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Parmetros Imunolgicos

Prof Heide Baida

Introduo
Antesdeestudarmosostestesimunolgicoseseusparmetrosde avaliao,valerelembraralgunstpicosimportantes. Tipodeamostrasquepodemserutilizadas:sangueelquor SANGUE: Constitudodecomponentesslidos(clulas)eumapartelquida (constitudaporgua,ons,molculas,macromolculas protinas, lipideos,carboidratos,etc...),poisosangueumdosprincipais veculosdetransportedoorganismo. ApartelquidadosanguepodeserchamadadePLASMA (ondeos elementosdacoagulaoestopreservados)oudeSORO (ondeocorre oconsumodoselementosdacoagulao). Paraarealizaodosensaiosimunes,utilizaseoSORO.Comoobtlo?

Introduo
ObtenodoSORO: Aamostradevesercolhidaporpunovenosaemtuboseco; Apspermaneceremdescansoporcercade30mim,deveser centrigufada por15minutosa3000RPM; Apsacentrifugao,osobrenadanteconstituioSOROeo sedimentoconstituisedeumcogulo,compostopelasclulas sanguneas:

Outras variveis: Jejum


Poucarelevnciaemensaiosimunes,porm: 1. Lipdeospodeminterferiremensaiosimunesnomarcados, napipetagem depequenasquantidadesdeamostras; 2. Deveseevitarcoletaspsprandiais; 3. Geralmenteopacientecoletaoutrosexamesqueexigemo jejum,favorecendoassimosexamesimunes; 4. Paraarealizaodeexamesimunes,oidealojejumde4 horas; 5. Porcontadafaltadeexignciadojejumparaensaios imunes,qualqueralteraoobservadanaamostradeveser ressaltada:lipmico,ictrico,hemolisado

Outras variveis: Jejum


6. Aingestodeguanoprejudicaosensaiosimunes; 7. Aingestodelcooldeveserevitada; 8. Ofumodeveserevitadoduranteas4horasqueantecedem oexame; 9. Gestantes:podemapresentarresultadosfalsopositivos; 10. Apsexerccios,deveseaguardarnomnimo30minutos paraacoletadaamostra; 11. Aidadedeveserconsiderada,vistoqueosidosospodem apresentarativaopoliclonal oumesmo hipergamaglobulinemia.

COLETA DE SANGUE

O tipo de amostra para cada analito definido por protocolos

internacionais.

Evitar hemoconcetrao: no deixar o torniquete por mais de 1

minuto.

Evitar hemlise: ruptura de hemcias. Coleta em tubo seco ou gel, e anticoagulantes (citrato, heparina,

EDTA e inibidor de glicose).

OBTENO DE SORO OU PLASMA

necessrio certo tempo para formao do cogulo e retrao

ideal.

No aconselhvel refrigerar a amostra. Aps centrifugao, obtm o soro ou plasma.

Obteno de Soro
SORO
CENTRIFUGAO

CREMELEUCOCITRIO COGULO (HEMCIAS EPLAQUETAS)

SANGUETOTAL (COLETADOEM TUBOSECO)

Osensaiosimunestambmsoconhecidoscomo EXAMESSOROLGICOSouSOROLOGIA

OUTROS ESPCIMES BIOLGICOS USADOS NOS IMUNOENSAIOS


URINA

Determinao hormonal ou de drogas

Lquido Cefalorraquidiano (LCR)


Pesquisa de antgenos bacterianos, virais e parasitrios Pesquisa de Ac

LQUIDO AMNITICO

Amniocentese procedimento para obteno de lquido aps 16. Semana de gestao. No deve conter sangue. Pesquisar presena de patgenos.

OUTROS ESPCIMES BIOLGICOS USADOS NOS IMUNOENSAIOS


FEZES

Pesquisar a presena de antgenos

SALIVA

Determinao de hormnios livres: cortisol, progesterona, estradiol e testosterona; e as drogas teofilina, digoxina e diazepam. SMEN

Pesquisa de anticorpos antiespermatozides. Manter 3 dias de abstinncia sexual. Aps ejaculao aguardar 30 min, e usar o material em at 2h

PARMETROS DE CONTROLE DE QUALIDADE


Compostosporvaloresintrnsecoseextrnsecos juntamentecomdadoslaboratoriais RESULTADODEUMTESTELABORATORIAL:refleteo estadoclnico(probabilidade)nomomentodacoleta daamostraanalisada TESTESDEREFERNCIA(GoldStandard):indicamo verdadeiroestadodopaciente.Otesteaplicadode formaindependenteaostestesusadosno diagnstico

PARMETROS DE CONTROLE DE QUALIDADE


Probabilidadederesultados
TESTE REAGENTE NOREAGENTE DOENA? VPFP FNVN TOTAL VP+FP FN+VN

Onde: VP:verdadeiramentepositivo FP:falsamentepositivo FN:falsamentenegativo VN:verdadeiramentepositivo

Ento

VP+FN=doenapresente FP+VN=doenaausente

PARMETROS DE CONTROLE DE QUALIDADE


SENSIBILIDADE: amostrasdepacientesdoentes comresultadopositivo.Calculase:

VP S= X100 FN+VP
ESPECIFICIDADE: amostrasdepacientesno doentescomresultadonegativo.Calculase:

VN E = X100 FP+VN

PARMETROS DE CONTROLE DE QUALIDADE


VALORESPREDITIVOS: aprecisodeumteste paraindicarsadeoudoena.QUALA PROBABILIDADEDEESTARDOENTEOUNO?

Muitoimportantenoestudodeendemias

VALORPREDITIVOPOSITIVO(VPP)

Proporo de indivduos doentes entre os resultados positivos obtidos no teste, portanto referese probabilidade de doena quando o teste positivo.

VPP=

VP VP+FP

X100

VALORPREDITIVONEGATIVO(VPN)

Proporo de indivduos nodoentes entre os resultados negativos obtidos no teste, portanto referese probabilidade de no ocorrncia da doena quando o teste negativo.

VPN=

VN VN+FN

X100

EFICINCIA

Referese relao entre o somatrio dos resultados achados de verdadeiros positivos (VP) e os verdadeiros negativos (VN) com a real populao estudada.

Eficincia=

VP+VN VN+VP+FP+FN

X100

PREVALNCIA
Porcentagem de indivduos doentes numa populao. Consideremos indivduos doentes os verdadeiros positivos e os falsos negativos (VP + FN).

Prevalncia=

VP+FN VP+VN+FN+FP

X100

EXERCCIO
Analisandose50amostrasparaotesteantiHTLV,obtivemosos seguintesresultadosvalidadospelotestedereferncia: VP=16 VN=29 FP=4 FN=1 Calculeasensibilidade,especificidade,valorpreditivopositivoe valorpreditivonegativo

VALIDADEEXTRNSECA
PRECISO o parmetro que determina se existe concordncia entre os resultados obtidos quando um mesmo teste feito vrias vezes.

ACURCIA ou EXATIDO Determina a capacidade do teste fornecer resultados prximos ao verdadeiro valor que se est medindo. A exatido permite detectar erro sistemtico ou a tendncia dos resultados se desviarem do valor real.

Curva ROC(ReceiverOperatingCharacteristics)

Utilizase quando selecionado um VALOR DE CORTE, tambm conhecido por CUTOFF, refletindo a sensibilidade e especificidade de um teste diagnstico. Curva ROC aquela onde a sensibilidade encontrase no eixo y e a especificidade no eixo x.

Curva ROC(ReceiverOperatingCharacteristics)

Curva ROC(ReceiverOperatingCharacteristics)

Figuras extradas:
BiologiaMoleculardaClula Alberts Imunobiologia Janeway Imunologia Kuby Google Obrigada!

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