RECONOCIMIENTO DE LPIDOS

I. RESUMEN FUNCIONES DE LOS LIPIDOS:

Reserva de energa Aislantes trmicos Proteccin Estructurarlos Lpidos ms abundantes son los que posen cidos grasos, es decir, los lpidos Saponificables. De ellos los Triglicridos (Grasas y aceites) son los ms caractersticos. En los triglicridos una molcula de glicerina se encuentra esterificada por tres molculas de cidos grasos. La reaccin de formacin ser la siguiente:

GLICERINA (Alcohol)

3 CIDOS GRASOS

STER (Triglicrido)

AGUA

La caracterstica comn a todos los lpidos es que son insolubles en agua y solubles en disolventes orgnicos como la gasolina, benceno, xilol, cloroformo...Cuando se mezcla agua y aceite y se agita la mezcla se forma una Emulsin transitoria . Esto significa que si se deja la mezcla reposar unos instantes, las gotas de aceite, de menor densidad, suben y se unen entre s, formndose dos capas, la superior de aceite y la inferior de agua comprobndose su insolubilidad enagua. En cuanto a su tincin, los lpidos se colorean selectivamente de rojo -anaranjado con el colorante Sudn III.

Introduccin
En el campo de la Ingeniera Agroindustrial, el saber cmo reconocer cualitativamente los lpidos es de importancia; ya que el reconocerlos es bsico para desarrollar anlisis en grasas y aceites. En este informe de laboratorio

est contenido todo lo referente a este tema; marco terico, descripcin de La prctica, conclusiones

Objetivos
Reconocer las propiedades de los lpidos. Conocer y desarrollar las principales reacciones de algunos lpidos dando a conocer sus propiedades mas importantes como la solubilidad de los cidos grasos con diferentes sustancias por medio de la preparacin de distintas soluciones en tubos de ensayos y una agitacin fuerte, observando cada una de las mezclas entre aceite de maz y agua destilada, HCl, ter y etanol, respectivamente. Poner en prctica lo aprendido

II.

MATERIALES Y MTODOS:

*Proporcionados por el laboratorio:

Bao maria 21 tubos de ensayo 3 mecheros 3 gradillas 3 vasos precipitado con agua 12ml Hidrxido de sodio al 40% 15ml de alcohol 10ml de cloroforma, ter o benceno 15 gotas de solucin de sudan III en frasco cuentagotas 12ml solucin de Hidrxido sdico al 20%

*Proporcionados por el alumno:

10ml de aceite vegetal 3bilis de pollo fresco

*METODOLOGA
Se utilizar La experimentacin directa, acompaada de La observacin y La deduccin.

III.

RESULTADOS LPIDOS.

 saponificacin: Las grasas reaccionan en caliente con el hidrxido sdico o potsico descomponindose en glicerina y cidos grasos. stos se combinan con los iones sodio o potasio del hidrxido para dar jabones. Bueno es una reaccin qumica entre un cido graso (o un lpido saponificable, portador de residuos de cidos grasos) y una base o alcalino, en la que se obtiene como principal producto la sal de dicho cido. Estos compuestos tienen la particularidad de ser anfipticos, es decir tienen una parte polar y otra apolar (o no polar), con lo cual pueden interactuar con sustancias de propiedades dispares. Por ejemplo, los jabones son sales de cidos grasos y metales alcalinos que se obtienen mediante este proceso.El mtodo de saponificacin en el aspecto industrial consiste en hervir la grasa en grandes calderas, aadiendo lentamente sosa custica (NaOH), agitndose continuamente la mezcla hasta que comienza esta a ponerse pastosa. La reaccin que tiene lugar es la saponificacin y los productos son el jabn y la glicerina:

CH3-(CH2)nCOOCH2+NaOH CH3-(CH2)n -COO CH+ NaOH CH3-(CH2)n COOCH2+NaOH I molcula de GRASA 3 molculas de ALCALI

CH3-(CH2)n-COO Na CH3-(CH2)n- COO Na CH3-(CH2)n-COO Na 3 molculas de JABON +

CH2OH CHOH CH2OH

1mlecula de GLICERINA

Primero colocamos en un tubo de ensayo 2ml de aceite y 2ml de NaOH al 20%* La mezcla quedara asi: *como prepara NaOH al 20%

Agitar enrgicamente y colocar el tubo al bao Mara de 20 a 30 minutos. La mezcla quedara as:

Ahora se pueden observar 3 fases: la inferior que contiene la solucin de sosa sobrante con la glicerina formada la intermedia semislida que es el jabn formado y una superir lipdica de aceite inalterado. ACEITE NO SOBR JABN SOSA CON GLICERINA

Por ltimo se extrae el jabn del tubo de ensayo y se da la forma que se quiera al jabn, se remueve bien y se deja calentar hasta que se haga un buen trozo de jabn.

Los lpidos en agua se ubican poniendo contacto con el agua sus grupos hidrfilos y alejando de ella sus cadenas lipofilos. Los grupos lipofilos predominan sobre los grupos hidrfilos.

Insolubilidad:

En dos tubos de ensayo tomar 1 ml de aceite y luego aadir 5 ml de agua destilada.

Agregar a un tubo 2 ml de bilis. Agitar fuertemente y dejar reposar un minuto.

Agregar al otro tubo 2 ml de NaOH al 20 %. Agitar fuertemente y dejar reposar un minuto.

Observamos la formacin de una solucin estable (emulsin).

TINCIN:
Los lpidos se colorean de rojo-anaranjado con el colorante Sudn III. Disponer en una gradilla 2 tubos de ensayo colocando en ambos 2 ml de aceite.

Aadir a uno de los tubos 4-5 gotas de solucin alcohlica de Sudn III, agitar y dejar reposar.

Aadir al otro tubo 4-5 gotas de tinta roja, agitar y dejar reposar.

Observamos que en el tubo al que se le aadi sudan, que todo el aceite aparece teido. En cambio al tubo que se le aadi la tinta roja, la tinta se fue al fondo y el aceite aparece sin teir.

RECONOCIMIENTO DE PROTENAS
IV. Fundamento.
Las protenas debido al gran tamao de sus molculas forman con el agua soluciones coloidales que pueden precipitar formndose cogulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70C o al ser tratadas con soluciones salinas, cidos, alcohol, etc. La coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalizacin por los agentes indicados que al actuar sobre la protena la desordenan por destruccin de sus estructuras secundaria y terciaria.

V.

Introduccin.

En este presente trabajo desarrollamos el tema de Reconocimiento de protenas y para esto hemos realizado un trabajo de investigacin mediante el cual estamos exponiendo las diferentes formas de reconocer la presencia de las protenas en una sustancia (clara de huevo), las reacciones a utilizar, etc. Este informe en completo tambin contiene la experiencia en el laboratorio, imgenes de ella y algunos resultados que se peda en la realizacin de informe y que se requera saber en cada experimentacin.

VI.

objetivos:
* Reconocer los aminocidos y las protenas utilizando los reactivos de ninhidrina y

de Biuret, respectivamente. * Realizar con la solucin de albumina los ensayos de: * Prueba de coagulacin utilizando varios agentes. * Prueba de precipitacin con cationes. * Determinar el punto isoelctrico de la casena. * Identificar la presencia de ncleos aromticos en las protenas (reaccin xanoproteica). * Identificar la presencia de triptfano, tirosina y aminocido azufrados en las protenas. * Llevar a cabo algunas reacciones que permiten a travs de una coloracin especifica el reconocimiento de algunos aminocidos. * Reconocer mediante reacciones de precipitacin la desnaturalizacin de protenas.

VII.

MATERIALES Y MTODOS

Reactivos. cido ntrico concentrado Hidrxido de sodio al 40 % Hidrxido de sodio al 20% Sulfato cprico al 1% Acetato de plomo al 5%

Materiales. Tubo de ensayo Gradilla Varillas de vidrio Mechero Vaso precipitado Vagueta Pipeta.

Resultados protenas.

i.

Coagulacin de Protenas.

Las protenas, debido al gran tamao de sus molculas, forman con el agua soluciones coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formacin de cogulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los 70:C o al ser tratadas con soluciones salinas, cidos, alcohol, etc. La coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalizacin por los agentes indicados, que al actuar sobre la protena la desordenan por la destruccin de su estructura terciaria y cuaternaria

ii.

Reaccin Xantoproteica:

Es debida a la formacin de un compuesto aromtico nitrado de color amarillo, cuando las protenas son tratadas con cido ntrico concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas proteinas con aminocidos portadores de grupos bencnicos, especialmente en presencia de tirosina. Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un lcali vira a un color anaranjado oscuro.

Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de solucin problema (clara de huevo ).

Aadir 1 cc. de HNO3 concentrado

Calentar al bao mara a 100: C Enfriar en agua fra, Aadir gota a gota una disolucin de sosa al 40%.

Observamos que se forma algo lechoso blanco, cuando lo sometemos a bao mara se transforma en algo amarillento y por ultimo al agregar amoniaco se transforma en un color anaranjado.

iii.

Reaccin de Biuret.

La producen los pptidos y las protenas, pero no los aminocidos, ya que se debe a la presencia del enlace peptdico (- CO- NH -)que se destruye al liberarse los aminocidos. Cuando una protena se pone en contacto con un lcali concentrado, se forma una sustancia compleja denominada biuret, de frmula.Que en contacto con una solucin de sulfato cprico diluda, da una coloracin violeta caracterstica.

Tomar un tubo de ensayo y poner unos 3 cc. de albmina de huevo.

Aadir 2cc. de solucin de hidrxido sdico al 20%.

A continuacin 4 5 gotas de solucin de sulfato cprico diluida al 1%.

aparece una coloracin violeta-roscea caracterstica y se puede afirmar que la reaccin es positiva.

Se pone de manifiesto por la formacin de un precipitado negruzco de sulfuro de plomo. Se basa esta reaccin en la separacin mediante un lcali, del azufre de los aminocidos, el cual al reaccionar con una solucin de acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo. Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de albmina de huevo (clara de huevo).

iv.

reaccin de los aminocidos azufrado (cistina).

Aadir 2 cc. de solucin de hidrxido sdico al 20% Aadir 10 gotas de solucin de acetato de plomo al 5%. Calentar el tubo hasta ebullicin.

Si se forma un precipitado de color negruzco nos indica que se ha formado sulfuro de plomo, utilizndose el azufre de los aminocidos, lo que nos sirve para identificar protenas que tienen en su composicin aminocidos con azufre.

I. II.

Discusin:
Tincion: Gianni (1952) comprob que los microorganismos grampositivos Bacillus subtilis y B. anthracis tomaban negativamente el Gram cuando los cultivos databan de dos a tres horas. Luego se desarrollaba la sustancia grampositiva debajo de la pared celular, para invertir la reaccin. Otra explicacin de la reaccin de Gram puede ser la posible existencia de una capa exterior alrededor de un ncleo gramnegativo. Libenson y Mcllroy, han comunicado que si la reaccin grampositiva depende de que se forme una combinacin compleja entre los componentes de la coloracin de Gram y las protenas de la pared celular, sera de esperar que las bacterias desintegradas por medios fsicos retuviesen este tinte, ya que ese tratamiento no podra cambiar el carcter qumico de los materiales de dicha pared. Por el contrario, los grmenes grampositivos desintegrados pierden su capacidad de retener el colorante primario y toman negativamente el Gram.

III.

CUESTIONARIO:

1. Qu son los jabones? El jabn es la sal (generalmente de sodio) de varios cidos grasos provenientes delsebo y grasas animales incluyendo aceite de coco, palma, semilla de algodn y otrosen la formulacin para darle alguna propiedad extra en funcin del tipo de aceite. El jabn es soluble en agua y la solucin tiene excelentes propiedades limpiadoras. 2. Cmo se pueden obtener jabones? En la actualidad hay dos mtodos de obtencin del jabn, ambos basados en la saponificacin.-Primer mtodo: En el primer mtodo se produce la saponificacin directamente sobre la grasa, se hace reaccionar el lcali con la grasa, y se obtiene el jabn y glicerina. Este mtodo tiene como desventaja que es ms difcil la separacin de la glicerina y el jabn.-Segundo mtodo: En este mtodo primero se produce la ruptura qumica de la grasa, y se obtiene la glicerina y los cidos grasos; stos se separan fcilmente. Luego se produce la salde cido graso y el lcali. 3. Por qu en la saponificacin la glicerina aparece en la fase acuosa? Porque la glicerina no es liposoluble. Tiene que ver con su solubilidad Recuerda que es un producto secundario, lo importante es el jabn. 4. Qu enzima logra en el aparato digestivo la hidrlisis de agua? Es la lipasa, es una enzima ubicua que se usa en el organismo para disgregar las grasas de los alimentos de manera que se puedan absorber. Su funcin principal es catalizar la hidrlisis de triacilglicerol a glicerol. Las lipasas se encuentran en gran variedad de seres vivos. 5. Indica lo que ocurre con la mezcla aceite Sudan III y aceite Tinta y explica a que se debe la diferencia entre ambos resultados. El sudan III - aceite presenta una coloracin rojo vino Este resultado se debe a que el aceite y las grasas son un grupo de compuestos orgnicos existentes en la naturaleza que consiste en esteres formados por tres molculas de cidos grasos y una molcula del alcohol glicerina. De tal manera que el Sudan III, lo reconoce y lo tie. Tinta china aceite presenta una coloracin rojo sangre:

Las diferencias entre ambos es que en el sudan III con el aceite todo el aceite aparece teido y en la tinta china aceite este se fue poco a poco destiendo suavemente pero no del todo 6. Qu ocurre con la emulsin de agua en aceite transcurrido unos minutos de reposo? Y con la de los otros compuestos empleados y aceite? A que sedeen las diferencias observadas entre ambas emulsiones? Luego de unos minutos de reposo notamos que el aceite sube y agua se encuentran abajo. El agua es ms densa que el aceite.

En el caso del aceite y la acetona, no se disolvi del todo porque la acetona es impura, entonces utilizamos glicerina en la cual se disolvi. A que deben a la diferencia de densidades entre los componentes.

IV. CONCLUSIN: En el experimento de solubilidad de los lpidos, se podr observar que el aceite se ha disuelto en el ter y no en el agua ya que este subir debido a su menor densidad al separarse el almidn. Los lpidos son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en pequesimas gotas formando una emulsin de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en reposo por reagrupacin de las gotitas de grasa en una capa que, por su menor densidad, se sita sobre el agua. Por el contrario, las grasas son solubles en disolventes orgnicos, como el ter, cloroformo, acetona, benceno, etc. V. BIBLIOGRAFA: a) http://es.wikipedia.org/wiki/Lipasa b) http://html.rincondelvago.com/lipidos_10.html c) http://bienvenidovasquez.blogspot.com/2008/04/reconocimiento-delpidos d) http://www.uniquindio.edu.com. e) http://web.mac.com/pedropablomoreno/BioGeo/BIO2racticas_files/VI%20Reconocimiento%20proteinas.pdf