Universidad nacional de ingeniera

facultad de ingeniera ambiental

Microbiologa ii

IDENTIFICACION DE PROTOZOARIOS , ROTIFEROS,MICROCRUSTACEOS,HONGOS,ARTROPODOS,LARVAS DE INSECTOS,HELMINTOS,VIRUS,PECES,PLANTASACUATICAS,PECES Y VIRUS

Alumna:
Jara Huamanahui Litza

Seccin:
F

26 DE JUNIO DEL 2013

INTRODUCCION..1 OBJETIVOS.1 FUNDAMENTO TEORICO..1-2 MATERIALES Y EQUIPOS..2-3 PROCEDIMIENTO..3-5 RESULTADOS.5-8 CONCLUSIONES ,DISCUSIONES Y RECOMENDACIONES....8-9 CUESTIONARIO.9-11 ANEXOS.11-12

1. INTRODUCCIN:
Las algas son habitantes comunes y normales de aguas poco profundas y se encuentran en todo suministro de agua expuesto a la luz del sol aunque algunas algas se encuentran en el suelo y en superficies expuestas al aire .Conocer el numero y clase de algas presentes en estanques de aguas negras es de gran utilidad para ver el proceso de oxidacin. La metodologa empleada es la que utilizan la gran mayora de los laboratorios ;consiste en un anlisis cualitativo y cuantitativo , en este ultimo se emplea la cmara de Sedwick Rafter. Determinar la concentracin promedio de microorganismos por los mtodos de celda Sedgwic - Rafter y la franja, y hallar el nmero de campos de cada uno de ellos, con los objetivos 10X y 43X. Comprender los mtodos para determinar la concentracin demicroorganismos, observar y determinar cul de los dos mtodos es el mspreciso.Hallar la cantidad de campos para ambas celdas por medio del microscopio ptico.Determinar la concentracin de los microorganismos encontrados en la muestra.

2. OBJETIVOS:

3. FUNDAMENTO TEORICO:
El recuento de microorganismos , para la avaliacion (valoracin) de su concentracin en 1ml de agua , se hace por varios procedimientos .Los mas usuales son los que utilizan la celda contadora de Sedwick Rafter .Esta celda es un porta objeto que contiene un recipiente rectangular, con dimensiones de 20x50mm , con una profundidad de 1mm (volumen total de 1ml).La colocacin de la muestra de agua en la celda de Sedwick Rafter se hace como se ve en la figura

En general , se emplea para la observacin, un objetivo 10x .Objetivos ms potentes no pueden ser empleados con la celda de recuento , pues esta tiene un espesor muy grande .El numero de microorganismos enfocados en un campo visual debe ser multiplicado por el numero de campos existente en toda la celda (osea en un rea de 20x50mm , o mejor dicho en 1ml de muestra).Los procedimientos principales , para conocer el numero de campos existentes en la superficie de la celda. a)mtodo de whipple (ver anexo1) b)mtodo de la celda de S-R (del recuento por hileras):En este mtodo se cuentan todos los mo que se encuentran en una faja del ancho del campo , en toda la longitud de la celda de S-R .La concentracin de mo po ml se obtiene simplemente multiplicando el numero obtenido de mo por el numero de campos existentes en el ancho de la celda .El numero de campos puede ser contado directamente , al microscopio, sin auxilio de retculos o de micrmetros. c)mtodo de la franja : para muestras que contienen una gran concentracin de mo (por ejemplo lagunas de estabilizacin) se puede emplear el mismo mtodo anterior , pero utilizando solamente una gota de la muestra , la cual es colocada sobre un porta objeto y recubierto por un cubre objetos de 22x22mm .En este caso es necesario conocer el volumen de la gota .Eso se puede medir contando e numero d egotas necesario para llenar un aprobeta de 10 0 50ml .

4. MATERIALES Y EQUIPOS:

5. PROCEDIMIENTO :
Mtodo de la franja:

Medir las gotas que hay en 5 ml

Tomar 1 gota de la muestra

Observar los campos y realizar el conteo de mo.

verter la gota sobre el portaobjetos , y colocar sobre ella el cubreobjetos

Mtodo de la Celda - SEDGEWICK RAFTER

Tomar 1 ml de muestra

Verterlo en la celda

Realizar el conteo de mo en cada campo

Observar los campos a

travs del microscopio

6.RESULTADOS
Objetivo 10x: T = 27C

N CAMPOS

N DE MICROORGANISMOS

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Total de N de campos: 12

1 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 1 Total de N de microorganismos: 3

CALCULAR EL PROMEDIO DE MO POR CAMPO:

X = 3/12 = 0.833 mo/campo

DETERMINACIN DE NO DE CAMPOS EN TODO EL CUBREOBJETOS. Numero de campos a lo ancho (lado) del cubre objeto = 12 campos Numero de campos a lo largo (lado) del cubre objeto = 12campos Total Ncampos = 12*12 =144 DETERMINACIN DEL VOLUMEN DE UNA GOTA
85 gotas <> 5 mL 1 gota <> X mL Volumen de una gota: X = 85 X = 0.0588ml

DETERMINACIN DE LA CONCENTRACIN DE MICRORGANISMOS

Concentracin de mo: 0.833*144*0.0588 = 7.053 N de mo /ml

Mtodo de la celda sedwwick rafter

Calcular el promedio de mo po campo:

N DE CAMPOS 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11

N DE MICROORGANISMOS 0 0 1 1 0 0 0 0 2 0 0

12 13 Total de N de campos: 13

0 0 Total de N de microorganismos: 4

X = 4/ 13 = 0.3076 mo/campo

Total de N campos = 13*33 = 429 campos

Concentracin de mo : 0.3076 * 429 /ml = 131.9 N d emo /ml

5 .DISCUSIN Y CONCLUSIONES 6 .RECOMENDACIONES

*Hacer el recuento no en una sola franja , sino en 2 franjas perpendiculares Ejemplo: si en un recuento se encuentran 20 algas en un sentido y 30 en otro , el promedio es 25 organismos. *Si se encontr en un sentido 110 campos y el otro 90 campos , el factor de multiplicacin ser 100(promedio de 100 y 90)

7 .CUESTIONARIO
8 .ANEXOS

Anexo1: a)mtodo de whipple:En este metodo se mide el area del campo visual(el cual es variable para cada objetivo y ocular utilizado)con auxilio del micrmetro ocular de Whipple.Este es un disco de vidrio , que contiene un retculo quebrado que divide el campo en cien partes o cuadraditos iguales .El valor , en micras , del rea de cada uno de esos cuadraditos varia segn el objetivo utilizado .Por ese motivo , dicho valor debe ser previamente medido , para cada objetivo del microscopio , con auxilio de un micrmetro de objetivo .Se coloca ese micrmetro en la platina del microscopio , del mismo modo como se colocara un portaobjeto.Se focaliza la lnea , colocndose el micrmetro de whipple en el ocular , se hace la superposicin de ambos y , de esa manera se puede se puede medir el lado de uno de los cuadraditos .Una vez conocida el rea del cuadradito , se obtiene el rea del campo , multiplicando ese valor por 100, y por lo tanto el numeor de campos comprendido en toda la celda de Sedwick-Rafter. Por ejemplo , si el cuadradito mide 10 divisiones osea 100u de lado , se tiene que su rea es de 100x100=10000u2 y el rea del campo ser: 100x10000 u2 =1000000u2 .La celda de S-R mide 2x5x108 u2 = 1000000000 u2 , osea , que contiene mil campos .Luego se multiplica el numero de microorganismos promedio .Luego se multiplica el numero de mo promedio , contado digamos en 10campos , por el numero de campos que hay en la celda

9 .BIBLIOGRAFA

http://cdigital.dgb.uanl.mx/la/.pdf http://www.bvsde.ops-oms.org/ pdf