empleados para transformar un organismo, y se ejemplifica con un caso concreto: Metodologa Caso: obtencin de maz Bt que produce una protena recombinante que le confiere resistencia a determinados insectos 1. Identificar el carcter resistencia a insectos en el organismo de origen, la bacteria del suelo Bacillus thuringiensis (Bt).

1. Identificar un carcter deseable en el organismo de origen.

2. Encontrar el gen responsable 2. Encontrar al gen que lleva las

del carcter deseado (gen de instrucciones para esta caracterstica, inters), aislarlo y caracterizarlo. aislarlo y caracterizarlo. 3. Combinar dicho gen con otros elementos necesarios (vector) para que ste sea funcional en el organismo receptor. 3. Combinar este gen con otros elementos genticos para que sea funcional en una planta: especialmente una secuencia promotora (y ligarlo a un vector adecuado para transformar plantas) 4. Transferir este gen a clulas de maz (organismo receptor).

4. Transferir el gen de inters, previamente introducido en el vector adecuado, al organismo receptor. 5. Crecer y reproducir el organismo receptor, ahora modificado genticamente.

5. Identificar las clulas de maz que recibieron el gen (clulas transformadas) y regenerar, a partir de estas clulas, una planta adulta resistente a insectos.

Tcnicas de Ingeniera Gentica o del ADN Recombinante La obtencin de un organismo transgnico mediante tcnicas de ingeniera gentica implica la participacin de un organismo que dona el gen de inters y un organismo receptor del gen que expresar la nueva caracterstica deseada. Por ejemplo, para el caso particular de la produccin de una variedad de maz que resista el ataque de insectos, el organismo dador es la bacteria del suelo denominada Bacillus thuringiensis (Bt) de la cual se extrae el gen que determina la sntesis de la protena insecticida, y el organismo receptor del gen es la planta de maz. Las etapas y tcnicas involucradas en este proceso seran: 1. Corroborar que existe un gen que codifica para la caracterstica de inters. Cuando se encuentra una caracterstica en un organismo que resulta interesante para transferir a otro organismo debe verificarse que es producto de un gen. Se identifica el gen de inters por medio de cruzamientos a partir de una caracterstica que se expresa, y se verifican las proporciones mendelianas (ver Cuadernos 40 y 41). Si la caracterstica se atribuye a una protena, que es producto directo de un gen, ser ms sencillo transferir esa caracterstica a un organismo que no la tiene. 2. Clonar el gen de inters. Clonar un gen significa tenerlo puro en el tubo de ensayos, o mejor an, dentro de un vector (una molcula mayor de ADN que permite guardar fragmentos de ADN en forma estable y prctica por ms tiempo). La tarea de clonar un gen involucra varias tcnicas (ver Cuaderno N 67): i) Extraccin de ADN; ii) Bsqueda de un gen entre la mezcla de genes del ADN; iii) Secuenciacin; iv) Construccin del vector recombinante. El ADN de inters se inserta en plsmidos-vectores que son molculas de ADN lineales o circulares en las cuales se puede "guardar" (clonar) un fragmento de ADN. Los ms usados son los plsmidos de origen bacteriano.

Los plsmidos pueden extraerse de las bacterias e incorporarse a otras, a travs del proceso de transformacin. Los plsmidos fueron modificados por los investigadores para ser empleados como vectores (vehculos). As, el gen de inters puede insertarse en el plsmido-vector e incorporarse a una nueva clula. El desarrollo de estas tcnicas fue posible en gran medida por el descubrimiento de las enzimas de restriccin .Las enzimas de restriccin reconocen secuencias determinadas en el ADN. De esta manera, conociendo la secuencia de un fragmento de ADN, es posible aislarlo del genoma original para insertarlo en otra molcula de ADN. Hay muchas enzimas de restriccin obtenidas a partir de bacterias y que sirven como herramientas para la ingeniera gentica.

Las enzimas de restriccin reconocen secuencias de 4, 6 o ms bases y cortan generando extremos romos o extremos cohesivos. Estos extremos, generados en diferentes molculas de ADN, pueden sellarse con la enzima ADN ligasa y generar as una molcula de ADN nueva, denominada recombinante. Para tener gran cantidad y fcil disponibilidad del ADN de inters, el vector se inserta dentro de bacterias (E. coli), las cuales crecen fcil y rpidamente. O sea, la bacteria se utiliza como "multiplicadora" del vector, y por ende del inserto de inters. Esta es una etapa de "amplificacin" del ADN para poder tener gran cantidad para secuenciarlo, caracterizarlo, y luego poder hacer con l ADN recombinante.

En placas de Petri se cultivan las bacterias. Se originan colonias de bacterias iguales (clones). Las bacterias transformadas, que incorporaron el plsmido y el gen de inters, se seleccionan por medio de antibiticos y por reacciones con indicadores de color. 3. Caracterizar el gen de inters. A partir de conocer la secuencia del gen se puede, mediante bioinformtica, comparar esta secuencia con las de genes ya conocidos para determinar a qu gen se parece, y se le asigna una posible funcin. Una vez predicha la funcin del gen clonado por medio de anlisis informtico, se debe proceder a confirmar la funcin real in vivo, o sea corroborar que en un sistema biolgico funciona acorde a lo que se prev. Para ello se suele transferir el gen a un organismo modelo, en el cual se pueda expresar el gen y medir su funcin. En el ejemplo del maz, el gen Bt se puede transferir primero a las especies modelo Arabidopsis thaliana y Nicotiana tabacum (ver Cuaderno N 50). 4. Modificar el gen de inters. Si as se desea se puede agregar, deletar o mutar secuencias dentro de la regin codificante, y agregar secuencias (promotor, terminador, intrones) para que se pueda expresar en el sistema de inters. Por ejemplo: si se clona un gen Bt de una bacteria para luego ponerlo en maz, se debe agregar un promotor que funcione bien en plantas, es decir, que permita que las clulas vegetales expresen la protena Bt. El promotor es una regin fundamental del gen ya que determina cundo y dnde se expresar el gen.

Inserto preparado para ser transferido. Fuente: http://www.agronort.com/informacion/abcbiotec/abcbio6.html

5. Transformacin de un organismo con el gen de inters. Una vez hecha la construccin gentica con el gen y promotor deseado, se elige el mtodo de transformacin ms indicado para el organismo que se desea hacer transgnico (para plantas ver Cuadernos N 18 y 28, para animales ver Cuaderno N 47).

6. Caracterizacin del OGM. Una vez obtenido el OGM, se lo analiza desde el punto de vista molecular y biolgico. Para el anlisis molecular se debe demostrar, entre otras cosas, si tiene una (o ms) copias del transgn, y cmo y en qu tejidos se expresa el gen. Para analizar en qu tejido, momento y cantidad se expresa el gen se analiza la presencia del ARN mensajero y de la protena recombinante codificados por el transgn (ver Cuaderno N 49 y N67). Para la caracterizacin biolgica, el OGM se analiza desde el punto de vista del objetivo (en este ejemplo, si el maz resulta efectivamente resistente a los insectos) y desde el punto de vista que sea necesario acorde al OGM en cuestin. Si ser utilizado como alimento y se lo cultivar a campo, entonces se deber hacer el anlisis de riesgo alimentario y ambiental (ver Cuadernos 62 y 60, respectivamente). Hasta el momento se ha utilizado la ingeniera gentica para producir, entre otras aplicaciones: Vacunas, por ejemplo contra la hepatitis B. Frmacos, como la insulina y la hormona del crecimiento humano, tanto en clulas transformadas y crecidas in vitro como en bacterias recombinantes y animales transgnicos. Enzimas para disolver manchas, como las que se usan en los detergentes en polvo, mayormente por medio de microorganismos recombinantes (transgnicos) que crecen en biorreactores. Enzimas para la industria alimenticia, como las empleadas en la elaboracin del queso y en la obtencin de jugos de fruta, entre otras. Plantas resistentes a enfermedades, entre otras caractersticas

Introduccin al Mejoramiento tradicional y la Biotecnologa moderna

El mejoramiento vegetal Las plantas que hoy se cultivan son distintas de sus antepasados silvestres, ya que el hombre ha modificado y seleccionado sus propiedades a lo largo de ms de diez mil aos en funcin de sus necesidades. La civilizacin moderna basa su agricultura en agroecosistemas, ecosistemas fuertemente alterado por las actividades humanas con el objetivo de la produccin agrcola, en los que la biodiversidad se ha reducido para maximizar los rendimientos multiplicando la produccin de alimentos para satisfacer necesidades humanas. Muchas especies (animales, vegetales, microorganismos) que predominan en estos sistemas resultan de la seleccin artificial vinculada al manejo agrcola. Un agro-ecosistema es controlado con el objetivo definido de producir alimentos, y a diferencia de un ecosistema natural (como el que se encontrara en un parque nacional), es de naturaleza artificial y se encuentra en constante evolucin y mejoramiento de las prcticas agrcolas. La gran mayora de los cultivos que utiliza el agricultor en la actualidad han sido generados por los mtodos convencionales, como los cruzamientos selectivos, en centros dedicados a la produccin de nuevas variedades. Hoy, la ingeniera gentica se suma a las prcticas convencionales como una herramienta ms para mejorar o modificar los cultivos vegetales. La incorporacin de OGMs (organismos genticamente modificados) en los agroecosistemas ha ayudado a hacerlos ms sustentables a partir de la asociacin con mtodos conservativos, como la siembra directa y un control ms focalizado de los insectos plaga respetando otros insectos benficos. Tcnicas tradicionales de mejoramiento de plantas Existe gran diversidad de fenotipos en las plantas, en sus caractersticas y en sus funciones, determinada por la variabilidad gentica y la interaccin de estos genotipos con el ambiente. Existen diferentes factores que favorecen la diversidad gentica y la variedad de caractersticas entre individuos de una misma especie o de diferentes especies. Entre estos factores se puede mencionar la reproduccin sexual y las mutaciones que aumentan la diversidad sobre la que acta la seleccin natural. A esto se suma la accin del hombre que, a travs de la seleccin artificial y la hibridacin (cruzamientos selectivos) aprovecha esta diversidad y promueve la reproduccin y supervivencia de determinadas especies o variedades que resultan favorables. Todos estos mecanismos, naturales e inducidos por el hombre, se incluyen en lo que se denominan tcnicas tradicionales de mejoramiento vegetal, que se detallan a continuacin: 1. Seleccin artificial y cruzamientos selectivos: El hombre selecciona las plantas que le ofrecen ms ventajas (mejores frutos, mayor crecimiento, mayor resistencia a enfermedades, etc.), y realiza cruzamientos selectivos entre esas variedades para obtener descendencia con mejores rendimientos. Adems, desde que es agricultor, el hombre no solo ha seleccionado sino que tambin ha trasladado

especies vegetales de un lugar a otro, a otras condiciones ambientales. Estas variables ambientales tambin originaron gran diversidad en los vegetales. Por ejemplo, las diferentes coles (brcoli, coliflor, repollo, repollito de Burselas, y otros) son descendientes de una especie original, obtenidas por el hombre mediante seleccin artificial. 2. Hibridacin (intervarietal, interespecfica, intergenrica): El hombre realiza cruzamientos no solo entre diferentes variedades de una misma especie, sino tambin interespecficos (entre especies) e inclusive intergenricos (entre diferentes gneros). Estos cruzamientos generan hbridos: mezcla entre dos especies o gneros diferentes pero sexualmente compatibles que da como resultado una descendencia cuya combinacin de genes ser al azar, diferentes de los progenitores. Esta tcnica es una de la que ms contribuy a la diversidad. 3. Mutagnesis inducida (agentes mutagnicos). Esta tcnica se utiliza desde mediados del siglo XX. Por medio del uso de sustancias qumicas o radiaciones se inducen mutaciones al azar en el genoma que generan cambios en la planta. 4. Polinizacin y Fertilizacin in vitro: Existen barreras sexuales entre organismos de diferentes especies y gneros. El hombre puede atravesar estas barreras a travs de la polinizacin (traslado del polen que contiene las gametas masculinas de la planta, hacia la estructura reproductiva femenina). Cuando el hombre aprende a polinizar artificialmente estas plantas y se genera la unin de las gametas, se pueden cultivar los embriones in vitro. 5. Cultivo in vitro de clulas, tejidos y rganos vegetales. Tambin se cultivan clulas, tejidos u rganos en medios nutritivos en frascos. Esta tcnica acompaa otras tcnicas de mejoramiento vegetal. El cultivo in vitro es posible debido a que las plantas tienen una propiedad denominada totipotencialidad celular: toda clula viva e ntegra de una planta, sin importar el grado de especializacin alcanzado, es capaz de regenerar una planta entera igual a la original (ver Cuaderno N 35 y N 56). 6. Obtencin de haploides: cultivo in vitro de estructuras sexuales haploides que generan organismos haploides que pueden aportar caracteres agronmicos importantes. 7. Variacin somaclonal (cultivo in vitro o a campo): mediante cultivo de clulas o tejidos in vitro se pueden generar variaciones.

Cultivo in vitro de plantas

Seleccin y Cruzamiento tradicional Las diferentes variedades de maz (Dent, Sweet, Popcorn, Flint, Pod, etc.) son producto de procesos de seleccin artificial, sumado a procesos de seleccin natural y mutaciones que el hombre fue aprovechando y seleccionando hasta llegar a domesticarlo. Hoy en da hay una gran variedad de maces hbridos, ms vigorosos, con mejores caractersticas, ms beneficiosos desde el punto de vista alimenticio, como el tamao y disposicin de los granos. Estos mtodos se basan en el cruzamiento entre individuos de la misma especie pero que muestran caractersticas diferentes, y una posterior seleccin de los ejemplares que presentan las caractersticas deseadas. Este mtodo de cruzamiento y seleccin se repite sucesivamente de manera de lograr, en la variedad final, la incorporacin de los genes que llevan informacin para los rasgos deseados y la eliminacin de aquellos relacionados con las caractersticas no deseadas. Este proceso de generacin de nuevas variedades ha sido (y contina siendo) muy til en la agricultura y ha originado a las variedades que se cultivan hoy en da.

A travs de los cruzamientos tradicionales se mezclan genes de plantas que presentan diferentes variantes para una misma caracterstica, como el tamao del choclo en este caso. De la diversidad que se obtiene, el agricultor selecciona el que ms le conviene y lo vuelve a cruzar, y as sucesivamente hasta obtener la especie deseada. El hbrido que resulta por cruce sexual tiene una combinacin gentica de los progenitores. Esta recombinacin es al azar.

La mutagnesis A fines de la dcada de 1920, los investigadores descubrieron que se pueden obtener mutaciones (cambios en el ADN) exponiendo a las plantas a agentes mutgenos fsicos (rayos X y gamma, neutrones, protones, etc.) o qumicos (etilmetanosulfonato, azida sdica, etc). Estas mutaciones ocurren al azar en el genoma y generan una enorme variabilidad que puede dar lugar a la aparicin de caractersticas interesantes, las que son seleccionadas por el agricultor. As se obtuvo el pomelo rosado, a partir del pomelo blanco mutagenizado por radiacin. Otros cultivos modificados por mutagnesis son: trigo, arroz, lechuga y porotos, entre otros. La mutagnesis no es dirigida. Se induce una gran cantidad de variaciones a travs de los agentes mutagnicos en diferentes cromosomas, proporcional a la dosis del agente que se emple para causar las

mutaciones. Las mutaciones que se inducen son al azar, no se sabe qu tipo de mutaciones o dnde en el genoma de la planta ocurren, pero dan nuevas variedades que pueden ser aprovechables porque ofrecen caracteres nuevos interesantes. La biotecnologa moderna en el mejoramiento vegetal Las tcnicas tradicionales de hibridacin mezclaron durante varios aos miles y miles de genes y muchas generaciones de plantas con el fin de obtener una caracterstica deseada. La biotecnologa acelera este proceso permitiendo a los cientficos tomar solamente los genes deseados de una planta, logrando de ese modo los resultados buscados en tan slo una generacin (ver Cuaderno N67). La biotecnologa es una herramienta ms segura y eficiente para el mejoramiento de especies respecto de las tcnicas tradicionales, puesto que elimina gran parte del azar presente en el mejoramiento tradicional. Por otro lado, la biotecnologa moderna es una nueva tecnologa, en la medida que puede modificar los atributos de los organismos vivientes mediante la introduccin de material gentico que ha sido trabajado "in vitro" (fuera del organismo). Esta metodologa ofrece tres ventajas fundamentales respecto a las tcnicas convencionales de mejora gentica basadas en la hibridacin, como muestra el esquema: Los genes que se van a incorporar pueden provenir de cualquier especie, emparentada o no (por ejemplo, un gen de una bacteria puede incorporarse al genoma de la soja). En la planta mejorada genticamente se puede introducir un nico gen nuevo preservando en su descendencia el resto de los genes de la planta original. Este proceso de modificacin demora mucho menos tiempo que el necesario para el mejoramiento por cruzamiento. De esta forma se puede modificar propiedades de las plantas de manera ms amplia, ms precisa y ms rpida.

Mediante el cruzamiento tradicional se genera un hbrido que combina al azar genes de ambos organismos parentales, entre ellos el gen de inters que codifica para la caracterstica deseada. Mediante las tcnicas de la biotecnologa moderna se pasan uno o unos pocos genes, que codifican una caracterstica especfica conocida. La nueva planta est integrada con todos los genes originales de la planta y un gen que es introducido de manera precisa y dirigida.

Perspectivas de la biotecnologa agrcola La biotecnologa moderna est avanzando en desarrollos que tendran beneficios para productores, consumidores e industrias, entre ellos: Aumento de la productividad y calidad de los cultivos. Resistencia a enfermedades y plagas. Tolerancia a herbicidas, sequas, salinidad y temperaturas extremas. Alimentos ms nutritivos, como frutas y cereales con mayor contenido de vitaminas. Vacunas comestibles, como bananas que contengan la vacuna contra la hepatitis B. Alimentos ms saludables, como aceites con menor contenido de cidos grasos indeseables, papas que

absorban menos aceite, frutas con ms antioxidantes y man libre de alrgenos. Produccin de frmacos, bio-combustibles y plsticos biodegradables

Cmo ayuda la biotecnologa a la seguridad alimentaria?

De la granja a la mesa Los alimentos posibilitan el crecimiento, la regeneracin y reparacin de tejidos, y aportan la energa necesaria para los procesos vitales. Sin embargo, en ocasiones, son el vehculo de agentes extraos (infecciosos o txicos) que al ser ingeridos pueden provocar enfermedades. Este tipo de enfermedades son evitables si los alimentos llegan en buen estado al consumidor. La Cumbre Mundial sobre la Alimentacin, organizada en 1996 por la FAO -Organizacin de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentacin- defini que existe seguridad alimentaria cuando todas las personas tienen en todo momento acceso fsico y econmico a suficientes alimentos inocuos y nutritivos para satisfacer sus necesidades alimentarias y sus preferencias en cuanto a los alimentos, a fin de llevar una vida activa y sana. Esta definicin implica por una parte, seguridad en el acceso a los alimentos y, por otra, seguridad en la inocuidad de los alimentos. En los ltimos aos se hizo necesario ampliar los mtodos de control de la seguridad alimentaria a toda la cadena del proceso productivo, desde la siembra en el campo y crianza de animales, pasando por la cosecha, sacrificio, elaboracin, empaquetado, distribucin, venta y consumo del producto final. Surge as una nueva forma de abordar el problema de la seguridad alimentaria, con un enfoque global y un tratamiento integral del consumo de alimentos que va de la granja a la mesa. La biotecnologa ofrece enormes posibilidades para mejorar los sistemas de seguridad alimentaria. Los nuevos sistemas de deteccin de agentes nocivos presentan una elevada sensibilidad y una mayor versatilidad en sus posibilidades de aplicacin, contribuyendo a mejorar los sistemas de control. Adems, se estn implementando otras biotecnologas para mejorar los procesos productivos, conservacin y envasado de alimentos, los cuales inciden de forma indirecta en una mejora de la seguridad alimentaria. Qu elementos amenazan la inocuidad de los alimentos? Muchas veces, la inocuidad de los alimentos se ve amenazada por la presencia de diferentes agentes, que se resumen en el siguiente diagrama:

Qu aporta la biotecnologa a la seguridad alimentaria? Los grandes avances que ha experimentado la biotecnologa en los ltimos aos permitieron que lentamente se vayan utilizando nuevas tcnicas para asegurar a los consumidores la inocuidad de los alimentos. Dentro de las reas de aplicacin de la biotecnologa en el mbito de la bioseguridad se encuentran: Deteccin de agentes nocivos Existen una gran cantidad de agentes que amenazan la seguridad de los alimentos. Si bien todos ellos son detectados por tcnicas analticas convencionales, las nuevas tcnicas biotecnolgicas presentan una serie de ventajas tales como una mayor sensibilidad del sistema de deteccin, mejor portabilidad (kits pequeos de fcil transporte), mejor adaptacin a los sistemas de produccin (pueden ser incluidos en los sistemas de produccin sin afectar al normal funcionamiento de los mismos) y, en algunos casos, abaratamiento de los costos de control. Son varias las tcnicas de biologa molecular que se utilizan para el control de la calidad alimentaria (ver Cuadernos N 67 y 68). Entre ellas se encuentran:

ELISA (en ingls, Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay): es un mtodo de deteccin basado en la especificidad antgeno-anticuerpo. Permite la deteccin de diversas sustancias antignicas mediante la unin de anticuerpos especficos que directa o indirectamente producen una reaccin cuyo producto es visible y puede ser medido. Inmunoblotting o Western blot: es una tcnica inmuno-enzimtica que se utiliza para la deteccin de protenas. Se basa en la separacin de las protenas de una muestra en funcin del tamao, mediante una electroforesis y una deteccin posterior mediante anticuerpos especficos contra la protena que se desea detectar. Permite detectar el contenido relativo de protenas en diferentes muestras. Southern blot: Es una tcnica de hibridacin que se utiliza para detectar una determinada secuencia de ADN dentro de una mezcla compleja. Para ello se debe contar con una sonda (fragmento conocido de ADN de simple cadena) que sea complementaria a la secuencia que se desea encontrar. Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR): es un mtodo de anlisis rpido y sencillo que permite la deteccin y amplificacin de determinados segmentos del ADN. Secuenciacin de ADN: se utiliza como tcnica de confirmacin positiva en la presencia de una determinada secuencia de ADN, tras su deteccin por PCR. Generalmente se utiliza para la autentificacin gentica de alimentos (autentificacin de especies o deteccin de componentes de origen animal o vegetal no deseados en el alimento). Biosensores: son dispositivos de anlisis compactos que incorporan un elemento de tipo biolgico asociado a un sistema de transduccin que permite amplificar, almacenar y registrar la seal producida por la interaccin entre el elemento de reconocimiento y el analito buscado. Permiten detectar muchas sustancias como: fertilizantes, aditivos, plaguicidas, metales pesados, antinutrientes, toxinas, frmacos, contaminantes orgnicos, alrgenos, etc.

En la siguiente tabla se muestran los agentes nocivos que pueden ser detectados por las tcnicas antes mencionadas:

Agentes antinutrientes alrgenos aditivos plaguicidas fertilizantes frmacos

Sistemas de deteccin biotecnolgicos biosensores * * * * * * * * * PCR ELISA inmunoblotting * * *

metales pesados virus priones bacterias toxinas marinas toxinas bacterianas micotoxinas

* * * * * * * * * * * * * * * *

Deteccin de organismos genticamente modificados (OGMs) Muchos son los aportes de las tcnicas de ingeniera gentica (transgnesis) a la seguridad alimentaria. Por ejemplo, la obtencin de plantas resistentes a insectos permite una reduccin en el uso de plaguicidas. De la misma forma, las plantas transgnicas tolerantes a herbicidas permiten la utilizacin de menores cantidades de estos compuestos. La reduccin en los aportes de estos insumos a los cultivos causa una menor contaminacin medioambiental y, de forma indirecta, mejores niveles de seguridad alimentaria. Sin embargo, en algunos pases, debido a grandes controversias respecto al consumo de estos alimentos, se realizan anlisis para detectar si provienen de OGMs. Las tcnicas de biotecnologa que son eficientes en la deteccin de OGMs son: PCR, ELISA, inmunoblotting y Southern blot. Identificacin de especies Uno de los objetivos de la seguridad alimentaria es conocer la procedencia de un producto. Es para ello que se utilizan tcnicas analticas, que permitan determinar el origen de los animales o plantas que se utilizan para la elaboracin de un alimento (trazabilidad). Estas tcnicas se usan principalmente para la deteccin de fraudes. Por ejemplo, se pueden encontrar a la venta productos de calidad inferior a la denominada en su etiqueta, o se modifican los ingredientes de los mismos para abaratar costos, pudindose originar problemas de salud. Para identificar las especies de procedencia se debe contar con marcadores bioqumicos, ya sean cidos nucleicos o protenas especficas de esa planta o animal. Por lo general se utilizan marcadores que sean estables frente a los tratamientos del proceso industrial (pasteurizacin, congelamiento, etc.). As, se utilizan la troponina I (termoestable) para la deteccin de carne de cerdo; las hemoglobinas, mioglobinas y citocromo C para discriminar el origen de distintas carnes (porcinos, vacunos, etc); alfalactoglobulina para la deteccin de leche de vaca; glicina y beta-conglicinina para detectar presencia de soja usada para abaratar costos al sustituir productos lcteos; hesperetina y metilantranilato para detectar miel proveniente de ctricos. Biotecnologa aplicada a la conservacin La biotecnologa se aplica a la conservacin de alimentos, bsicamente de dos maneras: Mediante la produccin de bacteriocinas. Las bacteriocinas son pptidos de origen bacteriano con capacidad antimicrobiana, es por ello que tienen un gran potencial como agente conservante de alimentos. Las ms conocidas son la nisina, pediocina y la lactococcina. Estas sustancias son producidas por bacterias cido-lcticas y atacan a bacterias relacionadas con la cepa productora, entre las que se encuentran cepas alterantes y patgenas frecuentes en los alimentos. En la actualidad, algunas de estos pptidos se estn utilizando en la conservacin de productos lcteos, crnicos y vegetales poco procesados. Se espera que un futuro reemplacen a los aditivos qumicos, es por eso que la biotecnologa est desarrollando bacterias recombinantes que produzcan mayores cantidades de estas sustancias para cubrir su demanda comercial. Mediante la prolongacin de la vida til. Cuando se obtienen frutas con vida til prolongada se incide indirectamente en la seguridad alimentaria ya que, al tener inhibido el proceso de maduracin, son productos con menor contaminacin microbiana. Actualmente se estn desarrollando plantas transgnicas cuyos frutos tienen maduracin retardada. Los cientficos estn logrando este objetivo a travs de diferentes estrategias: plantas con frutos con mayor resistencia fsica al ataque bacteriano, plantas con menor produccin de etileno (hormona responsable de la maduracin), plantas con bloqueo del proceso de senescencia que interviene en la maduracin del fruto antes y despus de la cosecha. Biotecnologa aplicada al envasado En los ltimos aos, se est fomentando la investigacin y desarrollo de materiales bioplsticos (Ver cuaderno N 48) producidos a partir de microorganismos y plantas transgnicas. stos proveen a la

industria un mtodo de envasado amigable con el medio ambiente y adems presentan unas caractersticas de barrera activa, que permiten una mejor conservacin del producto y un aumento de su seguridad. Una nueva rama de la biotecnologa aplicada al mejoramiento de alimentos es la Nutrigenmica. Es el estudio de cmo interacta la informacin de los alimentos con la de los genes y sus consecuencias, relacionando la investigacin genmica y biotecnolgica con la nutricin. sta surge de los rpidos avances en el conocimiento del genoma humano, de sus mecanismos de regulacin y del conocimiento de cmo ciertos alimentos inciden en estos sistemas. As, la nutrigenmica permitir mejorar tanto la seguridad como la eficiencia de los alimentos. Si bien actualmente se est haciendo nfasis en garantizar la seguridad alimentaria, en un futuro cercano se aadir una creciente consideracin de los posibles beneficios asociados a los alimentos y sus componentes, en relacin a la salud

Alimentos transgnicos, deberan etiquetarse?